全 文 ：W型 z T CI + 1天然澄清剂
在中草药制剂生产中的应用研究
J一东省粤北人民 医院药剂科( 韶关5 2 1 02 6 )卞益民 带
金燕辛
徐晓梅
黄 冬
赖水招
张 伟明
摘 要 研究了 w 型 Z T CI + 1天然澄清剂在八珍 口服液制备中的应用 ,并从指标成分 、 工艺 、 稳
定性和药理学等方面与水醇法进行了 比较 。 结果表明 , Z T C I + 1 天然澄清剂为一种新型精制中草
药液的澄清剂 。 可较好的保留中草药有效指标成分 ,在中草药制剂制备中可代替水醇法 。
关键词 天然澄清剂 中草药 制剂
目前在中草药制剂制备中普遍采用水提
醇沉工艺 (以下简称 “ 水提法 ” ) , 以除去杂质 ,
达到澄清药液的 目的 。近年来 , 对吸附澄清剂
的应用研究较多 。 我们采用天津南开大学开
发的 Z T C I + 1 天然澄清剂 (以下简称 ,’1 + 1
澄清剂 ” )与水提醇沉两法生产八珍 口服液 ,
并从指标成分 、 工艺 、 质量控制 、 稳定性和药
理学等方面进行对 比性实验研究 , 以确证 1
+ 1 澄清剂的效能 , 收到满意效果 。
1 实验材料
1
.
1 药品与试剂 : 1十 1 澄清剂 由天津南开
大学高分子化学研究所提供 (见封 2 ) ; 八珍
口服液由本院制剂室提供 ;芍药贰 由中国药
品生物制品检定所提供 ;葡萄糖对 照品为市
售品 ;氯仿 、 无水 乙醇等试剂均为 A R 级 。
1
.
2 仪器 : 高效液相色谱仪 (岛津 ) ; 7 5 0 0 型
紫外分光光度计 (上分厂 ) ;生物显微镜 (奥林
巴斯 ) ; I J 1 0 型粘度计 。
1
.
3 动物 : 小鼠 N IH 种系 , 大鼠 S D 种系 ,
均由 3 01 医院提供 。
2 方法与结果
.2 1 制备工艺
.2 .1 1 八珍 口服液 的处方 : 党参 、 白术 、 白
芍 、 北蔑 、熟地 、 获等 、 Jll芍 、 甘草 。
2
.
1
.
2 制备方法 :
党参、 白术 、 白芍等六味中药材竺竺兰争水提液竺曳-
当归 、 ) ,!枷 : 5%酒精鲤醇提液一坚丛冬二壁,
, 浓缩液 (1 : 1 )、 竺业燮九
}
二竺鲤鹦畔塑些醇
预处理液一鲤 )丝生澄清液二二斗调配液二二 ;
溶液卫竺卫生浓缩液 加燕馏水
过滤
调配液塑
一八珍口服 A液 (简称八珍 A液 ,每毫升含原生药 0 . 5 9 )一八珍口服 B 液 (简称八珍 B液 ,每毫升含原生药 。 . 5 9)2 . 2 定性分析
2
.
2
.
1 白术的薄层分析 : 吸取八珍 A 液 、 B
液各 10 m l 一 ,分别用正丁醇提取 3 次 ( 1 0 、 1 0 、
20 m I
J
)
, 合并提取液 , 蒸干正丁醇 , 残留物加
甲醇 1 m L 使溶解 , 作为供试品溶液 。 另取白
术原药材 2 9 ,加水煮沸 15 m in , 滤过 , 得滤
液约 15 m I J , 同上制成对照药材溶液 。 取上述
两种供试品和对照品溶液各 5 拜L ,分别点于
同一硅胶 G 板上 , 以甲苯 一醋酸 乙酷一甲酸 (5
: 1 0 : 1) 为展开剂 ,展开 、 取出 、 晾干 ,在紫外
光灯 ( 3 6 5 n m )下检视 ,供试品色谱与对照品
色谱相应的位置上显相 同颜色的荧光斑点 。
2
.
2
.
