全 文 ：田基黄不同炮制品总黄酮及鞣质含量的比较
杨青1，张璐2
(1．武警广东省总队医院，广东 广州，510507;2． 南方医科大学 中医药学院，广东 广州，
510515)
摘要:目的 探索不同炮制方法对田基黄药材中总黄酮和鞣质的影响。方法 采用紫外分光光度法测定
田基黄不同炮制品中总黄酮、鞣质的质量分数，并对其炮制品进行薄层色谱比较研究。结果 田基黄酒
炙和醋炙后，黄酮与鞣质的质量分数较其他炮制品高。结论 本方法操作快速、简便、准确，可用于田基
黄药材的质量控制。
关键词:田基黄;炮制方法;总黄酮;鞣质;槲皮素;含量
中图分类号:Ｒ284． 1 文献标志码:A doi:10． 3969 / j． issn． 1006-8783． 2013． 05． 009
文章编号:1006-8783(2013)05-0505-05
Study on the contents of total flavonoids and tannins in different processed products
of Hypericum japonicum Thumb．
YANG Qin1，ZHANG Lu2
(1． Department of Pharmacy，Guangdong Provincial Corps Hospital of Chinese Peoples Armed Police Forces，
Guangzhou 510507，China;2． College of TCM，Southern Medical University，Guangzhou 510515，China)
Abstract:Objective To invesitage the effect of the different processing methods on total flavonoids and
tannins in Hypericum japonicum． Methods UV was used to determine the contents of total flavonoids and
tannins in different processed products of H． japonicum，and its processed products were identified by thin
layer chromatography． Ｒesults Contents of total flavonoids and tannins in wine and vinegar processed
products of H． japonicum slightly increased than others． Conclusion This method was simple，rapid，
accurate and reproducible，which was suitable for the quality control of H． japonicum．
Key words:Hypericum japonicum Thumb．;processing method;total flavonoids;tannins;quercetin;
content
收稿日期:2013-06-09
作者简介:杨青(1974 －) ，女，主管药师，大学本科，从事中药药剂与药物质量标准控制研究，电话:020-61627407，Email:
857881455@ qq． com;通信作者:张璐(1977 －) ，女，实验师，大学本科，从事中药制剂工艺研究与新剂型开发，电话:
020-61648263，Email:ulgnahz@ 163． com。
网络出版时间:2013-10-16 09:41 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /44． 1413． Ｒ． 20131016． 0941． 003． html
田基黄原名地耳草，始载于《生草药性备要》、
《植物名实图考》［1］，系藤黄科金丝桃属植物地耳草
(Hypericum japonicum Thumb. )的干燥全草［2］，功能
清热解毒、利湿退黄、消肿散瘀。各类地方药志均记
载田基黄可解毒消炎、祛黄疸除腹水、止血生肌，中
医临床上常用于治疗肝炎、急性黄疸型肝炎、肠炎、
急性肾炎、急性结膜炎以及皮肤疥癣、毒蛇咬伤、跌
打损伤等［3］。田基黄中医临床多以鲜品或生干品
入药，尚未见其炮制品入药的文献记载或相关报道，
《中药炮制学》［4］中记载酒炙可增强活血通络作用;
醋炙可引药入肝、使部分成分发生化学反应，利于有
