全 文 ：无抗小鼠心律失常的作用。 在离体豚鼠乳头肌实验
中 ,与 A、 B、 D相比 , C增加至 5倍浓度仍无影响心
肌电生理的作用。因此 ,认为山茱萸中的总苷不具有
抗心律失常活性。B中主要含总有机酸成分 ,经分析
检测总有机酸含量达到母液的 93. 8% ,说明总有机
酸在提取过程中未有明显损失 ,其在离体和整体均
表现为显著的抗心律失常效应。因此 ,可以确定山茱
萸中的总有机酸具有抗心律失常活性。令人意外的
是 D (即残余液 )具有肯定的抗心律失常作用 ,在离
体乳头肌具有延长动作电位时程和增大静息电位绝
对值 (更负 )的作用。说明 D中含有高效的微量抗心
律失常活性物质 ,这种物质可被乙酸乙酯所萃取 ,但
是不能溶于正丁醇。对此种成分还需采用制备分离
和高精度的检测手段 (如液-质联用技术 )等才能进
一步证实。在本文中暂且将这种未知成分定名为 X
成分。
3种提取液抗心律失常的效应强度顺序为 ,总
提取 > X成分 > 总有机酸成分 (抑制率分别为
65%、 60% 和 55% )。延长动作电位时程的强度顺
序与前者相同 ,亦为总提取物> X成分> 总有机酸
成分。一个有趣的现象是 ,在离体心肌实验中 , A延
长 APD50和 APD50的净值 (药后值 -药前值 )为 39
和 36 ms; D为 30和 28 ms;而 B为 8和 7 ms。 D
与 B的相加值几乎与 A相等 ,说明 A的效应是 B
与 D相加之结果。 但是 ,在整体动物的抗心律失常
实验中 ,却没有得到近似的结果。这可能与整体动物
实验中药物的效能有关 ;例如 ,当我们将 A增加剂
量至 4. 4 g /kg ( 2倍 )其抑制室颤率仅由 2. 2 g /kg
剂量的 65% 提高到 70% ,并非提高到 100% 。 因
此 ,在整体实验中 ,无法得到 B与 D相加的结果。
药效学及心肌电生理实验结果表明 ,抗心律失
常作用可能与延长心肌动作电位、减慢自律性和增
大静息电位绝对值有关 ,离体心肌电生理实验结果
支持整体药效学实验结论。研究结果表明 ,山茱萸提
取液具有十分明显的抗心律失常作用。 山茱萸提取
液抗心律失常的有效部位为总有机酸和一种未知的
微量成分 ,总苷类成分不具有抗心律失常活性。但其
有效成分和作用机制的研究还有待于进一步进行。
参考文献:
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755.
消瘀片及其组分对动脉粥样硬化兔 ET-1和 NO影响的比较
谢梅林 ,顾振纶 ,朱路佳 ,陆　群⒇
(苏州中药研究所 ,江苏 苏州　 215007)
摘　要: 目的　探讨消瘀片组方的合理性。方法　采用动脉粥样硬化兔模型 ,观察消瘀片及其组分对体内 ET-1和
NO含量的影响。结果　消瘀片对降低血浆和血管壁组织中 ET-1含量 ,增加血清和血管壁组织中 NO含量均较其
相应组分的丹参水提物或山楂醇提物更明显。 结论　丹参水提物和山楂醇提物合用后 ,对降低粥样硬化兔体内
ET-1和增加 NO含量具有明显的协同作用。
关键词: 消瘀片 ;丹参 ;山楂 ;内皮素 -1;一氧化氮
中图分类号: R286. 26　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 1007 04
·1007·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2001-05-17基金项目:香港保健协会资助项目 ( No. 960086)作者简介: 谢梅林 ( 1958-) ,男 ,江苏无锡市人 ,苏州大学副教授 ,医学博士 ,从事心血管药理学研究。 Tel: 0512-5190599, E-mail: sz zys
@ publicl. s z. js. cn
Comparison of effects of XIAOYU TABLETS and its constituents on
endothelin-1 and nitric oxide in atherosclerotic rabbits
