全 文 ：·1162· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
供了新的方法。
3．4溶剂提取后的原料只能丢弃，超临界CO。提
取后，原料的性状、结构、形态几乎没有任何改变，可
以继续提取超临界不适合的组分，为中药资源的合
理开发利用提供了新方法。
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纳米黄芪粉的显微结构和有效成分溶出的研究
马培艳1’2，傅正义1，苏艳丽1
(1．武汉理工大学材料复合新技术国家重点实验室，湖北武汉430070；2．武汉理工大学理学院，湖北武汉430070)
摘 要：目的 对黄芪药材进行纳米级粉碎的研究。方法 采用HSCS超细粉碎机进行纳米粉碎，ZetaPALS光散
射粒度分布及电位分析仪进行粒度分析和Zeta电位测定，并采用显微观察法对药物组织结构进行显微特征的观
察。结果纳米黄芪悬浮液中固体颗粒平均粒径为81．7nm，大部分细胞壁被破碎，黄芪皂苷和多糖直接进入水中。
结论 黄芪纳米化后可促进有效成分的溶出。
关键词：蒙古黄芪；纳米粉碎；显微特征；皂苷
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)08—1162—03
Microscopicharacteristicsandeffectivecomponent
7
Sdissolutionofna oparticles
ofAstragalusmembranaceusvar．mongholicus
MAPei—yanl“。FUZheng—yil。SUYan—lil
(1．StateK yLaborataryofAdvancedTechnologyforMaterialSynthesisandProcessing，WuhanUniversityofTechnology，
Wuhan430070，China；2．SchoolofScience，WuhanUniversityofTechnology，Wuhan430070，China)
Keywords：Astragalusmembranaceus(Fisch．)Bungevar．mongholicus(Bunge)Hsiao；nano-
pulverization；microscopiccharacteristics；saponin
纳米技术在生物、医学领域的飞速发展对传统
中医药产生了深刻的影响。纳米雄黄、纳米石决明等
药物已被制备出来[1~4]，但是草药由于多纤维而使
其纳米化成为难题。日本奈良机械所研制的HSCS
超细粉碎机采用先进的超细粉碎方式，通过高速自
转的粉碎环获得传统粉碎机粉碎介质所得不到的强
大离心力和剪切力，在短时间内将植物粒子粉碎成
亚微米的超细粉末。该仪器的密闭磨腔外套有水冷
却装置，使整个粉碎过程在接近室温、无污染环境下
操作，保证了药物在粉碎过程中活性成分不被破坏。
黄芪为豆科植物，具有强心利尿、降血压等作
用。现代药理研究表明，该药对心血管系统、血液系
统、肾功能、物质代谢及肿瘤均有良好的作用。有研
究表明黄芪有增强机体非特异免疫和增强机体抵抗
力的功能[5]。其主要的化学成分为黄芪皂苷和多糖。
本实验通过HSCS超细粉碎机将黄芪粉碎到纳米量
收稿日期：2004—11—25
级，并研究了粉碎前后药物的显微特征的变化，为研
究纳米技术对中药有效成分的溶出、生物利用度的
影响提供参考。
1仪器与材料
HSCS超细粉碎机(日本奈良机械所)，Zeta
PALS光散射粒度分布及电位分析仪(美国Brook
haven公司)，Orthoplan偏光显微镜(西德莱茨公
司)。黄芪药材购于武汉街道口中药店，经湖北省中
医药研究院中药研究中心鉴定为蒙古黄芪
Astragalusmembranaceus(Fisch．)Bungevar．
mongholicus(Bunge)Hsiao的干燥根；所用试剂均
为分析纯。
2纳米黄芪粉体制备和表征
2．1纳米黄芪粉体的制备：将黄芪洗净烘干，常规
粉碎，过180目筛，得黄芪细粉。取10g细粉，加蒸
馏水作分散剂，投入HSCS超细粉碎机的投料罐中
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1163·
进行粉碎。控制转速1200r／min，粉碎时间45min。
2．2粒度分布和Zeta电位的测定：将纳米黄芪粉
悬浮液置光散射粒度分布及电位分析仪中进行粒度
