全 文 ：·1488· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
学试剂的使用会带来溶剂残留和环境污染等问题。
微生物转化法对天然产物进行结构修饰，是通过生
物酶对底物作用，获得更高活性、低不良反应的目标
产物。本研究表明，青霉菌培养过程所产酶能对叶黄
索酯选择性降解，并能将其转化为游离态叶黄素，通
过反应前后叶黄素及其酯的峰面积计算，叶黄素的
质量分数可达到91．6％。
本实验研究了微生物转化法制备叶黄素的可能
性，为生产叶黄素提供一个新思路，但由于转化体系
与化学方法完全不同，其后续分离纯化工作还有待
进一步研究。
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麦冬多糖的单糖组成研究
林晓，徐德生。，冯怡，沈岚
(上海中医药大学中药学院．上海201203)
麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬Ophiopogon
japonicus(Thunb．)Ker—Gawl．的干燥块根，具有
养阴生津、润肺清心的功能，可用于热病伤律、心烦
口渴等症。药理学研究表明，麦冬及其制剂具有一定
的抗心肌缺氧、抗心肌缺血作用，临床用于治疗冠心
病、心绞痛取得一定疗效。麦冬含有箱体皂苷、高异
黄酮、多糖、氨基酸等成分。小鼠“Rb心肌营养血流
量实验表明，麦冬皂苷、麦冬总多糖可能是麦冬抗心
肌缺血的主要有效部位口]，相对分子质量小于1×
1∥的麦冬多糖有较显著的抗心肌缺血作用C2]。通过
测定多糖全水解后水解液中的单糖种类和数量可以
对多糖的组成有所了解，目前常用0．5～2mol／L硫
酸或三氟乙酸进行全水解，且一般不对水解程度进
行监测。由于单糖在酸性条件下会脱水成糠醛，且不
同种类单糖的反应速率不同，若水解条件下不合适
或水解时闻过长，都会造成在确定单糖组成比例时
产生误差或错误。因此，本实验采用HPGPC—ELSD
法监测多糖水解程度，比较了两种全水解条件下麦
冬多糖的单糖组成。
l仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪，PL--ELS1000
蒸发光散射检测器(英国Polymer公司)，Lc一5A
液相色谱泵，cTo一2A柱温箱，RF一530荧光检测
器(日本岛津公司)，N2000色谱数据工作站(浙江太
学智能信息工程研究所)，ShodexSugarKS一802色
谱柱(日本昭和电工株式会社)。
浙麦冬(产地；浙江慈溪)，经上海中医药大学生
药教研室鉴定。DEAESepharoseTMFastFlow，
SephadexG25(PharmaciaBioteehAB，Uppsala，
瑞典)}盐酸胍(上海化学试剂公司)；果糖、葡萄糖、
半乳糖、甘霸糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖对照品为
Fluka产品。
2实验方法
2．1麦冬总多糖的提取：取干燥麦冬块根1kg，压
扁，永煎3次(每次加10倍量水，每次煮沸0．5h)，
合并水提液并减压浓缩至1g／mL，加乙醇至乙醇体
积分数为80％，静置过夜，倾去上清液，沉淀冷冻干
燥，即得(得率约为药材的25％)。
2．2麦冬多糖(POJ)的分离纯化，取麦冬总多糖，
稀释15倍，1X10‘相对分子质量膜超滤，压力为
o．3MPa，取相对分子质量小于1X 04部分，依次
上DEAESepharose柱和SephadexG25柱，水洗
脱，蒽酮一硫酸法检测，合并峰位，冷冻干燥，即得(得
率约为总多糖的35％)。
摧霎品髯；蒙04矗；茹4～)，男，福建蒲田人，博士，讲师，主要从事中西药药荆学研究
。通讯作者徐德生Teli(021)51322493E—mail：duotang@163．corn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月· 489·
2．3 POJ质量分数鉴定方法：用高效液相色谱法测
定，色谱条件；色谱柱为ShodexSugarKS一802；流
动相为水I体积流量为lmL／min}检测器为蒸发光
散射检测器(ELSD)。
