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小檗属植物中的生物碱成分测定及资源利用



全 文 :小聚属植物中的生物碱成分测定及资源利用
华西医科大学 药学院天然药物 化学室 (成都 6 1 0 0 4 4)
中国协和 医科大学药用植 物研究所
中国 医学科学院
吕光华 ‘
王立 为 陈建 民 肖培根
摘 要 应用 H PL C 法测 定了 17 种 7 变种小 聚属植物 中的尖刺碱 (A ) 、小 璧胺 (B ) 、异 汉防 己碱 、
非 洲防 己胺 (D ) 、药根碱 (E ) 、 巴马亭 (F ) 、小 梁碱 (G ) 。 其 中对 2 种 1 变种植物 的根 、根皮 、根木 、茎
皮 、茎木 和 15 种 6 变种植 物根 中的 B 、E 、F 、 G 进 了定 量分析 , 对 A 、C 、D 进行 了定性分析 。 通 过分
析生物碱在该属植物中的 分布情况 , 讨论 了小璧属药 用植物 资源 的利用 , 建议 : l 、扩大药用植 物种
类 , 充分 利用 自然植物 资源 ; 2 、扩大药用部位 ; 3 、多种有效成分提取及综合利用 。
美锉词 小 梁属 生物碱 含量测定 高效 液相色谱法 资源利用
小聚属 (B e rb er i: l一 )植物 习称 为 “三棵 位 ; 3 、 提取多种有 效成分 , 综 合利用 植物 资
针 ” , 在我 国约有 2 0 0 多种 , 分 布广 、 资源 丰 源 。
富 。主要以根 、 根皮人药 , 用于治疗多种疾病 ; 1 H PL C 法测定 17 种 7 变种小聚属植物中
有的种用于提取“黄连素 ” 。 该属植物中的生 7 种生物碱成分
理活性成分是节基异喳琳生物碱 。 为了综合 1 . 1 仪器与试药 : W at er S 高效 液相色谱仪
利用该属植物资源 , 评估其药用价值 , 我们测 (5 1 0 型泵 , 4 90 E 检测器 , U 6k 进样器 , B as e -
定了该属 植 物 中 的 尖 刺 碱 (o x ya ca nt hi ne , hne 8 10 色谱工作站 ) 。 盐酸小聚碱 、盐酸 巴
A )
、 小 璧 胺 (b er b a m in e , B ) 、 异 汉 防 己 碱 马亭 、盐酸药根碱 、非洲防己胺 由中国药品生
(is ot et ra
n dr in e
,
C )( 以 上系双节基异唆琳类 物制品检定所提供 ;小璧胺购于 中国科学院
生物碱) 、非洲防 己胺 (c ol u m b a m ine , D ) 、药 林业土壤研究所 , 经重结 晶纯化 ; 尖刺碱 、 异
根碱 (ia t r o r r hiz in e , E ) 、 巴 马 亭 (p a lm a t in e , 汉防己碱 由中国医学科学院药用植物研究所
F )
、 小粟碱 (b er b er in e , G )( 以上 系原小 璧碱 提供 。植物标本和样品由作者采集 , 中国科学
类生物碱)7 种生物碱成分 。 曾报道 了 “改变 院植物研究所李振宇研究员鉴定 。 乙睛为色
检测波长 H PL C 法测定 小聚属植 物根 中的 谱纯 , 甲醇和 磷 酸二氢钾 为分析纯 , 去离子
生物碱 ”的方法 , 并测定 了 5 种该属植物根中 水 。
的这 7 种成分川 。 笔者报道应用此方法对从 1 . 2 色 谱 条 件 : 色 谱 柱 : 拌一B o n d aP a k
四川 、重庆 、北 京三省市采集 的 17 种 7 变种 phe n yl ; 流动相 : 。. 02 m ol /I 碑 磷酸二 氢钾 一 乙
小粟属植物中的上述 7 种生物碱成分的测定 睛 (7 : 3) ;检测波长 : 固定波长用 2 03 n m , 变
结果 。其中对 2 种 1 变种植物根 、根皮 、 根木 、 波长 O一 1 0 m in 为 2 0 3 n m , 1 0 一 2 5 m in 为
茎皮 、 茎木和 15 种 6 变种植物根 中的 B 、 E 、 3 4 6 n m ;流速 : 1 . 0 m L / m in ;柱温 : 室温 。色谱
F

