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Effect of Sargassum pallidum and Glycyrrhiza uralensis on thyroid hormones and its antibodies of model goitered rats

海藻甘草对甲状腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体的影响



全 文 :bral i sch emia reperfusion in p res enile mice [ J ]. J Beij ing Un iv
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海藻甘草对甲状腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体的影响
丁选胜 ,阚毓铭 ,李 欧
(南京中医药大学 海洋药物研究开发中心 ,江苏 南京  210029)
摘 要: 目的 观察海藻、甘草单煎液及其不同比例合煎、单煎后混合液对甲状腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体
的影响。方法 每日给大鼠 ig丙基硫氧嘧啶 ( 0. 15 g /kg ) ,连续造模 10 d。给药组动物在造模的同时分别 ig海藻、
甘草单煎液及其不同比例合煎、单煎后混合液。 15 d后采血 ,处死大鼠 ,放射免疫法测定血清中三碘甲状腺原氨酸
( T3 )、四碘甲状腺原氨酸 ( T4 )及甲状腺微粒体抗体 ( TM )、甲状腺球蛋白抗体 ( TG) 的含量。 结果 海藻单煎液
及海藻、甘草不同比例合煎及单煎后混合液均有不同程度降低 TM , TG作用 ,其中 TM的降低幅度大于 TG ,且二
者合煎液作用大于单煎后混合液 ,当二者为 1∶ 1合煎时作用最显著。但未见对 T3 , T4的影响。结论 海藻及海藻、
甘草合用可抑制丙基硫氧嘧啶所致甲状腺肿模型大鼠甲状腺抗体升高。
关键词: 海藻 ;甘草 ;甲状腺激素 ;抗体
中图分类号: R286. 71   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2003) 01 0054 03
Effect of Sargassum pall idum andGlycyrrhiza uralensis on thyroid hormones
and its antibodies of model goitered rats
DING Xuan-sheng, KAN Yu-ming, LI Ou
( Resear ch & Development Center fo r Marine Medicine, Nanjing Unive rsity of TCM , Nanjing 210029, China)
Key words: Sargassum pall idum ( Tum. ) C. Ag . ; Glycy rrhiza uralensis Fish; thy roid ho rmone; anti-
bodies
  中医之瘿瘤包括现代医学的甲状腺肿、甲状腺
机能亢进症、甲状腺腺瘤等病症。临床上 ,诸多医家
将含有海藻、甘草配伍的方药应用于治疗瘿瘤 ,如海
藻玉壶汤、瘿瘤丸等 ,疗效显著 [ 1]。近年来 ,两药配伍
同用的报道更是屡见不鲜。本实验通过观察海藻、甘
草单煎液及其不同比例合煎、单煎后混合液对甲状
腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体的影响 ,初步探
讨了二者配伍用于甲状腺疑难症的作用机制。
1 实验材料
1. 1 药品及试剂:甘草购于南京医药股份公司 ,经
本校中药鉴定学教研室鉴定为豆科植物甘草 Gly-
cyrrhiza uralensis Fisch的干燥根及根茎的饮片。海
藻购于南京医药股份公司 ,经本校中药鉴定学教研
室鉴定为马尾藻科植物海蒿子 Sargassum pal-
lidum ( Tum. ) C. Ag. 的干燥藻体。丙基硫氧嘧啶 ,