2 白芍的薄层分析 : 吸取八珍 A 液 、 B
带 A d d r e s s : B一a n Y im i n , D e p a r tm e n t o f P h a r m a e y
,
P e o p l e
, 5
H o s p i t a l o f Y u e b e i
,
S h a o g u a n
卞益 民 男 60 岁 ,大学本科 ,主任药师 , 专业研究方向为医院药学和中草药制剂 。 “ 复方半枝莲注射液治疗肝炎 ” , “ 病毒清 口服液的制备及其药效学研究 ” 及 “ 泌炎宁冲剂的制备及其药理学研究 ’ ,等科研成果 , 曾先后获广东省科学大会奖及广东省韶关市科技进步奖等多项奖励 。 1 9 9 2 年获政府特殊津贴 。
《中草药 》 1 9 98 年第 2 9 卷第 8 期 . 5 2 3 ,
液各 1 0 m L, 分别用饱和的正丁醇提取 3 次 ,
每次 20 m L ,合并正丁醇提取液用水洗 3次 ,
弃去水液 ,蒸干正丁醇 , 残渣加 0 . 5 m L 乙醇
使溶解作供试品溶液 。 另取芍药昔对照品 ,加
乙醇制成每毫升含 2 m g 的溶液 , 作对照 品
溶液 。 吸取上述两种供试品及对照品溶液各
3 拌L , 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 , 以氯
仿一醋酸 乙醋 一甲醇一甲酸 (4 o : 5 : 10 : 0 . 2)
为展开剂 , 展开 、 取出 、 晾干 ,喷以 5 %香草醛
硫酸溶液 ,供试品色谱中 , 在与对照品色谱相
应的位置上显相同的颜色斑点 。
.2 3 定量分析
.2 3
·
1 芍药昔的含量测 定 : 按文献川 , 精密
称取芍药昔约 1 m g 置 10 m L 容量瓶中 ,加
入 50 % 乙醇至刻度 , 溶解摇匀 ,精密吸取芍
药昔 标准液 , 用 50 %乙醇稀释成 0 . 01 拼g /
m 1
)一 .0 05 拼g /m L , 分别进样 10 拌L ,测得的
峰面 积 ( A x l o 一 5 ) 为纵坐标 , 芍 药 昔 浓 度
恤g扭L )为横坐 标 , 得 回归方程 : Y 一 7 . 1 又
1 0一 ` + 1
.
8 2 1X (
r = 1
.
0 0 0 0
, n 一 5 ) , 分别取八
珍 口服液各 10 拌L 进样 , 测得结果见表 1 。
2
、
3
.
2 多糖的含量测定 : 精密称取葡萄糖对
照 品按文献 〔` 〕方法用分光光度法在 49 0 n m
处测 得吸收度 , 绘制标准曲线 , 其回归方程
为 : Y = 1 0 5 . 0 3X 一 0 . 4 0 4 ( r = 0 . 0 9 9 5 0 , n =
5 )
。精密吸取八珍 A 液 、 B 液各 1 m L ,分别用
乙醇调含醇量 至 85 % , 搅拌 、 离 心 、 弃去溶
液 , 沉淀用乙醇洗涤多次至无色为止 , 加水溶
解沉淀 , 定容 5 m L 。 吸取八珍 A 、 B 液各 1 0
拌L , 加水 2 m L , 按上述方法在 49 0 n m 处测
定吸收度 , 按回归方程计算 ,结果见表 1 。
2
.
3
.
3 总氨基酸的含量测定 : 精密称取酩氨
酸对照品 , 用分光光度法 〔 2〕 ,在 5 70 n m 处测
定吸收度 , 以浓度和吸收度绘制标准曲线 ,其
回归方程为 : Y = 7 . 5 8又 2 9 . o 6 X ( r = 0 . 9 9 9 3 ,
n 一 5 ) 。精密吸取八珍 A 液 、 B 液各 1 0 0 拜L 于
25 m L 容量瓶中 , 加 2 %苟三酮溶液 1 m L ,
加水补充至 5 m L ,加 p H 8 . 04 磷酸盐缓冲液
l m L
,加水补充至 n m L ,沸水浴上加热 15
m in
, 冷却 ,加水至刻度 , 测得吸收度 , 按回归
.