X IE M ei-lin, GU Zhen-lun, ZHU Lu-jia, LU Qun
　　 ( Suzhou Institute o f Chinese Ma teria Medica, Suzhou Jiang su 215007, China)
Abstract: Object　 To determine the ra tionali ty o f prescription o f XIAO YU T ABLETS. ( Tablet fo r
the elimina tion o f blo od stasis ) . Methods　 The ef fects of X IAOYU TABLETS and its individua l con-
sti tuents on endothelin-1 and ni tric o xide in atherosclero tic rabbi ts w ere observed and compared. Results　
X IAOYU T ABLETS show ed st ronger actions than i ts individual consti tuents ( ex t ract of Radix Salviae
Milt iorrhizae o r Fructus Crataegi ) in decreasing the contents of endo thelin-1 in plasma and atherosclero tic
v essel wall and increasing the contents o f nit ric o xide in serum and athero sclero tic v essel w all. Conclusion
　 The combine use of Radix Salviae Miltiorrhizae and Fructus Crataegi ex tracts show ed an obv ious syner-
gistic ef fect on reduction o f endo thelin-1 and elev ation of ni t ric o xide in atherosclero tic rabbi ts.
Key words: XIAO YU TABLET S; Radix Salv iae Milt iorrhizae; Frutus Crataegi; endo thelin-1; ni tric
o xide
　　消瘀片由丹参 Salv ia mil tiorrhiza Bge. 提取物
和山楂 Crataegus pinnati f ida Bge. 提取物组成。近
年研究表明 ,丹参和山楂均具有明显的调节血脂和
抗动脉粥样硬化作用 [1, 2 ] ,为探讨丹参和山楂提取物
组成的复方制剂是否对抗动脉粥样硬化会有更强的
作用 ,本研究以粥样硬化兔为模型 ,比较消瘀片及其
组分对兔体内内皮素 ( ET) -1和一氧化氮 ( NO)水
平的影响。
1　材料和方法
1. 1动物:雄性新西兰兔 ,体重 2～ 2. 5 kg,分笼喂
养 ,经 2周检疫期及实验室基础饲料适应性喂养后
进行试验。
1. 2　药物和试剂: 消瘀片 ,丹参水提物和山楂醇提
物均由太平保健药业 (蛇口 )有限公司提供 ,丹参水
提物中含丹参甲素的含星不低于 0. 9% ,山楂醇提
物中含山楂总黄酮的含量不低于 1. 2% 。临用时用
蒸馏水配至所需浓度 ;胆固醇为南京生物化学制药
厂产品 ;猪油为市售产品 ; 125 I-ET-1放免测定试剂
盒 , NO代谢产物硝酸盐测定试剂盒为北京东亚免
疫技术研究所产品 ; L-精氨酸和还原型辅酶 Ⅱ
( N ADPH) 四钠盐由上海伯奥生物科技公司提供 ;
钙调蛋白 ,盐酸萘乙胺 ,黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤
均为 Sigma产品 ;四氢生物喋呤为 ICN公司产品 ;
