全 文 ：表 2　模型组小鼠 RBC-C3b, RBC-ICRR, RFER和
RFIR给药前后测定结果比较 (x± s, n= 10)
Table 2　 Comparison of RBC-C3b, RBC-ICRR, RFER
and RFIR of model group mice by pre- and
post-administrat ion ( x± s, n= 10)
模型组 RBC-C3b /% RBC-ICRR/% RFIR/% RFER/%
疗前 6. 28± 2. 64 22. 54±4. 53 45. 14±11. 88 34. 71± 10. 99
疗后 6. 00± 2. 46 22. 97±3. 94 48. 14± 8. 11 29. 57± 9. 22
部位 ,每个红细胞上大约有 500个 CRI, Sieg el算出
循环系统中红细胞的 C3b受体数为白细胞的 20
倍 ,即 C3b受体总数的 95% 分布在红细胞膜上 ,循
环免疫复合物 ( CIC) 与红细胞膜相遇的机会比白
细胞大 500～ 1 000倍。然而红细胞黏附的强弱不仅
与红细胞补体受体的数目有关 ,而且与血清中存在
的红细胞免疫调节物质有关。
消红散低剂量组的小鼠 C3b受体花环率明显
升高 , CIC的花环率明显降低 ;与模型组相比 ,差异
有显著性 ( P < 0. 01) ,这说明消红散低剂量能明显
地增强红细胞的黏附作用 ,促进红细胞的免疫功能 ,
从而减少免疫复合物的形成 ,抑制肾小球损伤。与模
型组相比消红散各剂量组小鼠的 RFER明显提高 ,
而 RFIR显著降低 ,亦说明消红散可增强红细胞的
免疫功能。
方中黄芪对免疫系统具有双向调节作用 ,能使
紊乱的免疫功能恢复。 黄芪当归二者配伍有抗氧化
自由基作用 ,可以减轻肾组织细胞在缺血、缺氧和炎
症反应时的损伤 [6 ]。白术有免疫增强、免疫调节的作
用 ,临床应用白术煎剂可使玫瑰花环形成率明显上
升。茯苓多糖有明显的促进免疫功能的作用 ,是一种
免疫促进剂。甘草能够补气和中、调和诸药。三七的
根、叶皂苷可提高红细胞黏附免疫复合物能力和红
细胞 C3b受体活性 ,有利于清除免疫复合物 ,以维
持机体的正常免疫功能。茜草具有活血化瘀功能。实
验结果表明 ,该方具有免疫双向调节作用 ,其作用是
通过调节紊乱的免疫功能而实现的。
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金荞麦 Fr4抑瘤和拮抗环磷酰胺毒性的作用
陈洁梅 1 ,顾振纶 1 ,梁中琴 1 ,周文轩 2 ,郭次仪 2
( 1. 苏州大学医学院 药理学教研室、苏州中药研究所 ,江苏 苏州　 215007; 2. 香港保健协会 ,香港 )
　　金荞麦 Fagopyrum cymosum ( T rev . ) Meisn.
又称野荞麦、苦荞头 ,为蓼科植物 ,是民间常用中草
药 ,具有活血化瘀的功效 ,临床上用于肺癌的治疗 ,
金荞麦还具有清热解毒、抗菌作用 [1 ]。金荞麦 Fr4系
从金荞麦根茎中提取的多酚类物质 ,本实验研究了
金荞麦 Fr4的体内外抑瘤作用和拮抗环磷酰胺
( C TX)的骨髓抑制作用。
1　材料与方法
1. 1　药品:金荞麦 Fr4由苏州中药研究所植化研究
室从购自上海药材公司的云南产金荞麦根茎中提取
所得的有效部位 ,为棕褐色粉末 ,主要含多酚类化合
物 (含量为 64. 25% )。体内实验时 ,用蒸馏水配制成
1% 和 2% 的溶液。
1. 2　试剂: CTX,南通制药厂出品 ,批号 970409。
1. 3　动物: 昆明种小鼠 ,体重 ( 20± 2) g ,雌雄兼
用 ,每一批实验为同一性别。由苏州大学医学院实验
动物中心提供 ,合格证编号:苏动 (环 ) 98008,苏动
(质 ) 98018。
1. 4　瘤种:小鼠肉瘤 S180 ,肝癌 H22由中国科学院上
海药物研究所提供。
·938· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
收稿日期: 2002-11-25基金项目: 香港保健协会资助项目 ( HK 2000918)作者简介: 陈洁梅 ( 1969— ) ,女 ,江苏张家港人 ,苏州第三人民医院主治医师 ,硕士 ,研究方向为药理学。