效成分提取、增强疗效;制炭可增强或产生止血、止
泻作用［5］。因此本试验根据田基黄不同药用功效
及主要化学成分，将药材进行酒炙、醋炙、制炭炮制
加工，并对其炮制品进行薄层鉴别、紫外光谱测定，
选取芦丁、槲皮素、没食子酸作为成分指标，比较各
炮制品中组分的质量分数差异，为田基黄的加工炮
制及临床用药提供依据。
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Oct． 2013，29(5)
1 仪器与试药
1. 1 仪器 UV-2401PC 紫外-分光光度计(日本岛
津公司) ，JA2003 型电子天平(上海浪平设备仪器公
司) ，CP225D 型电子分析天平(塞多利斯公司) ，
KQ2200DB型数控超声波清洗器(昆山超声仪器有
限公司，频率 40 kHz，功率 100 W) ，HH-S. Z. W电热
恒温水浴锅(河南巩义设备仪器公司) ，KH-3000 薄
层色谱扫描成像系统(上海科哲生化科技有限公
司)。
1. 2 试剂 芦丁(批号:100080-200707，中国药品
生物制品检定所，供含量测定用) ，槲皮素(批号:
100081-200406，中国药品生物制品检定所，供含量
测定用) ，没食子酸(批号:110831-200803，中国药品
生物制品检定所，供含量测定用)。硅胶 G 薄层板
(青岛海洋化工厂) ，所用试剂均为分析纯，水为双
蒸水。
1. 3 材料 田基黄新鲜药材购于广州白云农批市
场，经南方医科大学中药鉴定教研室陈兴兴副教授
鉴定为藤黄科金丝桃属植物田基黄 Hypercum
japonicum Thunb. 的全草。
2 方法与结果
2. 1 田基黄不同炮制品的制备
由于临床尚未使用田基黄炮制品，因此田基黄
酒炙法、醋炙法、炒炭法均参考 2010 版《中国药典》
一部附录ⅡD“炮制通则”项下方法。田基黄生品:
取田基黄新鲜药材，除去杂质，洗净，润透，切段，阴
干。酒炙田基黄:取田基黄生品用黄酒拌匀，吸尽余
酒，闷润至透，用文火炒干至颜色偏棕，晾凉，每 10
kg田基黄用黄酒 1 kg。醋炙田基黄:取田基黄生品
用米醋拌匀，闷润至透，置锅内，用文火炒干，取出
放凉，每 10 kg田基黄用米醋 2 kg。田基黄炭:将
田基黄生品置热锅内，用武火炒至表面焦黑色、内
部焦黄色程度时，喷淋清水少许，熄灭火星，取出，
晾干。
2. 2 田基黄不同炮制品的薄层色谱鉴别
2. 2. 1 对照品溶液的制备 取槲皮素对照品适量，
精密称定，用甲醇溶解配制成每 1 mL 含 0. 2 mg 槲
皮素的溶液，作为对照品溶液。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 分别取田基黄鲜品、生
品、酒炙品、醋炙品、炒炭品等样品粉末(过 2 号筛)
各 5 g，分别加甲醇-25%(体积分数)HCl(体积比 4∶
1)溶液 30 mL，超声处理 60 min，滤过，滤液加水 20
mL，摇匀。加乙酸乙酯振摇提取 3 次，每次 25 mL，
合并乙酸乙酯液，溶剂挥干，残渣加甲醇 1 mL定容，
即得。
2. 2. 3 薄层色谱条件 分别吸取上述溶液 20
μL，点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-
甲酸(体积比 5∶ 4∶ 1)为展开剂，展至 8 cm，取出晾
干，分别在日光与 365 nm 紫外光灯下检视，结果
见图 1。
槲皮素
1 2 3 4 5 6
A: 日光下 B：365 nm 下
1 2 3 4 5 6
槲皮素
1．鲜品;2．生品;3．醋炙品;4．酒炙品;5．炒炭品;
6．槲皮素对照品。
图 1 田基黄不同炮制品的薄层色谱图
Figure 1 Thin layer chromatograms of different processed
products of Hypericum japonicum Thumb.
2. 3 田基黄不同炮制品中总黄酮的测定［6］
2. 3. 1 对照品溶液的制备及标准曲线的绘制 精
密称取以 P2O5 为干燥剂，60 ℃、0. 09 mPa减压干燥
至恒重的芦丁对照品 20. 1 mg，置于 100 mL 容量瓶
中，加 40%(体积分数)乙醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，即得 0. 201 mg /mL 的对照品溶液。分别精密量
取对照品溶液 0. 0、0. 1、0. 5、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0
