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伊犁黄芪与蒙古黄芪成分的比较及多糖含量的测定
赵　文 1 ,任永凤 2 ,樊建航 2
( 1. 暨南大学 医药生物技术研究开发中心 ,广东 广州　 510632;　 2. 新疆药物研究所 ,新疆 乌鲁木齐　
830002)
摘　要: 目的　对新疆地产药材伊犁黄芪与蒙古黄芪的化学成分进行比较。方法　用薄层色谱法比较化学成分 ,用
分光光度法测定伊犁黄芪中粗多糖含量 ,测定波长 488 nm。 结果　伊犁黄芪多糖含量为 0. 35% ,蒙古黄芪多糖含
量为 6. 33% ,结论　薄层表明伊犁黄芪与蒙古黄芪有区别 ,多糖含量低于蒙古黄芪。
关键词: 伊犁黄芪 ;蒙古黄芪 ;多糖 ;分光光度法
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0122 03
Comparison of constituents and determination of polysaccharides between
Astragalus lepsensis and Astragalus mongolicus
ZHAO Wen, REN Yong-feng , FAN Jian-hang
　　 ( Xinjiang Institute o f Mate ria Medica , Wulumuqi Xinjiang 830002, China)
Key words: Astragalus lepsensis Bge. ; Astragalus mongolicus Bge. ; poly saccharides; spect ropho-
tometry
　　伊犁黄芪 Astragalus lepsensis Bge. 为豆科紫
云英属植物 ,维吾尔名为 ili k ti rasi ,主要分布于新
疆维吾尔自治区境内的伊犁、天山等地 ,是新疆地方
常用药材 ,具有补气固表、托疮生肌和强心利尿等作
用 ,可用于治疗体虚自汗、久泻等病症 [1 ]。为考察伊
犁黄芪的药用价值 ,我们对伊犁黄芪与蒙古黄芪的
成分进行了初步的比较 ,并对伊犁黄芪中具有免疫
活性的多糖进行了含量测定 ,为综合利用伊犁黄芪
提供理论依据。
1　实验材料与试剂
伊犁黄芪:采于新疆伊犁新源县 ,经新疆药物研
究所张彦福研究员鉴定系 Astragalus lepsensis
Bge;蒙古黄芪: 由大同药检所中药室提供 ;黄芪甲
苷标准品: 购于中国药品生物制品检定所 , 0781-
9409;苯酚 , 95%乙醇 ,葡萄糖 ,浓 H2 SO4 ,铝片 ,碳酸
氢钠 , D101大孔吸附树脂 ;仪器: UV-200紫外分光光
度计 ,日本岛津产 ; UV-1型三用紫外分析仪 ; UV-
2501 ( PC)。
2　伊犁黄芪与正品黄芪定性比较
2. 1　黄芪甲苷检识:取粉碎后的伊犁黄芪根 10 g,
加氯仿 50 mL回流 3 h,倾出氯仿液 ,残渣加甲醇
50 mL回流 4 h,倾出甲醇液蒸干 ,得 A样 ;蒙古黄
芪根同样处理得 C样 ; A样残渣加 90% 乙醇液 ,回
流 4 h ,过滤 ,滤液蒸干 ,得 B样。
A样加 5 mL水溶液 ,用水饱和正丁醇提取
( 3× 10 mL) ,合并正丁醇液 ,用 5% NaHCO3水洗 3
次 ,弃去水层 ,再用正丁醇饱和水洗 ,分取正丁醇层 ,
蒸干 ,加 1 mL水溶解残渣 ,加至 D101型大孔吸附树
脂柱内 (内径 1 cm,柱高 12 cm )用水 50 mL洗脱 ,
弃去 , 30% 乙醇 50 mL洗脱 ,弃去 ,继用 70% 乙醇
洗脱 ,收集洗脱液 ,水浴蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL溶
解 ,得样品 AI。 B样同样处理得 BI。 C样 (蒙古黄
芪 )同样处理得 CI。
黄芪甲苷对照品:取黄芪甲苷对照品加甲醇制
·122· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-04-28基金项目:国家自然科学基金资助项目 (批准号 39660082)
成每毫升含 0. 5 mg溶液。