其它试剂均为国产分析纯。
1. 3　实验仪器:内切式组织匀浆机 ( ZS83-1型 )为
浙西机械厂产品 ;高速台式离心机 ( TGL. 16G)为
上海医用分析仪器厂产品 ;分光光度计 ( 721型 )由
上海第三分析仪器厂生产 ;放射免疫 γ-计数仪
( SN-682B型 )为上海核福光电仪器有限公司产品。
1. 4　兔腹主动脉粥样硬化模型复制及实验分组:按
我室建立的方法 [3 ]复制兔腹主动脉粥样硬化模型 ,
将已形成腹主动脉粥样硬化兔 24只随机分为 4
组 ,即动脉粥样硬化组:喂正常饲料 ;消瘀片组:在正
常饲料中拌入消瘀片每天 0. 32 g /kg;丹参提取物
组: 在正常饲料中拌入丹参水提物每天 0. 112
g /kg;山楂提取物组: 在正常饲料中拌入山楂醇提
物每天 0. 208 g /kg;另加一组伪手术对照组 ,每组 6
只 ,连续给药 16周。
1. 5　血液样品处理及指标测定: 分别取给药前 ,给
药后 6和 12周时兔耳缘静脉血 3 mL,其中 1 mL
注入 10% EDT A-Na2溶液 15μL和抑肽酶 20μL
的试管中 ,混匀后离心 ,吸取上层血浆置另一试管
中 ,采用非平衡法 ,按试剂盒说明书在 γ-计数测定
仪上测定血浆中 ET-1的含量 ;另外 , 2 mL血液置
玻璃试管中 , 37℃温育 30 min后离心 ,吸取上层血
清按 NO测定试剂盒说明书操作测定血清中的 NO
含量。
1. 6　血管组织样品制备及有关指标测定:取给药至
16周时兔腹主动脉 ,用 PBS洗去血迹 ,滤纸吸干后
称重 ,按 5% 加入醋酸溶液 ( 1 mol /L ) ,略作碾磨 ,
然后在 100℃ 水浴中煮沸 10 min,室温冷却后匀
浆 ,再经 3 000 r /min离心 15 min后 ,取上清液并
用 PBS稀释 10倍后 ,按试剂盒说明书在 γ-计数测
定仪上测定 ET-1的含量。用事先准备好的冰浴 pH
7. 4 Tris缓冲液 ( 50 mmol /L )冲洗兔腹主动脉 3
次 ,再用虹膜剪刀剪碎后加适量同上 Tris缓冲液 ,
在冰浴中匀浆 ,然后 1 000 r /min离心 30 min,取上
清液后则分别按试剂盒说明书方法测定 NO和王
氏方法 [4 ]测定一氧化氮合酶 ( NOS)的活性。 1 mg
蛋白质在酶反应中 1 min产生的 NO2-量表示血管
·1008· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
壁组织中的 NOS活性。血管壁组织中的蛋白含量
按改良 Low ry法 [5 ]测定。
2　结果
2. 1　对兔血浆 ET-1含量的影响: 在给药前 ,腹主
动脉粥样硬化兔的血浆 ET-1水平明显较正常对照
组为高 ( P < 0. 05) ,在给动脉粥样硬化兔服用消瘀
片后 6～ 12周 ,其血浆 ET-1含量明显降低 ( P <
0. 05) ,但单用丹参提取物或山楂提取物后对血浆
ET-1水平仅有降低趋势 (表 1)。
表 1　消瘀片及其组分对动脉粥样硬化兔血浆 ET-1
含量的影响 (x± s ,n= 6)
组　别 ET-1 ( pg /m L)给药前 给药后 6周 给药后 12周
正常对照 150± 30 156± 32 99± 26
粥样硬化 212± 67* 244± 74* 189± 27* *
消瘀片 233± 101* 163± 52△ 158± 23△
丹参提取物 215± 58* 176± 63 161± 67
山楂提取物 204± 62 171± 80 156± 40
　　与正常对照组相比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
与粥样硬化组相比较: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01 (下同 )
2. 2　对兔血清 NO含量的影响:粥样硬化兔的血
清 NO水平较正常对照组显著降低 (P < 0. 01)。给
消瘀片治疗 6周后 ,可使 NO含量显著增加 ,与粥
