全 文 ：　　表 1　阿克苏黄芪中黄芪多糖含量测定结果 (n= 3)
Table 1　Con ten t of polysacchar ide in A. aksuens is (n= 3)
样　品 多糖含量ö%
1 2. 29
2 2. 27
3 2. 31
4 2. 26
5 2. 27
5　讨论
511　本实验采用端基法来测定样品中所含可测端
基数, 由质量计算出样品的相对分子质量。
512　本实验中所提取的阿克苏黄芪多糖, 经检定为
葡聚糖, 含量仅 2128% (n= 3) , 显著低于蒙古黄芪 中多糖含量。References:[ 1 ]　X in jiang Institu te of B io logy So il and D esert, Ch inese A cade2m y of Sciences. X inj iang F lora of M ed icam en t and P lan t (新疆药用植物志) [M ]1 3rd ed. U rum qi: X in jiang Peop le’sP ress, 19841[ 2 ]　Zhang W J. R esearch T echn ique of Comp ound P oly saccharid e(复合多糖生化研究技术) [M ]1 Shanghai: Shanghai Scien tificand T echn ical Pub lishers, 19871[ 3 ]　Yang F Z, X ie H M. D eterm ination of po lysaccharide inch rist ina loo sestrife herb by spectropho tography [J ]1 Ch inT rad it H erb D rug s (中草药) , 1996, 27 (Supp l) : 972981[ 4 ]　Cheng Y X, Zhang Z S. P rob lem and so lu tion of determ inationof po lysaccharide in A strag a lus [J ]1 R es T rad it Ch in M ed (中医药研究) , 1993 (5) : 562581
茯苓萜类的高效液相色谱指纹图谱研究
杨　冉1, 李建军1, 屈凌波1, 相秉仁2, 安登魁2Ξ
(11 郑州大学 化学系, 河南 郑州　450052; 21 中国药科大学 分析中心, 江苏 南京　210009)
摘　要: 目的　建立茯苓三萜化合物的指纹图谱。方法　反相高效液相色谱法。结果　道地药材茯苓及不同地区收
集的市场商品具有相当稳定的、相似程度很高的指纹图谱。结论　可利用液相色谱的特征峰控制茯苓及其制剂的
质量。
关键词: 茯苓; 高效液相色谱; 指纹图谱
中图分类号: R 28411　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0273 03
Stud ies on f ingerpr in t of terpeno id in P or ia cocos by HPLC
YAN G R an1, L I J ian2jun1, QU L ing2bo 1, X IAN G B ing2ren2, AN D eng2ku i2
(1. D epartm ent of Chem istry, Zhengzhou U niversity, Zhengzhou 450052, Ch ina; 2. Cen ter of A nalysis,
Ch ina Pharm aceu tical U niversity, N an jing 210009, Ch ina)
Key words: P oria cocos (Schw. ) W o lf; H PL C; fingerp rin t ing
　　茯苓为多孔菌科植物茯苓 P oria cocos (Schw. )
W o lf 的干燥菌核, 具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安
神、增强机体抗病能力的功效。其主要化学成分为多
糖、三萜、脂肪酸、甾醇、酶等。中外学者对茯苓的化
学成分及生物活性进行研究, 发现其所含的大量三
萜类物质具有免疫调节、抗肿瘤、拮抗醛固酮, 诱导
分化白血病细胞系HL 260 等很好的药理活性[1～ 4 ]。
建立茯苓三萜类的分析测定体系对于茯苓药材内在
质量的控制具有重要意义, 但鉴定单一的化学成分
不能代表其特有的功效, 也不能全面地反映其内在
质量。研究表明, 其甲醇提取物具有很好的药理活
性。本实验着重对不同产地茯苓的甲醇提取物进行
了液相色谱指纹图谱的比较研究, 以探求其呈现的
特征峰群, 为茯苓中药材的鉴定和质量控制提供科
学依据。
1　材料与仪器
茯苓药材为安徽、湖北、河南、四川、浙江等市场
商品, 共 9 个样品, 经鉴定均为多孔菌科真菌茯苓
P. cocos (Schw. ) W o lf 的干燥菌核。
W ater 1100 型液相色谱仪, DAD 检测器, 数据
处理工作站。
2　方法
211　色谱条件: 色谱柱: T SKgel OD S—80 C18 (150
mm ×4 mm , 415 Λm ) ; 流动相: 甲醇水溶液进行梯
·372·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003206210
