全 文 ：4. 92 /88, 4. 65 /87, 4. 49 /89, 4. 41 /86, 4. 33 /85,
4. 25 /84, 4. 18 /86, 4. 06 /86, 3. 99 /88, 3. 88 /82,
3. 82 /78, 3. 67 /83, 3. 33 /54, 3. 26 /49, 3. 18 /48,
3. 13 /50, - , 2. 974 /55, 2. 901 /47, 2. 846 /46, 2. 749 /
42, 2. 696 /43, 2. 606 /45, 2. 498 /47, 2. 399 /41,
2. 354 /46, 2. 318 /38, 2. 270 /38, 2. 097 /32, 2. 079 /
34, 1. 987 /31, 1. 961 /30, 1. 930 /29,共 45个衍射峰。
　　以上衍射数据中“ - ”表示衍射图谱存在但未标
记的衍射峰值。
3　结论
3. 1　比较 5个白芍样品的 X射线衍射 Fourier图
谱 ,其几何拓扑图形规律一致 ,将 5个白芍样品的几
何拓扑图形叠加平均后获得白芍的标准 X射线衍
射 Fourier图谱 (图 1中 27所示 )。
3. 2　经计算获得白芍 X射线衍射特征标记峰均值
共 31个: 8. 56 /36, 8. 05 /39, 7. 35 /45, 7. 06 /48,
6. 39 /60, 5. 96 /83* , 5. 81 /77* , 5. 32 /93, 5. 20 /
100, 5. 12 /98, 4. 92 /87, 4. 66 /90, 4. 47 /86, 4. 33 /83,
4. 04 /85, 3. 97 /84, 3. 87 /78, 3. 66 /80* , 3. 12 /48,
3. 03 /44, 2. 976 /53* , 2. 902 /46, 2. 853 /47, 2. 705 /
43, 2. 603 /44, 2. 502 /44* , 2. 407 /40, 2. 358 /44* ,
2. 321 /37, 2. 271 /38, 2. 082 /32* 。
3. 3　 5个白芍样品中均有含量相近的一水草酸钙
结晶。 上述标准数据中的“* ”表示一水草酸钙衍
射峰。
3. 4　实验分析结果表明: 以标准 X射线衍射
Fourier图谱的几何拓扑图形与特征标记峰值可实
现对中药材白芍的鉴定。同时也显示了 X射线衍射
Fourier图谱鉴定分析方法具有广阔的应用前景。
参考文献:
[1 ]　中国药典 [ S] . 1995年版 .一部 .
[2 ]　吕　扬 ,郑启泰 . 中药材山萘的 X衍射 Fourier图谱分析
[ J ].药学学报 , 1998, 33( 8): 587-590.
[ 3 ]　吕　扬　郑启秦 . 中药材牛黄的 X衍射 Fourier图谱分析
[ J] .中国医学科学院学报 , 1997, 19( 5): 331-336.
