全 文 ：* -槲皮素
* -quercetin
图 1　槲皮素对照品 ( A)和阴干银杏叶
供试品 (B)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of quercetin ( A)
and ginkgo leaves dried in shade (B)
1-GC　 2-BB　 3-GA　 4-GB
图 2　银杏内酯混合对照品 (A)和阴干银杏叶
供试品 (B)的 HPLC图谱
Fig. 2　HPLC chromatograms of ginkgolide mixed
reference substances (A) and ginkgo leaves
dried in shade (B)
* -白果酸
* -gink goic acid
图 3　白果酸对照品 ( A)和阴干银杏
叶供试品 ( B)的 HPLC图谱
Fig. 3　HPLC chromatograms of ginkgoic acid ( A)
and ginkgo leaves dried in shade (B)
阴干含量下降 74% ～ 86%。而霉变后的叶子所有活
性成分几乎全被降低为零。因此 ,综合来看 ,采用晒
干既能有效的降低银杏酸含量 ,减少其毒副作用 ,又
能很好地保持银杏叶中黄酮、萜内酯药用成分。 因
此 ,晒干是 5种常用干燥条件中最佳干燥条件。
References:
[1 ]　 Zhang D Q, He Z F. Research on the Chemical Ingredients in
Leaves of Ginkgo biloba (银杏叶资源化学研究 ) [M ] . Bei jing:
China Ligh t Indus t ry Press, 1999.
[2 ]　 Li Z L. E xploi tation and Exer tion of Gin kgo leaves (银杏叶开
发与利用 ) [M ] . Shanghai: Shanghai Scien tifi c and Technical
Publi shers, 1996.
[3 ]　 Lobs tein-Guth A, Brianconscheld F. Analysis of terpenes
f rom Ginkgo bioba L. by h igh perfo rmmance liquid chroma-
tography [ J]. J Chromatogr , 1983, 267: 432-438.
HPLC法测定沙棘油软胶囊中α-维生素 E的含量
王兆华 ,张大军 ,赵玉兰 ,徐国经
(吉林省中医中药研究院 ,吉林 长春　 130021)
　　沙棘油软胶囊是由胡颓子科植物沙棘 Hippol-
phae rhamnoides L.种子油经加工所制成的软胶囊
制剂。具有消食化滞、和胃降逆、活血化瘀等功能 ,临
床用于气滞血瘀、胃气上逆所致的脘腹痛、嗳气返
酸、胸闷、纳呆等症 ,取得满意疗效。沙棘油具有较高
的医药价值 ,其中含有多种生物活性物质 ,如维生素
A, B, C, D, E, F, K,V-和U-胡萝卜素等 ,还含有亚油
酸、亚麻酸、脑磷脂、卵磷脂等成分。α-维生素 E是沙
棘油中主要有效成分 ,其含量测定方法有薄层扫描
法 [1 ]、气相色谱法 [ 2]和高效液相色谱法 [3 ]。本实验采
用 HPLC法对沙棘油软胶囊中α-维生素 E进行了
含量测定 ,以控制该制剂的质量 ,更有效地保证其临
床疗效。
1　仪器与试药
日本岛津 LC— 9AC高效液相色谱仪 , SPD—
6AV紫外检测器 ; ZFQ— 85A型旋转蒸发器 ,α-维生
·48· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 1期 2004年 1月
收稿日期: 2003-04-15作者简介:王兆华 ( 1964— ) ,女 ,吉林省长春市人 ,副研究员 , 1986年毕业于长春中医学院中药系 ,同年分配到吉林省中医中药研究院中药研究所工作 ,一直从事中药药化、中药质量标准及中药研究开发工作。 Tel: ( 0431) 5934092　 E-mai l: zdjfq@ hotmail. com
素 E对照品购于中国药品生物制品检定所 (批号:
062-200004) ;沙棘油软胶囊由长春达兴药业股份有
限公司提供 ;甲醇、乙腈为色谱纯 ,其余均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　α-维生素 E检测波长的选择:精密称取α-维生
素 E对照品适量 ,加无水乙醇制成 0. 107μg /mL的
溶液 ,在 2201紫外可见分光光度计 (日本岛津 )上于
190～ 370 nm波长扫描。结果α-维生素 E在 292 nm
波长处有最大吸收 ,故选用 290 nm为检测波长。
2. 2　色谱条件: 色谱柱: Diamonsi l-C18柱 ( 5μm,
4. 6 mm× 150 mm);流动相:甲醇-乙腈 ( 91∶ 9) ;流
速: 1 m L /min;紫外检测波长: 290 nm;柱温: 室温。
理论塔板数按 α-维生素 E计算 ,不低于 2 000。
2. 3　对照品溶液的制备:精密称取 α-维生素 E对
照品适量 ,加无水乙醇制成 45μg /mL的溶液 ,摇
匀 ,作为对照品溶液。
