全 文 ：测定, 计算回收率, 结果平均回收率为 99181% ,
R SD 为 113 (n= 6)。
219　样品测定: 分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液各 10 ΛL , 按上述色谱条件进样测定, 计算二苯
乙烯苷含量, 结果见表 1。
表 1　首乌补肾酒中二苯乙烯苷的含量 (n= 3)
Table 1　Stilbene glycoside in Shouwu
Bushen Tinctura (n= 3)
批号 二苯乙烯苷ö(m g·mL - 1) RSD ö%
020701 0. 282 0. 7
020702 0. 269 1. 2
020703 0. 290 0. 4
3　讨论
311　提取溶剂选择: 试验用流动相、甲醇、50% 甲醇
分别稀释至刻度, 离心, 取上清液, 过滤膜 ( 0145Λm ) , 取续滤液, 进样 10 ΛL , 记录色谱图, 结果含量
基本一致。根据取溶剂与流动相接近为佳, 并且考虑
到流出曲线的饱和时间, 因此选择 50% 甲醇为提取
溶剂。
312　提取条件选择[3 ]: 试验用 50% 甲醇直接稀释
至刻度, 超声提取 10, 20, 30, 45 m in, 结果发现测得
含量基本一致。考虑到试验操作越简单越好, 因此选
择直接稀释提取。
313　试验采用DAD 检测器进行峰纯度检测, 纯度
达到 9917% , 所以未做阴性对照试验。
References:
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[ 3 ]　Ch P (中国药典) [S ]1 2000 ed. V o l É 1
HPLC 法测定川芎及天芎注射液中阿魏酸的含量
黄东萍1, 文东旭2, 林文翰3Ξ
(11 广西大学化学化工学院, 广西 南宁　530004; 21 广西药品检验所, 广西 南宁　530021;
31 北京大学 天然药物及仿生药物国家重点实验室, 北京　100083)
　　天芎注射液由川芎、天麻两味中药组成, 用于偏
头疼、老年痴呆、头风眩晕、目系眩急、身体拘倦等
症。方中川芎的主要成分为阿魏酸。现代药理研究
表明, 阿魏酸有抑制血小板聚集、降低血小板活性和
改善微循环的作用, 是天芎注射液中的有效成分之
一。因此, 本实验选择阿魏酸作为定量指标, 采用
R P2H PL C 法测定川芎及天芎注射液中阿魏酸的含
量, 方法快速、方便、专属。
1　仪器与试药
W aters 600E 泵,W aters PDA 996 检测器,W a2
ters 717 自动进样器,W aters M iliennum 32色谱工作
站。川芎, 四川产, 鉴定为川芎L ig usticum chuanx 2
iong Ho rt. 的根茎; 天芎注射液由广东彼迪药业有
限责任公司提供, 阿魏酸对照品由中国药品生物制
品检定所提供, 甲醇为色谱纯, 其他试剂均为分析
纯。
2　方法与结果
211　色谱条件: 色谱柱: Inertsil OD S23 (250 mm × 416 mm , 5 Λm ) (日本GL Sciences Inc. ) ; 流动相: 甲醇21% 醋酸溶液 (35∶65) ; 流速: 110 mL öm in; 检测波长: 320 nm。212　川芎药材供试品溶液的制备: 取本品粉末约012 g (同时另取本品粉末按《中华人民共和国药典》2000 年版一部附录Ñ H 第一法测定水分) , 精密称定, 置量瓶中, 精密加 30% 乙醇 10 mL , 称定质量,静置 24 h, 振摇后再超声处理 20 m in, 再称定质量,用 30% 乙醇补足减失的质量, 摇匀, 静置。取上清液离心, 即得。213　天芎注射液供试品溶液的制备: 精密量取天芎注射液 30 mL , 加水饱和正丁醇提取 6 次, 每次 20mL , 合并正丁醇液, 减压蒸干, 残渣加温热的甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 溶解, 转移至 10 mL 量瓶中, 放冷, 加甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4)至刻度, 摇匀, 即得。214　阴性对照溶液的制备: 取天麻干粉 013 g (相当于不含川芎的天芎注射液 100 mL ) , 按天芎注射液制备方法制成阴性样品, 再按上述方法制备阴性对
·904·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 4 期 2004 年 4 月
Ξ 收稿日期: 2003206214
照溶液。
215　线性范围考察: 精密称取阿魏酸对照品 10 m g
