全 文 ：至恒重的大黄素对照品 10 mg ,置 100 mL量瓶中 ,
加甲醇使溶解 ,并稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 0. 1 mg /
m L的对照溶液。 精密吸取对照溶液 1. 0, 2. 0, 3. 0,
4. 0, 5. 0 mL分别置于 25 m L容量瓶中 ,加 1%醋酸
镁甲醇溶液 10 mL,加甲醇至刻度 ,以甲醇做空白 ,
510 nm波长处测定吸光度 ,测定结果见表 1。
表 1　不同量的对照溶液吸光值变化
取样量 ( mL) 含量 (μg /m L) 吸光值
1. 0 4. 0 0. 164 3
2. 0 8. 0 0. 296 6
3. 0 12. 0 0. 458 7
4. 0 16. 0 0. 602 0
5. 0 20. 0 0. 762 7
　　大黄素浓度与吸光度关系方程为 C =
26. 601 5X - 0. 153 2, r= 0. 999 5,线性范围 2. 0～
40. 0μg /mL。
2. 2. 2　半成品中大黄素的含量测定:从 3批半成品
中分别精密称取该品一定量 ,蒸干 ,加入适量 (约 20
m L)的甲醇使之溶解 ,再置分液漏斗中 ,用 30, 20,
10 m L氯仿数次萃取至氯仿层无色 ,收集氯仿层 ,回
收氯仿 ,然后用少量甲醇洗涤残渣数次 ,转移入 100
m L容量瓶中 ,再加 50 mL 1%醋酸镁甲醇液 ,再用
甲醇定容至刻度 ,用力摇匀。放置 30 min后 ,以甲醇
作空白对照 ,于 510 nm处测定吸光度 ,将吸光度值
代入标准曲线计算含量 ,结果见表 2。
表 2　大黄提取物总固体量和大黄素含量
试验号 总固体 ( g /100 g生药 ) 大黄素含量 (μg ) (% )
1 2. 271 3 237 307. 266 4 10. 448
2 2. 692 1 285 042. 386 7 10. 588
3 2. 531 5 265 035. 353 3 10. 469
2. 2. 3　回收率测定:准确称取该品 ,蒸干 ,再准确取
1. 1 mg大黄素对照品加入其中混和 ,用适量甲醇溶
解 ,后按照上述含量测定方法测定大黄素含量。结果
3批实验平均回收率为 109. 39% , RSD= 0. 36% ;
94. 60% , RSD= 0. 11% ; 102. 97% , RSD= 0. 14%。
2. 2. 4　精密度、重复性试验: 准确称取该品 ,蒸干 ,
按上述含量测定方法测定吸光度 ,计算大黄素含量。
平行操作 6次 ,结果 RSD= 1. 13% ;仪器精密度
RSD= 0. 29% ,表明取样精密度、仪器精密度、重复
性良好。
2. 2. 5　稳定性试验:准确称取该品 ,蒸干 ,按含量测
定方法测定吸光度。每隔 30 min测定一次 ,结果 3 h
内稳定 ,RSD= 0. 13%。说明大黄成分稳定 ,在此时
间范围内测定误差较小。
从以上对半成品的鉴别和检查认为半成品已经
符合配液要求 ,可用于下一步的配液研究。
3　讨论
3. 1　此注射液主要用于治疗温热性疾病的初、中
期 ,清热解毒、退高热。其中的游离蒽醌类成分特别
是大黄素、大黄酸、芦荟大黄素的药理作用较强 ,因
此可用大黄素含量来代表这类成分的含量。
3. 2　质量控制用紫外分光光度法进行 ,方法简便易
行 ,可作为生产单位应用。
参 考 文 献
1　楼之岑 .北京医科大学学报 , 1993, (增刊 ): 2
2　中华人民共和国药典中药薄层色谱色图集 . 1993: 23