南通制药总厂生产 ,批号: 990904。碘化钾 ,宜兴市化
学试剂厂 , AR级 ,批号: 980922。 T3试剂盒 ,天津德
普生物技术和医学产品有限公司 ,批号: KT3D1
·54· 中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
收稿日期: 2002-03-27基金项目:江苏省教育厅自然科学基金资助课题 ( K JB360003)作者简介:丁选胜 ( 1962— ) ,男 ,安徽广德人 ,讲师 ,博士 ,现中国药科大学博士后 ,主要从事功能食品、中药新药开发及方剂配伍研究。
Tel: ( 025) 3271270  E-mai l: dxso162@ sina. com
0116。 T4试剂盒 ,天津德普生物技术和医学产品有
限公司 ,批号: KT4D1 0114。 TM, TG试剂盒 ,上海
放射免疫分析技术研究所 ,批号: 20001201。
1. 2 仪器: HANGPING JA 2003电子天平 ,上海
天平仪器厂。 SN-682放射免疫γ计数器 ,中国科学
院原子核研究所日环仪器厂。
1. 3 动物: SD大鼠 ,体重 170~ 220 g ,雄性 ,南京
医科大学实验动物中心提供。
2 方法
  依不同比例分别称取甘草、海藻饮片 ,加水 8
倍量 ,浸泡 20 min后加热煎煮至沸腾 ,保持 30
min,过滤 ;药渣加 6倍量水 ,再煎一次。 合并煎液 ,
浓缩至每毫升药液相当于原药材 1 g。
按文献方法 [2 ]取大鼠 112只 ,随机均分成 14
组 ,每组 8只: ( 1)正常组 ; ( 2)模型组 ; ( 3)海藻单
煎液组 ; ( 4)甘草单煎液组 ; ( 5)甘草 -海藻 ( 1∶ 1)
合煎组 ; ( 6)甘草 -海藻 ( 2∶ 1)合煎组 ; ( 7)甘草-海
藻 ( 3∶ 1) 合煎组 ; ( 8)海藻 -甘草 ( 2∶ 1)合煎组 ;
( 9) 海藻 -甘草 ( 3∶ 1) 合煎组 ; ( 10) 甘草 -海藻
( 1∶ 1)单煎后混合组 ; ( 11)甘草 -海藻 ( 2∶ 1)单煎
后混合组 ; ( 12)甘草 -海藻 ( 3∶ 1) 单煎后混合组 ;
( 13) 海藻 -甘草 ( 2∶ 1)单煎后混合组 ; ( 14)海藻 -
甘草 ( 3∶ 1)单煎后混合组。正常组 ig等量蒸馏水 ,
余下各组大鼠按 0. 15 g /kg 丙基硫氧嘧啶进行造
模 ,共 10 d。 其中第 3~ 14组大鼠于造模的同时分
别以 12 g /kg ig各受试药。于第 16天称重后采血 ,
处死大鼠 ,放射免疫法测定血清中 T3 , T4及 TG,
TM的含量。
3 结果
3. 1 对模型大鼠血清 T3 , T4的影响: 丙基硫氧嘧啶
能降低大鼠血清中 T3 , T4水平 ,但与正常组比较无
显著差异性。海藻、甘草单煎液及其不同比例合煎、
单煎后混合液对模型大鼠血清中 T3 , T4水平均无明
显影响 ,结果见表 1。
3. 2 对模型大鼠血清 TM, TG的影响: 丙基硫氧
嘧啶能极显著升高大鼠血清中 TM , TG水平 ,与正
常组比较有极显著差异性 ( P < 0. 001)。海藻单煎液
及海藻、甘草不同比例合煎及单煎后混合液均有不
同程度降低 TM, TG作用 ,其中 TM的降低幅度大
于 TG,且二者合煎液作用大于单煎后混合液 ,当二
者为 1∶ 1合煎时作用最显著 ,结果见表 2。
表 1 对模型大鼠血清 T3 , T4的影响 ( x± s, n= 8)
Table 1 Ef fects on serum T3 , T4 in model rats (x± s , n= 8)
组 别    T3 / (nmol· L- 1) T4 / ( nmol· L- 1 )
正常 1. 56± 0. 39 6. 32± 2. 14
模型 1. 35± 0. 38 4. 87± 1. 88
海藻单煎液 2. 07± 1. 45 4. 55± 3. 06
甘草单煎液 1. 43± 0. 59 5. 64± 2. 26
甘草 -海藻 ( 1∶ 1) 合煎 1. 51± 0. 76 3. 70± 2. 35
甘草 -海藻 ( 2∶ 1) 合煎 1. 74± 0. 35 4. 43± 1. 25