G 进行 了定量分析 , 对 A 、 C 、 D 进 行 了定 图见文献川 。
性分析 。结合文献资料 , 通过分析生物碱在该 1 . 3 4 种定量生物碱 的线性 范围及 回 归方
属植物 中的分布情况 , 讨论了该 属药 用植物 程 : 分别精取干燥至恒重的小璧胺 、盐酸药根
资源的利用 问题 , 建议 : 1 、 扩大药 用植物 种 碱 、 盐 酸 巴 马亭 、盐 酸 小 粟 碱 4 , 93 、 4 . 98 、
类 , 充分利 用 自然植物 资源 ; 2 、 扩大药 用部 5 . 0 4 、 5 . 05 m g 于 25 m l, 量瓶 中 , 甲醇溶解 ,

A d d r e
s s : L 一1 G u a n g h u a , C o lle g e o f Ph a r m a ey , W e s t Ch in a U n iv e r s ity o fM e d ie a l S e ie n e e s
,
C he n g d u
·
4 2 8
-
定容 , 制成标准 品贮备液 。再分别吸取贮备液
0
.
1

0
.
3

0
.
5

0
.
8

1
.
0

1
.
5

3
.
0

5
.
O m L 于
10 m l
, 量瓶中 , 加甲醇定容 , 制成 9 个浓度梯
度的标准液 ;依次吸取 1 0 拜L 进样 , 用 2 0 3一
34 6 n m 变波 长检 测 ; 以 峰 面积 (X ) 为横 坐
标 , 溶质量 (Y )为纵 坐标 作图 , 得 4 条直线 。
其回归方程 、相关系数和线性范围见表 1 。
表 1 4 种分析 生物碱定 , 的 回归方程和线性范围
成分 回归方程 相关系数 : 线性范围(朋)
小桑胺(田 Y = 1 . 109 x lo 一 S X 一 4 . 78 9 0 . 9993 (, = 7 ) 0 0 19一 0. 296
药根碱(E) Y = 2 . 359x 飞。一 S X + 1 . 94 1 0 . 9999 (: = 9) 0 . 0 19一0 . 996
巴马亭(F) Y = 2 386x l0一 S X 一 3 . 450 0 . 99 , 8 (: = 9 ) 0 . 020 一 x. Q0 8
小巢碱(G ) y= 2 . 376 X IO一 S X 一 3 . 037 0 . 9998 (, = 9) 0 , 02 0~ 1 . 010
1
.
4 样品液的制备 : 精密称取干燥样品粉末
0
.
1 9 于 5 0 m L 磨 口 三角 瓶 中 , 加 甲醇 20
m L
, 称 重 , 浸泡 12 h , 超声 提 取 6 0 m in , 称
重 , 补足损失的 甲醇 , 摇匀 , 密闭 , 静置 。取 5 . 0
m L 上清液于 离心管 中 , 密闭 , 离心 , 取 2 . 0
m L 于量瓶 中 , 即为待测样品液 。
1
.
5 精 密度试验 : 吸取一样 品液 10 拼L 进
样 , 2 0 3一 3 4 6 n m 变波长检测 , 重复进样测定
10 次 。 根 据测 出的样 品液 中各成分 的浓度
印g / m L )计算相对标准偏差 R S D (环) : 小璧
胺 0 . 2 5 8 , 药根碱 0 . 8 4 0 , 巴马亭 0 . 7 5 4 , 小璧
碱 1 . 2 0 6 。
1
.
6 加样回 收率试验 : 精密称取 0 . 05 9 黄
芦木根的干燥粉末 5 份于 50 m L 磨 口 三角
瓶 中 , 其 中 4 份 (另 1 份作对照 )分别加人标
准品贮备液 0 . 5 , 1 . 0 , 2 . 0 , 3 . 0 m L , 混匀 , 自
然条件下挥干 ;按样 品液的制备项操作 ;分别
吸取 10 拜L 进样 , 用 2 03 一 3 46 n m 变波长测
定 , 每份重复 3 次 ;计算每一份样品中 4 种定
量生物碱的回 收率 , 再计算 出 4 份样 品中同
种生物碱 的回收率平 均值 (% ) (尺S D % ) : 小
梁胺 9 9 . 2 (1 . 9 3 ) , 药根碱 9 9 . 8 (1 . 3 8 ) , 巴马
亭 10 0 . 5 (0 . 9 6 ) , 小聚碱 9 9 . 5 (2 . 0 1 ) 。
1
.
7 样 品分析 : 按样 品液 的制备项操作 , 吸
取 1 0 拌L 进样 , 用 2 0 3一 3 4 6 n m 变波长检测 ,
重复一次 。 以峰面积外标法定量 。 对成分 B 、
E