薄层层析:吸取上述 4种溶液各 10μL,分别点
于同一硅胶 G板上 ,以氯仿 -甲醇-水 ( 65∶ 35∶ 10)
下层液为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷 10% 硫酸乙
醇液 , 105℃烘约 5 min,结果见图 1-A。
2. 2　其它不明成分的比较: 取粉碎的伊犁黄芪根
10 g ,用甲醇回流提取 4 h,倾出甲醇液 ,蒸干 ,用 1
m L甲醇溶解 ,作为点样液 AII。
取蒙古黄芪 10 g ,同法处理 ,得点样液 CII。
薄层层析:吸取上述 2种溶液各 10μL,分别点
于同一硅胶 G板上 ,以氯仿-甲醇 ( 85∶ 15) (图 1-
B)和乙酸乙酯 -甲醇 ( 9∶ 1) (图 1-C)为展开剂 ,展
开 ,取出 ,晾干 ,喷 10% 硫酸乙醇液 , 105℃ 烘约 5
min,结果见图 1-B, C。
A-1-AI样 ; 2-B I样 ; 3-黄芪甲苷 ; 4-CI样
B, C-伊犁黄芪 ( 1)与蒙古黄氏 (2)比较
图 1　样品薄层图
3　多糖含量的测定 [ 2, 3]
3. 1　多糖的提取: 取粉碎后的伊犁黄芪粗粉 10 g ,
加水于 100℃水浴提取 3次 ( 3× 100 mL) ,合并滤
液 ,浓缩至 1∶ 2 (药材∶药液 ) ,加 95% 乙醇使含
醇量为 80% ,冰箱内静置 24 h,用已恒重的垂熔玻
砂漏斗过滤 ,滤渣于 55℃ 烘干至恒重 ,得粗多糖
0. 341 2 g;同样处理对照药材 ,得粗多糖 0. 887 5 g。
3. 2　试剂的配制:取苯酚 100 g,加铝片 0. 1 g和
NaHO C3 0. 05 g ,蒸馏 ,收集 182℃馏分。称取此馏
分 5 g ,加 95 mL蒸馏水 ,置棕色瓶中 ,得浓度为
5% 的苯酚试液。
3. 3　测定波长的选择:精密称取一定量样品置小烧
杯中 ,加水溶解 ,定量转移至 100 mL容量瓶中 ,加
水至刻度 ,混匀。 取该溶液 2. 0 mL于具塞试管中 ,
加 5% 的苯酚试液 1 mL,混匀 ,迅速加 5 mL浓
H2 SO4 ,振摇 2 min,置沸水浴加热 15 min,取出至
冰水中冷却 ,以酚-硫酸溶液为空白 ,于 UV2501
( PC)上 ,从 400～ 800 nm进行扫描 ,见图 2,确定测
定波长 488 nm。
3. 4　稳定性实验: 取样品溶液按 3. 3项下分析方法操
作 ,于 UV 2501 ( PC)上进行稳定性测定 ,见图 3,结果
表明 ,样品冷却后 1 h内显色稳定 ,可用于比色测定。
1-葡萄糖对照 ; 2-葡萄糖+ 伊犁黄芪多糖 ;
3-伊犁黄芪粗多糖
图 2　伊犁黄芪粗多糖扫描曲线
图 3　伊犁黄芪多糖测定稳定性曲线
3. 5　标准曲线的绘制:精密称取于 105℃ 干燥至
恒重的葡萄糖 25 mg于小烧杯中 ,加水溶解并定量
移至 100 mL的容量瓶中 ,稀释至刻度 ,混匀 ,得
0. 1 mg /mL的标准品溶液。 分别精密吸取该溶液
1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0, 6. 0 mL置于 50 mL量瓶
中 ,加蒸馏水至刻度 ,得到每 2 mL分别含 10, 20,
30, 40, 50, 60μg的标准品溶液 ,分别吸取以上各浓
度的标准溶液 2 m L于具塞试管中 ,加 5% 的苯酚
试液 1 mL,摇匀 ,迅速加浓 H2 SO4 5 mL,振摇 2
min后 ,旋转于沸水浴中加热 15 min,取出置冷水
中冷却。以酚 -硫酸溶液为空白 ,于 488 nm处测吸
·123·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
光度 ,经回归得线性方程 A= 6. 344× 10- 3C -
1. 302× 10- 3 , r为 0. 998 9。
3. 6　多糖的含量测定: 精密称取约 0. 1～ 0. 15 g粗
多糖样品于小烧杯中 ,加水适量使溶解 ,定量转移至
100 mL容量瓶中 ,加水稀释至刻度 ,混匀 ,得样品溶
液 ,分别吸取该溶液 10. 0, 7. 5, 9. 0 mL置于 100 mL
