全 文 ：榷花叶鞭质急性毒性及抗炎镇痛作用研究△
河南中医学院(郑州 4 5 0 0 0 3) 刘延泽 豁 苗明三
摘 要 研究了榷花叶靴质的急性毒性及抗炎 、镇痛作用 。 结果表明 :榷花叶揉质能够明显抑制二
甲苯所致小鼠耳壳肿胀及蛋清所致大鼠足趾肿胀的作用 , 对热板法及酒石酸锑钾所致小鼠疼痛均
有明显抑制作用 , 且毒性较小 , 提示榷花叶斡质具有抗炎 、镇痛作用 。
关链词 摧花叶 鞭质 急性毒性 抗炎作用 镇痛作用
批花叶为金缕梅科植物糙花 L o 犷。Pe tal -
u m ch in en se O h v
. 的干燥叶 , 具有清热止泻 、
活血止血的功效 , 用于治疗暑热泻痢 、扭闪伤
筋 、创伤出血 、 目痛喉痛等症〔‘’ 。 临床报道将
其制成注射剂用于治疗冠心病取得较好疗
效 〔2〕 , 将其配伍紫珠和蒲 公英治疗上 消化道
出血 , 疗效 显著 , 并显 示 出镇痛和 抗炎作
用 〔8〕 。 我们曾对其中的鞭质及多元酚类化合
物进行了研究 , 阐明了包括可水解靴质二聚
体 、三聚体 、绿原酸等 34 种多元酚类化合物
的结构 , 其中 4 种为新化合物 〔‘, 。 鞭质为近年
国际上 的研 究热点 , 除传统 已知的收敛 、止
血 、止泻作用外 , 新发现不少揉质具有抗癌防
癌 、抗脂质过氧化 、清除自由基等作用〔5 , 。 为
了对糙花 叶的深入开发利用提供依据 , 我 们
对其中的裸质部分进行了急性毒性及抗炎镇
痛的药效学研究 。
1 实验材料
1
.
1 试药与试剂 : 糙花叶靴质(简称 LC ) , 批
花 叶于 1 9 9 0 年 9 月采自河南新县 , 经 70 %
M e
Z
C O 破碎提取 、过滤 、浓缩 , 除去色素等杂
质后抽干 , 得 褐 色干燥粉末即 L c (易溶于
水 ) 。 平痛新片 由锦州市兴海制药厂生产 , 批
号 8 8 1 0 2 9 ;醋酸泼尼 松 由常州制药厂生产 ,
批号 9 2 0 1 2 3 ;二 甲苯为上海试剂四厂昆山分
厂生产 , 批号 8 7 0 8 0 1 ; 生理盐水为郑州化学
制药厂生产 , 批号 9 2 1 2 0 8 。
1
.
2 动物 : 昆明种小 鼠 , S D 大鼠 , 均由河南
医科大学动物中心提供 。
2 方法与结果
2
.
1 急性毒性 : 取小 鼠 50 只 , 体重 18 9 ~ 20
g
, 雌雄各半 , 随机均分为 5 组 , 实验前禁食
(不禁水 )12 h , 将 L C 配成 2 . 1 9 / m L 浓度的
水溶液 ,分别给 5 组动物按等比级数 19 ,连续
观察 7 d ,记录各级动物死亡情况 , 发现有动
物死亡者立即取出并解剖 , 结果未见有肉眼
可见的肝 、心 、脾 、肺 、 肾 、脑 、 胃 、肠主要脏器
的异常 , 第 7 天处死其它小鼠并解剖 , 也未见
有肉眼可见的主要脏器的异常 , 按概率单法
计算 L D : 。为 80 . 9 9 /k g , 其 95 %可 信 限 为
7 1
.
2 9 / k g ~ 9 1
.
9 9 / k g
。
2
.
2 抗炎作用
2
.
2
.
