全 文 ：5 讨论
5
.
1 由于蜂胶具有大量 生物活性成分和营
养成分而被广泛应用于药品 、食品领域 ,黄酮
类化合物是其中的活性成分之一 。 实验结果
表明 ,本法的回收率高 , 重现性好 , 方法简便 ,
数据可靠 , 对产品的质量控制是切实可行的 。
5
.
2 蜂胶 口服液由蜂胶 、银耳等原料经特殊
工艺制成 , 呈乳白色胶状液体 , 样品需处理后
才能测定其含量 。 由于蜂胶含黄酮而银耳含
蛋白质 , 可利用黄酮类化合物溶于 乙醇而蛋
白质遇乙醇凝固沉淀的性质 , 在样品中加入
乙醇后使蛋白质沉淀 , 从溶液中分离出去而
达到纯化样品的目的 。实验显示 , 经这样处理
后测得的结果令人满意 。
5
.
3 经试验 , 除去蜂胶后制成的阴性对照溶
液对本品的测定无干扰 。 因此对蜂胶 口服液
中黄酮类化合物的含量测定十分理想 。
参 考 文 献
1 房 柱 . 蜂胶 . 北京 :农业出版社 , 19 84 . 27
2 苏 华 . 蜜蜂杂志 , 1 9 9 6 , (1 2 ) : 5
唐金贤 , 等 . 蜜蜂杂志 , 19 95 (2 ) : 6
(1 9 9 7
一 1 1
一
0 8 收稿 )
D ete rm in a tio n o f F la v o n o id s C o n ten t in Pr o Po lis o r a l L iq u id
M
a o L iz h e n
,
X u S h ifa n g (Z h eji
a n g A e a d e m y o f M
e d ie a l S e ie n e e s
,
H a n g z h o u 3 1 0 0 1 3 )
A b s tr a e t D e t e rm in a tio n o f th e fla v o n o id s e o n t e n t in Pr o p o lis O r a lL iq u id w it h sP e e tr o p h o t o m e t r y 15 d e
-
se r ib e d
·
T h e fla v o n o id s w e r e e x t r a e te d u s in g e th a n o l
·
T h r o u g h s a m p le a s s a y
,
lin e a r in v e s t ig a tio n (r 一 o · 9 9 9 9 )
a n d r e e o v e r y te s ts (X = 1 0 0
.
2 9 %
,
R S D = 0
.
6 3 % )
,
it w a s fo u n d th a t th e m e th o d w a s a ee u r a te
,
q u iek
, s im p le
,
a n d g a v e s a tisfa et o r y r e s u lt s
·
T h is m e t ho d m a y be u se d fo r th e q u a lit y e o n t r o l o f th is p r e p a r a tio n
·
K e y W o
rd s P r o p o lis O r a l Liq u id F la v o n o id s S p e e t r o p h o t o m e try
H PL C 法测定生脉注射液中人参皂试 R e 的含量
扬州市药品检验所 (2 2 5 0 0 1) 一 闻俐毓 带 于 洋 李炳根
江苏苏中制药厂 徐柏颐 陈志清 胡 岳
摘 要 用 H P L C 法测定生脉注射液中人参皂贰 R e 的含量 , 以 C ]8 柱 , 乙睛一 0 . 05 %磷酸 (1 9 , 8 1)
为流动相 , 检测波长 20 3 n m 。 该方法线性关系良好 , 平均 回收率为 97 . 3 8 % , R S D 为 1 . 83 % 。 可作
