全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10斯2005年lO胃·1463·
gationsfIJcaniagenus．flavonoidsfromL caniapyrijbtia
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Nf他胁舯Id,,nt(／iMt．m(耵机光谱和有机化台物结掏鉴定)
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泥鳅黏多糖的提取分离及其理化性质检测
量陆陆1，李泽文2，李文凯1．何树庄1。扬宝峰1
(1．哈尔滨医科大学药学院．黑龙江暗尔滨150086}2．黑龙江大学化学化工学院．黑龙江哈尔滨】50080
自古以来，泥鳅被认为具有较高的药用价值，对
肝炎、高血压、冠心病及皮肤瘙痒等症具有一定辅助
疗效u1。实验证实动物黏多糖具有多种药理活性，包
括抗凝血、降血脂等”一。目前已发现并利用的动物来
源黏多糖主要有肝索、硫酸软骨索、硫酸皮肤素、硫
酸角质素等。有关泥鳅黏多糖的提取及研究目前尚
未见报道。本实验从泥鳅中提取出黏多糖并对其部
分理化指标进行了检测，有美其药理活性研究仍在
进行中。
1材料，仪器及试剂
泥鳅为市购。新鲜猪胰腺及胰蛋白酶由哈尔滨
生化制药厂提供。
DT一100电光天平，岛津UV220紫外分光光
度计，岛津IR470红外分光光度计，DYY一Ⅲ31C
型微型电泳槽等。葡萄糖醛酸为Sigma产品，盐酸
氨基葡萄糖由浙江红星生化制品厂提供，其他试剂
均为分析纯。
2实验方法与结果
2．1 泥鳅黏多糖的提取分离及精制：泥鳅清水养
2d，期间数次换水。晾晒，烘干，磨碎得干粉。干粉先
后用丙酮及石油醚回流提取1～2次，晾干。将脱脂
后的干粉浸入适量提取液中(0．34mol／I．NaCI一
0．5mol／I．NaOH一4：1)．室温浸泡24h，滤过，重
复浸提一次，合并两次浸提液。新鲜猪胰腺剔除异
物，按每克胰腺加入lmg胰蛋白酶制成匀浆。按鲜
品的4％在提取液中加入胰匀浆，50C恒温搅拌
7h，此期间分几次加人胰蛋白酶，直至酸度不再改
变。调pH=7，加热至85(1，出现大量絮状沉淀。迅
速冷却至30C以下，抽滤。滤液调pH一6。加95％
乙醇使含醇量达75％．冷藏过夜，滤过，滤液用无水
乙醇洗涤两次，抽干，得泥鳅黏多糖粗品。
粗品用适量蒸馏水溶解，阋pH一9，50(1水浴
反应4h．期间滴加H。()!适量。冷却，凋pH一7，加
入少量NaC[，抽滤，滤液中按比例依次加入无水乙
醇，冷藏放置，离心收集，真空于燥，依次得到25％、
40％、45％、75％4种醇沉样品．分别标示为样品1、
样品2、样品3、样品4。
2．2泥鳅黏多糖的分析鉴定
2．2．1一般性质：样品1～3均为自色粉末。样品4
为浅黄色粉末。样品2～4均易溶于水。4种样品水
溶披的pH值依次为6．5、7．3、7．0、6．7。4种样品水
溶液遇茚三酮均不显色。
2．2．2琼脂精电泳检测均一性：参照Dietrich
法【”．取4种样品及对照品肝素各1mg分别溶于
0．2mI。溶有少量甲酚红的缓冲溶液中(样品l难
溶)。0．5％琼脂糖制胶，电压为75V。分别采用巴比
妥和乙二胺缓冲体系，甲苯胺兰染色。结果见表1。
衰1琼膳糖电泳检测样品均一性
Table1 Homogeneityofsamplesd termined
byagaroseelectrophoresi5
2．2．3硫酸基检测：精确称取4种样品各约lo
mg，按Dodgson法检测硫酸基1]，证明样品中均有
硫酸基存在。标准曲线回归方程为：A一4．5839C+
0．02133，r一0．99812。定量结果见表2。
2．2．4己糖胺检测：精确称取4种样品各10mg，
按Rondle法检测己糖胺“]。4种样品酸解液均呈
箨薯品羿：鍪蓝盎；做4一)，女，哈尔滨人，教授，本科毕业于吉林大学化学系，硬士毕业于哈尔滨医科大学药理学々业，主要从事天然药
物成分及其药理药效学研究。Tel：(0451)8669935lE—mail：donglulu54817@sohu·com
万方数据
’1464。 中草药ChineseTraditiunalandHerbalDrugs第36卷第lo期2005年lo月