作者简介: 杨　冉 (1976—) , 女, 河南西峡县人, 郑州大学化学系研究生, 主要进行中药质量控制和分析研究。
度洗脱, 0～ 25 m in 由 80% 甲醇水溶液增加到 95%
甲醇水溶液, 然后保持 5 m in; 流速: 018 mL öm in; 检
测波长: 230 nm ; 温度: 25 ℃。在上述条件下对各样
品进行了分析, 茯苓的H PL C 指纹特征峰见图 1。
图 1　茯苓的 HPLC 指纹特征峰
F ig. 1　HPLC f ingerpr in t of P. cocos
212　供试品溶液的制备: 取茯苓药材 5 g 粉碎, 过
100 目筛, 加 100 mL 甲醇, 水浴回流 2 h, 放置, 取上
清液, 0145 Λm 膜过滤器滤过, 所得滤液即为供试品
溶液。
213　参比组份的选取: 为消除测定结果的系统误
差, 选定能够与其他组份很好分离、峰形对称、保留
时间为 81685 m in 的 6 号峰作为内参比组份, 以便
计算同种茯苓共同特征组份的相对保留时间和相对
含量。
214　方法学验证: 为了考察分析方法的可靠性, 以
安徽产茯苓药材样品为例进行考察。
21411　稳定性试验: 取同一份供试品溶液, 分别在
0, 1, 2, 3, 4, 5, 7, 24, 72, 96 h 进行检测, 考察各主要
色谱峰与内参比峰保留时间的一致性, 各主要色谱
峰相对保留时间的R SD 为 012%～ 017%。
21412　精密度试验: 取同一份供试品溶液, 连续进
样 6 次, 考察各主要色谱峰与内参比峰相对保留时
间和相对面积的一致性, 各色谱峰保留时间的R SD
为 0112%～ 013% , 相对面积的R SD 小于 5%。
21413　重现性试验: 取同一批号的供试品 5 份, 同
法检测, 考察各主要色谱峰与内参比峰相对保留时
间和相对面积的一致性, 各色谱峰相对保留时间的
R SD 为 012%～ 015%。
3　茯苓 HPLC 相对保留指纹图谱的建立
311　相对保留值 Α的计算: 茯苓三萜类化合物液相
色谱可分离出 20 余个成分, 从中选取经比较所有测
定和记录的色谱图, 在观察众多样品色谱图的基础
上, 根据能否构成“指纹”为根据选取 12 个作为可以
构成指纹图谱的稳定的特征峰。在本实验条件下, 色
谱峰较多且相当密集, 难以插入一个合适的参照物,
故选择一个分离较好, 出峰居中的特征峰 6 号峰作
为内参照峰, 求出样品中特征峰的相对保留值 Α
(Α= tR iötR s)。
312　Α值窗口的设定: 由于保留时间受各种实验因
素的影响, 每一次实验数据不可能完全一致, 所以对
每个峰位的 Α值设定为 2% , 即取可信限在±2% 的
范围内。
313　指纹谱的建立: 按样品各色谱峰 Α值的大小次
序排序, 在每个 Α项下标出各组份的相对面积值
(RA ) , 就组成了样品的 H PL C 相对保留值指纹图
谱。对不同样品中具有相同 Α值的峰的RA 值进行
比较, 可以获知所对应的化合物在各个样品中的相
对含量, 达到半定量分析的目的。以 6 号峰为内参照
峰的茯苓药物的色谱指纹谱的特征峰见表 1。
　　RA = A x×100ö∑A , A ◊ = ∑A x ö∑A
　　RA 2相对面积值, ∑A 2总峰面积, A x 2某个特征峰的面
积, ∑A x 2样品所有特征峰的面积
表 1　不同茯苓药材的 HPLC 相对保留值指纹图谱数据
Table 1　Relative reten tion time of HPLC
f ingerpr in ts of P. cocosΑ 样品峰　RA
1 2 3 4 5 6 7 8 9
0. 342 6. 30 4. 74 5. 88 1. 12 2. 30 5. 45 4. 10 5. 59 2. 99
0. 471 4. 75 3. 49 5. 82 2. 88 1. 42 5. 25 4. 61 5. 03 3. 81
0. 708 2. 24 10. 61 5. 39 7. 19 7. 88 9. 08 6. 88 9. 70 7. 86
0. 747 2. 20 4. 50 10. 80 4. 94 4. 01 6. 53 6. 46 6. 84 5. 53
0. 880 6. 03 4. 75 6. 85 3. 94 6. 53 8. 27 10. 10 7. 22 9. 03
1. 000 13. 98 10. 69 9. 71 10. 47 10. 04 10. 49 10. 63 10. 68 10. 94
1. 145 2. 10 2. 72 2. 26 3. 88 2. 85 2. 30 3. 07 1. 99 3. 99
1. 320 6. 49 4. 86 3. 96 3. 46 4. 01 2. 92 3. 03 3. 75 4. 33
1. 428 2. 67 4. 02 8. 39 6. 49 7. 71 2. 96 3. 70 4. 26 7. 53
1. 602 9. 25 10. 26 1. 22 8. 86 8. 02 7. 65 7. 23 6. 90 6. 88
1. 737 1. 77 1. 33 0. 87 1. 81 1. 28 1. 45 1. 37 1. 31 1. 06
2. 536 2. 66 13. 99 11. 60 23. 68 5. 83 5. 73 3. 31 2. 93 4. 99
A ö% 60. 44 75. 91 72. 75 78. 72 61. 88 68. 08 64. 49 66. 2 68. 94