三七及其混淆品的 HPLC指纹图谱鉴定
崔秀明 1, 2 ,董婷霞 2 ,陈中坚1 ,詹华强2

( 1. 云南省文山州三七研究所 ,云南 文山　 663000;　 2. 香港科技大学 生物系暨生物技术研究所 ,香港 九龙 )
摘　要: 目的　建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。 方法　采用 HPLC方法 ,测定三七、人参、西洋参 、姜状
三七、三七不同部位及其 2种混淆品的指纹图谱。 结果　三七与人参、西洋参、姜状三七及其 2种混淆品的指纹图
谱有明显区别 ,三七不同部位也有差异。 结论　 HPLC皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性
强、方法简便等特点 ,可作为三七药材的鉴别方法。
关键词: 三七 ;指纹图谱 ;混淆品 ;皂苷 ; HPLC
中图分类号: R282. 710. 3　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 10 0941 03
Identification on Panax pseudo-ginseng var. notoginseng
and its adulterants by HPLC fingerprint chromatogram
CU I Xiu-ming
1, 2
, DONG Ting-xia
2
, CHEN Zhong-jian
1
, K. W. K. Tsim
2
( 1. Wenshan Prefecture Institute of Sanqi Science and Techno lo g y, Wenshan 663000, China; 2. Depa rtm ent o f Biolog y
and Institute o f Biotechnolog y, Hong Kong Univ ersity of Science and Techno log y , Jiulong , Hong Kong , China)
Abstract: Object　 To establish the fingerprint chromatog ram fo r the identification of Panax pseudo-
ginseng var. notoginseng ( Burki ll) Hoo et Tseng and i ts adulterants. Methods　 Analy sis fing erprint chro-
ma tog ram of P. pseudo-ginseng var. notoginseng di fferent parts and P . ginseng C. A. Mey. , P. quinque-
fol ius L. , P. z ingiberensis C. Y. Wu et K. M. Feng , Curcuma wenyuj in Y. H. Chen et C. Ling , Blet illa
striata ( Thunb. ) Reichb. f. and two adulterants w as ca rried out by HPLC. Results　 It was found that
there w ere g rea t dif ference in fing erprint ch romatog ram among them. there w as distinguish in dif ferent
·941·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期
收稿日期: 2002-03-21基金项目:云南省重点基础研究项目资助 ( 1999C0009Z)作者简介:崔秀明 ( 1963-) ,男 ,云南省文山州三七研究所高级农艺师、所长 , 1985年毕业于云南农业大学 , 2001年 2～ 11月应邀到香港科技大学访问研究 ,现为中国药科大学生药专业在读博士研究生 ,研究方向为中药材鉴定、质量标准及 GAP研究 ,现主持科技部项目 2项 ,云南省中药现代化项目 1项 ,云南省重点基础研究项目 1项 ,发表论文 34篇 , 2002年当选云南省技术创新人才。 Tel: 0876-2141062　　 E-mail: s anqi30@ hotmail. com
parts of P. pseudo-ginseng var. notoginseng. Conclusion　 This method is simple, rapid, stable and w ith