样硬化组相比较 ,差异非常显著 ( P < 0. 01) ,连续给
消瘀片治疗 12周后 ,则血清 NO含量可恢复至正
常水平。丹参提取物对血清 NO含量未见有明显影
响 ,而山楂提取物组兔血清 NO含量在给药 6周时
已有明显增加 , 12周时接近正常水平 (表 2)。
表 2　消瘀片及其组分对动脉粥样硬化兔血清 NO
含量的影响 ( x± s ,n= 6)
组　别 NO (μmol /L)给药前 给药后 6周 给药后 12周
正常对照 53± 8 30± 4 31± 8
粥样硬化 33± 11* * 9± 3* * 21± 8*
消瘀片 36± 10* * 23± 8△△ 34± 7△
丹参提取物 34± 7* * 10± 5 22± 10
山楂提取物 37± 8* * 18± 4△△ 30± 8
2. 3　对腹主动脉壁组织中 ET-1含量的影响: 粥样
硬化组兔腹主动脉壁组织中的 ET-1含量显著高于
正常对照组 ( P < 0. 01) ,服用消瘀片 16周后 ,可见
ET-1含量明显下降。单独使用丹参提取物对 ET-1
无明显影响 ,山楂提取物对腹主动脉壁组织中的
ET-1虽有一定的降低作用 ,但未见有统计学上的
显著差异 (表 3)。
2. 4　对腹主动脉壁组织中 NO和 NO S活性的影
响:粥样硬化组的腹主动脉壁组织中 NO含量明显
较正常对照组为低 ( P < 0. 05) ,但 NO S活性却高
表 3　消瘀片及其组分对兔粥样硬化血管壁中 ET-1
含量的影响 (x± s)
组　别 n ET-1 (μg /mg蛋白 )
正常对照 6 2. 9± 0. 8
粥样硬化 6 6. 1± 1. 6* *
消瘀片 6 3. 5± 1. 9△
丹参提取物 6 6. 1± 2. 5
山楂提取物 6 4. 1± 2. 2
于正常对照组 ( P < 0. 05)。给予消瘀片治疗 16周
后 ,动脉壁组织中的 NO 含量明显增加 ( P <
0. 05) ,而 NOS活性的增加未见有显著性差异。 单
用丹参提取物也未见有增加 NO和 NO S活性的作
用 ,山楂提取物组兔腹主动脉壁组织中的 NO和
NOS活性虽有增加 ,但与粥样硬化组相比 ,差异不
显著 (表 4)。
表 4　消瘀片及其组分对兔粥样硬化血管壁中
NO和 NOS的影响 (x± s )
组　别 n NO
(μmol /g 蛋白 )
NO S
( nmol /min. g蛋白 )
正常对照 6 14. 2± 3. 3 15± 5
粥样硬化 6 9. 3± 2. 2* 26± 10*
消瘀片 6 14. 5± 4. 2△ 34± 12
丹参提取物 6 7. 4± 1. 8 24± 10
山楂提取物 6 10. 8± 4. 1 38± 18
3　讨论
目前已知 , ET不仅是体内活性最强的缩血管
物质 ,也是一种强烈长效促生长因子 ,它可以促进血
管平滑肌细胞的增殖 [ 6] ,而且证明动脉粥样硬化的
程度和范围与血浆 ET水平呈正相关 [7 ]。 NO是在
NOS催化下形成的 ,它可通过增加细胞内 cGMP
含量抑制 ET的生物合成 [8 ] ,具有对抗 ET的促血
管平滑肌细胞增殖的作用。因此认为 , ET和 NO平
衡失调与动脉粥样硬化的发生和发展关系密切。 消
瘀片由丹参提取物和山楂提取物组成 ,在临床上 试
用于治疗高脂血症所致的动脉粥样硬化症 [9 ] ,为验
证其组方是否合理 ,本研究以血浆 ET-1,血清 NO
和血管壁组织中 ET-1, NO及 NOS活性为指标 ,观
察消瘀片及组分对其的影响。结果表明 ,消瘀片对降
低血浆和血管壁组织中 ET-1水平 ,增加血清和血
管壁组织中 NO含量的作用均较其相应的丹参提
取物或山楂提取物为强 ,提示两者合用后对防治动
脉粥样硬化可产生明显的协同效应 ,但其协同作用
机制有待于进一步研究。
参考文献:
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活血化瘀注射液对急性重型胰腺炎
大鼠肺内皮细胞粘附分子表达的影响
张艳军 1 ,赵连根 1 ,吴咸中 2⒇