F

G 进行了定量分析 , A 、 D 定性分析 。 再
《中草药》1 9 9 9 年第 3 0 卷第 6 期
吸取 1。 拜L 进样 , 用 2 0 3 n m 固定波长检测 ,
得到各样品的特征图谱 , 并定性分析成分 C 。
对小聚属 2 种 1 变种植 物根 、根皮 、根木 、茎
皮哥茎木和 15 种 6 变种植物根中 7 种生物碱
成分测定结果 , 见表 2 、 3 。
2 小聚属药用植物资源利用
小聚属 是小聚科 中最大 的一属 , 约 5 0
种植物闭 , 我国约有 20 0 种 。 从化学成分看 ,
该属植物 中含有多种节基异喳琳生物碱 , 对
其 它类 型的成分报道较少〔3一 ’〕, 在我们测定
的植物 中也有一些生物碱含量高的种类 (见
表 2 , 3 ) 。 从药用价值看 , 该属多种植物的根 、
根皮 、 茎 、茎皮 、叶或果实及其制剂在国内外
很多地区人药 [s. 8 一 ‘。: 。
对小聚属药用植物资源的利用 , 我们建
议 : ¹ 扩大药用植物种类 , 充分利用 自然植物
资源 : 从我们研究的结果和文献资料分析 , 同
属中还有不少植物 中的主要有效成分含量也
很高 , 这些植物应该利用起来 , 直接作药材用
或作为提取药用成分的原料 。 如秦岭小粟 B .
c irc u m s t e r ra ta S e h n e id
. , 黑 果 小 聚 B . h e t -
e r oP o d a S e h r e n k
, 壕 猪 刺 B . ju lia n a e
S e hn e id
. , 华 西 小 璧 B . : ilv a 一 ta ro u c a n a
S e h n e id
. , 深 黄小聚 B . a t ro c a rP a S e h n e id . ,
长柱小聚 刀 , le mP e嗒 i a n a A h r e n d t 等 。
表 2 2 种 1变种小梁属植物 不同部位中
7 种生物碱分析结果 ( % )
植物名称及采集地 部位 A B C D E F G
B erbe ri s p
o ire t iis e h n e id
. 根 一 1. 59 + 0 . 52 + 0 . 22 0 , 7 5
(细小梁 , 北京药植所) 根皮 一 8 . 45 + 2 . 14 + 0 . 32 2. 24
根木 一 0 . 04 + 0 . 10 + 0 . 10 0 . 32
茎皮 一 0 . 10 + 0 . 55 一 O‘ 0 1 0 . 22
茎木 一 士 十 0 . n 十 0 . 18 0 . 25
B
. 卯 g , e iP a i , 11 Sc h n e id . 根 + 0 . 08 + 0 . 28 + 0 . 0 6 1. 0 0
v a r
. o m e ie ns is Sc h n o id
. 根皮 + 0 . 74 + 0 . 99 + 0 . 26 2. 9 4
( 四川峨眉山 ) 根木 一 士 + 0 . 0 7 一 0 . 15 0 . 42
茎皮 + 0 . 55 + 1 . 08 + 0 . 34 2 . 5 9
茎木 一 一 十 0 . 07 一 0 . 01 0 . 34
B
. s i m u la , : Se hn e id
. 根 一 0 . 08 一 0 . 12 + 0 . 0 4 0 . 6 5
( 四川峨眉山 ) 根皮 一 0 . 43 一 0 . 74 + 0 . 20 2 . 42
根木 一 0 . 03 + 0 . 0 6 一 0 . 0 2 0 . 28
茎皮 一 0 . 09 一 0 . 53 + 0 . 16 1 . 5 6
茎木 一 0 . 04 + 0 . 06 + 0 . 0 3 0 . 39
· 429
·
注 : + : 检侧到该 成分 , 未定 量 ; 一 : 未检侧 到该成分 ; 士 : 含
量低于 0 . 01 %
º扩大药用部位 : 同一植株 , 各部位中有
效成分的分布 、含量有一定差别 , 从生物碱的
含量上看 , 大多数植物以根皮 中含量最高 (在
皮部又 以 内皮层含量最高 [6] ) , 茎皮次之 , 然
后是 根木部 、茎 木部 , 地下 部分高 于地上部
分 。从植株产量看 , 茎皮和茎的产量超过根和
根皮 , 应加 以利用 。
» 提 取多种有 效成分综合 利用植 物资
源 : 在以该属植物为原料提取某一成分时 , 应
考虑其它有效成分在该原料 中的含量 , 有选
择地将这些成分提取出来 , 综合利用该植物 。
致谢 : 重庆市南川 药物种植研究所刘正
宇老 师 、 四川 省 医药学校 阂伯清老师协助采
集标本和样品 。 中国药品生物制品检定所涂
国士研究员赠送非洲 防 己胺对照品 。
裹 3 15 种 6 变种小梁目植物根中 7 种生物碱分析结 果 ( % )
植物名称
B e r be ri s a m o e n a D u n n v a r
.
u m 加llifl o r a A hre n dt
B
. a 二u re n si : R u p r . ( 黄芦木 )
B
.
a tro e a r 户a Sc h n e id . (深 黄小粟 )
采集地 D E F G
四 川理塘
北京药植所
四川峨眉 山
重庆南川
十 士 一
+ 0
.
6 0 一
+ 0
.
8 4 +
一 O。 0 6 一
()