1 对二 甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响 〔6〕 :
取体重 18 9 ~ 2 1 9 雄性小鼠 50 只 , 随机均分
为 5 组 , 分别 19 大 、中 、小剂量的 LC 溶液 、醋
酸泼尼松混悬液和同体积的生理盐水 , 每天
给药 1 次 , 连续给药 3 d , 于第 3 天给药 后 1
h
, 每鼠左耳滴二 甲苯 0 . 04 m l洲 (正反均滴 ) ,
右耳为对照 , Z h 后处死小鼠 , 剪下双 耳 , 对
齐用 0 . 8 c m 打孔器打下双耳耳片 , 迅速在分
辛 A d d e r s s : L iu Y a n z e , H e n a n (二o lle g e o f ’f r a d it io n a l Chin e s e M ed l ein e , Zh e n g z h o u
刘延泽 男 , 教授 , 硕士研究生 导师 1 9 8 1 年毕业于河南电医学 院 , 留校从事中药化学教学与科研 , 1 9 8 5 年在中国 医学科学院药物研究所谢晶曦教授指 导下进修 , 1 9 8 8 和 1 9 9 2 年两次赴 日本冈山大学奥田拓男教授研究室进行中草药鞭质合作研究 。 连续三次主持国家自然科学基金项目和 国家九五攻关项 弓 , 对继花叶 、 鬼灯擎 、 千屈菜 、 地锦草 、天葵等中草药中辣质及多元酚类成分进行了系统研究 , 19 9 2 年获中国药学会青年科技奖 . 1 9 9 1 年晋升副教授 , 1 9 9 5 年晋升教授 , 1 99 6 年被定为河南省跨世纪学术与技术带头人 , 同年被评为河南省 10 名杰出青年科学家之一 。
△ 国家青年科学基金资助项 目
《中草药》1 9 98 年第 29 卷第 5 期 . 3 2 5 。
析天平上称重 , 测肿胀度 . 见表 1 。
表 1 L c 对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响临士 : )
几 别 动物数(只 )
剂 量
(g / k著; 、
月中胀度
(m g )
肿胀抑
制率(% )
2
.
2
.
2 对大鼠蛋清性足环肿胀的影响〔7〕 :取
20 0 士 2 0 9 雄性大鼠 40 只 , 随机均分为 5 组 ,
各组给药方法同 2 . 2 . 1 , 于第 3 天 19 后测各
鼠左右后 足断正常体积 , 于 19 l h 后分别给
每鼠左足 足环 s 。 用蒸馏水稀释的 10 %新鲜
鸡蛋清 0 . 1 m IJ , 分别于注射后 3 0 、 6 0 、 9 0 、
1 20
、
1 50 m in 测各鼠左右 足环体积 , 并计算
肿胀率 , 见表 2 。
丙匕九bo口八门了OJ只一
门自01勺1.1,eIL生理盐水组
醋酸泼尼松组
小剂量 L C 组
中剂量 工一C 组
大剂量 L C 组
0
.
0息
2
.
5
5
l O
8
.
0士 1 . 9
1
.
9士 1 . 2 “ 呼 苍 △
5
.
1 士 1 . 9 矜 否 , △ △△
3
.
8 士 1 . 4 盖 禅 花 △ △
2
.
4 士 0 . 9 朴 谷 苦
与生理盐水组比 : ” ‘ 尸< 。. 01 ;与大剂量 L C 组 比 :
八P ) 0
.
0 5 △乙P < 0
.
0 5 八 6 。尸< 0 . 0 1
表 2 L C 对大鼠蛋清性足踌肿胀的影响 (王土 、)
组 别 正常足肝体积 ( m L )
给蛋清后不同时间足断体积 ( m L )
生理盐水组 8 1 6 一
1 6 0
.
0 5
0
.
9 3士 0 . 0 7
3 0 m
ln
1
.
5 8 士 0 . 1 6 1
醋酸泼 尼松组 8
( 0
.
6 9 士 0 . 1 4 ) ( 0 .
0
.
9 3士 0 . 1 4 1 . 2 1 士 0 . 1 5 1 .
* 关 关 △
6 0 m ln 9 0 m ln 1 2 0 m in 15 0 m in
6 4 士 0 . 1 7 1 . 5 8士 0 . 1 6 1 . 5 2士 0 . 1 6 1 . 4 6士 0 . 1 8
7 7 士 0 . 14 ) ( 0 , 7 0士 0 . 14 ) ( 0 . 6 3士 0 . 15 ) ( 0 . 5 6士 0 . 1 6 )
2 6 士 0 . 15 1 . 1 8士 0 . 14 1 . 1 2土 0 . 13 1 . 0 6土 0 . 1 6
、 * , △ * 关 * △ , * 关 △ 关 苦 关 △
小剂量 L C 组 8 16 2 . 5 0 . 9 4士 0 . 1 4
中剂量 L C 组 8 l6 5 0 . 9 2士 0 . 1 1
大剂量 L C 组 8 l 6 1 0 0 . 9 5 士 0 . 1 3
( 0
.