为生脉注射液的含量测定方法 。
关键词 H P L C 生脉注谢液 人参皂贰 R e
生脉注射液系根据古方 “生脉散 ” 由红
参 、麦冬和五味子配制而成的灭菌注射液 , 具
有活血化疲 、理气开窍 、补气生血及扩张血管
与增加冠状动脉血流量等作用 , 临床疗效较
好 。原质量标准未制定含量测定项 目〔‘〕 , 也未
见文献报道 。本品中红参 、麦冬的主要成分均
为皂贰 , 用重量法 〔2〕、香草醛比色法〔3〕等方法
只能测定总皂贰的含量 。 我们选用 H PLC 法
可单独测 定人参皂贰 R e 的含量 , 结果准确
可靠 , 可作为控制本品质量的指标 。
1 仪器与试药
S P 8 8 1 o 高效液相色谱仪 , S P 1 0 0 可见紫
外检测器 , SP4 2 9 o 积分仪 (美 国光谱物理公
司 ) , C 18柱 (2 0 0 m m 只 4 . 6 m m , 国产 ) 。
人参皂贰 R e 对照品 (含量测定用 ) : 中
国药品生物制品检定所 ; 生脉注射液 : 扬州苏
‘ Ad d r e s s :W
e n L iy u
,
Y a n g z h o u
闻喇放 专 . 副卞仟药师 。 1 9 8 2
P r o v in e ia l In s tit u te fo r D r u g
年毕业于南京药学院 ,
C o n t r o l
,
Y a n g z h o u
获理学学士学位 。 从事药品检验工作 , 主要研究 H PL C 法在中药质量控制中的应用 , 已发表多篇研究论文 。
·
2 3 2
-
刻度 , 摇匀 , 过滤 , 取续滤液进样 10 拌L , 外标
峰面积法计算含量 , 结果见表 2 。
表 2 样品测定结果(n 一 2)
批 号 平均含量年 g / m L ) R SD (% )
10口O内匕八j01巧J89
.⋯09白OC1八60
片几匕1.J8UOj任0.⋯O口n八Q匕卜9O乙,污J
中制药厂提供 ; 乙睛为色谱纯 , 其它试剂均为
分析纯 。 ’
2 实验方法与结果
2
.
1 色谱条件 : 用十八烷基键合硅胶为分析
柱 , 乙睛 一 0 . 0 5 %磷酸 ( 1 9 : 8 1 )为流动相 , 流
速 1 . 0 m L / m in , 检测波长 2 0 3 n m 。该条件下
人参皂贰 R e 、 R g , 与其它干扰成分能得到满
意分离 。 对照品与样品色谱图见图 1 。
9 6 1 1 18
9 6 1 1 2 8
9 6 1 1 3 0
9 6 1 2 0 1
9 6 12 0 3
图 1 色谱图
左 一对 照 右 一样品 I 一R g l l 一R “
2
.
2 线性关系 : 取人参皂贰 R e 对照品约 25
m g
, 精密称定 , 置 25 m L 量瓶中 , 加甲醇溶解
并稀释至刻度 , 精密量取 2. 0 、 4. 0 、 6. 0 、 8. 0 、
10
.
0 m l
才 置 10 m 1) 容量瓶 中 , 加 甲醇至 刻
度 , 摇匀 , 分别取 10 沁J 进样测定 。 以人参皂
贰 R e 浓度为横坐标 , 以峰面积为纵坐标 , 得
回归方程 :
A = 一 0 . 0 0 9 6 5C 十 1 . 3 4 5 7 , r = 0 . 9 9 9 9 。
2
.
3 回收率测定 : 取已测含量的样 品 , 分别
加入一定量的人参 皂贰 R e 对照品溶液 , 按
样品测定项下处理 , 分别进样 10 拌L , 计算回
收率为 9 7 . 3 8 % , R S D 为 1 . 8 3 % 。 见表 1 。
表 1 回收率测定 (n ~ 2)
加人量年 g / m L ) 测得量恤g / m 工) 回收率 ( % ) R SD ( % )
1 9
.
1 6 1 9
.
0 5 9 9
.
4 3 1
.
3 3
2 8
.
7 4 2 7
.
7 4 9 6
.
5 2 2
.
1 5
3 8
.
3 2 3 6
.
8 6 9 6
.
1 9 1
.