4　结果与讨论
411　供试品溶液的配制: 茯苓药材中的有效成分主
要为水溶性的糖类和脂溶性的萜类, 由于近些年来
人们对其进行的大量研究主要集中在脂溶性萜类部
分, 因此本实验也针对这一部分进行研究, 实验过程
中对其甲醇和乙醚的提取物分别进行了考察, 发现甲
醇提取物的成分多, 因此对甲醇提取物进行了研究。
412　流动相的选择: 茯苓醇提取物的成分多, 在等
梯度条件下, 某些有效成分出峰时间太长, 故选用梯
度洗脱, 考虑到梯度洗脱基线漂移对实验的影响, 进
行了空白对照实验。
413　色谱相对保留值: 色谱相对保留值是一组仅与
化合物性质、色谱分离条件相关的半定量参数, 当色
·472· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
谱分离条件固定时, 仅与化合物性质有关, 可以消除
人和仪器设备对化合物保留时间的影响, 依此为依
据, 建立样品指纹图谱可使获得的样品信息更准确。
414　指纹图谱的整体性和模糊性: 色谱指纹图谱用
于中药鉴别, 提供的信息较用任何单一化学对照品
作为鉴别的依据要丰富的多。本实验基于整体色谱
的面貌辨认样品的真实性出发, 选取了 12 个特征
峰, 它们的峰位和大致的比例关系, 作为一个整体,
清楚地表达了指纹图谱鉴别的专属性。样品之间的
差异没有影响到对茯苓指纹图谱整体面貌的“共性
特征”, 不影响真实性的判断。
References:
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po riation. [J ]1 A cta A cad M ed S in (中国医学科学院学报) ,
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and its pharm aco logy [J ]1 Ch in T rad it P a t M ed (中成药) ,
2001, 23 (1) : 582621
桃花止泻冲剂中干姜油 Β-环糊精包合工艺研究
赵艳玲, 山丽梅, 肖小河, 周韶华, 袁海龙, 蔡光明, 贺承山Ξ
(中国人民解放军 302 医院 药学部, 北京　100039)
摘　要: 目的　研究桃花止泻冲剂中干姜油 Β2环糊精最佳包合工艺。方法　采用正交试验法, 以油利用率、含油率、
包合物收得率为指标进行比较, 并采用薄层色谱 (TL C)、差热分析 (D SC)、红外光谱 ( IR )、显微镜成像验证包合物
的形成。结果　饱和水溶液法最佳包合条件: Β2CD 和油的比例为 6∶1, 包合温度为 50 ℃, 包合时间为 2 h, 该条件
下的挥发油利用率和包合物得率最高。结论　该包合工艺可用于干姜油的 Β2环糊精包合。
关键词: 干姜油; Β2环糊精包合; 薄层色谱; 差热分析
中图分类号: R 28316; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0275 03
Study on optim um prepara tion techn ique of Β-cyclodextr in inclusion
for vola tile o il from dr ied g inger in Taohua An ti-d iarrhea Granula
ZHAO Yan2ling, SHAN L i2m ei, X IAO X iao2he, ZHOU Shao2hua,
YUAN H ai2long, CA I Guang2m ing, H E Cheng2shan
(D epartm ent of Pharm acy, 302 Ho sp ita l of PLA , Beijing 100039, Ch ina)
Key words: vo la t ile o il from dried ginger; Β2cyclodex trin inclu sion; TL C; differen t ia l therm al analysis
(D TA )
　　桃花止泻冲剂系在张仲景止泻名方桃花汤基础
上进行的剂型研究。该制剂具有温中散寒、涩肠止泻
的功效。其中干姜含有挥发油成分, 其性质不稳定,
容易挥发。为了提高药物的稳定性, 本实验就Β2环糊
精 (Β2CD ) 的包合特点[1 ] , 将干姜挥发油作客体, 用
饱和水溶液法进行包合试验研究。分别以干姜挥发
油的利用率、包合物中的油含率、包合物收得率为指
标, 采用正交设计法筛选了桃花止泻冲剂中干姜油Β2环糊精包合工艺。
1　材料和仪器
干姜挥发油 (解放军 302 医院药学部提供) , Β2 环糊精 (陕西生物化学工业公司, 蒸馏水重结晶后干燥备用) , 硅胶 G 薄层板 (青岛海洋化工厂产品) , 其余试剂均为分析纯。　　挥发油测定器 (上海玻璃仪器厂) , D—7401—90 电动搅拌器 (北京分析仪器厂) , DB 602—E 电子天平 (梅特勃2托利多仪器有限公司) , CKS 倒置显微镜 (日本O lympu s 公司) , 阿贝折光仪 (北京光学仪器厂) , CDR—1 热分析仪 (上海分析仪器厂)。2　实验方法211　干姜挥发油的提取: 取干姜制成 2 mm 的粗粉, 加 8 L 蒸馏水, 浸泡过夜, 按《中华人民共和国药
·572·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003205230
基金项目: 军队“十五”攻关课题 (01Q 136)