甘草 -海藻 ( 3∶ 1) 合煎 1. 62± 0. 48 4. 99± 2. 12
海藻 -甘草 ( 2∶ 1) 合煎 1. 12± 0. 44 4. 64± 1. 20
海藻 -甘草 ( 3∶ 1) 合煎 1. 60± 0. 52 5. 37± 2. 35
甘草 -海藻 ( 1∶ 1) 单煎后混合 1. 74± 0. 76 5. 60± 1. 49
甘草 -海藻 ( 2∶ 1) 单煎后混合 1. 54± 0. 81 6. 34± 1. 63
甘草 -海藻 ( 3∶ 1) 单煎后混合 1. 35± 0. 43 4. 62± 2. 12
海藻 -甘草 ( 2∶ 1) 单煎后混合 1. 18± 0. 61 6. 52± 2. 09
海藻 -甘草 ( 3∶ 1) 单煎后混合 1. 07± 0. 34 5. 91± 1. 73
3 讨论
  丙基硫氧嘧啶是一种抗甲状腺药 ,能够阻止甲
状腺内酪氨酸碘化及偶联 ,抑制甲状腺素的生物合
成 ,使体内甲状腺素合成减少 ,通过副反馈作用 ,产
表 2 对模型大鼠血清 TM , TG的影响 (x± s, n= 8)
Table 2  Ef fects on serum TM , TG in model rats (x± s, n= 8)
组 别   TM /% TG /%
正常        3. 21± 0. 78        2. 03± 0. 39
模型 9. 08± 1. 73* * * 6. 19± 1. 22* * *
海藻单煎液 6. 09± 1. 19* * * △ 4. 20± 1. 03* * * △
甘草单煎液 7. 31± 1. 45* * * 5. 38± 1. 48* *
甘草 -海藻 ( 1∶ 1)合煎 4. 51± 1. 17△△ 3. 54± 1. 38△△
甘草 -海藻 ( 2∶ 1)合煎 5. 22± 1. 43* △△ 4. 18± 0. 98* * * △△
甘草 -海藻 ( 3∶ 1)合煎 5. 87± 1. 95* △ 4. 81± 1. 16* *
海藻 -甘草 ( 2∶ 1)合煎 5. 63± 1. 16* * △△ 4. 56± 1. 45* *
海藻 -甘草 ( 3∶ 1)合煎 5. 44± 1. 08* * △△ 4. 20± 0. 95* * * △△
甘草 -海藻 ( 1∶ 1)单煎后混合 5. 98± 1. 15* * * △ 4. 67± 1. 03* * *
甘草 -海藻 ( 2∶ 1)单煎后混合 6. 29± 1. 53* * △ 4. 82± 1. 21* *
甘草 -海藻 ( 3∶ 1)单煎后混合 6. 52± 1. 17* * * △ 5. 06± 0. 86* * *
海藻 -甘草 ( 2∶ 1)单煎后混合 5. 87± 1. 38* * △ 4. 99± 1. 22* *
海藻 -甘草 ( 3∶ 1)单煎后混合 5. 67± 1. 25* * △△ 4. 85± 1. 16* *
    与正常组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001; 与模型组比较: △ P < 0. 05 △△ P < 0. 01
    * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001 vs normal group; △ P < 0. 05 △△ P < 0. 01 vs m odel group
·55·中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
生大量的 TSH (促甲状腺激素 ,简称 TSH) ,使甲状
腺肥大增生。 实验结果表明丙基硫氧嘧啶所造成的
甲状腺肿模型大鼠血清 T3 , T4水平与正常组比较有
所降低 ,但经统计学处理无显著性差异。而模型大鼠
血清 TM , TG水平明显高于正常组 ,经统计学处理
有极显著性差异。 临床上某些甲状腺疾病如桥本氏
甲状腺炎、慢性侵袭性纤维性甲状腺炎、 Graves病
(毒性弥漫性甲状腺肿 ) 及部分甲减等多伴有抗体
增高 [ 3]。 TM是一个补体结合性抗体 ,可与甲状腺作