good reproduciblity. It may be uesd to identify P. pseudo-ginseng var. notoginseng and i ts adul terants.
Key words: Panax pseudo-ginseng var. notoginseng ( Burkill ) Hoo et Tseng; fing erprint chro-
ma tog ram; adulterants saponins; HPLC
　　三七 Panax notoginseng ( Burk. ) F. H. Chen
为五加科人参属名贵中药材 ,主要用于治疗冠心病、
心绞痛等心脑血管系统疾病 [1 ]。三七中含有皂苷、黄
酮、多糖等多种有效成分 ,其中皂苷含量最高 ,其药
理活性研究也较为系统和全面 [ 2, 3 ]。目前对三七药材
的鉴别和质量控制仍然采用传统的物理和化学方
法。近几年 ,指纹图谱鉴定技术得到了快速发展 ,越
来越多的中药材开始采用指纹图谱进行鉴定和质量
控制。本文参照《中药注射液指纹图谱研究的技术要
求》和文献方法 [ 4] ,研究了三七、人参、西洋参及 2种
三七混淆品的 HPLC指纹图谱 ,为制定三七药材和
饮片质量标准提供科学依据。
1　材料和方法
1. 1　仪器: WatersTM 600E高效液相色谱仪 , Wa-
ters
TM 2487UV检测器 , WatersTM Millennium32色谱
工作站 , BRN ASON5200超声仪器。
1. 2　试剂:乙腈 HPLC级 ,甲醇分析级 ,均为 Sigma
公司购买 ,对照品人参皂苷 Rg1、 Rb1、 Rd,三七皂苷
R1 (中国药品生物制品检验所购买 )。
1. 3　药材:三七的药材样品采自云南文山 ,人参、西
洋参、温郁金和白及样品购自香港。
1. 4　测定方法:
1. 4. 1　色谱条件:分析柱 Nova-Pak C18 ( 3. 9 mm×
300 mm);流动相: CH3CN-50 mmo l /L KH2 PO4·
H2O( 20∶ 80) ,二元梯度洗脱 ;流速: 1. 0 mL /min;
UV检测器 ,检测波长 203 nm,进样量 10μL。
1. 4. 2　对照品溶液的制备: 分别取人参皂苷 Rg1、
Rb1、 Rd,三七皂苷 R1标准品 1 mg , 甲醇配成 1
mg /m L对照品溶液。
1. 4. 3　供试样品溶液的制备:取待测样品 5 g ,加入
50 mL 70%甲醇溶液 ,超声提取 2 h , 4 000 r /min
离心 ,取上清液 ,过 0. 2μm滤膜 ,滤液为供试样品
溶液。
1. 4. 4　稳定性试验:取同一份样品溶液 ,分别在 0,
1, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 h进行测定 ,考察色谱峰面
积和保留时间的一致性。
1. 4. 5　精密度试验:取同一份供试样品溶液 ,连续
进样 5次 ,考察色谱峰面积和保留时间的一致性。
1. 4. 6　重现性试验:取 5份样品 ,按测定方法测定 ,
考察色谱峰面积和保留时间的一致性。
2　结果与分析
2. 1　方法学验证
2. 1. 1　药材的提取方法比较:比较了文献 [1 ]常用的
甲醇提取 ,大孔树脂纯化与甲醇超声提取后离心两
种药材提取方法 ,虽然前者所得的指纹图谱杂质干
扰较少 ,但费时 ,且人为操作影响较大 ,重现性较差。
后者有一定的杂质干扰。 但重复性较好 ,且快速 ,所
得的指纹图谱有代表性 ,故我们采用甲醇超声提取
法作为药材样品的提取方法。
2. 1. 2　稳定性试验结果: 取同一份样品溶液 ,分别
在 0, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 h进行测定 ,色谱峰面
积和保留时间的 RSD分别为 1. 5%和 0. 43% ,表明
试验方法稳定。
2. 1. 3　精密度试验结果: 取同一份供试样品溶液 ,
连续进样 5次 ,色谱峰面积和保留时间的 RSD分别
为 1. 76%和 0. 52% ,说明仪器的精密度良好。
2. 1. 4　重现性试验结果: 取 5份样品 ,按测定方法
测定 ,色谱峰面积和保留时间的 RSD 分别为
1. 64%和 0. 38% ,重现性好。
2. 2　三七及混淆品的指纹图谱分析
2. 2. 1　三七的 HPLC指纹特征峰: 试验条件下 ,三
七块根和根茎样品在 10～ 19 min均出现 5个明显
的共有特征峰 ,经与标准品对照 ,我们确定其中的 4