和Zeta电位的测定，结果见图1。可见固体颗粒平均
粒径为81。7nm，颗粒大小分布均匀。黄芪在纳米粉
碎后，不溶于水的纤维和淀粉等物质颗粒大小急剧
降低，表面能大大增加，颗粒间易发生团聚，纳米黄
芪悬浮液的Zeta电位为一23．07mV，说明纳米黄
芪颗粒表面吸附有一定量的电荷，相同电荷的排斥
作用使悬浮液的稳定性较好。
O 8I．7 500—1500 00 150．0
粒径／nm Zeta电位／mV
图1 纳米黄芪粉的粒径分布(A)和Zeta电位(B)
Fig．1Particlesizdivision(A)andZeta
potential(B)ofnanoA．membra—
naceusvar．mongholicuspowder
2．3粉体的显微特征观察：分别挑取黄芪细粉和纳
米悬浮液少许，置载玻片上，蒸馏水湿润(细粉)，水
合氯醛液透化装片，置显微镜下观察。见图2。在黄
芪细粉中木栓细胞表面呈类多角形或类方形，细胞
壁呈微波状弯曲(图2一a)。淀粉粒大量存在，单粒呈
类圆形或类椭圆形，直径在10肛m，复粒由2～4分
粒组成，在偏光下呈黑十字状(图2塌)。淡黄色的导
管呈缘纹孔(图2一c)。纤维大量存在于细粉中，束状，
直径10～30肛m，在偏光下呈亮橙黄色间多彩状(图
2一d)。黄芪在纳米粉碎后没有原药材的显微特征，只
有分布均匀的颗粒。明显看到黄芪中各类成分已经
均质化。在纳米粉中没有完整细胞存在，说明组织中
各类细胞均被破壁，此时细胞内的有效成分呈释放
状态，在水的溶剂化作用以及粉碎机主轴的高速旋
转的条件下，直接进入水中(图2-e)。
2．4黄芪皂苷和多糖的溶出[6]：称取黄芪细粉10
g，用20mL蒸馏水浸泡45rain后滤过，取滤液，在
烘箱内将水分蒸干。取固体物质用95％乙醇作溶
剂，超声提取2h，滤液蒸干，然后将所得固体物质
a一木栓细胞b一淀粉粒c一导管d一纤维e一纳米粉
a—phellemcellb-starchc—vesseld-fiber-nano—particles
图2黄芪细粉和纳米粉的显微特征
Fig．2MicroscopicharacteristicsoffineparticlesandnanoparticlesofA．membranaceusvar．mongholicus
用20mL正丁醇萃取2次，合并萃取液，130℃油为细胞壁和细胞膜的破碎，黄芪皂苷和多糖呈释放
浴，蒸去正丁醇，将所得固体物质溶于氯仿，然后加 状态，直接进入到水中。另外，黄芪细粉在水中超细
入浓硫酸，振荡、静置。在紫外灯下观察浓硫酸层的 粉碎后的悬浮液出现大量持久的气泡，不因加热而
颜色，如有绿色荧光，说明有皂苷从细粉中溶出。取 消退，这是因为皂苷本身具有降低水溶液表面张力
相应量的黄芪纳米粉悬浮液，直接滤过，滤液按上述 的作用[6]，该现象也证明了黄芪皂苷在纳米粉悬浮
方法检验有无皂苷的直接溶出。 液中直接溶出。在粉碎机主轴高速旋转下，皂苷作为
乙醇回流后的药渣，挥去乙醇，加入100mL 表面活性剂，与各物质充分混合，有助于保持纳米悬
水，水浴回流，滤过，滤液蒸至一定体积，加3倍体积 浮液的稳定性。
的无水乙醇，产生乳白色沉淀，滤过，烘干，得浮白色 3结论
黏稠固体，称重。在溶液中加入碱性酒石酸铜试剂， 本实验通过超细粉碎的方法制备了纳米黄芪悬
水浴加热至沸，保持2～3rain，观察有无橙色沉淀 浮液，并通过Zeta电位、粒度分布等测试方法，对纳
产生，如出现，说明有黄芪多糖的析出。 米黄芪进行了表征。使用HSCS超细粉碎技术可以
结果表明，黄芪细粉虽然经过45rain的蒸馏水 将黄芪细粉均匀粉碎到81．7nm。纳米粉碎后，黄芪
浸泡，但因有效成分都存在于细胞内，需要经过细胞 中细胞壁和细胞膜大部分被破碎，有效成分不经过
膜和细胞壁的扩散、渗透作用，析出速率较慢，因此 提取可以直接溶出。黄芪内在物质皂苷对纳米黄芪
没有检验到黄芪皂苷和多糖的溶出。黄芪纳米粉因 悬浮液起到了稳定的作用。
万方数据
·1164· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
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高效毛细管电泳法测定玉米花粉多糖中单糖的组成
耿 越，王建波，刘靓雯，张明伟，刘书明
(山东师范大学生命科学学院，山东济南250014)
摘要：目的采用高效毛细管电泳法测定玉米花粉多糖中单糖的组成。方法玉米花粉多糖水解后，经a一萘胺衍