8 9
2
.
4 样 品测 定 : 精密量取样品 50 拜L , 置分
液漏斗中 , 加乙 醚 20 m I J 提取 , 水层 用水饱
和 正丁醇提取 5 次 ( 2 0 、 2 0 、 1 5 、 1 5 、 1 5 m L ) ,
合并正丁醇液 , 置水浴上蒸干 , 残渣加 甲醇溶
解并转移到 5 m I J 容量瓶中 , 用 甲醇稀释至
《中草药 》1 9 98 年第 29 卷第 4 期
2
.
5 重现性考察 : 取样 品溶液连续测定 6
次 , 含量分别为 2 6 . 4 6 、 2 7 · 2 4 、 2 6 · 6 2 、 2 6 · 5 0 、
2 6
.
3 4
、
2 6
.
7 4 拜g / m L , 平均 含量 2 6 . 6 5 羊: g /
m l
, ,
R S D 为 1 . 2 % 。
3 讨论
3
.
1 人参皂贰在正丁醇中溶解度最大 , 用水
饱和正 丁醇提取 5 次 , 人参皂贰基本提取完
全 。正丁醇提取前用乙醚洗提 , 可以除去少量
脂溶性杂质 , 减少柱头污染 。我们曾在乙醚提
取前用氨水将样品碱化 , 正丁醇提取后 , 合并
正丁醇提取液 , 用水洗后再蒸干 , 虽然 可以除
去部分酸性杂质和多糖 , 但色谱图形没有明
显改变 , 且人参皂贰含量有所下降 。
3
.
2 本品所含皂贰成分复杂 , 干扰较大 , 但
当 人参皂贰 R e 与 R g , 的分离度大于 2 . 0
时 , 两者与其它成分的分离 良好 。
3
.
3 本品为灭菌注射剂 , 在制备过程中 , 由
于受热等因素影响 , 人参皂贰 R e 会部分转
化为 R g : 〔4〕 , 故测得的人参皂贰 R e 含量较
低 , 但在工艺稳定的条件下 , 测 定人参皂贰
R e 的含量对控制本品质量仍具有意义 。
3
.
4 因原质量标准中未制定含量测定项 目 ,
而中药材在不同产地 、不同采收季节 、不同贮
存期的有效成分的含量均有差异 , 利用本方
法测定人参皂贰 R e 的含量可作为检测和控
制生脉注射液质量的指标 。
参 考 文 献
1 江苏省药品标准 . 1 9 8 5
2 卫生部进 口药材部标准 (W S 4 一1 6 一86 ) : 7
3 谢刚林 . 中草药 ‘ 1 9 9 0 , 2 1 ( 1 1 ) : 1 2
4 朱永新 , 等 药物分析杂志 , 1 9 8 9 , 9 ( 1 ) : 5
( 1 9 9 7
一
0 7 一0 2 收稿 )
·
2 3 3
·
D e te r m in a tio n o f G in s e n o sid e R e in S h e n g m a i In je e tio n b y H PL C
W
e n I iy u
,
Y u Y a n g
,
L i B in g g e n (Y a n g z h o u In s t it u te fo r D r u g C o n t r o l
,
Y a n g z h o u 2 2 5 0 0 1 ) )
X u B o y i
,
C he n Z h iq in g
,
H u Y u e (Jia n g s u S u z h o n g Ph a r m a e e u tiea lF a e t o ry )
A b str a c t G in s e n o s id e R e in Sh e n g m a i In j
e e t io n w a s dir e : t ly d e te r m in e d b y H P LC
.
A ee t o n it rile
一
0
.
0 5 %
p llo s p ho r ie a e id ( 1 9
,
8 1 ) w a s u se d a s t he m o b ile p h a s e o n C ls e o lu m n
.
D e t e e tio n w a v e le n g th w a s 2 0 3
n m
.