1. 5　细胞株:人白血病细胞 HL-60,中国科学院上
海细胞生物学研究所提供 ,胃腺癌细胞 SGC-7901、
肾癌细胞 786-B由本所保存。用含 100 g /L灭活小
牛血清 RPM I1640培养基在 37℃ , 5% CO2条件下
培养 ,每两天传代 1次 ,取对数生长期细胞用于实验。
1. 6　方法
1. 6. 1　对小鼠移植瘤 S180的抑制作用 [ 2]:无菌条件
下抽取荷肉瘤 S180鼠的腹水液 ,用生理盐水稀释至
1× 107 /m L,鼠传代 7～ 9 d,无菌条件下抽取肉瘤
S180鼠的腹水液 ,瘤细胞用生理盐水稀释并计数后 ,
每鼠右腋皮下接种 1× 106 /mL细胞 ,称重后随机分
组。设对照组 (生理盐水组 ) , Fr4 200, 400, 800 mg /
kg组 , C TX 25 mg /kg组 , Fr4 200 mg /kg+ CTX 25
mg /kg合用组 ,接种次日开始 ip给药 7 d,对照组
ip生理盐水 ,对照组及 Fr4组每天给药 1次 , CTX
间断给药 2次。给药体积均为 0. 1 mL /10 g。停药
后次日处死动物 ,称小鼠体重和瘤重 ,计算抑瘤率。
两个单药是否增效 ,按 Burgi修正公式算出 q值。
抑瘤率= ( 1-实验组瘤重 /对照组瘤重 )× 100%
q= EA+ B /EA+ ( 1- EA )× EB
其中 EA+ B表示两药合用抑瘤率 ; EA和 EB表示各药单
用抑瘤率。 q值在 0. 85～ 1. 15表示两药作用相加。 q> 1. 15
表示两药作用增强。 q < 0. 85表示两药相互拮抗。 整个实验
重复 3次。
1. 6. 2　对小鼠肝癌 H22抑制作用:同 1. 6. 1项。
1. 6. 3　对 CTX致骨髓抑制的拮抗作用 [3 ]:小鼠 60
只 ,随机分成 6组 ,每组 10只。设对照组 ( A) , CTX
100 mg /kg模型组 ( B) , Fr4 200 mg /kg+ CTX 100
mg /kg合用组 ( C) , Fr4 400 mg /kg+ CTX 100 mg /
kg 组 ( D) , Fr4 200 mg /kg 预先给药+ CTX 100
mg /kg组 ( E) , Fr4 400 mg /kg预先给药+ CTX 100
mg /kg组 ( F)。CTX各组均 1次给药 , E和 F组 Fr4
给 5 d后给 CTX,再继续给 Fr4 3 d, C和 D组给生
理盐水 5 d后给 CTX,再给 Fr4 3 d。各种药物均按
0. 1 mL /10 g给药。停止给药次日 ,取血后处死动
物 ,迅速剖取一侧股骨 ,除净软组织 ,用 0. 005 mol /L
CaCl2 10 mL将全部骨髓冲入离心管中 ,置 4℃ 冰
箱中 30 min, 2 500 r /min离心 15 min,弃上清 ,将
沉淀物与 HClO4 5 mL混合 ,加热 15 min,冷却、滤
过 ,各滤液用 752— C型紫外分光光度仪在 268 nm
波长处测定吸光度 A值。 计算每根股骨所含 DNA
(μg )的量 (每根股骨所含 DNA= 40× 5× A值 )。血
液标本计白细胞 (WBC)数。
1. 6. 4　对 3种人肿瘤细胞株体外增殖抑制试验 [4 ]:
分别收集对数生长期的人白血病细胞 HL-60、胃腺
癌细胞 SGC-7901及肾癌细胞 786-B肿瘤细胞制成
细胞悬液 ,调整细胞浓度为 2× 106 /m L,种入 96孔
培养板 ,每孔 50μL,同时加入不同浓度的 Fr4 50
μL,使药物的终浓度分别为 500, 250, 125, 62. 5,
31. 25μg /m L,每组设 6个平行孔 , 37℃ , 5% CO2
条件下培养 48 h,实验终止前 4 h加入 10μL MT T
( 5 mg /mL, PBS配制 ,无菌滤过 ) , 4 h后用酸化的
10% SDS ( 10% SDS 29. 7 mL+ 0. 1 mo l /L HCl
0. 3 mL)中止反应 ,放置 24 h后 ,以 DG3032A酶标
仪测吸光度 ( A )值 (实验波长 570 nm ) ,按公式计
算对瘤细胞的抑制率 ,并求得 IC50值。
抑制率= ( 1-用药组 A值 /对照组 A 值 )× 100%
