全 文 ：· 有效成分 ·
巴戟天中一新的环丙酮类衍生物的分离与结构鉴定
南京市中医院 (21 0 0 0 1 )
江苏省药品检验所
中国医学科学院
中国协和医科大学药物研究所
如匕仲青
郭 青
黄 彦合
摘 要 从 巴戟 天 从矿动d “ Q汇八,i) , al i、 根 皮的正 一-J 醉扮取部 分分得 一水溶性化合物 , 经 IR 、
F A B M S
、
EI M S
、
, H
, 3
C
一
N M R
, 13
C
一 `
H C O S Y
、 `
H
一 I H C O S Y 谱分析 、 元素分析 ,对其乙酞化物的 ` H
N M R 谱分析 , 确定其结构为 1一丁氧基 一 4 , 5 , 7 一三趁基一 6 一搜 甲基 一 2一城杂双 环 〔4 . 1 . 。〕庚烷 , 为一环
丙酮类的新化合物 ,命名为 o f f ie i n a li s i n 。
关键词 巴戟天 1一 r 氧基一 4 , 异 , 7一三轻基 一 6一抒甲墓 一 2一氧杂双环 二.4 1 · 。〕庚烷 of 位 ian ils in
巴戟天 入了。动以 a Q fj 艺c ian ils H o w . 为茜
草科植物 ,具补 肾壮阳 ,强筋健骨 , 祛风除湿
等功 效 。 文 献 报道 , 其 根 含 多种 化 学 成
分 〔` 一 ` 4 〕 , 笔者报道从其根皮 的正 丁醇提取物
中分离得一水溶性化合物 ,经元素分析 ,光谱
解析 ,对其乙酞化物 的波谱解析 , 确定了其化
学结构式 (图 1 ) , 为一新的环丙酮类衍 生物 ,
即 1一 丁氧基 一 4 , 5 , 7一三轻基 一 6一轻 甲基一 2一氧杂
双环巨 . 1 . 0」庚烷 ,命名为 o f f ie i n a l i s i n
化合物 I , 无色针
晶 , m p 1 4 9 C 一 1三I C 。
元素分析 : C 5 3 . 1 % ,
H 8
.
1 5 %
.
F A 壬弓加[ S
m / 2 2 7 1 ( M 丰 N a 十 ) 。
由此确 定其分子式为
p H
0 H
O C 魂H 。
图 1 o f f ie i n a l i s i n
的化学结构式
C
1 1
H
Z o
O
。 。
IR 谱 : 3 4 0 0 c m 一 ` (一 O H ) 。 ’ H N M R
谱中 , 有 己p p。 : 0 . 8 8 ( 3 H , t , J = 7 · 5 H z , (飞 , -
H )
,
1
.
2 6 ( Z H
,
rn
,
C
Z 一
H 、 , 1 . 4 3 ( Z H , m , C : , -
H )
,
3
.
4 2 ( Z H
,
m
,
C
4 一
H )
。 在 E IM S 谱中 , 有
m / z
: 4 3
、
5 7
、
7 3
,
3 个碎片峰 ,表明分子中含有
一个丁氧基 团 ,从 ` 3 C 一 I H C O S Y 谱也得到 了
证实 。 L3 C N M R 谱显分子中含有 1 1 个碳 原
子 ,其中 7 个为 含氧碳 ,且有一个双氧碳原子
( a
: 1 0 3
.
2
,
C
I 、 。 C 。 虽不直接连接氧原子 ,但
连有 3 个 一 C 一O H 基因与一个一 C < 牲基 , 使其
化学位 移向低场移动 , 其 6 值为 57 · 7 p p m 。
“ 3
c
一 I
H c O S Y 谱 显示 , C 。 与 c l 均 为季碳 原
子 , 己一 3 . 8 9 P 。 , 的两 个氢原 子则分别在 C ;
位 ( a : 7 2 . 3 p p rn )和 (二: 位 ( a : 7 0 . 9 p p m ) 上 , 台
一 3 . 97 p p m 的氧原子在 C 、 位 ( 6 : 71 . 6 p p m )
上 。 H 一 4 与 H 一 5 自勺偶合常数 J 二 4 . 5 H z ,根据
糖类 化合物 的 工 H N M R 偶合常数特征 「忍; , 证
明 H 一 4 与 H 一 5 互为反式 。 C 3 上的 2 个氢原子
具有不等性 , 在 乙、酸化前为 d 峰 , 化学位移
分别为 3 . 6 9 和 5 . 82 p p m , J 、 , 3 一 1· 9 H z , J . 卜
~ 1 2
.
5 H z
, 乙 酞化后 , 因与 C 4 一O A c 较为接
近 , 故 化 学 位移 向低场 侈动 , a 值分别 为
3
.
7 9
、
3
.