mL，置于 10 mL容量瓶中，加 40%(体积分数)乙醇
至 5 mL，加入 5%(质量浓度)NaNO2 溶液 0. 3 mL
放置 6 min，再加 10%(质量浓度)Al(NO3)3 溶液
0. 3 mL，放置 6 min，再加 1mol /L NaOH 溶液 4 mL，
加 40%(体积分数)乙醇至刻度，摇匀，放置 30 min。
以对照品溶液 0. 0 mL 者为空白对照，在 510 nm 处
测定吸光度，以质量浓度 (ρ)为横坐标，吸光度(A)
为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 A = 8. 463 8ρ －
0. 001 3 (r = 0. 999 2) ，结果表明在 0. 002 01 ～
0. 100 5 mg /mL范围内呈良好的线性关系。
2. 3. 2 供试品溶液的制备 分别取田基黄生品、
炒炭品、醋炙品以及酒炙品各 20 g，精密称定，每
个样品平行操作 3 份。分别适当剪成小段，置圆
底烧瓶中，加 40%(体积分数)乙醇 300 mL，水浴
加热，提取温度 40 ℃，提取时间为 1. 5 h，提取 3
次。滤过，合并滤液，浓缩定容至 200 mL，即得供
605 广东药学院学报 第 29 卷
试品溶液。
2. 3. 3 精密度试验 精密吸取芦丁对照品溶液 3
mL，置 10 mL容量瓶中，按照“2. 3. 1”项下方法进行
显色反应，测得吸光度的平均值为 0. 528 8，ＲSD 为
0. 51%(n = 6) ，结果表明仪器精密度良好。
2. 3. 4 稳定性试验 精密称取田基黄生品 20 g，按
照“2. 3. 2”项下方法制备供试品溶液，精密吸取 0. 1
mL，按照“2. 3. 1”项下方法，从 0 min 开始，每隔 10
min测定一次吸光度，直到 120 min。计算 ＲSD值为
0. 44%(n = 13) ，结果表明田基黄供试品溶液在 2 h
内稳定性良好。
2. 3. 5 重复性试验 精密称取同一批田基黄酒炙
品 20 g，按“2. 3. 2”项下方法制备供试品溶液，精密
吸取 0. 1 mL，按“2. 3. 1”项下方法测定，得总黄酮吸
光度的平均值为 0. 323，ＲSD 为 0. 05%(n = 7) ，结
果表明此方法重复性良好。
2. 3. 6 加样回收率试验 取田基黄酒炙品 0. 1
mL，共 9 份，平均分成 3 组，每组分别加入芦丁对照
品溶液(0. 201 mg /mL)1、2、4 mL，按“2. 3. 1”项下
方法测定吸光度，计算田基黄酒炙品中总黄酮的加
样回收率，结果见表 1。
表 1 田基黄酒炙品中总黄酮的加样回收试验结果
Table 1 The average recovery results of total flavonoids of
Hypericum japonicum Thumb. in wine (n = 9)
序
号
样品中的
量 /mg
加入
量 /mg
测得
量 /mg
回收
率 /%
平均回
收率 /%
ＲSD /
%
1 0. 38 0. 201 0. 578 1 98． 56
2 0. 38 0. 201 0. 579 9 99． 45 99． 3
3 0. 38 0. 201 0. 5807 99． 85
4 0. 38 0. 402 0. 775 8 98． 46
5 0. 38 0. 402 0. 776 1 98． 53 98． 5
6 0. 38 0. 402 0. 775 5 98． 38
7 0. 38 0. 804 1. 157 8 96． 74
8 0. 38 0. 804 1. 153 9 6． 26 96． 5
9 0. 38 0. 804 1. 155 1 96． 41
1. 05
2. 3. 7 田基黄不同炮制品中总黄酮的测定 精密
吸取“2. 3. 2”项下供试品溶液各 0. 1 mL 至 10 mL
容量瓶中，按照“2. 3. 1 ”项下方法测定吸光度，计算
得到生品、炒炭品、酒炙品、醋炙品中总黄酮质量分
数分别为 33. 416 8、25. 288 1、37. 536 3、35. 775 9
mg /g。
2. 4 田基黄不同炮制品中鞣质的测定［7］
2. 4. 1 对照品溶液的制备及标准曲线的绘制 取
没食子酸对照品 49 mg，置 100 mL 棕色量瓶中，加
水溶解并稀释至刻度，精密量取 5 mL，置 50 mL 棕
色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为
0. 049 mg /mL的没食子酸对照品溶液。分别精密量