3　芦喜珍 .中国医院药学杂志 , 1994, 14( 8): 376
4　徐韧柳 ,等 .中国实验方剂学杂志 , 1998, 4(3) : 9
( 1999-06-25收稿 )
四神茶剂制备工艺及质量标准研究
山东医科大学 (济南 250012)　　张典瑞
山东中医药大学　　　　　　　 张兆旺　孙秀梅
摘　要　四神茶剂为古方四神丸的改进剂型 ,由肉豆蔻、补骨脂、五味子、吴茱萸、大枣、生姜 6味药组成。改制
成茶剂可提高生物利用度 ,服用方便。 本文对制备工艺和质量标准进行了研究。
关键词　四神茶　制备工艺　质量标准　剂型改革
　　四神茶剂为古方四神丸的改进剂型 ,主要有肉
豆蔻、补骨脂、五味子、吴茱萸、大枣、生姜 6味药组
成 ,具有温肾暖脾、涩肠止泻的功能。 临床上主要用
于胃肠功能紊乱性疾病 ,尤其对各种原因不明的慢
性腹泻疗效确切。药理研究 [ 1]表明 ,四神丸具有抗痉
挛、抑制副交感神经过度兴奋和松弛平滑肌的作用 ,
·21·中草药　 Chinese Tradi tional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 1期
Address: Zhang Dianrui , Sh andong Univ ersi ty of M edical Sciences , Jinan
并在治疗肠道易激综合征 ( IBS)方面具有良好的效
果 [2 ] ,具有研究和开发价值。
将四神丸改制成四神茶剂 ,可以提高其生物利
用度 ,增加溶出 ,而且服用方便。 我们对四神茶剂的
制备工艺和质量标准进行了研究。
1　仪器和试剂
　　 DSC-41差示扫描量热分析仪 (日本岛津公司
制造 ) , SP-501N气相色谱仪 (鲁南化工仪器厂制
造 ) , D /max-rB型 X射线衍射仪 (日本理学电机会
社制造 )。
β -环糊精 (广东郁南味精厂生产 ) ,补骨脂素、五
味子乙素和吴茱萸碱对照品 (中国药品生物制品检
定所提供 ) ,硅胶 G和硅胶 GF254 (青岛海洋化工厂
生产 ) ,其它试剂均为 AR级。
2　四神茶剂制备工艺
2. 1　方药提取: 按处方比例称取一定量的药材 ,混
合均匀 ,按“半仿生提取法” [3 ]提取。 第一次加一定
pH的水 10倍量 ,浸 30 min,双提法提取 2 h,第二
煎、第三煎再加一定 pH的水 6倍量 ,双提法各提取
1 h。以上 3次提取液分别过滤 ,滤液合并 ,减压浓缩
至相对体积质量比为 1. 25左右 ,低温保存。
2. 2　支持剂的制备及配比实验:上述 3次提取后的
药渣 ,置烘箱中 80℃烘干 ,粉碎 ,过筛 ,留取 10～ 20
目粗粉作支持剂。 将浸膏和支持剂按不同比例进行
配比实验 ,可得二者最佳配比。
2. 3　挥发油 β -CD包合物的制备:采用饱和水溶液
法 [4, 5 ]包合。 精密称取 β-CD 4 g ,置 100 mL具塞三
角瓶中 ,加入蒸馏水 100 mL,沸水浴加热使溶解 ,降
至 45℃ ,于磁力加热搅拌器恒温搅拌 ,用移液管量
取挥发油 0. 75 mL,按 3∶ 1比例用无水乙醇稀释 ,
然后用 5 mL注射器将挥发油稀释液缓缓注入保持
45℃ β -CD溶液中 ,加塞 ,继续恒温搅拌 2 h。置冰箱
冷藏 24 h,抽滤 ,少量水洗 (约 10 mL) ,抽干 ,收集滤
渣 ,置干燥器中 12 h,即得白色粉末状包合物。将所
得包合物进行气相分析 , X射线衍射分析和差示扫
描量热分析 ,可证明包合物确已形成。
2. 4　茶剂的制备: 按所选比例取支持剂吸收浸膏 ,
混合均匀后 , 60℃以下干燥 ,以 20目筛整粒 ,再加
