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Effect of Se-PSK on NO content in macrophages

硒云芝多糖对巨噬细胞一氧化氮的影响



全 文 :给药及剂量同 2. 2, 1次 /日 ,共 7 d,于末次给药后
24 h摘眼球放血处死 ,称体重 ,摘出胸腺及脾脏称
重 ,以胸腺或脾脏重量 ( mg )与体重 ( g )之比作为胸
腺或脾指数 ,结果见表 5。
表 5 养阴延生片对小鼠免疫器官重量的影响 (n= 10)
组别 剂量 体重 ( g ) 胸腺指数 (m g /g) 脾指数 ( mg /g)
对照 - 12. 8± 0. 9     3. 9± 0. 6     4. 6± 0. 7
养阴延生片 0. 27 g /kg 13. 1± 1. 1 5. 2± 0. 7* * △ 6. 1± 0. 8* * △
0. 135 g /kg 12. 6± 1. 3 5. 1± 0. 8* * △ 6. 1± 0. 7* * △
人参固本丸 0. 25 g /d 12. 5± 1. 5 4. 7± 0. 6* * 5. 8± 0. 5* *
    与对照组比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01; 与人参固本丸比: △ P < 0. 05
  结果可见 ,养阴延生片、人参固本丸均能增加幼
鼠胸腺、脾脏重量。
3 讨论
  养阴延生片以西洋参为君 ,辅以补气药等配伍
而成。西洋参微苦、性寒 ,滋肺阴 ,生津液 ,除烦倦 ,具
有补气滋阴双重功效。 伍以黄芪甘温入肺胃以补气
壮阳 ,生地滋阴清热 ,佐以生龟板 ,加强滋阴之功效 ,
同时制黄芪之壮阳 ,用甘草清热除烦调和诸药 ,不寒
不燥 ,从而达到益气养阴之功效。针对气虚模型小鼠
外周血中 T淋巴细胞及白细胞明显低于健康小鼠 ,
其增强免疫作用 ,首先表现为对模型小鼠的外周 T
淋巴细胞百分数的白细胞数有非常显著的促进作
用。并且能使网状内皮系统吞噬功能 K值及α值均
明显增高 ,提高淋巴细胞转化率 ,增加幼鼠胸腺、脾
脏重量。 因此 ,养阴延生片是提高机体抵抗力 ,增强
体质的良方。
参考文献:
[ 1 ] 周梦圣 ,李秋莲 .模拟中医气虚动物模型的研究 [ J ] . 中医杂
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[2 ] 邓文龙 ,刘家玉 ,叶尚钧 ,等 . 人参对网状内皮系统吞噬功能影
响的研究 [ J] .中医杂志 , 1983, 24( 7): 66-70.
硒云芝多糖对巨噬细胞一氧化氮的影响
张宏莲 1 ,蒋一方 2 ,傅中滇 1* ,陈婉蓉 1⒇
( 1. 华东师范大学 生物系 ,上海  200062;  2. 上海市儿童医院 营养研究室 ,上海  200000)
摘 要:目的 研究了硒云芝多糖 ( Se-PSK)对巨噬细胞一氧化氮 ( NO )含量的影响。 方法 用 Grisse法测定 Se-
PSK在不同剂量、不同作用时间中 NO的产量 ,并与云芝多糖 ( PSK)作同步比较。 结果  Se-PSK在 400μg /m L作
用 48 h达到 NO释放的峰值 ,与 PSK比较效果更为明显。结论  Se-PSK能显著促进巨噬细胞释放 NO,并有明显
的剂量依赖关系。
关键词: 硒云芝多糖 ;云芝多糖 ;一氧化氮 ;巨噬细胞
中图分类号: R285. 5   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0820 03
Effect of Se-PSK on NO content in macrophages
ZHAN G Hong-lian1 , JIAN G Yi-fang2 , FU Zhong-dian1 , CHEN Wan-rong1
   ( 1. Depar tment o f Biolog y, Ea st China No rmal Univ e rsity , Shanghai 200062, China; 2. Depar tment of Nutritio n,