2．4全水解
2．4．1测定方法：用柱后荧光衍生化方法测定。测
定条件参照文献报道方法01作适当修改。色谱柱：
Lichrosorb5NH2柱串联HypersilAPS2柱}流动
相：85％乙腈水溶液；体积流量：0．6mL／mini衍生
化试剂：50mmol／I。盐酸胍的0．2tool／LNaOH溶
液，体积流量：0．3mL／min；柱温：室温；反应温度：
80C。
2．4．2样品处理方法：POJ经0．05mol／L三氟乙
酸(TFA)110C封管水解2、3、4、5或6h，或2
tool／I，TFA110C封管水解2h，水解液减压浓缩
至干，再加甲醇3mI。，蒸干，重复3次，以除尽
TFA。加少量水溶饵水解产物，过0．45pm微孔滤
膜，取滤液20pI，用于液相分析，与果糖、葡萄糖、半
乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖对照品的色
潜图比较确定单糖的种类。
3结果与讨论
麦冬总多糖与POJ的色谱图见图1，可见POJ
为相对分子质量均一的多糖，POJ经完全水解后可
检测到果糖和葡萄糖(图2)。果糖和葡萄糖经2
mol／L三氟乙酸(TFA)110℃封管处理2h，前者
呈黄褐色，色谱蜂高较处理前减小了38．5倍，后者
仅略显淡黄色，色谱峰高仅较处理前减小了4．6倍，
说明在此处理条件下果糖、酮糖大部分脱水成糠醛
衍生物，而葡萄糖、醛糖则较稳定。POJ水解条件为
2mol／LTFA110。C封管水解2h时，所得水解产
物也呈黄褐色，说明水解产物果糖已大部分被破坏，
此时果糖与葡萄糖的色谱峰高比推算出的厢单糖摩
尔比为1．16t 1(图2一B)，已不能代表它们在POJ
中所占的比例。当水解条件为0．05mol／LTFA110
℃封管水解5h时，ShodexSugarKS一802凝胶柱分
析表明POJ已完全水解(图1一C)，所得水解产物仅
略显淡黄色，此时的色谱峰高比可近似地代表果糖
和葡萄糖在POJ中所占的比例。经计算得POJ中果
糖与葡萄糖的摩尔比为35t 1(图2-C)，可见POJ为
一果聚糖。
POJ按《中国药典》2000年版附录VH法测得
的数均相对分子质量为3400，重均相对分子质量为
4800，峰尖相对分子质量为5000。POJ的IR图(图
3)呈典型的多糖吸收特征，在渡数933cml和820
A B
1一葡萄糖2一果糖
1-glucose2fructose
圈1蠹冬总多糖(A)、POJ(B)和POJ经0．05mol／L
TFA110℃水嘏sh产物(c)的ShodexSugar
KS802柱分离一ELSD检测田谱
Fig·1Chromatogramsfc udepolysaccharldes
ofO．japonieus(A)，POJ(B)，andPOJ
hydrolyzedby0．05mol／LTFA8l110e
for5h(C)determinedbyShod xSugar
K$802ascolumn，ELSDasdelector
B
8
罱暑
。6盖
从左至右依次为：鼠李糖、术糖、阿拉伯糖、果糖，甘露糖，葡萄
糖、半乳糖
Fromleftcright：rhamnose，xyiopyranose，arablnose，
huctose·m㈣e’giucose．gaIacto*。
圈2混合对照品(A)、POJ经2moi／LTFAll0C水解
2h产物(B)和POJ经0．05mol／LTFA l0℃水
解5h产物(c)的Llchrosorb5NH：柱串联
HypersllAPS2柱分离柱后荧光衍生化检溯圈谱
Fig．2Chromatogramsfseven忡ofmonosKcha-
‘
rosereforenoeSubtnnce(A)，POJhydrolyzed
by2tool／LTFAat110℃for2h(B)，and
POJhydrolyzedby0．帖mol／LTFAat110℃
for5h(C)determinedbyusi gLlchrosorbS
NH：andHypersllAPS2躯columnswith
postcolunmF orescencederlvatlzaUon
cm_1的吸收峰为果聚糖特有的吸收信号，迸一步证
明该多糖为一果聚糖‘“。POJ的1H—NMR谱(图4)