( 1. 天津中医学院 中药系 ,天津　 300193; 2. 天津市中西医结合急腹症研究所 ,天津　 300100)
摘　要: 目的　研究急性重型胰腺炎 ( SAP)大鼠胰腺、肺内皮细胞粘附分子 ICAM-1、 P-选择素、 E-选择素的动态
变化 ,并观察活血化瘀注射液 ( HHI-I)的作用。 方法　应用胆胰管内逆行注射牛磺酸钠的方法引起大鼠 SAP,将
实验动物随机分为假手术对照组、 SAP模型组、 SAP+ HHI-I组、 SAP+ 复方丹参注射液组 ,利用免疫组织化学方
法观察了 SAP大鼠 1, 3, 6, 12, 24 h胰腺、肺内皮细胞粘附分子 ICAM-1、 P-选择素、 E-选择素的表达情况。结果　
SAP后肺 ICAM-1、 P-选择素、 E-选择素表达明显增多 , HHI-I能够有效抑制粘附分子的过度表达。 结论　粘附分
子在 SAP发展过程中起重要作用 , HHI-I通过抑制粘附分子的过度表达 ,从而影响白细胞内皮细胞的相互作用 ,
减少白细胞在组织募集 ,发挥其对胰外脏器的保护作用。
关键词: 急性重型胰腺炎 ( SAP);粘附分子 ;活血化瘀注射液 ( HHI-I)
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 1010 03
Affect of HUOXUE HUAYU INJECTION in expression of adhesive molecular of
intrapulmonic endothelial cell of rats suffered from SAP
ZHANG Yan-jun
1
, ZHAO Lian-gen
2
, WU Xian-zhong
2
　　 ( Depa rtment o f Chinese Ma teria Medica , Tianjin Co llege o f TCM , Tianjin 300193, China)
Key words: SAP; adhesiv e mo lecula r; HUOXUE HUAYU IN JECTION ( HHI-I)
　　以往的研究表明 ,活血化瘀注射液 ( HHI-I)可
改善犬肠、胰腺血液的动力学 [ 1, 2] ,并证实与抑酶注
射液 ( Y HI)合用能延长急性重型胰腺炎 ( SAP)家
兔存活时间 ,提高存活率 [3 ]。 我们推测可能对 SAP
病理生理过程中白细胞内皮细胞相互作用有影响。
HHI-I可抑制 SAP大鼠白细胞在肠系膜毛细血管
后静脉的滚动、粘附 [ 4]。已知白细胞与内皮细胞粘附
以及经内皮迁移需要粘附分子的表达 ,因此 ,我们研
究了实验性 SAP大鼠病理生理过程中胰腺、肺内皮
细胞表面粘附分子表达状况以及 HHI-I对细胞表
面粘附分子的表达作用。
1　材料与方法
1. 1　实验动物及分组: 健康 Wistar大鼠 (购于军事
医学科学院四所 ) 160只 ,体重 220～ 300 g ,雌雄各
半。适应环境 1周后开始实验。将实验动物随机分
为假手术对照组 (n= 10) , SAP模型组 ( n= 50) ,
SAP+ HHI-I组 (n= 50) , SAP+ 复方丹参注射液
组 (n= 50) ,后 3组又分为 1, 3, 6, 12, 24 h亚组 ,每
亚组 10只。
1. 2　试剂和药物: P-选择素、 E-选择素、 ICAM-1山
羊抗鼠多克隆抗体 (一抗 , Santa Cruz公司 ) ;生物素
化兔抗山羊 IgG (二抗 , V ecto r公司 ) ,辣根酶标记
·1010· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2001-03-04基金项目:天津市卫生局科研基金资助课题 ( 98KY-9)作者简介:张艳军 ( 1967-) ,男 , 2000年 6月天津医科大学中西医结合专业博士研究生毕业 ,主要从事活血化瘀中药作用机制研究 ,发表论文
10余篇 ,获天津市科技进步三等奖 2项。 Tel: 27486658转 1086