全 文 ：高效液相色谱法测定益髓胶囊中淫羊蕾贰含量
河北医科大学中医学院 (石家庄 。5 0 0 9 1) 牛丽颖 王鑫 国 陈卫 民 谈 李澎涛 白 霞 房家毅
益髓胶囊是根据祖国医学理论研制的中药复方
制剂 , 主治老年性骨质疏松症等 。 为了保证药品质
量 , 选择其中主要成分淫羊蕾贰作为质控指标〔U , 采
用高效液相色谱法测定了淫羊霍贰的含量 。
1 实验部分
1
.
1 仪器与试剂 : L C 一 6A 液相色谱仪 , S P D 一 6A V
U V
一
V IS 分光光度检测器 , C R 一 3A 数据处理仪 。
乙睛为色谱纯一级 (山东禹王实业总公司化学
试剂厂 ) ; 磷酸盐 、三乙胺为国产分析纯 ; 淫羊霍贰标
准品 (中国药品生物制品检定所 ) ; 水为二次蒸馏水 。
1
.
2 样品处理 :取干燥至恒重的本品 0 . 2 9 , 精密称
定 , 加无水乙醇 20 m L , 回流 l h , 连续 2 次 , 过滤 , 合
并滤液 , 定容 50 m L , 精确稀释 5 倍后作为供试液 。
1
.
3 标准液 的配制 : 精 确称取 淫羊蕾试 标准品
29
·
Z m g
, 用 乙醇溶解于 25 m L 量瓶中定容 , 备用 。
1
.
4 色谱条件 : 检测波长 :根据淫羊蕾贰在 270 n m
波长处有最大吸收 , 故选择 270 n m 为检测波长 。
色谱柱 :大连依利特公司装 (s p h e r is o rb e l : 柱 ,
2 0 0 m m X 4
·
6 m m i
·
d
·
5 拜m ) 。 流动相 : 乙睛一。一
m ol / L 磷酸缓冲液 (pH 一 2 . 95 , 8 %。三乙胺 ) 一 30 :
7 0
, 流速 1 . 0 m L / m in , 柱温 : 3 5 ℃ 。
2 试验方法与结果
2
.
1
‘ 分离条件的选择 : 若采用甲醇和水的二元流动
相体系〔2 〕 , 样品中各成分不能很好分离 , 淫羊霍贰的
峰无法确定 , 改用 乙睛和磷酸盐缓冲液的二元流动
相体系 , 分离效果 明显改善 , 但色谱峰形仍宽 , 且有
拖尾 , 在此流动相中加入适量的三乙胺 , 使游离氨基
与色谱柱 O D S 键合相中的残余硅醇基相互作用 , 以
掩蔽组分分子与键合相 O D S 键合的作用 , 从而提高
了柱效 , 使峰形得到改善 。 因此 , 选择在酸性条件下 ,
加入少量三乙胺并与乙睛以一定比例混合 , 经反复
试验 , 三乙胺比例在 3编 ~ 8%。 , 对结果影响不大 。
2
.
2 色谱行为 : 色谱图见图 1 一A , 图 1 一B 。
2
.
3 线性关系 : 精确吸收标准储备液 2 、 4 、 8 、 12 、 16
和 20 拜L 进样 , 测定峰面积 , 并以峰面积 (A )对样品
量 (X )进行线性 回归分析 , 在 0 . 884 ~ 23 . 36 m g / m L
间呈线性关系 。得回归方程 : A 一 7 . 162 x l。‘+ 3 . 458
x 1 o , X
, 相关系数 r 一 0 . 9 9 9 2 。
图 1 样品色谱图
A
一样品 * 为淫羊菠贰 B一淫羊鳌贰标准品
2
.
4 精密度及重现性实验 : 取同一样品 , 重复进样
6 次 , 测得相对标准偏差为 3 . 7 % 。 取同一批号样
品 , 精密称取 5 份 , 依法测定 , 结果 , R S D 为 1 . 06 % 。
2
.
5 回收率测定 :精密取干燥至恒重的样品 3 份 ,
分别加入 1 . 0 2 、 1 . 0 4 、 1 . 0 5 m g 的淫羊霍贰标准品 ,
下同供试品溶液的制备方法 。在上述色谱条件下 , 测
得了其平均回收率为 98 . 38 % , R S D 为 1 . 08 % 。
2. 6 样品测定 :取 3 批样品 , 精密称定 , 依前法制备
供试液 , 进样 , 计算其中淫羊霍贰含量 , 见表 1 。
表 1 样品测定结果
编号 1 2 3
平均含量 (m g / g )
R S D 平均值 (% )
2
。
3 2
1
.
0 6
2
.
4 2
l
。
0 7
2
.
4 2
1
。
0 6
3 讨论
试验表明 : 淫羊蕾贰在 0 . 8 84 ~ 23 . 36 m g / m L
范围内与峰面积之间线性关系较好 , 并经过重现性
试验和回收率试验 , 证明此方法可靠 , 适合益髓胶囊
中淫羊霍贰的定量分析
参 考 文 献
1 王宝琴主编 . 中成药质量标准与标准物质研究. 北京 : 中
国医药科技出版社 , 1 9 94 . 5 35
2 张晓平 , 等 . 中草药 , 1 9 90 , 2 1 (2 ) : 15
(1 9 9 7
一
0 1
一
0 8 收稿 )
, 河北师范大学实验中心
《中草药 》19 98 年第 29 卷第 2 期 1 0 1