取对照品溶液 0、0. 2、0. 4、0. 8、1. 2、1. 6、2. 0、2. 4
mL，分别置 10 mL 棕色容量瓶中，各加入磷钼钨酸
试液 0. 4 mL，再分别加入水 4. 8、4. 6、4. 4、4. 0、3. 6、
3. 2、2. 8、2. 4 mL，用 29%(质量浓度)Na2CO3 溶液
稀释至刻度，摇匀，放置 30 min。以对照品溶液 0. 0
mL者为空白对照，在 760 nm处测定吸光度，以对照
品溶液质量浓度(ρ)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标
绘制标准曲线，得回归方程 A = 7. 056 6ρ － 0. 000 3
(r = 0. 999 2) ，结果表明在 0. 98 ～ 11. 76 μg /mL范
围内呈良好的线性关系。
2. 4. 2 供试品溶液的制备 精密称取田基黄生品、
炒炭品、醋炙品以及酒炙品各 5 g，平行做 3 份，精密
称定。置 100 mL 棕色容量瓶中，加水 70 mL，放置
过夜，超声处理 10 min，放冷。用水稀释至刻度，摇
匀，静置使固体物沉淀，滤过，弃去初滤液 10 mL，取
续滤液 50 mL，置 100 mL 棕色容量瓶中，用水稀释
至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
2. 4. 3 精密度试验 精密吸取没食子酸对照品溶
液 3 mL，按“2. 4. 1”项下方法显色，连续测定 6 次，
测得吸光度的平均值为 0. 084 9，ＲSD 为 0. 37%
(n = 6) ，表明仪器精密度良好。
2. 4. 4 稳定性试验 精密吸取没食子酸对照品溶
液 2 mL，按“2. 4. 1”项下方法显色，从 0 min 开始测
定，每隔 10 min测定一次，至 120 min。结果 ＲSD为
0. 36%(n = 13) ，表明供试品溶液显色后 2 h内稳定
性良好。
2. 4. 5 重复性试验 精密称取同一批田基黄酒炙
品 20 g，共 6 份，按“2. 4. 2”项下方法制备供试品溶
液。分别精密吸取 1 mL，按“2. 4. 1”项下方法测定。
结果吸光度的 ＲSD 值为 0. 20%(n = 6) ，表明方法
重复性良好。
2. 4. 6 加样回收率试验 取田基黄炭供试品溶液
0. 8 mL，共 6 份，分别加入没食子酸对照品溶液
(0. 049 mg /mL)0. 4、0. 6、0. 8 mL，依法测定，并按公
式“鞣质测得量 =总酚测得量 －不被吸附的多酚测
得量”核对计算，得鞣质的平均回收率，ＲSD =
1. 93%。结果见表 2。
705第 5 期 杨青，等．田基黄不同炮制品总黄酮及鞣质含量的比较
表 2 田基黄炭中鞣质加样回收率试验结果
Table 2 The average recovery results of tannins of Hypericum japonicum Thumb. carbon (n = 9)
序号
样品中鞣质
的量 /mg
加入量 /
mg
总酚测得
量 /mg
不被吸附的多酚
测得量 /mg
鞣质测得
量 /mg
回收率 /
%
平均回收率 /
%
ＲSD /
%
1 0. 034 8 0. 019 6 0. 093 5 0. 037 2 0. 056 3 109. 69
2 0. 034 8 0. 019 6 0. 092 8 0. 038 9 0. 053 9 97. 45 104. 08
3 0. 034 8 0. 019 6 0. 093 8 0. 038 4 0. 055 4 105. 10
4 0. 034 8 0. 029 4 0. 111 7 0. 044 1 0. 067 6 111. 56
5 0. 034 8 0. 029 4 0. 112 0. 042 7 0. 069 3 117. 35 102. 04
6 0. 034 8 0. 029 4 0. 111 5 0. 054 0 0. 057 5 77. 21
7 0. 034 8 0. 039 2 0. 140 6 0. 059 4 0. 081 2 118. 37
8 0. 034 8 0. 039 2 0. 135 6 0. 065 1 0. 070 5 91. 07 103. 06
9 0. 034 8 0. 039 2 0. 135 1 0. 061 2 0. 073 9 99. 74
0. 99
2. 4. 7 田基黄不同炮制品中鞣质的测定
2. 4. 7. 1 总酚的测定 精密吸取“2. 4. 2”项下供
试品溶液各 0. 8 mL，平行做 3 份，按照“2. 4. 1”项下