1. 7　统计处理:所有数据均以 x± s表示 ,两样本均
数用配对 t检验。
2　结果
2. 1　对小鼠移植瘤 S180的抑制作用:金荞麦 Fr4 3
个剂量对 S180都有抑制作用 ,其中 400, 800 mg /kg
组对 S180的抑瘤率分别为 29. 56%～ 55. 84% ,
32. 77%～ 38. 52% ,与对照组相比差异具有显著性
( P < 0. 05, 0. 01)。 单用 Fr4 200 mg /kg对 S180的抑
瘤率为 15. 76%～ 24. 84% ,单用 CTX 25 mg /kg为
37% ～ 59. 12% ,两药合用达到 63. 05% ～ 65. 84% ,
q值为 1. 21～ 1. 80, 3次平均为 1. 43,说明两药合用
对 S180抑瘤作用增强。结果见表 1。
表 1　 Fr4对小鼠移植瘤 S180的抑制作用 (n= 3)
Table 1　 Inhibitory ef f ect of Fr4 on S180 in mice (n= 3)
组　别 剂　量
/( mg· k g- 1)
动物 /只
始 末
平均体重
变化 / g
平均瘤重
/ g
抑瘤率
/%
对照 - 10 9 + 7. 80 2. 23± 0. 86 -
Fr4 200 10 10 + 8. 34 1. 68± 0. 47 24. 84
400 10 10 + 5. 12 1. 52± 0. 68* 32. 28
800 10 8 + 8. 00 1. 50± 0. 73* 32. 77
CTX 25 10 9 + 5. 26 0. 92± 0. 34* * 59. 12
Fr4+ CTX 200+ 25 10 10 + 4. 90 0. 76± 0. 44* * 65. 84
　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs cont rol g roup
2. 2　对小鼠移植瘤 H22的抑制作用: Fr4 200, 400,
800 mg /kg对 H22都有抑制作用。单用 Fr4 200 mg /
kg 对 H22的抑瘤率为 26. 61% ～ 36. 46% ,单用
CTX 25 mg /kg抑瘤率为 36. 46%～ 37. 83% ,两药
合用抑瘤率达到 43. 83%～ 68. 24% ,q值为 1. 35～
1. 70, 3次平均为 1. 50,说明两药合用对 H22有增强
抑瘤作用。结果见表 2。
2. 3　对 CTX致骨髓抑制的拮抗作用: CTX 100
mg /kg明显降低小鼠骨髓 DNA含量与外周血
·939·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
表 2　 Fr4对小鼠移植瘤 H22的抑制作用 ( n= 3)
Table 2　 Inhibitory ef fect of Fr4 on H22 in mice ( n= 3)
组　别 剂　量
/ ( mg· kg- 1 )
动物 /只
始 末
平均体重
变化 /g
平均瘤重
/g
抑瘤率
/%
对照 - 10 10 + 5. 18 1. 25± 0. 29 -
Fr4 200 10 10 + 3. 60 1. 03± 0. 01* 36. 46
400 10 9 + 5. 64 0. 90± 0. 43* 38. 75
800 10 10 + 3. 63 0. 74± 0. 39* 68. 24
C TX 25 10 9 + 5. 19 0. 92± 0. 41* * 36. 46
Fr4+ CTX 200+ 25 10 10 + 3. 65 0. 79± 0. 57* * 68. 24
　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs cont rol group
WBC数。 与对照组相比 ,模型组骨髓 DNA含量下
降近 80. 36% ,外周血 WBC数下降近 80%。 Fr4对
此有拮抗作用 ,无论是预先给药还是与 CTX同时
给药 , Fr4均能明显提高骨髓 DNA含量 ( P < 0. 05,
0. 01)。预先给药比同时给药更能提高骨髓 DNA含
量 (P < 0. 05) ,但无明显的剂量依赖关系。 Fr4给药