2. 4　供试品溶液的制备 [ 2]:取样品内容物约 0. 8 g ,
精密称定 ,用无水乙醇 12 mL分次溶解并转移至
100 mL圆底烧瓶中 ,加维生素 C 0. 9 g ,置沸水浴中
回流提取 ,待瓶内液体沸腾 ,加入 50%氢氧化钾溶
液 2 mL,混匀 ,继续加热 ,并从加入氢氧化钾时起计
时 ,至 15 min取出 ,立即在流水中冷却 ,将皂化后的
样品用 40 mL水溶解并转移至分液漏斗中 ,用乙醚
提取 3次 ,每次 40 mL(每次加入乙醚后应充分振摇
1 min) ,合并乙醚液 ,用水洗涤至中性 ,弃去水液 ,乙
醚液加无水硫酸钠 8 g脱水 ,用乙醚洗涤无水硫酸
钠 ,再合并乙醚液中 ,将乙醚液减压蒸干 ,残渣加无
水乙醇使溶解 ,并定容至 25 mL,摇匀 ,用微孔滤膜
( 0. 45μm)滤过 ,取续滤液 ,作为供试品溶液。 精密
吸取对照品溶液、供试品溶液各 10μL,按上述色谱
条件 ,进样 ,绘制其色谱图 ,见图 1。
* -α-维生素
* -α-vi tamin E
图 1　α-维生素 E对照品 ( A)和沙棘油软
胶囊 (B)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms ofα-vitamin E reference
substance (A) and Shaji Oil Soft Capule ( B)
2. 5　线性关系考察: 精密吸取 α-维生素 E对照品
溶液 5, 10, 15, 20, 25μL,分别注入高效液相色谱仪
中进行分析 ,测定。 以对照品峰面积为纵坐标 ,以进
样量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,其回归方程为: Y=
30 829. 88X - 634. 20, r= 0. 999 9,表明α-维生素 E
在 0. 241～ 1. 205μg时进样量与峰面积呈良好的线
性关系。
2. 6　精密度试验:精密吸取供试品溶液 ,连续 5次
进样 ,测定 α-维生素 E峰面积 ,计算其 RSD=
1. 78% (n= 5)。
2. 7　稳定性试验:精密吸取供试品溶液在 0, 2, 4, 8
h分别进样 ,进行测定。结果 α-维生素 E含量的
RSD= 0. 67%。 可见供试品溶液中α-维生素 E在 8
h内含量稳定。
2. 8　重现性试验:精密称取同一批号 ( 20021020)样
品 5份 ,分别按供试品溶液的制备方法操作 ,进样分
析 ,样品中α-维生素 E含量的 RSD= 2. 62% (n=
5) ,表明其重现性良好。
2. 9　加样回收率试验: 精密称取α-维生素 E对照
品约 0. 385 6 mg ,加入已测知α-维生素 E含量的样
品中 (含α-维生素 E约 0. 4 mg) ,按供试品溶液的制
备方法操作 ,进样 ,测定 ,计算回收率 ,结果平均回收
率为 96. 67% , RSD为 1. 70% (n= 5)。
2. 10　样品的含量测定: 分别称取不同批号样品 ,分
别按供试品溶液制备方法制备 ,分别精密吸取对照
品溶液与供试品溶液各 10μL,进行分析 ,计算沙棘
油软胶囊中α-维生素 E的含量 ,结果沙棘油软胶囊
021018, 021020, 021025批号中α-维生素 E的含量
分别为 0. 978, 0. 938, 0. 937 mg /g (n= 2)。
3　讨论
3. 1　在实验过程中 ,曾选用甲醇 -水 ( 95∶ 5)、甲醇-
氯仿 ( 95∶ 5)、甲醇-乙腈 ( 95∶ 5)为流动相 ,因其色
谱峰分离效果不好而未被采用。经摸索确定甲醇 -乙
腈 ( 91∶ 9)流动相 ,能使色谱峰得到较好分离 ,且保
留时间适宜 ,而被采用。
3. 2　沙棘油中含有较多的脂肪酸 ,对含量测定有一
定干扰 ,本实验采用皂化方法除去大量干扰成分。但
α-维生素 E易氧化 ,皂化对碱液浓度、温度、时间和
抗氧化剂量都必须严格控制 ,避免测定成分损失。
References:
[1 ]　 Zhuo J S, Zhang L J, Chen Z Q, et al . Determinat ion of vi ta-
min E in peanu t oil and some food s by f luorometer and TLC
scanning [ J ]. Acta N utr Sin (营养学报 ) , 1983, 5( 5): 289-
296.
[2 ]　 Zhang W L, Ch en L G. Th e es timation ofα-tocoph erol in h u-
man blood by GAS ch romatograph y [ J ]. Acta N utr S in (营养
学报 ) , 1984, 6( 4): 355-358.
[3 ]　 Huang Y Q, Xiao Y Y. Comparative s tudy on determinat ion of
vitamin E in Shanxi Shaji [ J ]. China J Chin Mater Med (中国
中药杂志 ) , 1991, 16( 9): 530-532.
·49·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 35卷第 1期 2004年 1月