生化，高效毛细管电泳分析。电泳条件：缓冲液为75mmol／L硼砂溶液(pH9．5)；柱温22‘C；电压16kV；检测波长
200am；气压进样，进样时间5S。结果玉米花粉多糖主要是由葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖3种单糖组成。结论
高效毛细管电泳可用于测定多糖中单糖的组成。
关键词：玉米花粉；多糖；高效毛细管电泳
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)08—1164—03
Determinationofmon saccharidecompositionofmaizepollenpolysaccharidesbyHPCE
GENGYue，WANGJian—bo，LIUJing-wen，ZHANGMing—wei，LIUShu—ming
(CollegeofLifeScience，ShandongNormalUniversity，Jinan250014，China)
Keywords：maizepoll n；polysaccharides；highpe formancecap llarylectrophoresis(HPCE)
玉米花粉多糖具有多种免疫增强活性，对肺泡
及人胸腔内的巨噬细胞有明显的激活作用n~3]，并
能明显抑制小鼠S。。。肿瘤细胞的生长[3“]。
高效毛细管电泳(HPCE)技术具有样品用量
少、时间短、灵敏度高、分离效果明显的特点，在糖类
物质的检测方面具有独特的优势。由于单糖在水溶
液中解离能力极差，在强碱条件下才能带上电荷。使
用含硼砂的缓冲液会让单糖在较低的pH条件下带
上足够的负电荷。不同的单糖在相同介质条件下与
硼砂的络合物具有有效淌度的差异，足以被毛细管
电泳分开。单糖的紫外吸收很弱，采用a一萘胺为衍
生试剂使其带上可被检测的基团[5]。本实验采用此
法测定了三氯醋酸法去蛋白的玉米花粉多糖中的单
糖组成，并将结果与Sevag法去蛋白的玉米花粉多
糖中的单糖组成进行比较。
1仪器与试剂
电泳装置为BeckmanP／ACE5000，操作软件为
BeckmanP／ACEStation1．0，毛细管柱(57cmx50
弘m，有效长度50cm)(河北永年光导纤维厂)。
半乳糖、木糖、甘露糖对照品(进口分装)，葡萄
糖、鼠李糖、阿拉伯糖对照品(国产分析试剂)；玉米
花粉购于济南蜂产品专卖店；试剂均为分析纯，水为
双蒸水。
电泳条件：缓冲液为75mmol／L硼砂溶液(pH
9．5)；柱温22℃；电压16kV；检测波长200nm；气
压进样，进样时间5s；清洗液0．1mol／LHCl溶液、
0．1mol／LNaOH溶液、重蒸水。
2方法与结果
2．1 衍生试剂的配制：称取0【一萘胺143mg和
NaBH。CN35mg，溶于450ttL无水甲醇中，再加入
41肛L冰醋酸，即得。
2．2单糖对照品溶液的制备：取各种单糖用重蒸水
配成质量浓度为20mg／mL的水溶液。各取1mL
制成单糖对照品混合液。
收稿日期：2004一11-27
基金项目：山东省自然科学基金资助项目(Y2002D11)
作者简介：耿越(1965一)，男，山东淄博人，博士，教授，1999年毕业于同济大学，获博士学位，主要从事天然产物研究。
Tel：(0531)86180196E—mail：gengyr@sdnu．edu．en
万方数据
纳米黄芪粉的显微结构和有效成分溶出的研究
作者： 马培艳， 傅正义， 苏艳丽， MA Pei-yan， FU Zheng-yi， SU Yan-li
作者单位： 马培艳,MA Pei-yan(武汉理工大学,材料复合新技术国家重点实验室,湖北,武汉,430070;武
汉理工大学理学院,湖北,武汉,430070)， 傅正义,苏艳丽,FU Zheng-yi,SU Yan-li(武汉理
工大学,材料复合新技术国家重点实验室,湖北,武汉,430070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(8)
被引用次数： 4次

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引证文献(4条)
1.汪涛.孙亮.梁蓉梅.宓鹤鸣 中药超微粉碎的研究进展与应用前景[期刊论文]-药学实践杂志 2007(3)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200508019.aspx