Shanghai Children s Hospital, Shanghai 20000, China)
Key words: selenium po lysaccharide krestin ( Se-PSK) ; poly saccharide krestin; ni t ric oxide ( NO) ;
macrophages
  云芝多糖 ( PSK)是从担子菌纲杂色菌 Polystic-
tus v ersicolor中提取的一种蛋白多糖 ,它与抗肿瘤、
抗病毒、抗溃疡及降血脂作用有关 [1 ]。刘尚喜等研究
表明 PSK对氧化修饰低密度脂蛋白 ( o xLDL)抑制
巨噬细胞中一氧化氮的产生具有保护作用 ,而且
PSK可以保护巨噬细胞免受氧化修饰 LDL引起的
·820· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-02-26基金项目:国家自然科学基金课题 ( 39670637)作者简介:张宏莲 ( 1976-) ,女 , 1998年于河南师范学院本科毕业 , 2001年于上海华东师范大学硕士研究生毕业。 研究方向:药用植物的药理学与毒理学。
* 指导者
一氧化氮合酶 m RNA含量下降 [2 ]。硒是人体所必需
的微量元素之一 ,适量的硒有助于防治肿瘤、心血管
疾病和克山病等 [3 ]。硒云芝多糖 ( Se-PSK)的硒是一
种结合在蛋白多糖上的有机硒 ,这种通过生物发酵
工程合成的硒多糖毒性很小 ,但是否会比硒或 PSK
的效果更好 ,尚未见更多报道。我们以大鼠腹腔巨噬
细胞释放的 NO为指标 ,研究了 Se-PSK的作用。
1 材料与方法
1. 1 材料 PSK和 Se-PSK均由本实验室提供 ,其
多糖和蛋白的含量分别为 81% , 10%和 78% , 12%。
Se-PSK中硒含量为 0. 9μg /g。 SD大鼠 ,雌性 ,上海
医科大学动物实验中心提供。 F12培养基购自 Gib-
cob公司 ,全自动酶标仪为美国宝特产品。
1. 2 大鼠腹腔巨噬细胞的制备: 用无血清的 F12
培养基 5 mL灌洗大鼠腹腔 ,取灌洗液 ,离心并收集
细胞 ,用含 10%小牛血清的 F12培养液调整细胞浓
度至 1× 106 cfu /mL,以每孔 100μL接种于 96孔
板 ,置 5% CO2、 37℃培养箱中培养 , 2 h后洗去未帖
壁的细胞 ,加入 10%小牛血清的 F12培养液 100μL
和受试物 10μL,各组浓度为 25, 50, 100, 200, 400,
800μg /mL,每个剂量组 5个平行样品 ,分别培养
12, 24, 48 h。
1. 3  NO的测定:按 Girsse方法测定 NO[ 4]。
1. 4 统计学处理:实验结果用 ( x± s)表示 ,组间比
较用配对 t检验。
2 结果
  由表 1, 2可知 , Se-PSK能显著促进巨噬细胞释
放 NO,在所用的最低浓度组 ( 25μg /mL)即有作用
( P < 0. 05)。 随着剂量的增加 ,这种作用也逐渐加
强。 至 400μg /mL时达到最大效果 ,并在各个作用
时间段均显示剂量 -效应相关 (r= 0. 82, P < 0. 05)。
云芝多糖也有类似的作用 ,但在短时间组 ( 12
h) ,这种剂量-效应关系不明显 (r= 0. 68, P> 0. 05)。
延长时间后 ,也显示了这种剂量 -效应依赖关系。
表 1  Se-PSK对巨噬细胞中一氧化氮含量的影响 (mmol /L)
时间
( h )
组别 多糖的浓度 (μg /m L)
25 50 100 200 400 800 对照
12 PSK   2. 32± 0. 02   2. 70± 0. 04   2. 78± 0. 04   2. 93± 0. 06   3. 04± 0. 10   2. 32± 0. 04   2. 17± 0. 04
Se-PSK 2. 46± 0. 04* * 2. 78± 0. 04* 2. 87± 0. 02* 3. 22± 0. 04* * 3. 33± 0. 04* * 2. 38± 0. 02 2. 17± 0. 04