5 2 4
.
方程计算含量 ,结果见表 1 。
2
.
3
.
4 总固体的测定 : 精密吸取八珍 A 液 、
B 液各 20 m L , 分别于 10 5 ℃干燥至恒重的
蒸发皿中 ,蒸干 , 然后在 10 5 ℃干燥 3 h ,取出
至干燥器中冷却 30 m in 称重 , 其结果见表
1
。
表 1 两种不同工艺生产的八珍口 服液成分比较
药品 芍药昔 总多糖 总氨基酸 总固体
( m g / l o m L ) (拌g / l o m L ) ( m g / 1 0m L ) (m g / 1 0m L )
八珍 A 液 5 . 2 6 7 5 . 7 4 7 · 8 5 10 7 · 8
八珍 B 液 3 . 0 4 3 0 . 5 8 5 . 4 5 ` 8 8 . 4 3一一 . . . . . . ~ ~ . . ~ . ~ .2 . 4 药理学实验2 . 4 . 1 两种工艺 的八珍 口服液对小鼠巨 噬细胞吞噬功能的影响 : 按文献 〔3〕方法 ,按表 2所示的药物和剂量进行实验 。结果显示 ,八珍
口服液均有显著增强巨噬细胞吞噬功能的作
用 。 见表 2 。
表 2 对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响
组别 剂量 动物数 吞噬率 ( % ) 吞噬指数
( g / k g ) (只 )
生理盐水组 0 . 2 2 5 1 0 2 3 . 9士 5 . 50 0 · 2 9 2士 0 · 0 7 1
八珍 A 液 5 1 0 4 9 · 3士 4 · 4 7 0 · 6 9士 0 · 0 7 0
八珍 A 液 1 . 5 1 0 3 6 . 8 5士 5 . 1 0 0 . 4 6 6士 0 · 0 7 8
八珍 B 液 5 1 0 4 4 . 8士 5 . 0 3 0 . 5 6 5士 0 . 0 6 0
八珍 B 液 1 , 5 1 0 3 1 . 6 5士 4 · 9 7 0 · 3 8 4士 0 · 0 54
八珍丸 2 . 5 1 0 4 5 . 9 5士 6 . 3 2 0 . 5 9 8士 o · 0 8 1
注 : 与空白对照 组比较全部 尸 < 0 . 0 01 。
2
.
4
.
2 两种工艺的八珍 口服液对失血性贫
血小 鼠 H b 和 R B C 的影响 : 按文献以〕方法 ,
按表 3 的药物和剂量进行实验 。 结果提示 ,八
珍 口服液均可使血虚小鼠症状有所改善 , 红
细胞数增加 ,血色素增高 。 结果见表 o3
2
.
4
.
3 两种工艺的八珍 口服液对气虚大鼠
血液流变学的影 响 : 按文献〔 , ,方法 ,按表 4 药
物和剂量灌胃给药 ,其游泳气虚模型和正常
对照组给注射用水进行实验 。 结果见表 4 。
实验结果提示 ,气虚模型组与正常对照
组相比 ,全血粘度及血浆粘度增高 ,红细胞电
泳时间延长 ,红细胞压积增高 ,表明气虚模型
成立 , A 、 B 口服液可使气虚动物全血粘度降
低 ,提示可改善动物气虚症状 , 有补气作用 。
对失血性贫血的小鼠 H b (g /L )和 B Re ( 1 1 2 0 /L )的影响
组别 剂量 失血前后降低差值
(g /k g )
0
.
2 2 5
表 3
动物数
(只 )H b RB C
给药前后增高差值
H b B RC
空白对照组
八珍 A液
八珍 A液
八珍 B 液
八珍 B 液
八珍丸
5
1
.
5
5
1
.
5
2 5
9 4
.
2士 1 4.7
6 4
.
7 土 1 4. 2
56
.
9士 18 .9
6 5
.
8 士 1 0.7
56
.
8 士 9 1 . 5
2 5
.
2士 1 4. 5
2
.
4 3士 0.7 2
2
.
7 2士 1 . 6 2
2
.
9 3士 1 . 5 5
2
.
38士 1 .1 4
2
.