方法，自“加入磷钼钨酸试液”起，依法测定吸光度，
根据标准曲线计算供试品溶液中没食子酸的质量
(mg) ，即得。结果见表 3。
2. 4. 7. 2 不被吸附的多酚的测定 精密吸取
“2. 4. 2”项下供试品溶液 25 mL，平行做 3 份，加至
已盛有干酪素 2. 5 g 的 100 mL 具塞锥形瓶中，密
塞，置 30 ℃水浴中保温 1 h，时时振摇，取出，放冷，
摇匀，滤过。弃去初滤液，精密量取续滤液 0. 8 mL，
置 10 mL 棕色量瓶中，按照“2. 4. 1”项下方法，自
“加入磷钼钨酸试液”起，依法测定吸光度，根据标
准曲线计算供试品溶液中没食子酸的质量(mg) ，即
得。结果见表 3。
2. 4. 7. 3 鞣质的测定 按公式“鞣质量 =总酚量 －
不被吸附的多酚量”计算，田基黄不同炮制品中鞣
质的质量分数结果见表 3。
表 3 田基黄不同炮制品中鞣质的质量分数
Table 3 Determination results of tannins in different processed products of H. japonicum (n = 3)
样品 总酚量 /mg 不被吸附的多酚量 /mg 鞣质量 /mg 鞣质平均量 /mg 鞣质质量分数 /(mg·g －1)
0. 094 9 0. 035 7 0. 059 2
生品 0. 094 2 0. 036 0 0. 058 2 0. 058 6 2. 928 7
0. 094 5 0. 036 3 0. 058 2
0. 064 6 0. 028 9 0. 035 7
炒炭品 0. 063 8 0. 030 3 0. 033 4 0. 034 8 1. 738 3
0. 064 9 0. 029 8 0. 035 1
0. 184 2 0. 047 8 0. 136 5
酒炙品 0. 183 4 0. 046 8 0. 136 6 0. 136 3 6. 816 3
0. 183 5 0. 047 6 0. 135 9
0. 117 6 0. 039 0 0. 078 6
醋炙品 0. 112 9 0. 039 3 0. 073 7 0. 075 6 3. 781 3
0. 113 5 0. 039 0 0. 074 5
3 讨论
试验过程中发现田基黄鲜品经过长时间放置其
外观由原先的翠绿色变成棕黄色，后将鲜品与生品用
95%(体积分数)乙醇浸泡，其提取液颜色有很大的
差别。采用紫外分光光度法进行测定，在 664 nm 处
有最大吸收，生品较鲜品吸光度明显降低，说明田基
黄鲜品含有的大量有色物质受光、温度、氧气、湿度条
件的影响会变化分解［8 － 9］。因此应选择合适的条件
保存田基黄药材。
805 广东药学院学报 第 29 卷
从薄层 365 nm紫外检测结果可见，在取样量、提
取方法、展开条件相同的情况下，不同炮制品薄层色
谱斑点存在一定差异。由薄层板上不同斑点的深浅
变化可以推断，药材在炮制后某些化学成分发生了此
消彼长的变化，有的成分在酸性条件下被分解或形成
盐类因此质量分数降低、斑点颜色变淡，有些成分经
过炮制后更利于有机溶剂的提取，因此成分含量增
加、斑点颜色明显变深，此类发生变化的成分有待进
一步研究证实是何种化合物。
鞣质是一种多元酚类化合物，广泛存在于植物
根、茎、叶中。鞣质具收敛性，内服可用于治疗胃肠道
出血、溃疡和水泻等症;外用可用于治疗创伤、灼伤，
可使创面的微血管收缩，有局部止血作用［7］。近年
来，有很多文献报道了田基黄可治疗内脏出血［10］，因
此本试验对田基黄不同炮制品进行了明胶沉淀法检
识，有沉淀生成，说明田基黄含有鞣质。继而又与
FeCl3 反应呈蓝色，Br2 反应呈黄色沉淀，甲醛浓盐酸-
硫酸铁铵反应呈红色，说明田基黄中含有邻三酚羟基
化合物并含有缩合鞣质。在加工炮制过程中田基黄
炭炙品总黄酮和鞣质质量分数下降，说明药材中含有
的大量缩合鞣质经过高温、氧化会破坏，导致其质量
分数降低。有关田基黄鞣质的报道很少，田基黄中所
含鞣质是否能发挥临床作用尚需要进一步药理实验
证实。
田基黄炮制品总黄酮和鞣质紫外分光法测定结
果为:酒炙品 ＞醋炙品 ＞生品 ＞炒炭品，说明药材经
过加工炮制各成分的质量分数有所提高，使田基黄药
材中化学成分之间发生了变化［11 － 12］，这为临床合理
用药提供了依据。
本试验结果表明，采用定性、定量方法测定田基
黄炮制品中总黄酮、鞣质的方法准确可靠、重复性好。
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( 责任编辑:刘晓涵
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