容量瓶中 ,加水至刻度 ,得 3组供试品浓液。分别吸取
该供试品溶液各 2 m L于具塞试管中 (每组 3份 ) ,按
标准曲线项下方法操作 ,以酚-硫酸溶液为空白 ,在
488 nm处进行比色测定 ,按回归方程求出供试品溶
液中多糖含量。 同样测定对照药材 ,结果见表 1。
表 1　多糖含量测定结果
组　数 吸光度 检出量
(μg /m L)
含　量
(% )
t检验
伊犁黄芪 1 　 0. 155 　 12. 3 　 0. 35
2 0. 115 9. 15 0. 34
3 0. 140 11. 14 0. 35 P < 0. 001
蒙古黄芪 4 0. 19 15. 17 6. 6
5 0. 225 17. 83 6. 3
6 0. 27 21. 38 6. 3
3. 7　回收率实验: 取样品液 10. 0 mL 6份置 100
mL容量瓶中 ,分别加入 0, 5. 0 mL 0. 1 mg /mL的
标准品溶液 ,加水稀释至刻度 ,每份取 2 mL,按样品
测定项下操作 ,以酚 -硫酸溶液为空白 ,在 488 nm
处进行比色测定 ,计算回收率 ,结果回收率为
94. 7% ,RSD= 0. 32% (n= 6)。
4　讨论
4. 1　我们通过反复实验 ,发现伊犁黄芪中含黄芪甲
苷极少 ,在薄层板上只能见到模糊斑点。
4. 2　从图 1-B, C中可以看出伊犁黄芪与蒙古黄芪
的区别 ,这可用于对伊犁黄芪的鉴别。
4. 3　从多糖含量测定结果可看出伊犁黄芪多糖含
量明显低于蒙古黄芪。
参考文献:
[1 ]　中国科学院新疆生物土壤沙漠研究所 . 新疆药物植物志 [ M ]
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法 [ J] . 中医药研究 , 1993, 5: 56.
马齿苋中多糖的提取与含量测定
周　晶 ,刘景文 ,符敬伟 ,郝兰芳
(天津医科大学药学院 ,天津　 300203)
摘　要:目的　考察马齿苋中的多糖含量。 方法 :采用蒽酮 -硫酸比色法测试。 结果 : 3批马齿苋多糖含量分别是
8. 63% 、 10. 22% 和 11. 06%。 结论: 马齿苋中多糖的含量与其生长期有关。
关键词: 马齿苋 ;多糖 ;蒽酮 -硫酸比色法 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0124 02
Isolation and Assaying of polysaccharides in Portulaca oleracea
ZHOU Jing , LIU Jing-w en, FU Jing-w ei, HAO Lan-fang
　　 ( Co lleg e o f Pha rmacy , Tianjin Univ ersity of Medical Sciences, Tianjin 300203, China)
Key words: Portulaca oleracea L. ; po lysaccharides; anthrone-H2 SO4 co lorimetry; assa ying
　　马齿苋 Portulaca oleracea L. 为马齿苋科马齿
苋属植物 ,具有清热解毒 ,凉血止血的功效。现代药
理研究表明有降血脂、抗衰老、提高机体免疫功能的
作用。其化学成分含有 L -去甲肾上腺素、多巴胺 ,还
富含有机酸、氨基酸、蒽醌、香豆素等成分 [1 ]。马齿苋
多糖的研究尚未见报道 ,我们采用蒽酮-硫酸比色
法 [2 ] ,对不同生长期的马齿苋多糖进行了含量测定。
1　仪器与试药
UV-240型分光光度计 (日本岛津 )。 马齿苋药
材 1, 2, 3分别在 7, 8, 9月份采集于天津郊区。葡萄
·124· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-06-26作者简介:周　晶　 ( 1956. 06-) ,女 ,辽宁省人 , 1982年毕业沈阳药学院 ,现任天津医科大学药学院教授。研究方向 ;天然药物化学与中药制剂。 主要工作:主持三类新药“新脑安口服液”的研究 ;“降低卷烟焦油量的中药制剂研究”等工作 ,发表论文 20余篇。
* 天津医科大学药学院 2000届毕业生