R e su lt s in d le a t e d th a t th e lin e a r it y o f th is m e t ho d w a s w e ll w ith a n a v e r a g e o f 9 7
.
3 8 %
, a n d R S D I
.
8 3写
.
T h e m e th o d e a n b e u s e d fo r th e a s s a y a n d q u a lity eo n t r o l o f S he n g m a i ln i
e e t io n
·
K e y W o
r d s H PL C S h e n g m a i In j
e e tio n G in s e n o s id e R e
冬凌草叶中齐墩果酸的提取分离及含量测定△
河南中医学院中药系 (郑州 4 5 0。。3) 袁 坷
摘 要 对冬凌草叶中的齐墩果酸进行 了提取分离 , 并以标准品作对照 , 采用薄层扫描法对其进
行含量测定 。 方法简便 , 结果稳定 , 重现性好 , 加样回收率为 97 . 73 % 。
关键词 提取分离 薄层扫描 含量测定 齐墩果酸
冬凌草为唇形科香茶菜属植物 R ab d os ia
r u b e s c e n : (H e rn s l
.
)H a r a
。冬凌草中的主要有
效成分为菇类化合物 , 三菇中的主要有效成
分为齐墩果酸和熊果酸 。据文献报道「‘〕,齐墩
果酸具有抑菌 、保肝 、护肝 、降酶 、升白细胞 、
增强机体免疫功能等方面 的作用 , 是当前治
疗肝炎的有效药物之一 , 近年又证明有抗癌
活 ·性[ 2一 : 。
冬凌草是河南省 的一大植物资源 , 且相
当丰富 。 我们对冬凌草叶中的有效成分齐墩
果酸进行了提取分离和含量测定研究 , 为进
一步扩大开发利用提供参考依据 。
1 仪器与试剂
冬凌草叶于 1 9 9 6一 0 9 采自河南省济源太
行山区 , 由本院标本室王中会副教授鉴定 。
齐墩果酸对照品 由中国药品生物制品检
定所提供 。
c s
一 9 3 0 1 双波 长 薄层 扫 描仪旧 本 岛
津) , 点样定量毛细管 (D r u rn m o n d S e ie n t ifie
c o u sA )
,
P BQ I型薄层 自动铺板器 , 中草药
破碎提取器 (自制 , 已获国家实用新型专利 ) ,
层析柱 (加工定做 ) 。
柱 层析硅胶 (1 50 ~ 20 0 目)及薄层层析
硅胶 G (青岛海洋化工厂生产 ) ;粉状活性炭 、
石油醚 、乙酸 乙醋 、氯仿 、丙酮 、甲醇均为分析
纯 。 提取用乙醇为 95 %的工业酒精 。
2 提取与分离
2
.
1 提取 : 称取一定量冬凌草叶 , 用 10 倍量
9 5 % 乙醇置提取器 中 , 破碎提取 2 m in , 提取
后的药材已完全破碎成了匀浆状 , 抽滤 , 将滤
液真空浓缩至浸膏状 , 待做分离用 。
2
.
2 分离 : 分离冬凌草叶中齐墩果酸的传统
方法 , 即通过硅胶干柱层析法 , 以一定比例的
氯仿一丙酮为洗脱液进行洗脱 , 可得到齐墩果
酸结晶 。该法所用的溶剂毒性较强 , 且极易挥
发 , 价格也较高 。 该法仅适合小量样品制备 ,
不适合大量生产 。 为此作者对该法进行了改
进 , 洗脱液改用 一定 比例的石 油醚一乙酸 乙
醋 , 经实验证明 , 改进后的方法切实可行 。
将由上述方法得到的提取物浸膏用适量
决 A d d r e s s : Y u a n K e , D e p a r t m e n t o f C hin e s e M a t e r ia M ed ie a
,
H e n a n C o lle g e o f T r ad it io n a lC hin e s e M e d ie in e
,
Z he n g z ho u
△ 河南省科技攻关资助课题
.
2 3 4
.