49
0

15
0

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0

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0

48
3

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1

9 0
3
.
42
+2
内心0
‘L工0口互4凌吮.⋯1人0
重 庆南川 一 0 . 0 9 + 0 。 20 + 0 . 4 2 2 。 14
四川康定
重 庆金佛 山
北京 药植 所
+ 0
.
30 一
一 1 . 00 一
一 0 . 6 4 +
0
.
17
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.
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0
.
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l

40
2

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.
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.
8 5
1

38
1
.
33
+十Q”OOt了8r,J咋沙左工叮诊110口月了八J, .孟连孟乙O庄工.⋯n曰00十O乙八乃4,J勺寸qU卜注月几乃.3忍士01C以0O乙+十一
B
.
a t r o c a rP
a S e h n e id
.
v a r
.
s u bi n t e g ra A h r e n d t
B
.
d ia Pha n a M a x im
·
v a r
·
ta c 六ie , s行 A h r e n d t ( 康定小聚 )
B
.
fa ll
a e io s a S e h n e id
.
( 金山小梁 )
B
.
fl o ri 撇 n d a W a ll. e x G . D o n
B
. 邵卯eP a i刀兹 S e h n e id . v a r .
la n e e ifo lia A h r e n d t (蓝 果小 粟 )
s u 加v a ta Sc h n id . (瓦屋 小粟 )
B
. 人e n ry a , a S e h n e id . ( 巴东小粟 )
B
.
h e t 巴阳户s钻 A h r e n d t
召 . 1帅 e 己ita S e h n e id . (南岭小架 )
B
.
lioP hy ll
a Sc h n e id
.
召 , Pot a n i n i 入4 a x im , (少齿小粟 )
B
.
s ilv a
一 ta ro u c a , a Sc h
n e id (华西小架 )
B
.
s t ie br it z i a n a Sc h n e id
.
B
.
t h“ , 加叮11 D C . ( 日本小粟 )
B
.
t h u ”加叮11 D C . v a r ·
a t r oPu rP
u re a C h e n a u lt (紫茎小果 )
B
.
v a lid a ( Sc h n e id ) S e hn e id
.
B
.
ve ~
c u Zo , a H e m s l
.
(虎枝小粟 )
B
.
w il son a e H e m s l
.
(金 花小果 )
四川 峨眉山
重庆金佛山
重庆南川
四 川峨边
重庆金佛山
四 川茂县
四 川茂县
四 川峨眉山
四川理塘
北京药植所
0
.
3 4
0

1 7
+ +北京药植所
四 川峨眉山
四 川峨眉山
四 川峨眉山
1
.
4 7 +
一 +
0
.
1 6 一
0
.
0 1 十
0

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,
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.
0 8 1
.
7 3
0 3 0 1
.
9 8
0
.
2 4 1
.
9 4
注 : + : 检测到该成分 , 未定 量 , 一 : 未检 测到该成 分 ; 士 : 含量低于 0 . 01 肠
参 考 文 献
吕光华 , 等 . 药学学报 , 19 95 , 3 0( 4) : 28 0
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T e r r y R S
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8 肖培根 , 等 . 植物分类 学报 , 1 9 7 4 , 12 ( 4 ) : 3 8 3
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社 . 1 9 9 5 : 附录 2 2
1 0 中国医学科学 院药 物研究所等 . 中药志 . 第一 册 .
北京 : 人 民卫生 出版社 . 19 93 : 2 78
( 1 9 9 8一 0 4

2 5 收稿 )
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4 3 0
-