8 8 p p n l
。 化合物 I 乙酸化后 , C 、 的氢
的化学位移向低场移动 ,并因 乙酞化后的空
间位阻增大 , 一 C H : O A C 旋转发生困难而 显示
较大的不等性 , 化学位移差别增大 , a 值分别
为 4 . 0 8 和 4 . 2 8 p p m 。 C ; 、 C : 、 C 了 的氢的化学
位移也因 乙酸化而向低场位移 1 · 34 一 」· 6 2
p p n 、 ( 仲醇 氢 ) , 由此可排除 了氧基团与 C , 、
次
A d d
r e s s
姚仲青 男
Y
a o Z h o n g q in g
,
N a n j i n g M u r
工I c l p a l H o s p i t a l o f
`
r
r a d
l t一o n a ! 〔’ h i工z e 污 e M e d lc l 们 e , N a n j i n g
, 1 9 8 6 年毕业于南京中医学院中药系 , 医学士 ,现为 南京市甲 医院 主管中药师 , 南京 中医药大学兼职讲师主要从事中草药的综合研究 及新药研究 。 近年来发表论文 5 篇 。 获南京 市科技进步二等奖 1 项 , 四类新药证书 1 项 ,
刃i石影药 》 1 9 9 8 年第 2 9 卷第 4 期 · 2 1 7 ·
C
。 、
C
, 轻基成醚的可能性 。
化合物 l ,为 I 的乙酞化物 , 其 , H N M R
谱显示 ,较 I 多 4 个甲基信号峰 ,化学位移分
别为 1 . 9 8 、 2 . 0 6 、 2 . 1 0 、 2 . 1 7 p p m 。 提示化合
物 I 为四轻基化合物 , 由此确定了化合物 I
的结构式 。
1 仪器与试剂
熔点用 X 4 仪测定 , 温度未校正 ; 比旋度
用 W x G T 一 4 仪测 定 ; 红外光谱用 S P 3一 3 0
仪测定 ;质谱用 Z A B 一 H S 质谱仪测定 ; N M R
谱用 B r u k e r A M 5 0 0 仪测 定 , T M S 内标 ;元
素分析用 P e r k i n 一 E lm e r 2 4 o 仪测定 ;柱层析
硅胶为青岛海洋化工厂产品 , 1 60 一 1 80 目 。
其余试剂均为 A · R 级 。
2 提取与分离
取 巴戟天根皮 s k g , 95 % E t 0 H 回流提
取 , 减 压 回 收 E f O H , 提取物石 油 醚脱脂 ,
n B u O H 萃取 , 萃取液减压 回收溶剂至 小体
积 , 拌入柱层硅胶 , 低温干燥 ( 60 ` C ) , 硅胶短
柱 加 压 层 析 , C H C 13一M e O H 系 统 洗 脱 ,
C H C 1
3一
M e O H ( 9 3
: 7 )部分放置析晶 , 结晶
以 M e O H 重结晶 ,得晶 I ( 1 0 0 m g ) 。 取晶 I
( 10 m g ) 以醋醉一毗陡常规 乙酞化后 , 得晶 l
( 6 m g )
。
3 鉴定
化合物 I : 无色针晶 , m p 1 4 9℃一 1 5 1 ℃ 。
〔a 昭一 4 1 . 5 ( c , 0 . 0 0 1 , E t O H ) 。 元素分析 : C
5 3
.
1 1%
,
H 8
.
1 5% 理 论 值 : ( 5 2 . 2 3 % ,
H s
.
0 6% )
,分子式 C l , H Z。 O 。 。 IR ( K B r ) e m 一 ` :
3 4 0 0
,
1 4 4 0 , 1 3 7 0
,
1 3 4 0 ; 1 1 2 0 ; 1 1 5 0 ; 9 1 5 ; 8 7 0
。
F A BM S m / z
: 2 7 1 ( M + N a 牛 )
。
E IM S m / z
( R
.
I N T )
:
2 0 5 ( 6 9 2
.
8 )
,
1 6 3 ( 1 3 8
.
6 ) 14 9
( 1 0 0 0
.
0 )
,
1 0 3 ( 2 5 6
.
7 )
,
7 7 ( 8 1 7
.
7 )
,
5 7
( 8 0 1
.
5 )
,
4 3 ( 7 3 2
.
9 )
。 `
H N M R
, ` 3
C HM R
,
` 3
C
一 ,
H C O S Y
, `
H
一 `
H C O SY 及 化 合 物 l
的 `H N M R 谱见表 1 。
表 i 化合物 I 的 ` 3C N M R , ’ 3 C 一 , H C O SY ,
,
H N M R 和 ’ H 一 , H e o s y 数据 (在 D z o 中)
和化合物 亚的 ` H N M R 数据 (在 C n C 13 )
Com印 u nd 1 oC m卯 u dn -
C (ppm )
1 3C
一
1 H COSY
co r r el a t ed w i t l
H(即 m )
(J
, Hz )
I
H
一
I HCOSY
c o r丁e la t ed w 一t卜
H〔p p nl )
(J
, Hz )
1 103
.