于 100 mL 量瓶中, 加甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 溶
解并稀释至刻度, 摇匀, 冰箱内贮存, 备用。精密吸取
对照品储备液 015, 110, 210, 410, 610 mL , 置 10 mL
量瓶中, 用甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 稀释至刻度, 各
进样 20 ΛL , 记录峰面积。以对照品溶液浓度 (C ) 与
其相应峰面积 (A ) 进行回归处理, 得回归方程Y =
41990 9×106 X + 21568 8×104, r= 01999 9, 线性范
围为 011～ 112 Λg。
216　精密度试验: 取阿魏酸对照品溶液, 重复进样
6 次, 记录阿魏酸峰面积, 结果R SD 为 0153%。
217　重现性试验: 取同一批号样品 5 份, 按上述方
法测定阿魏酸的含量, 结果川芎药材的 R SD 为
1153% , 天芎注射液为 1138%。
218　稳定性试验: 取同一批号供试品溶液, 在 0, 1,
4, 8, 12, 24 h 分别进样 20 ΛL , 记录峰面积, 结果阿
魏酸峰面积的 R SD 川芎药材的为 1106% , 天芎注
射液的为 1106% , 表明供试品溶液在 24 h 内均
稳定。
219　回收率试验
21911　川芎药材回收率试验: 采用加样回收法。精
密称取同一批号的本品粉末 011 g 各 5 份 (批号 10,
含量为 01165% , 水份为 8115% ) , 置 25 mL 量瓶
中, 分别精密加入阿魏酸对照贮备溶液 (称取阿魏酸
对照品 8154 m g, 置于 100 mL 量瓶中, 加 30% 乙醇
溶解并稀释至刻度, 浓度为 01085 4 m gömL ) 116
mL 各 3 份、212 mL 各 2 份, 精密加 30% 乙醇至溶
剂总量为 10 mL , 称定质量, 静置 24 h, 振摇后再超
声处理 20 m in, 再称定质量, 用 30% 乙醇补足减失
的质量, 摇匀, 静置。取上清液离心, 作为供试品溶
液。另精密配制含阿魏酸 20 ΛgömL 的对照品溶液,
进样, 记录峰面积, 外标法计算。结果平均回收率为
10110% , R SD 为 1107% (n= 5)。
21912　天芎注射液回收率试验: 采用加样回收法。
精 密 量 取 天 芎 注 射 液 15 mL 各 5 份 (批 号
20011105, 含量为 01687 m gö支) , 分别精密加入阿
魏酸对照贮备溶液 (称取阿魏酸对照品 9121 m g, 置
于 100 mL 量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度, 精密量
取 10 mL , 置于 50 mL 量瓶中, 加水溶解并稀释至
刻度, 浓度为 01018 42 m gömL ) 510 mL , 加水饱和
正丁醇提取 6 次, 每次 20 mL , 合并正丁醇液, 减压
蒸干, 残渣加温热的甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 溶解,
定量转移至 10 mL 量瓶中, 放冷, 稀释至刻度, 摇
匀, 滤过, 取续滤液作为供试品溶液。另精密配制含
阿魏酸 20 ΛgömL 的对照品溶液, 进样, 记录峰面
积, 外标法计算, 结果平均回收率为 9913% , R SD 为
2100% (n= 5)。
2110　样品测定: 吸取对照品溶液、供试品溶液和阴
性对照溶液各 20 ΛL , 依法测定, 样品与对照品在同
一保留时间里有一相应的色谱峰, 阴性对照溶液无
干扰, 见图 1。取川芎药材和天芎注射液样品, 按上
述方法测定阿魏酸的含量, 结果见表 1, 2。3 2阿魏酸3 2feru lic acid
图 1　阿魏酸 (A)、川芎药材 (B)、天芎注射液 (C)
和阴性对照 (D )的 HPLC 图谱
F ig. 1　HPLC chromatogram s of ferul ic ac id (A) ,
Rh izom a Chuanx iong (B) , Tianx iong
In jection (C) , and negative sample (D )
表 1　川芎药材中阿魏酸的含量测定结果 (n= 3)
Table 1　Ferul ic ac id in rh izome of L. chuanx iong (n= 3)
批号 阿魏酸ö% 批号 阿魏酸ö%
1 0. 15 6 0. 15
2 0. 15 7 0. 15
3 0. 16 8 0. 15
4 0. 14 9 0. 16