3 0 士 0 . 1 1 ) ( 0 . 3 5 土 0 . 10 ) ( 0 . 28 士 0 . 1 4 ) ( 0 . 2 3士 0 . 14 ) ( 0 . 1 4士 0 . 0 7 )
1
.
5 1士 0 . 2 1 1 . 5 5 士 0 . 2 2 1 . 4 9士 0 . 2 2 1 . 4 4士 0 . 19 1 . 3 6士 0 . 1 8
关 △△△ 、 关 △△△ , * △△△ * , △△△ , , △△△
( 0
.
6 1士 0 . 1 0 ) ( 0 . 6 5 士 0 . 1 1 ) ( 0 . 5 9士 0 . 1 1 ) ( 0 . 5 3士 0 . 0 8 ) ( 0 . 4 5士 0 . 0 9 )
1
.
3 4 士 0 . 1 7 1 . 4 0 士 0 . 19 1 . 3 6士 0 . 1 8 1 . 3 1士 0 1 7 1 . 2 3士 0 1 4
* * * △ * 关 关 △△ * * 、 △△ * * 二 △△ * * , △△
( 0
.
4 5 士 0 . 1 7 ) ( 0 . 5 2 士 0 . 2 0 ) ( 0 . 4 8 士 0 . 1 7 ) ( 0 . 4 2 士 0 . 1 7 ) ( 0 . 33 士 0 . 14 )
1
.
2 9 士 0 . 1 6 1 , 3 2 士 0 , 17 1 . 28 士 0 . 1 8 1 . 2 2士 0 . 18 1 . 8 8 士 0 . 15
关 关 签 关 关 书 关 关 釜 关 关 关 关 关
_
_ _
_ _
_
(旦旦旦士昼 丝 口呸 旦旦士Q卫旦2二旦二卫生土鱼巧 )( 。· 2 9士 0. 1冲 ( 0. 24 士 0. 飞; 之
与生理盐水组 比 : p > 。. 0 5 ’ ‘ 尸< 。. 05 ’ “ 尸< 0 . 01 ; 与大剂量 L C 组比 : 色 p > 。. 05 △△ 尸< 。. 05 △ △△尸< 。. 01
括号内数字为肿胀率
2
.
3 镇痛作用 感 )的小鼠均弃去不用 。 选痛闽在 3 m in ~ 30
2
,
3
.
1 对热板法致痛作用的影响〔7〕 : 取 18 9 m in 之 间的小 鼠 50 只 , 随机均分为 5 组 , 分
一 2 0 9 雌性小鼠 , 实验前将小鼠放在 56 ℃ 士 别 19 大 、 中 、小剂量的 L C 水溶液 、平痛新混
0
.
s c 的热板上测小鼠正常痛阑值 , 以小鼠舔 悬液和生理盐水 , 每天给药 1 次 ,连续 19 3 d ,
后 足拓 为痛 阂 出现 的指标 , 凡痛 阂超过 30 于第 3 天给药 30 m in 后测各小 鼠的痛闭 , 以
m in (痛觉不敏感 )或小于 3 m il( 痛觉过于敏 后每 30 m in 测 1 次 , 连测 5 次 , 见表 3 。
表 3 L C 对热板法致痛的抑制作用 (丁士 、 )
组 别 动物数
( 只 )
剂 量
( g / k g )
正常痛闹值 给药后不同时间的痛闭值 ( m in)
n l ln 3 0 m rn 6 0 m ln 9 0 m ll
l
1 2 0 m zn 1 50 rn zn
生理盐水组
平痛新组
2 0
.
4士 7 . 0
2 ()
.
9士 6 . 5
小剂 量 I C 组 1 0 2 . 5 1 8 . 8士 7 . 8
中剂量 L C 组 10 2 1 . 2士 6 . 9
大剂量 I (卜组 1 0 1 0 2 1 3士 7 . 7
2 2
.