3 3士 1 .1 5
2
.
4 3士 0.9 6
50
.
7 士 5. 5
6 6
.
2士 1 2. 5书 苍
59
.
2士 5. 5普 朴
9 5
.
9 士 6.9 件 长
6 5
.
3士 9 . 5
6 0
.
5士 1 0. 0卡
2
.
07士 0. 5 4
2
.
8 2士 0.9 5“
2
.
5 5士 0.1 4赞
2
.
7 3士 0. 6 0书
2
.
30土 0.7 1
0
.
7 7士 0. 68 书
O 0Cé 1上
,1卫.一
注 : 与空 白对照组比较 , ` 尸 < 0 . 05 ` , 尸 < 0 . 01 。
表 4 对气虚大鼠的血液流变学影响
组别 剂量
( g / k g )
动物数
( 只 )
全 血 粘 度 血浆粘度 血 沉
高 切 低 切
4
.
2 5士 0 . 3 7 “
5
.
7 7士 0 . 6 1
4
.
6 5士 0 . 3 3 普 爹
4
.
8 3士 0 . 7 0 哥 衡
4
.
6 9士 0 . 4 6 番 餐
5
.
0 1士 0 . 5 9 苍
4
.
6 6士 0 . 5 7 苍 件
5
.
3 2士 0 . 3 1 朴 蟹
8
.
4 3士 1 . 0 9
5
.
6 0士 0 . 4 8 “ 书
5
.
9 4士 0 . 7 8 “ 资
5
.
8 1士 0 . 6 6 苦 关
6
.
0 1士 1 . 0 2 “ 书
5
.
6 6士 0 . 8 7 ` 务
1
.
68士 0 . 2 3
1
.
7 5士 0 . 2 0
1
.
7 9士 0 . 3 3
1
.
6 9士 0 . 2 8
1
.
7 3士 0 . 1 9
1
.
6 6士 0 . 3 5
1
.
74士 O` 1 9
红细胞电泳
时间 ( S )
1 1 8
.
9士 1 9 . 1
1 1 9
.
4士 2 3 . 6
1 0 0
.
6士 2 5 . 7
1 1 0
.
2士 1 9 . 9
1 0 3
.
3士 1 8 . 8
1 1 2
.
8士 2 1 . 2
9 9
.
9士 1 7 . 0
红细胞压积
( % )
3 9
.
5士 5 . 5
4 5
.
7士 3 . 0
4 2
.
8士 5 . 6
4 5
.
0士 6 . 6
4 3
.
9士 4 . 9
4 5
.
9士 7 . 4
4 2
.
0士 4 . 7
3
.
0士 2 . 9
3
.
2士 1 . 9
2
.
4士 2 . 2
2
.
9士 3 . 2
2
.
7士 4 . 0
3
.
8士 3 . 8
3
.
0士 2 . 3
0OCé0
111
乙今Où勺óa10
:
气.51
一
se19`正常对照组
气虚模型组
八珍 A 液
八珍 A 液
八珍 B 液
八珍 B 液
八珍丸
注 : 与气虚模型组比较 , ’ 尸 < 0 . 05 ` ’ P < 氏 01 。
2
.
4
.
4 两种工艺八珍 口服液对小鼠免疫器
官的影响 : 按文献 〔3 ,方法 ,按表 5 的药物和剂
量灌胃给药进行实验 ,结果表明 A 、 B 口服液
使小鼠胸腺和脾脏的重量增加 ,提示对免疫
功能有增强作用 , 结果见表 5 。
表 5 对小鼠胸腺和脾脏的影响
组别 剂量
( g / k g )
0
.
2 2 5
动物数
(只 )
5
1
.
5
5
l 5
2
.
5
胸腺系数
( rn g / 1 09 )
1
.
8 1士 1 . 0
3 9
.
1士 2 . 8
2 7
.
4士 2 . 2
3 5
.
5士 2 . 2
2 4
.
4士 1 . 2
3 5
.
5士 2 . 0
脾脏系数
( m g / 1 09 )
3 9
.
4士 3 . 0
7 7
.
2士 3 . 2
5 7
.
9士 2 . 5
7 1
.