5 0. 15 10 0. 17
表 2　天芎注射液中阿魏酸的含量测定结果 (n= 3)
Table 2　Ferul ic ac id in Tianx iong In jection (n= 3)
批号 阿魏酸ö(m g·支- 1)
20011101 0. 68
20011102 0. 75
20011103 0. 67
20011104 0. 75
20011105 0. 69
·014· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 4 期 2004 年 4 月
3　讨论
311　文献报道阿魏酸水溶液随时间推移, 阿魏酸
H PL C 峰峰面积不断下降[1 ] , 亦有文献报道灌装于
安瓿中的阿魏酸水溶液分解 10% 的时间为 19 个
月[2 ]。预试表明阿魏酸水溶液配制放置 48 h 后, 阿
魏酸含量即明显下降。但本品常温放置 6 个月, 阿魏
酸含量基本稳定, 说明注射液虽为水溶液, 但密封保
存可使阿魏酸含量基本保持稳定, 故可选用阿魏酸
作为天芎注射液的含量测定指标。
312　溶剂的选择: 取川芎粉末适量, 分别以水、甲
醇、10% 乙醇、20% 乙醇、30% 乙醇、40% 乙醇、50%
乙醇为溶剂, 静置后测定阿魏酸的含量。结果溶剂为
水或乙醇浓度小于 40% 时, 阿魏酸峰形好, 和相邻
峰能很好分离; 且溶剂的乙醇浓度越高, 阿魏酸提取
率越高。故选择溶剂为 30% 乙醇。
313　提取时间的选择: 取川芎粉末适量, 以 30% 乙
醇为溶剂, 分别静置 0, 24, 36 h 测定阿魏酸的含量,
结果静置 24, 36 h 测得的阿魏酸的含量基本一致,
说明静置 24 h, 阿魏酸可提取完全。
314　制备天芎注射液供试液的条件考察: 阿魏酸能
溶于醇、热水和醋酸乙酯, 稍溶于乙醚, 难溶于苯和
石油醚。曾试验取天芎注射液用醋酸乙酯、乙醚、正
丁醇等溶剂提取, 结果用醋酸乙酯或乙醚, 提取溶液
极易乳化, 采用盐析、加热、放置等方法均不能完全
分层; 经试验用水饱和正丁醇溶液提取不乳化, 提取
6 次能将阿魏酸提取完全, 故采用正丁醇提取。合并
正丁醇提取液, 减压蒸干, 残渣曾试验用热水、甲醇、
温热的甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 为溶剂溶解。结果
以热水、甲醇为溶剂时阿魏酸易分解为双峰; 以温热
的甲醇25% 醋酸溶液 (1∶4) 为溶剂, 阿魏酸溶液在
冰箱放置 10 d 基本不变, 故残渣用温热的甲醇25%
醋酸溶液 (1∶4)溶解稀释制成供试品溶液。
References:
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HPLC 法测定清咽滴丸中胆红素的含量
姜玉凤1, 许　岚1, 边兴坤1, 孟庆军2Ξ
(11 天津市长征医院, 天津　300021; 21 天津市第六中药厂, 天津　300401)
　　清咽滴丸由中新药业集团天津市第六中药厂生
产, 由牛黄、青黛、冰片、薄荷脑等多味中药组成, 是
治疗风热喉痹 (急性咽炎)的常用药。牛黄为君药。为
了更好地控制该药的质量, 本实验采用H PL C 法对
胆红素进行测定[1～ 3 ]。该方法准确、可靠, 重现性好,
易于掌握。
1　仪器与试药
日本岛津L C—10A 高效液相色谱仪, CR—4A
色谱仪, SPD—2A S 紫外检测器。清咽滴丸 (天津市
第六中药厂) , 胆红素对照品 (中国药品生物制剂检
定所提供, 批号: 078520110, 供含量测定用) , 所用试
剂均为分析纯。
2　方法与结果
211　色谱条件: 色谱柱: C 18 OD S 柱 (250 mm ×416
mm , 10 Λm ) ; 流动相: 甲醇2二甲基亚砜22% 醋酸
(51∶34∶15) ; 检测波长: 450 nm ; 柱温: 30 ℃; 灵敏
度: 0105 AU FS; 进样量: 20 ΛL。色谱图见图 1。
a2胆红素
a2b ilirub in
图 1　胆红素 (A)、清咽滴丸 (B)和阴性
对照 (C)的 HPLC 图谱
F ig. 1　HPLC chromatogram s of bil irubin (A) , Qing-
yan D ropp ing P ill (B) and negative sample (C)
212　对照品溶液的制备: 精密称取胆红素对照品
5163 m g, 置 100 mL 棕色量瓶中, 用氯仿2冰醋酸
(4∶1)超声震荡 10 m in; 并用氯仿2冰醋酸 (4∶1)稀
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Ξ 收稿日期: 2003204206