2
3 66
.
5 3a
一
H 3
.
82( I H
,
dd
,
1
.
1
, 12
.
5 ) 3b
一
H
,
4
一
H 3
.
88( I H
,
d
,
12
.
5)
3卜H 3. 69 ( I H , dd , 1 . 9 , 12 . 5) 3a 一H , 4一 H 3 . 79( I H , d , 12 . 5)
4 71
.
6 4
一
H 3
.
97( I H
,
br s ) 5
一
H 5
.
31( I H
, n l )
5 70
.
9
6 57
.
7
7 72
.
3
8 64
.
0
5
一
H 3
.
89( I H
,
d
,
10
.
5)
3a
一
H
,
3卜H
4
一
H 5
.
51( I H
,
d
, 10
.
5 )
7
一
H 3
.
89( I H
, s )
8
一
H 3
.
77( Z H
,
br s )
5
.
36 ( I H
, s )
4
.
08 ( IH
,
d
,
12
.
5 )
0
.
88( 3 H
, t , 7
.
5)
1
.
26( Z H
, m )
1
.
43( Z H
, m )
3
.
42( Z H
, m )
é一翻邝灿
4
.
28 ( I H
,
d
, 12
.
5、
2
` 一
H 0
.
95 (3 H
, t , 7
.
5)
l ,
一
H
,
3`
一
H 1
.
4 ( ZH
, m )
2
,一
H
, 4 `
一
H 1
.
59 ( ZH
, m )
3 ,
一
H
, 一t e s lf 3
.
55 ( ZH
, m )
1
.
98 (3 H
, s )
2
.
06 (3 H
, s )
2
.
10 (3 H
, s )
2
.
17 (3 H
, s )
H
参 考 文 献
周发兴 ,等 . 中药通报 , 1 98 6 , 1 1 ( 9 ) : 5 5 4
陈玉武 ,等 . 中药通报 , 1 9 8 7 , 1 2 ( 1 0 ) : 6
李 赛 ,等 . 中国中药杂志 , 2 9 9 1 , 1 6 ( 1 1 ) : 6 7 5
杨燕军 ,等 . 药学学报 , 1 99 2 , 2 7 ( 5 ) : 3 5 8
于德泉 ,等 . 分析化学手册 ( v ) . 北京 : 化学工业出版
社 , 19 8 9 . 4 2 2
( 1 9 9 7
一
0 5
一
1 6 收稿 )
O f f i e i n a l i s i n
,
A N e w C o m P o u n d I s o l a t e d f r o m R o o t
一
B a r k o f
M e d i e i n a l I n d i a n m u l b e r r y (再了。 ir n d a 仇仃’i e i n a l i s )
Y a o Z h o n g q i n g ( N a n j i n g M
u n ie i p a l H o s p i t a l o f T r a d i t io n a l C h i n e s e M
e
d i
e
in
e ,
N
a n
ii
n g 2 1 0 0 0 1 )
G u o Q in g ( J i
a n g s u P
r o v
in
e
i
a l I n s t i t u t e f o r D r u g C o n t r o l )
H
u a n g Y
a n h e ( I n s t it u t e o f M 堪l t e r ia M
e
d i
e a ,
C h i
n e s e
A
e a
d
e m y o f M
e
d i
e a l S e ie n e e s
,
C h i
n e s e
X i
e h e M
e
d i
e a
l
U n iv e r s i t y )
A b s t r a e t A n e w w a t e r
一 s o lu b l e e o m p o u n d n a m e d o f f i e in a li s in h a s b e e n is o la t e d f o r m t h e r o o t
一
b a r k o f
材。 r i , d a q fj 王c i n a l i : H o w . O n t h e b a s is o f 。 h e m ie a l a n d s p e e t r a l a n a l y s i s , i t s s t r u e t u r e w a s e s t a b li s h e d a s l -
.
2 1 8
·
b uty l ox y
一
4
,
5
,
7
一 t r ih y d r o x y
一
6
一
h y d r o x y m e t h y l
一
2
一 o x a b i e y e l o
一〔4 . 1 . 0〕一 h e p t a n e .