4士 2 . 4
5 4
.
4士 2 . 3
7 0
.
5士 2 . 5
门0111.1确生理盐水组
八珍 A 液
八珍 A 液
八珍 B 液
八珍 B 液
八珍丸
注 : 与生理盐水 比较 ,全部 尸 < 。 · 01 。
2
.
4
.
5 最大耐受限量的测定 : 取体重 18 9 一
2 2 9 的小 鼠 10 0 只 , 雌雄各半 , 随机分为 10
组 ,每组分别灌 胃给予不 同浓度的八珍 A 液
与八珍 B 液 , 给药后 观察 7 d , 小 鼠活动 良
好 ,无一死亡 , 每只小 鼠耐受量为 5 . 65 9 ,最
大耐受量倍数为 14 12 · 5倍 。
2
.
5 稳定性观察 : 将八珍 口服液 ( A 液 、 B
液 )灭菌处理 ,室温放置 3 个月 , 观察澄清度 、
色泽变化 ,结果制剂均稳定 , 澄 明 、 色泽无变
化 。
《中草药 》 19 9 8 年第 29 卷第 8 期
3 讨论
3
.
1 从定性 、 定量分析看 , 八珍 A 液 芍药
昔 、 氨基酸 、 多糖 、 总固体的含量明显高 于八
珍 B 液 , 证明 1 + 1 澄清剂不与药物有效成
分起反应 ,保证了制剂的疗效 。
3
.
2 药理实验证明 , 八珍 A 液对小鼠胸腺
和脾脏免疫功能有增强作用 ; 可使气虚动物
全血粘度降低 , 改善动物气虚症状 ,有补气作
用 ; 同时可使血虚小鼠症状有所改善 ,红细胞
数增加 ,血色素增高 ,并有明显增强 巨噬细胞
吞噬功能的作用 ,其作用优于八珍丸 ,与本品
临床疗效取得一致结果 ,确证了 1十 1 的良好
澄清效能 。
3
.
3 1 + 1 天然澄清剂属食品添加剂 ,安全 、
无毒 ,是人工合成絮凝剂的理想代替品 。
3
.
4 本研究表明 , 用 1 + 1 澄清剂在中草药
制剂生产工艺中代替醇沉 ,且澄清速度快 ,保
留了更多的有效成分 ,降低 了成本 ,缩短了生
产工艺 ,其制剂的稳定性优于水醇法 。但制备
中草药注射剂 , 我们认为最好配合乙醇沉淀
工艺 , 两者互补 ,澄清效果更佳 。
参 考 文 献
i 李 俊 , 等 . 中国药学杂志 , 1 9 9 1 ; 2 6 ( 5 ) : 2 80
.
5 2 5
·
23
4
吕武清 , 等 . 中成药 , 2 9 9 6 ; 1 8 ( 7 ) : l
李 奇主编 . 中药药理研究方法学 . 北京 : 人 民卫生出
版社 , 1 9 9 3 : 3 1 5
崔景明 ,等 . 中成药 , 1 9 9 7 ; 1 9 ( 3 ) : 3 2
5 徐淑云主编 . 药理实验方法学 . 北京 : 人 民卫生出版
社 , 1 9 8 2 : 1 0 0 3
( 1 9 9 8
一
0 3
一
2 4 收稿 )
A P P l i e a t i o n o f M o d e l VI Z T C I + 1 N a t u r a l C l a r i f y i n g A g e n t i n t h e P r e P a r a t i o n o f
C h i n e s e T r a d i t i o n a l H e r b a l D r u g s
B i
a Y im i n
,
X
u
X i
a o m e i
,
L a i S h
u iz h
a o , e t a l
.
( D
e p a r t m e n t o f P h a r m a e y
,
P e o p l e
, 5 H o s p it a l o f Y u e b e i
,
S h
a o k u a n 5 1 2 0 2 6 )
A b s t r a c t T h e a p p l ie a t io n o f M
o
d
e
l VI Z T C I + 1 n a t u r a l e la r i f y i n g a g e n t i n th e p r e p a r a t io n o f B a z h e n
o r a
l l iq
u id w
a s s t u d ie d a n d e o m p a r e d w i t h w a t e r
一 a
l
e o
h
o
l
e x t r a e t i n g m e t h o d a s t o t h e p r e p a r a t io n p r o e e d u r e
y ie l d
, s t a b i li t y a n d p h a r m a e o l o g y o f t h e s p e e if i e d a e t iv e p r in e ip l e s
.