用诱导产生抗体依赖性细胞介导细胞毒而破坏甲状
腺组织。 TG是一个非补体结合性抗体 ,其检测阳性
率虽不高但自体免疫性甲状腺炎也有患者 TG阳
性而 TM阴性者。 海藻、甘草配伍应用后能使升高
的 TM , TG降低 ,从而减轻抗体对甲状腺细胞的破
坏 ,这可能是中医临床上某些方剂中运用二者配伍
治疗一些甲状腺疑难症的物质基础。而西医常用甲
状腺制剂治疗这些疾病 ,从不良反应和负反馈抑制
TSH角度来看远不如两中药的配伍应用。
  海藻甘草属中药十八反配伍禁忌范畴 ,但历代
医家的一些名方中常可见二者合用现象 ,且每显佳
效 ,未见不良反应。 通过上述实验研究 ,说明二者配
伍用于某些甲状腺疾病是有一定道理的。
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五倍子对 140株肠球菌的抑菌效果观察
李仲兴 1 ,张立志 2 ,王秀华 1 ,时东彦 1 ,张明明 2
( 1. 河北医科大学第二医院 ,河北 石家庄  050000; 2. 河北省人民医院 ,河北 石家庄  050071)
  中药五倍子具有收敛、止血等作用 ,对肺炎球
菌、链球菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、猪霍乱沙门菌均有
抑制作用 [1 ]。 然而亦有报道五倍子对金葡菌无抑制
作用 [ 2 ] ,周邦靖等报道五倍子对淋球菌及小肠结肠
炎耶氏菌抗菌力强 ,其抑菌环直径≥ 27 mm[ 3, 4]。此
外 ,周邦靖等还报道五倍子对肺炎克雷伯菌的 M IC
为 1∶ 10[5 ]。以上报道多为定性实验 ,且使用菌株大
多为 1株。经初步检测 ,五倍子对金葡菌、表皮葡萄
球菌的抑菌效果均较好 ,我们曾进行五倍子等中药
对 28株肠球菌的最低抑菌浓度测定 ,因菌株太少 ,
又未进行种的区分 ,但五倍子水煎液对肠球菌的抑
菌效果较好 [6 ] ,为了弄清五倍子对粪肠球菌、屎肠球
菌和其他肠球菌的抑菌作用 ,本实验应用中药定量
抗菌实验方法 ,并采用了大批量菌株进行抑菌实验 ,
结果表明五倍子对肠球菌有很好的抑菌效果。
1 材料与方法
1. 1 仪器、培养基及药材: 微量多点接种仪 ,北京医
科大学昆仑药物发展研究所生产。 Mueller-Hinton
琼脂 (美国 BD公司生产 , BBL,简称 M-H琼脂 )。
五倍子 (购自河北省药材公司 ) ,先将五倍子按常法
制成煎液 [7, 8 ] ,即 100 g五倍子 ,文火煎后制成 200
mL煎液 (为 50% 五倍子煎液 )备用。
1. 2 菌种:从我院临床病人的血液、尿液、脓汁、痰
液等标本分离的菌株共 140株 ,其中粪肠球菌 93
株、屎肠球菌 40株、其他肠球菌 7株。
1. 3 方法: 采用琼脂稀释法 ,用 M-H琼脂对五倍
子进行定量抗菌实验 [9, 10 ]。
1. 3. 1 药液稀释: 排列无菌试管 10只 ,于 2~ 10
只管中加无菌蒸馏水 10 mL,取五倍子水煎液 20
mL,于第 1管加入 10 mL,第 2管加入 10 mL,于
第 2管混合后取出 10 mL,加入第 3管 ,再混合后
取 10 m L放入第 4管 ,如此连续稀释至第 9管取出
10 mL弃掉。第 10管只有无菌蒸馏水作对照。这样
1~ 9管只含有不同浓度药液各 10 mL。
1. 3. 2 含药平板制备: 无菌操作将已溶化的无菌
M-H琼脂 900 mL,分装于 10瓶 ,每瓶 90 mL,将第
1管含 10 m L五倍子水煎液放入含 90 mL培养基
的瓶中 ,混合后倾注 4个平板 ,每个平板有 25 mL
·56· 中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
收稿日期: 2002-03-06基金项目:河北省科学技术厅计划内资助项目 ( 01276-2111D)作者简介:李仲兴 ( 1938— ) ,男 ,河北玉田人 ,教授 , 1958年毕业于张家口医专检验专业 ,一直从事临床微生物检验工作 ,研究方向为“机会致病菌生理、生化特性研究 ;机会致病菌对抗生素、中草药敏感及耐药谱型研究”。在国内外发表论文 80余篇 ,著有《临床细菌学》及《诊断细菌学》 ,获省部级科技进步奖 8项。