24 PSK 2. 75± 0. 04 2. 87± 0. 02 2. 94± 0. 06 3. 06± 0. 02 3. 33± 0. 06 2. 72± 0. 02 2. 39± 0. 02
Se-PSK 2. 84± 0. 02* 2. 96± 0. 06 3. 07± 0. 04* 3. 22± 0. 04* * 3. 51± 0. 02* * 2. 75± 0. 04 2. 39± 0. 02
48 PSK 2. 87± 0. 04 3. 01± 0. 02 3. 07± 0. 06 3. 36± 0. 02 3. 48± 0. 06 2. 81± 0. 02 2. 75± 0. 02
Se-PSK 3. 10± 0. 02* 3. 22± 0. 06 3. 42± 0. 04* * 3. 54± 0. 02* * 3. 65± 0. 02* * 2. 84± 0. 04 2. 75± 0. 02
    与 PSK比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
表 2  400μg /mL PSK和 Se-PSK不同作用时间对 NO
含量的影响
作用时间
( h)
NO浓度 (μg /mL)
PSK Se-PSK 对照
12 3. 17± 0. 02 3. 35± 0. 02* * 2. 19± 0. 03
24 3. 33± 0. 05 3. 48± 0. 06* * 2. 17± 0. 03
48 3. 58± 0. 03 3. 68± 0. 04* 2. 20± 0. 02
  与 PSK比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
  虽然两种多糖均有促使巨噬细胞增加 NO释放
量的作用 ,但其浓度有明显差别。结果显示 ,不同作
用时间 Se-PSK作用均强于 PSK,上述作用在剂量
达到 800μg /mL时则明显下降。
3 讨论
  一氧化氮合酶 ( NOS)可以催化 L-精氨酸产生
NO。作为 NO合成的关键酶 , NOS可分为两种 ,一
种为原生型 cNOS,受 Ca2+ 或钙调蛋白调控和激活 ,
主要分布在内皮细胞、血小板、脑细胞等处 ;另一种
为诱导型 iNOS,在细胞因子作用下 ,巨噬细胞被激
活 ,合成 iNO S,主要分布在巨噬细胞、中性粒细胞、
肝细胞等 [5 ]处。巨噬细胞是机体免疫系统中的重要
组成之一 ,对调节机体的免疫状态起着主要作用 ,并
与肿瘤、动脉硬化等疾病有关 [6 ]。 已有研究显示 ,动
脉粥样硬化斑块中 iNO S表达水平下降 , iNO S活性
降低 ,表明动脉粥样硬化发生与 iNOS活性下降有
关 [7 ]。动物实验也进一步证明 ,即通过诱导 iNOS活
性 ,增加 NO释放量 ,从而预防动脉粥样硬化发生 ,
维持血管舒张平衡。 ip PSK能预防家兔实验性动脉
粥样硬化可能与其诱导 iNO S活性增强而增加 NO
释放量有关 [ 7]。这种作用在 Se-PSK更为显著。我们
的研究表明 Se-PSK和 PSK都可以促进大鼠腹腔
巨噬细胞产生和释放 NO,并与作用剂量和时间相
关 ,其中 400μg /mL Se-PSK对 NO产生释放作用
最强。因此 ,在预防动脉粥样硬化时 Se-PSK可能是
更好的选择。这种作用是否与硒保护巨噬细胞免受
氧化 LDL的损害等有关 ,尚在深入研究中。
参考文献:
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·821·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 9期
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脉粥样硬化斑块中的表达 [ J ] . 中国动脉硬化杂志 , 1994, 2
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当归注射液对更年期大鼠超氧化物歧化酶和脂质过氧化物的影响
袁新初 1 ,张端莲 2⒇