入挥发油 β-CD包合物 ,混合均匀 ,包装 ,即得。
3　四神茶剂的质量标准
3. 1　定性鉴别:采用薄层色谱法对四神茶剂中主要
药物肉豆蔻、补骨脂、五味子、吴茱萸进行了定性鉴
别。
称取四神茶 10 g,研细 ,置圆底烧瓶中 ,加苯 50
mL加热回流提取 1 h,提取液滤过 ,回收至 2 mL,
作为样品供试液。另取缺肉豆蔻阴性样品和肉豆蔻
阳性样品经同法制成肉豆蔻阴性和阳性对照液。 取
上述 3种溶液各 4μL分别点于同一块硅胶 G薄层
板上 ,以石油醚 ( 60℃～ 90℃ ) -苯 ( 1∶ 1)为展开剂 ,
上行展开 15 cm ,取出 ,晾干 ,喷以 10%硫酸乙醇
液 , 105℃烘 5 min至斑点清晰。可见样品供试液色
谱中 ,在与阳性对照液色谱相应位置上显相同颜色
的斑点 ,而阴性对照液色谱中无相应的斑点。 见图
1。
　 1-样品　 2-阴性对照
　 3-阳性对照　 A-红色
　 B-棕色　 C-红色
图 1　肉豆蔻的薄层色谱
1-样品　 2-阴性对照
3-阳性对照　 4-补骨脂素
A-亮蓝色
图 2　补骨脂的薄层色谱
　　称取四神茶 2 g ,研细 ,加甲醇 10 mL,浸泡 6 h,
时常振摇 ,滤过 ,滤液浓缩至 2 mL,作为样品供试
液。 另取缺补骨脂阴性样品和补骨脂阳性样品经同
法制得补骨脂阴性和阳性对照液。 补骨脂素标准品
对照液为 0. 8 mg /mL的甲醇溶液。取上述 4种溶液
各 4μL,分别点于同一块 0. 5% CMC-Na-硅胶 G
薄层板上 ,以苯 -乙酸乙酯 ( 9. 5∶ 0. 5)为展开剂 ,上
行展开 15 cm,取出 ,晾干 ,于 UV 365 nm下观察。可
见样品供试液色谱中 ,在与阳性对照液和标准品对
照液色谱相应位置上显相同颜色的斑点 ,而阴性对
照液色谱中无相应的斑点。见图 2。
称取四神茶 2 g ,研细 ,置圆底烧瓶中 ,加氯仿
10 mL加热回流提取 1 h,提取液滤过 ,回收溶剂至
2 mL,作为样品供试液。另取缺吴茱萸阴性样品和
吴茱萸阳性样品经同法制得吴茱萸阴性和阳性对照
液。吴茱萸碱标准品对照液为 0. 56 mg /mL的氯仿
溶液。 取上述 4种溶液各 6μL,点于同一块 0. 5%
CMC-Na-硅胶 CF254薄层上 ,以石油醚-氯仿-甲醇
( 4∶ 24∶ 0. 5)为展开剂 ,上行展开 15 cm ,取出 ,晾
干 ,于 UV254 nm下观察。可见样品供试液色谱中 ,
在与阳性对照液和标准品对照液色谱相应位置上显
相同颜色的斑点 ,而阴性对照液色谱中无相应的斑
·22· 中草药　 Chinese Tradi tional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 1期
点。见图 3。
1-样品　 2-阴性对照　 3-阳性
对照　 4-吴茱萸碱　 A-褐色
图 3　吴茱萸薄层色谱
1-样品　 2-阴性对照　 3-阳性
对照　 4-五味子乙素　 A-褐色
图 4　五味子薄层色谱
称取四神茶 2 g ,研细 ,加甲醇 10 mL,放置 12
h,时常振摇 ,滤过 ,滤液浓缩至 2 mL,作为样品供试
液。另取缺五味子阴性样品和五味子阳性样品经同
法制得五味子阴性和阳性对照液。五味子乙素对照
液为 0. 83 mg /mL甲醇溶液。取上述 4种溶液各 4
μL,点于同一块 0. 5% CMC-Na-硅胶 GF254薄层板
上 ,以石油醚 -乙酸乙酯 ( 15∶ 5)为展开剂 ,上行展
开 ,取出 ,晾干 ,于 UV 254 nm下观察。可见样品供