T h e e x p e r im e n t a l r e s u l t s in d ie a t e d t h a t
M
o
d
e
l VI Z T C I + 1 n a t u r a l e la r if y i n g a g e n t e o u l d b e u s e d a s a n e w e l a r i f ie r f o r e l a r if y in g li q u id s o f C h in e s e
t r a d i t i
o n a l h e r b a l d r u g s
.
T h
e m e t h o d e o u ld r e t a in t h e s p e e i f ie d a e t iv e e o m p o n e n t o f C h i n e s e t r a d it i o n a l h e r b a l
d
r u g s a n d a n a l t e r n a t i v e fo r t h e p r e p a r a t i o n o f C h i n e s e t r a d i t io n a l h e r b a l d r u g s
.
K
e y w o r d s n a t u r a l C la r if y in g a g e n t C h i n e s e t r a d i t io n a l h e r b a l d r u g s
G C 法测定中药婴粟壳中吗啡 、 可待因和婴粟碱的含量
上海市药品检验所 ( 2。。 2 3 3) 季 申 米 王 柯
摘 要 采用 G C 法测定中药婴粟壳中吗啡 、 可待因和婴粟碱的含量 。 色谱柱以 1 . 5 % O V 一 17 为固
定液 ,柱温从 21 5 C 程序升温至 26 5 C , FI D 检测器 。 实验结果表明吗啡 、 可待因 、 婴粟碱在一定范
围内线性关系良好 , 相关系数分别为 0 . 9 9 9 1 、 1 . 0 0 0 、 。 . 9 99 旧 内精密度为 2 . 3 % 、 .2 2% 、 .1 5 % ;
日间精密度为 5 . 0 % 、 6 . 2 % 、 6 . 6% ;加祥回收率分别为 1 02 . 8% 、 101 . 4% 、 1 0 . 4 % 。 方法准确可靠 ,
重观性好 。
关键词 婴粟壳 G C 法 吗啡 可待因 婴粟碱 含量测定
婴粟壳为婴粟科植物婴粟 尸 a P a ve 二 so m -
n
ife ur m L
. 的干燥成熟果壳 , 具有 敛肺 、 涩
肠 、 止痛的作用 , 收载于 中国药典 1 9 9 5 年版
一部 , 但无含量测定项 目 , 由于本品久服易成
瘾 ,仅有鉴别项难以控制其质量 。虽然有关阿
片类成分的分析报道有 u v 、 H P L C 、 G c 法
等〔` 〕 ,但对成分含量甚少的婴粟壳进行几种
成分的同时测定未见报道 。 为此 ,我们研究建
立了用 G C 法同时测定婴粟壳中吗 啡 、 可待
因 、 婴粟碱含量的方法 。 实验结果表明 ,该法
操作简便 , 回收率高 ,结果可靠 ,重现性好 。
1 仪器与试药
1
.
1 仪器 : 岛津 G C 一 15 A 气相色谱仪 , 氢火
焰离子化检测器 , C 一R 4 A 数据处理机 。
1
.
2 试药 : 对照品磷酸可待因 ( C D 一 H 3 P O 4 ) 、
吗啡 (M F ) 、 盐酸婴粟碱 ( Y S 一 H CI ) , 均由中国
药品生物制品检定所提供 。 样品收集于各地
药材公司 。 试剂均为分析纯 。
2 方法与结果
2
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1 色谱条件 : 色谱柱 : O V 一 17 为固定液 ,
涂布浓度 1 . 5 % , 玻璃柱 (2 m ) 。 进样 口温度
为 27 0 ℃ ,检测器温度 2 80 ℃ ,柱温从 21 5 ℃
A d d r e s s
:
J i S h
e n , S h a n g h a i M u n i e ip a l I n s t i t u t e fo r D r u g C o n t r o l
,
S h a n g h a i
5 2 6
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