0 士 8 . 8
( 1
.
2士 1 . 6 )
2 3
.
9 士 6 . 3
△
( 4
.
2士 5 . 5 )
2 0
.
6 士 7 . 2
关 △△△
( 2
.
5士 2 . 0 )
2 5
.
1 士 5 . 1
关 关 △
( 4
.
0士 3 . 9 )
2 8
.
9士 9 . 0
19
.
9 上 8 . 6
( 1
.
8 士 3 . 1 )
2 9
.
8 士 5 . 3
关 关 关 △
( 8
.
9 士 4 . 7 )
2 4
.
5 士 8 . 8
* * 、 △△△
( 5
.
7 士 2 . 8 )
3 4 3 士 7 . 1
* * * △
( 12 1 士 4 . 5 )
3 5
.
5士 9 . 4
2 1
.
1士 8 . 1 2 1 . 1 士 0 . 1 6 2 0 . 8士 7 . 5
( 2
.
0 士 2 . 8 ) ( 1 . 8 士 2 . 0 ) ( 1 . 3士 1 . 8 )
3 5
.
0 士 6 . 8 3 1 . 0 士 6 . 5 2 6 . 4士 6 . 4
关 , 关 △ 釜 关 斧 △ * * 关 △
( 14
.
1士 5 . 8 ) ( 10 1 士 6 . 1 ) ( 5 . 7 士 4 . 3 )
2 7
.
6 士 9 . 7 2 2 . 1 土 9 . 4 2 0 . 3士 8 . 9
关 * * △ 芳 △△ ‘ △
( 7
.
8 士 1 . 9 ) ( 3 . 4 士 2 . 7 ) ( 1 . 8 士 1 . 8 )
3 1
.
7 士 5 . 9 2 5 . 6 土 4 . 2 2 3 . 4士 4 . 5
* * * △ * △ 等 △
( 1 0
.
5 士 4 . 6 ) ( 4 . 4 士 4 . 9 ) ( 3 . 3士 3 . 7 )
3 3
.
3 士 8 . 3 2 8 . 3士 8 . 6 2 4 . 9士 7 . 6
关 关 关 苦 粉 关
( 12
.
0 士 7 . 2 ) ( 7 . 0 土 4 . 5 ) ( 4 . 0 士 4 . 1 )
补 子 关 尸< 0 . 0 1 ;
日0气胜11
关 关 关 关 关 关
( 7
.
6士 4 . 2 ) ( 14 . 2士 6 . 5 )
括 号内数字为痛阎提高值 。 与生理盐水组 比 : 二 p > 。. 05 二 二 尸< 。. 05
与大钊量 L C 组比 : △尸> 。. 05 △乙尸 < 。 . 05 户八△ 尸< 。. 01
。
3 2 6
。
2
.
3
.
2 对酒后酸锑钾所致小鼠扭体反应的
影响〔别 : 取 18 9 ~ 20 9 小 鼠 60 只 , 雌雄各半 ,
随机均分为 4 组 。分别 19 大 、小剂量的 L C 小
溶液 、平痛新混悬液和生理盐水 , 每天给药 1
次 , 连续 3 d , 于第 3 天给药 l h 后每鼠 ip 新
配制的 0 . 05 %酒石酸锑钾 0 . 3 m L /1 。 g , 连
续观察 10 m in , 记录各组出现扭体反应的动
物数 , 扭体反应发生的潜伏期和扭体次数 , 见
表 4 、 5 。
表 4 LC 对酒石酸锑钾所致小鼠扭体反应的影响
组别 动物数
(只 )
剂量
(g / k g
扭体数
(只 )
扭体百分率
(% )
生理盐水组 15 一 州 照
平痛新组 15 0 . 1 9 6。
小剂量 L C 组 1 5 5 10 6 7
大剂量 L C 组 15 10 8 邪
从上表可看 出 , 平痛新组 , 大 、小剂敬 ! , C
组均可使酒石酸锑钾所致小鼠的扭体发生率
明显降低 。
表 5 LC 对酒石酸锑钾所致小鼠扭体发生
潜伏期及扭体次数的影响
动物数
(只) (g厂kg )