K e y W o r d s M
. 口刀飞` i n a l is H o w . 1一 b u t y l o x y 一 4 , 5 , 7 一 t r i h y d r o x y 一 6一 h y d r o x y m e t h y l一 2 一 o x a b ie y e l o -
〔4 . 1 . 0〕一 h e p t a n e o f fi e in a ! is i n
茜草多糖 Q A : 的分离纯化及组成分析
兰州军区后勤部药品检验所 ( 7 3 0 0 20) 王红霞 斑 王秉极 ”
摘 要 从东北茜草提取得到的粗多糖经离子交换 、 D E A E 一纤维素和 SeP h ad ex G 一 50 柱层析得到
多糖 Q A Z 。 Q A Z经 H PI 刃 的 L on aP k S 803 柱层析为单一对称峰 ,证明为均一多糖 ,并测得其分子量为
5 0 0 0
。
T L C 和 G C 分析表明 Q A : 由 R h a 、 A r a 、 X y l 、 M a n 、 G IC 和 G a l组成 ,其单糖摩尔 比为 1 . 0 :
2
.
5
:
1
.
4 : 2
.
8 : 2 7
.
7 : 15
.
3
。 红外光谱分析含 俘型糖贰键 。 药理实验结果表明 Q A : 具有较强的
清除自由基的作用 , 清除率为 94 . 59 % 。
关键词 茜草 中性杂多糖 自由基清除
茜草为茜草科 ( R u ib ac ea ` )茜草属植物
茜草 R “ ib a ` 。 dr ifo il a L
. 的根及根茎 , 具有
行血止血 、通经活络 、止咳祛痰之功效川 。 茜
草的化 学成分主要是葱醒及其衍生物 , 还有
蔡醒 、菇类及环肤类化合物 。药理实验表明茜
草具有止血 、 抑 菌 、 止 咳祛痰 、 “ 升白” 、 抗肿
瘤 、抗心肌缺血等生物活性 。但是关于茜草多
糖的研究 , 国内外尚未见报道 。
1 材料与方法
1
.
1 材料 : 茜草 R z`b i a ` o dr ifo l i a L
. 购于北
京同仁堂药店 , 由军事医学科学院放射医学
研究所孙仲治高级工程师鉴定 。
1
.
2 试剂 : D E A E 一纤维素 ( D E 一 2 2 )为 W h a t -
m a n 产品 。 已知分子量的 D e x t r a n , S e p h a d e x
G
一
5 0 为 p h a r m a e i a 公司 产品 。 标准单糖为
E
.
M er c k 产品 。 其它均为国产分析纯试剂 。
.1 3 仪器与方法
1
.
3
.
1 多糖的提取与纯化 : 茜草经水煎提取
3次 ,合并滤液减压浓缩至于原生药比为 1 :
1
.
5
, 缓慢加入 95 % 乙 醇 , 使乙醇终浓度为
30 %
,静置 、 离 心 、 除 去沉淀 , 上清液中加入
95 % 乙醇使 乙醇终浓度为 75 % , 离 心 , 沉淀
常规脱水得粗多糖 Q 。 Q 经 D E A E 一纤维素柱
层析 ( D E 一 2 ) , 依次用蒸馏水和 7%氨 水洗
脱 ,分为 Q A 和 Q B 两部分 。 Q A 经大孔树脂
( D
一 1 0) 柱层析 , 以水为洗脱剂 , M ol is h 反 应
阳性部分浓缩至适当浓度后加入 95 % 乙醇 ,
使 终 浓 度 为 50 % , 静 置 , 上 清 部 分 经
S e p h a d e x G
一
5 0 柱层析 ( 2 . 6 。 m 又 1 0 0 C m )精
制 , 以蒸馏水为洗脱剂 ,分管收集 , M ol is h 反
应检测 , 收集到 1 个单峰部分 , 冰冻干燥得
Q A
: 。
1
.
3
.
2 纯度鉴定及分子量测定川 : 本实验用
高效液相色谱法鉴定多糖纯度并测定其分子
量 。 高效液相色谱仪 为 W a t e r s 2 4 4 , I o n p a k
5
8 0 3色谱柱 , w a t e r 、 4 0 1 型示差折光检测器 。
M
一
73 0 型微处理机 。 流动相为 0 . 1 m ol / L
N a
Z
S O
; , 流速为 0 . 7 m L /m i n 。
在色谱柱的排阻限以 内 , 多糖分子量对
数与保留时间成反 比 : L o g M 一 a 十 b R T 。 以
不同分子量的标准品多糖 ( D e x t r a n 9 7 0 0 ,
1 0 5 0 0
,
4 0 1 0 0 ) 相继上柱 ,求出 a , b , 根据样
品的保留时间即可算出其分子量 。
1
.
3
.
3 部分理化性质的测定 : 通过硫酸咔
哩 〔 3〕反应和苟三酮反应分别检测 己糖醛酸和
氨基酸及肤的存在 。
寮
A d d r e
s s :
W a n g
* , 军事医学科学
,
L a n z h o u M i li t a r y R e g i o n M u n i e ip a l I n s t i t u t e f o r D r u g C o n t r o l
,
L a n z h o u
学研究所
《中草药 》 1 9 98 年第 29 卷第 4 期 . 2 1 9 .