( 1. 武汉科技大学医学院 组织学与胚胎学教研室 ,湖北 武汉  430080;  2. 武汉大学医学院 组织学与胚胎学教
研室 ,湖北 武汉  430071)
摘 要: 目的 探讨当归注射液对更年期大鼠心血管系统的保护作用。 方法 应用当归注射液对更年期大鼠进行
iv ,连续给药 20 d,观察当归注射液对超氧化物歧化酶 ( SOD)活性及脂质过氧化物 ( LPO)水平。 结果 更年期大鼠
经 iv当归注射液后 ,血 SOD活性明显增高 (P < 0. 01) , LPO水平下降。 结论 当归注射液可使更年期大鼠血 SOD
活性明显增加 ,能清除氧自由基 ,抗脂质过氧化物反应 ,对更年期大鼠心血管系统有重要的保护作用。
关键词: 当归注射液 ;超氧化物歧化酶 ;脂质过氧化物 ;更年期大鼠
中图分类号: R286. 75   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0822 02
Affect of ANGELICA INJECTION on superoxide dismutase and
lipid peroxide in blood of climacteric rats
YU AN Xin-chu, ZHANG Duan-lian
   ( Depa rtment of Histo lo gy and Em bryo lo gy , Medical Co llege , Wuhan Univ ersity of Science and Tech no lo gy , Wuhan
Hubei 430080, China; 2. Depar tment of Histo lo g y and Embryo lo g y, Medica l College, Wuhan Univ ersity , Wuhan Hubei
430071, China)
Key words: ANGELICA IN JECTION; supero xide dismutase; lipid pero xide; climacteric ra t
  当归有补血活血、调经止痛、养血滋补及活血化
瘀等功能。当归的主要成分为多种有机酸、脂类、糖、
多种氨基酸、微量元素以及其它有机成分等共 80余
种化学物质 [1, 2 ] ,其中以藁苯内酯、阿魏酸的含量较
多。由于当归属于活血化瘀、补血调经药 ,所以在当
归的药理研究中特别注重研究对心血管系统和女性
生殖系统的作用 ,女性更年期由于性激素减少及植
物神经功能紊乱而产生心血管及生殖器官等疾病症
状。本研究根据当归的药理作用 ,对更年期大鼠给予
当归注射液治疗 ,观察实验前后当归注射液对更年
期大鼠血 SOD活性的变化与氧自由基及其介导的
脂质过氧化反应与心血管疾病的发生及发展的作用
机制 ,为防治更年期综合征所致的心血管疾病提供
实验依据。
1 材料及方法
1. 1 动物分组及处理: 选用鼠龄为 11~ 15个月的
自然更年期雌性 SD大鼠 ,体重 250~ 300 g ,经阴道
细胞染片 ,证实属于更年期者共 20只 ,作为本研究
的实验模型。随机分为 2组 ,即更年期实验组、更年
期对照组 ,每组 10只。另选鼠龄为 4~ 6个月 ,体重
150~ 200 g的 SD雌性大鼠 10只 ,为青年组。各组
动物处理如下:
1. 1. 1 更年期实验组: 每只大鼠每日 iv当归注射
液 10 mL,每天 1次 ,连续给药 20 d。
1. 1. 2 更年期对照组:每只大鼠每日 iv生理盐水 ,
用法同 1. 1. 1。
1. 1. 3 青年对照组:方法同更年期对照组。
1. 2 试药:当归注射液浓度为 25% ,由湖北医科大
学附二院制药厂提供 ,批号: 95110742。
1. 3 标本制作及观察
·822· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2000-10-05作者简介:袁新初 ( 1953-) ,湖南人 ,副教授 ,毕业于湖南医学院临床医学系 ,现在武汉科技大学医学院任教 ,从事中草药对人体重要脏器保护作用的研究。 Tel: ( 027) 86864153