表2样品中的硫酸基、己糖胺、己糖醚馥
Table2 Contentofsulphate，glucosamine
andhexuronicacidInsamples
ElsonMorgan反应，示有己糖胺存在，标准曲线回
归方程为：A一27．40C+0．07476，y一0．9377。定
量结果见表2。以3种展开体系醋酸丁酯吡啶一盐酸
(1mol／I。)一5：3：1；正丁醇毗啶一盐酸
(1mol／I，)=5；3：2l醋酸乙酯一吡啶一水一2：1：2
进行薄层鉴定，证明4种样品中的己糖胺均为氨基
葡萄糖。
2．2．5 已糖醛酸检测；4种样品对硫酸咔唑反应
均呈阳性，示含有己糖醛酸，用Dischel法测定己糖
醛酸量“j，标准曲线回归方程为：A一39．19C+
0．002168，r=0．9994。定量结果见表2。
2．2．6中性糖纸色谱检测：对照品：葡萄糖、半乳
糖、甘露糖、术糖分别配成1％的水溶液。样品：己糖
胺实验酸解液。显色剂：苯胺一邻苯二甲酸。展开体
系：正丁醇一毗啶一水一3；1；1；醋酸乙酯毗啶一水=
2：1：1；正丁醇一乙醇一水一4l1．1{1．9。3种展开
体系中均出现与术糖Rf值相近的红色斑点，尤以样
品2、3明显。
2．2．7 红外光谱检测：分别取少量25％、40％、
45％、75％4种醇沉样品，溴化钾压片，红外光谱扫
描。结果如下：4种样品均在3448～3460cm。处有
强吸收，有羟基的O—H伸缩振动，氨基的N—H伸缩
振动，酰胺的N—H伸缩振动；4种样品均在1654～
l 656Cm_1有明显吸收，说明了酰胺中羰基的存在；
l404cm_1处的吸收表明了一COOH的c—o伸缩振
动及一C00一的对称伸缩振动；1080cm“处的强吸收
充分说明了4种样品中均含有明显吡喃环的c—oc
环内伸缩振动；1 240cm’附近有S一()伸缩振动吸
收，860及878cm“处有硫酸基结合位置c一()一s的
特征吸收，40％、75％醇沉样还有明显的l316cm。
吸收，这说明其中硫酸基量较高。总之，红外光谱检测
的结果充分说明4种醇沉样中确实存在下列结构及
官能团：糖的吡喃环、羰基、磺酸基、羟基和氨基等基
团。这些均与黏多糖的常见结构及基团相吻合。
3讨论
根据常见黏多糖在乙醇中溶解度的差异n]，本
实验将泥鳅粗黏多糖分为文中所述4部分。实验表
明提取过程中蛋白质的清除比较彻底且具有良好的
均一性。本实验没有得到另外一种黏多糖中常见的
中型糖即岩藻糖对照品．但岩藻糖在该实验条件下
应呈棕色斑点并在紫外灯下有荧光[5]，实验结果可
排除该糖的存在。本实验结构分析表明泥鳅黏多糖
中含有硫酸基、氨基葡萄糖、己糖醛酸、术糖等，这些
基本结构与肝素、硫酸软骨素等已知酸性黏多糖的
基本结构有很多相似性。目前正在进行的泥鳅黏多
糖对家兔血流动力学影响的试验也已初步证明观鳅
黏多糖对一15血管等方面具有一定生理活性。
Refetepeest
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蓬子菜的化学成分研究(I)
马英丽，卢卫红，于晓敏，史国玉，扬帆
(黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨 150040)
蓬子菜GaliumverumL．为茜草科拉拉藤属：11 药用植物蓬子菜的干燥全草。另名黄花米、疗毒蒿、
鉴銎晶留：鍪薹差岳强技攻关计划项目(。c。。c。。。一，)
作者筒介；马蔸丽(1954一)，黑诧江啥尔滨市人，教授，博士生导师，主要研究方向为中药药教物质基础研究，Tel：(0451)82198178
万方数据
泥鳅黏多糖的提取分离及其理化性质检测
作者： 董陆陆， 李泽文， 李文凯， 何树庄， 杨宝峰
作者单位： 董陆陆,李文凯,何树庄,杨宝峰(哈尔滨医科大学药学院,黑龙江,哈尔滨,150086)， 李泽文
(黑龙江大学,化学化工学院,黑龙江,哈尔滨,150080)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 1次

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