中在异头氢区无强信号i这再次说明该多糖为果聚
糖，因为果糖是酮糖，其z位异头碳上投有质子。氢
谱中有一个较弱的异头信号，来源于POJ中的微量
葡萄糖基。该葡萄糖基可能位于POJ的还原末端，
；。。0ILU
万方数据
·1490· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lo月
渡数／cm—o
圈3 POJ的IR圈谱
Fig．31RspectrumofPOJ
因为这在果聚糖中较为常见。
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树脂法分离纯化喜树果中喜果苷的研究
欧来良‘，王瑞芳2，史作清“，仇农学2
(1．南开大学生物活性材料教育部重点实验室，分子生物研究所+天津300071
2，陕西师范大学食品系，陕西西安710004)
自从1966年Wall等首次从喜树中分离出喜树
碱并发现其具有显著抗癌活性后o]，至今已有20多
种化学成分从中分离出来，包括喜树碱
(camptotheeine，CPT)、lO一羟基喜树碱、11一羟基喜
树碱、10一甲氧基喜树碱、喜树次碱、自桦脂酸、喜果
苷(vincoside—lactamVCS—LT)等o’3]。人工合成也
取得了可喜的进展n]。研究发现喜树果中喜果苷明
显高于喜树碱及其他类似物[s]。目前由喜树果中分
离提取喜果苷采用溶剂萃取和氧化铝柱色谱法，过
程复杂，收率很低，且尚处于实验室阶段。太孔树脂
具有理化性质稳定、吸附选择性独特，吸附效率高、
易再生等优点。本实验采用树脂吸附分离法从喜树
果中分离纯化喜果苷。
1材料与仪器
乙腈(色谱纯)，喜树果由四川雅达药业公司提
供，产地为广西，经鉴定符合《广西中药材标准》1990
年版“喜树果”项下规定；喜树碱对照品(质量分数为
98％，ACROSorganics)}喜果苷对照品(自制，质量
分数>98．5％)；ME一1、ME一3树脂(天津欧瑞生物
科技有发公司)。
Waters484高效液相色谱仪(美国Waters公
司)，HL一2恒流泵(上海沪西仪器厂)，Bsz一2型
部分收集器上海沪西仪器厂)，THZ88—1台式多用
恒温震荡器(江苏太仓鹿河生化仪器厂)，真空干燥
箱(天津实验仪器厂)，DT一100A型分析天平(北京
光学仪器厂)。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：KromasilC，8柱(1fi0mm×
4．6mm，5pm)‘流动相：30％乙腈水溶液；体积流
量：0．8mL／min；紫外检测波长：256nm。
2．2标准曲线的制备
2．z．1喜果苷标准曲线的制备：精密称取喜果苷对
照品10．2mg，用50％乙醇溶液定容于50mI。量瓶
中。精密吸取0．5、1、2、4、8mL此溶液分别置于10
警銎最奢；眢茹翟蒙磊学基金赘助项目(29。，。。，。，
堂翥票荏害‘答辩嚣’讲师。Td“022、23500660E。m赫hou讲1@⋯h“edu’姐
万方数据
麦冬多糖的单糖组成研究
作者： 林晓， 徐德生， 冯怡， 沈岚
作者单位： 上海中医药大学中药学院,上海,201203
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 8次

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引证文献(8条)
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6.韩祥.薛冬令.金凤燮.鱼红闪 麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件[期刊论文]-大连工业大学学报
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7.晏传奇.邹坤 百合科植物多糖研究进展[期刊论文]-三峡大学学报（自然科学版） 2009(2)
8.王敏.赵倩 微波辅助提取双糖饮中多糖的工艺研究[期刊论文]-中国药房 2007(36)


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