3 d不能拮抗 CTX所致 WBC数下降 ,预先给药组
WBC计数显著升高 ( P < 0. 05) ,也无明显的剂量
依赖关系。结果见表 3。
表 3　 Fr4对 CTX致 DNA合成和白细胞
减少的拮抗作用 (x± s, n= 10)
Table 3　 Ef fect of Fr4 on both DNA synthesis and WBC
decreased by CTX in mice (x± s , n= 10)
组　别 Fr4
/( mg· kg- 1)
CTX
/( mg· kg- 1)
DN A
/μg
WBC计数
/ ( 109· L- 1 )
A 0 0 218. 28± 52. 61* *　 6. 23± 1. 06* *
B 0 100× 1 42. 85± 28. 08 1. 29± 0. 52
C 200× 3 100× 1 131. 49± 33. 61* * 1. 34± 0. 42
D 400× 3 100× 1 141. 90± 36. 04* * 1. 58± 0. 68
E 200× 8 100× 1 187. 98± 31. 77* * 1. 88± 0. 46*
F 400× 8 100× 1 142. 73± 51. 02* * 1. 92± 0. 49* *
　　与 B组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs B g rou p
2. 4　对 HL-60, SGC-7901, 786-B细胞体外增殖
的影响: 金荞麦 Fr4呈剂量依赖性抑制 HL-60和
SGC-7901肿瘤细胞体外增殖 ,对 786-B则无明显
细胞毒作用。 Fr4作用 24 h后对 HL-60, SGC-7901,
786-B的 IC50依次为 112. 6, 160. 2, 399 mg /m L。结
果见表 4。
3　讨论
　　结果表明单用 CTX或金荞麦 Fr4均能抑制移
植瘤 S180、肝癌 H22的生长 ,金荞麦 Fr4和 CTX联合
应用能起到相加的作用。 但是金荞麦 Fr4恢复骨髓
DNA含量与外周血 WBC数不够一致 ,这可能因为
给药时间或观察时间较短 ,骨髓 DNA与外周血
表 4　 Fr4对 HL-60, SGC-7901, 786-B细胞
体外增殖的抑制作用 (x± s, n= 6)
Table 4　 Ant iprolif eration eff ect of Fr4 on HL-60,
SGC-7901, 786-B cells in v itro ( x± s , n= 6)
组别 浓度
/ ( mg· mL- 1 )
抑制率 /%
HL-60 SGC-7901 786-B
对照 - - - -
Fr4 31. 25 8. 4 1. 1 10. 0
62. 50 17. 8 7. 4 15. 0
125. 00 56. 1 41. 5 26. 0
250. 00 83. 2 70. 2 39. 0
WBC合成尚未表现出同步化。 文献报道 ,用 FCR
(金荞麦根部乙醇提取的有效成分 )作体内试验治
疗动物肿瘤 ,对胰腺腺泡细胞癌、肺癌、黑色素瘤、肝
癌、 U14宫颈癌、小鼠移植 S180肉瘤均有抗癌作用 ,
且毒性较小 [5 ] ,本实验结果与文献报道相符。金荞麦
Fr4抑制肿瘤细胞的生长可能是通过直接或间接作
用于 DNA代谢的某一环节来实现 [6 ]。在一定剂量
和范围内金荞麦 Fr4可诱导 HL-60细胞凋亡 ,诱导
细胞凋亡可能为其抗肿瘤作用的机制之一。 金荞麦
Fr4拮抗 CTX所致骨髓抑制的机制可能与其能增强
小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能 ,增强机体的免疫能
力 ,以及抑制血小板聚集 ,降低血液黏滞度有关 [2 ] ,
具体机制有待进一步研究。金荞麦 Fr4可能通过某
种机制提高 P-450代谢酶活性 ,而发挥协同抗癌作
用。本实验研究表明: 金荞麦 Fr4具有一定的抑瘤作
用 ,与 CTX合用有协同抑瘤作用 ,还可拮抗 CTX
造成的骨髓抑制 ,提示金荞麦 Fr4是值得开发研究
的抗癌药物。
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