扭体潜伏期(二 )
1 2 5 15 ) 16
扭体次数欣 )
弓 民一 1() ji 竺
生理盐水组 巧 一 三 7 2 0 1 1 0 6 8
平痛新组 巧 。 1 0 0 8 1 6 6 6 艺 l ()
小剂量LC 组 15 5 0 3 7 0 5 5 3 3 q ‘、
大剂量LC 组 15 10 0 0 8 0 7 7 5 3 () 。
经 Ri di t 检验 , 平痛 新组 , 大小剂 量 的
LC 组均可极显著性延长酒石酸锑钾所致小
鼠的扭体潜伏期 , 极显著性降低扭体次数 , 但
平痛新组 , 大小剂量的 LC 组之间在对小 鼠
扭体潜伏期及扭体次数方面无显著性差异 。
3 讨论
糙花叶为临床较常用的清热 止泻 、活血
止血中草药 , 但由于其中含有复杂且难分离
的蹂质及多元酚类化合物 , 至使多年来对其
研究甚少 , 直到近年才对其中的靴质及 多元
酚类化合物的组成和结构基本搞清 , 为进 -
步开发利用打下 了基础 。本研究证实 , 桃花仆卜
靴质具有较好 的抗炎镇痛作用 , 能够 显著抑
制二甲苯所致的小 鼠耳壳肿胀和蛋清所致大
鼠足趾肿胀 , 能够显著性延长酒石酸锑钾所
致 小 鼠扭体发生潜伏期及 降低扭体发 生次
数 , 能够显著性提高热板法小 鼠的痛阂 , 与作
为阳性对照的平痛 新组没有明显差异 , 但不
同剂量间具有较明显量效关系 。 急性毒性试
验结果表明 , 本品毒性很低 。 这些结果的发
现 , 提示靴质类 成分为糙花叶中的主要 有效
部位 , 对进 一步 开发新药具有重要意 义
参 考 文 献
1 江苏新医学院 . 中药人辞典 ( 日讲、. 上海 : 卜海科技 川
版社 , 1 9 8 6 . 1 〔)9 0
2 衡阳市 二医院 . 湖南医学杂志 , 1 , 7 6 , (2 ) : 3 3
3 施觉 民 , 等 . 件, 药通报 , 一‘。8 8 . 13 (2 ) : 3 ‘)
1 Y o
、
1
1 1({a T
, 。t “ 1
. 工, } ), t 、〕。 11、、 , : z一s t r y . l t刁93 . 3 2 (几) : 1艺8 了
石 ()k Lld 石飞 1 ’ , f r u / . 1〕1百 1飞t‘工M 护(11c 夏1 , l仁, 8 9 , 5 5 : 1 1 7
6 李仪 奎 . 中药药理 实验方法学 . 1: 海 : h 海科技 出版
社 , l‘)9 1 . 3 ‘)
7 陈 奇 . 中药药理实验 方法学 . 贵阳 : 贵州 人民出版
社 , 1 9 8 8 . 8 1
8 徐叔云 . 药理实验方法学 . _厄京 : 人 民卫生 出版 社 ,
1 98 2
.
5 13
(1 9 9 7
一
0 1
一
2 7 收稿
1 9 9 8
一
0 2
一
0 6 修 回 )
“华东地区第 14 次天然药物化学学术研讨会 ”在上海召开
由上海市药学会主办的“华东地区第 14 次天然药物化学学术研讨会 ”于 1 9 9 8 年 3 月 2 日~ 25 日在上海
市召开 。 参加这次会议的 80 多名代表来自华东地区五省市及广东等地 , 本刊也派员参加了会议 。 大会共收到
论文 75 篇 , 在会上作专题报告的有 :赵守训教授 “天然产物化学与产品开发” ;胡昌奇教授 “具有雌激素样作用
的天然产物” ; 易杨华教授 “海洋药物的最新进展 ” ;秦国伟研究员“天然产物立体结构测定的一些方法 ”和刘涤
教授“植物细胞培养技术生产有用化合物的潜力和问题” 。 参加这次会议的代表层次 、素质高 ; 中 、青年学科带
头人的论文学术水平高 ;会议的学术气氛浓等特点获得与会者的一致好评 。
(聂荣海 )
《中草药》1分9 8 年第 29 卷第 5 期 · 3 2 7 。