试液色谱中 ,在与五味子阳性对照液和五味子乙素
标准品对照液色谱相应位置上显相同颜色的斑点 ,
而阴性对照色谱无相应的斑点。 据此可证明本品中
含有五味子。 见图 4。
3. 2　补骨脂素的含量测定:薄层层析条件:以苯-乙
酸乙酯 ( 9. 5∶ 0. 5)为展开剂 ,用 0. 5% CMC-Na-硅
胶 G板展开 ,补骨脂素与其它组分能较好地分离。
薄层扫描条件: 扫描方式为单波长反射式锯齿
扫描 ,扫描波长为 310 nm ,狭缝 1. 2 mm× 1. 2 mm,
Sx= 3,灵敏度中。
标准曲线的制备:精密称取补取脂素 1. 60 mg ,
置 2 mL容量瓶中 ,加甲醇溶解并定容至刻度。精密
吸取上述溶液 2, 4, 6, 8, 10μL点于 0. 5% CMC-
Na-硅胶 G薄层板上 ,按上述条件测定峰面积 ,并计
算得回归方程 Y = 18 369. 24+ 74 521. 41X , r=
0. 999 5。 结果表明 ,补骨脂素在 1. 6～ 8μg范围内
具有良好的线性关系。
稳定性实验: 精密吸取上述对照品溶液 ,按上述
条件测定峰面积。结果表明 ,补骨脂素在 4. 5 h内稳
定。
精密度实验:对同一斑点连续扫描 5次 ,峰面积
积分值的 RSD为 0. 72% ,同板峰面积的 RSD为
0. 89% ,异板峰面积的 RSD为 2. 24% 。
加样回收率实验: 5次平均回收率为 98. 96% ,
RSD为 1. 57%。
样品的含量测定:精密称取四神茶剂 5 g ,研匀 ,
用甲醇为溶剂索氏提取 6 h,提取液回收溶剂后 ,定
容于 50 mL容量瓶中 ,得样品供试液。 用定量毛细
管精密吸取样品供试液 6μL,点于 0. 5% CMC-Na-
硅胶 G板上 ,按上述条件展开 ,扫描测定其含量 ,结
果见表 1,其 95%置信区间为 0. 251～ 0. 261 mg /g。
表 1　四神茶剂补骨脂素含量
批号 测得值
( mg /g )
x-± s
(mg /g)
RSD
(% )
1 0. 254 0. 268 0. 246
0. 248 0. 264 0. 256± 0. 01 3. 91
2 0. 261 0. 254 0. 267
0. 249 0. 271 0. 260± 0. 009 3. 46
3 0. 244 0. 253 0. 259
0. 248 0. 247 0. 251± 0. 006 2. 39
4　讨论
4. 1　本茶剂制备工艺中 ,以药渣粗粉作支持剂 ,既
不同于目前市售的全生药型的袋泡茶 ,又不同于半
生药型袋泡茶 ,其释药速度快 ,生物利用度高 ,生产
成本低 ,能够即泡即饮。
4. 2　本制剂的另一特点是采用半仿生提取法提取 ,
能较好地体现中医治病的特点 ,充分发挥混合成分
的综合作用。
4. 3　本制剂对其主要组成药物进行了薄层鉴别 ,并
对其主要成分补骨脂素进行了含量测定 ,方法简单 ,
方便可行 ,结果准确可靠 ,能有效控制制剂质量。
参 考 文 献
1　胡稳恒 ,等 .中成药研究 , 1981, ( 9): 31
2　张　迪 .黑龙江中医药 , 1986, ( 6): 23
3　张兆旺 ,等 .中国中药杂志 , 1995, 20( 11): 670
4　奚念朱 ,等 .药剂学 . 北京:人民卫生出版社 , 1990: 157
5　谢秀琼 ,等 . 中药新制剂开发与应用 . 北京:人民卫生出版社 ,
1994: 74
( 1999-04-15收稿 )
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