个共有特征峰 ,按出峰顺序分别为三七皂苷 R1、人
参皂苷 Rg1、 Rb1 和 Rd;按峰面积大小排列为:
Rg1> Rb1> Rd> R1 ,与文献报道的结果一致 [5, 6 ]。
2. 2. 2　三七不同部位指纹图谱: 三七的部位不同 ,
所含的皂苷成分也不一样 ,如地下部分人参三醇型
皂苷比人参二醇型皂苷高 ,地上部分仅含有人参二
醇型皂苷。 试验条件下的 HPLC指纹图谱 ,可以明
显看出地下部分与地上部分的差异。地上部分的三
七花和三七茎叶共有 10个特征峰 ,且峰面积较小 ;
地下部分的根茎、主根、大根的特征峰很一致 ,但峰
面积有差异 ,表现为根茎的峰面积> 主根> 大根 ,毛
根的峰面积较小 ,特别是 Rb1的峰面积很小 ,如图 1
所示 ,可以通过 4个皂苷的峰高和峰面积的比例很
容易地将三七各部位区别开来。
2. 2. 3　三七、人参、西洋参及三七常见混淆品的指
·942· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期
纹图谱比较: 人参属植物最大的共同点是都含有人
参皂苷 ,且植物学形态十分相似 ,但药用功效却各有
不同 ,如何鉴别是合理使用的前提。本试验条件下三
七、人参、西洋参和姜状三七的 HPLC指纹图谱明
显不同 ,峰的数量、峰面积和峰高都有显著差异 (图
2) ,三七含有三七皂苷 R1 ,人参、西洋参和姜状三七
则没有 ;人参皂苷 Rg1、 Rb1虽然三者都含有 ,但峰
高明显不一样 ,三七是 Rg1比 Rb1高 ,人参二者相
当 ,西洋参 Rb1略比 Rg1高 ;姜状三七与三七、人参
和西洋参的图谱差别更大。 试验表明 ,通过 HPLC
指纹图谱 ,可以很容易地将它们相互区别开来。 同
样 ,三七与其 2个常见混淆品温郁金和白及的指纹
图谱差别十分明显。温郁金和白及不含皂苷 ,在相应
的位置就没有皂苷峰出现。
图 1　三七不同部位的皂苷指纹图谱
图 2　三七、人参、西洋参及三七混淆品的指纹图谱
3　讨论
3. 1　采用指纹图谱鉴别中药材 (中药饮片或中成
药 )的真伪具有明显优势。本试验条件下三七有 4个
明显的特征峰 ,我们把它作为三七“共同特征”的三
七皂苷 HPLC指纹图谱 ,可以清楚地表达三七指纹
图谱鉴别的专属性 ,与人参属的其他种和三七的 2
个混淆品的指纹图谱比较 ,可以十分明显地看出他
们之间的差异 ,很容易地将三七与其他混淆品区别
开。本试验条件下的三七指纹图谱作为三七药材和
饮片的鉴别无疑是一种可靠的方法。
3. 2　三七的各部位均可作为药用 ,但药理作用却各
不相同 ,如花和茎叶对中枢神经有抑制作用 ,根和根
茎则表现为兴奋作用 [ 2] ;在用途上也各异 ,主根入
药 ,根茎为副产物 ,主要为工业提取皂苷的原料 ,毛
根作食品 ,如三七汽锅鸡配料等。生产中混用的现象
时有发生。在原料粉碎后 ,采用常规的物理和化学
方法很难鉴别。 采用 HPLC指纹图谱 ,可以较好地
将它们区别开来。
3. 3　本文建立的三七皂苷 HPLC指纹图谱方法 ,
快速 ,简便 ,重现性和稳定性均很好 ,特征性强 ,可作
为三七药材和饮片鉴别的依据。
参考文献:
[ 1 ]　任德权 . 中药指纹图谱质控技术的意义与作用 [ J ] . 中药新
药与临床药理 , 2001, 12( 3): 135-140.
[2 ]　魏均娴 ,杜元冲 . 三七现代科学研究与应用 [M ] . 昆明:云南
科技出版社 , 1996.
[3 ]　郑光植 ,杨崇仁 . 三七生物学及其应用 [ M ] .北京: 科学出版
社 , 1994.
[ 4 ]　屠鹏飞 . 中药指纹图谱制度的方法学探讨 [ A] . 国际色谱指
纹图谱评价中药质量研讨会组委会 . 国际色谱指纹图谱评
价中药质量研讨会论文集 [ C] . 广州: 2001.
[5 ]　王　颖 ,陈新发 ,盛龙生 . 三七注射液指纹图谱的 LC /M S测
定 [ J] . 中药新药与临床药理 , 2001, 12( 3): 160-161.
[6 ]　盛龙生 ,王　颖 ,彭建和 ,等 . LC /M S在中药指纹图谱测定中
的应用 [ A] .国际色谱指纹图谱评价中药质量研讨会组委会 .
国际色谱指纹图谱评价中药质量研讨会论文集 [ C ] . 广州:
2001.
通　　知
为了便于国际交流 ,本刊决定从 2003年第 1期起 ,文内的图题、表题、图注、表注及文后的参考文
献一律用中、英文两种文字表示。 请投稿时按以上要求撰写。
《中草药》杂志编辑部
2002年 10月
·943·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2002年第 33卷第 10期