全 文 ：HPLC法测定不同产地葛根中葛根素的含量
肖学凤 ,高　岚
(天津中医学院 ,天津　 300193)
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0220 01
　　葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata ( Wild)
Ohwi或甘葛藤 P. thomsonii Benth的干燥根。用于
外感发热头痛、颈强等。现代研究证实 ,葛根中主要
含有葛根素等黄酮类化合物 ,具有扩张冠状动脉血
管、增加冠状动脉血流量的作用 ,同时也有降低血压
的作用。现通过 HPLC法对不同产地葛根中葛根素
进行含量测定。
1　仪器与试药
日本 Jasco高效液相色谱仪 ; AN AST AR色谱
数据处理软件 ;葛根素对照品从中国药品生物制品
检定所购买 ;甲醇为色谱纯 ;乙醇为分析纯。
2　色谱条件
色谱柱:μBondapak C18 10μm ( 4. 6 mm× 250
mm );流动相: 甲醇 -水 (含 0. 5% 的醋酸 ) ( 27∶
73) ;流速: 1 mL /min;检测波长: 250 nm;理论板数
按葛根素峰计算不低于 2 000。
3　实验方法
3. 1　对照品溶液的制备: 精密称取葛根素对照品
8. 16 mg置于 25 mL容量瓶中 ,加入 75% 乙醇溶
解并稀释至刻度 ,摇匀:再从中精密吸取 2 mL置于
10 m L容量瓶中 ,加 75% 乙醇溶解并稀释至刻度 ,
摇匀 ( 65. 3μg /m L)。
3. 2　供试品提取条件的选择:根据药材的常用提取
方法 ,考察了索氏提取与超声提取方法 ,并采用不同
溶剂和提取时间进行综合考察 ,结果表明:以 75%
乙醇超声处理 60 min的提取方法为最佳条件。
3. 3　供试品溶液的制备: 取葛根药材适量 ,粉碎成
粗粉 ,精密称取 0. 5 g左右 ,加至 100 mL磨口锥形
瓶中 ,准确加入 75% 乙醇 50 mL称重 ,超声提取 1
h,放置室温 ,擦干锥形瓶并称重 ,补足溶剂减失的
重量 ,摇匀 ,滤过 ,弃去初滤液 ,精密量取续滤液 5
m L至 10 mL容量瓶中 ,加 75% 乙醇至刻度 ,摇
匀 ,微孔滤膜 ( 0. 45μm)滤过 ,作为供试品溶液。
4　实验结果
4. 1　精密吸取对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10μL进样 ,
照上述色谱条件分析 ,以峰面积积分值 Y 为纵坐
标 ,葛根素量 X (μg )为横坐标绘制标准曲线 ,计算
出回归方法: Y= 28 860+ 264 700 X , r= 0. 999 8。表
明葛根素在 0. 324～ 1. 620μg范围内呈线性关系。
4. 2　精密度试验: 精密吸取葛根素对照品溶液 5
μL,连续进样 6 次 ,测得峰面积 ,得 RSD 为
1. 10%。
4. 3　样品的含量测定:精密吸取供试品溶液 5μL
进样 ,按上述色谱条件测定葛根素含量 ,见表 1。
4. 4　重现性试验:按样品测定法对同一样品药材测
定 6次 ,结果 RSD为 1. 18%。
表 1　样品测定结果 (n= 6)
样品 产地 葛根素含量 (% ) 平均值 R SD (% )
野葛 安徽 2. 90 2. 89 2. 90 0. 24
山东 3. 02 3. 03 3. 03 0. 23
山西 2. 92 2. 96 2. 94 0. 96
湖北 1. 50 1. 47 1. 49 1. 43
粉葛 广西 0. 61 0. 60 0. 61 1. 17
4. 5　回收率试验:精密称取已知葛根素含量的样品
药材粉末 0. 25 g ,再精密加入一定量的葛根素对照
品 ,同样品测定法处理 ,测定葛根素的含量。 结果平
均回收率为 99. 89% RSD为 1. 30%。
5　讨论
5. 1　中国药典 2000年版一部 ,关于葛根药材中葛
根素的含量的测定方法是以甲醇 -水 ( 25∶ 75)为流
动相 ,其葛根素的吸收峰与随后的小峰的分离度为
1. 2左右。我们在水中加入 0. 5% 的醋酸 ,甲醇 -水
比例调到 27∶ 73后 ,提高了两峰的分离度 (大于
2) ,故选用为流动相。
5. 2　中国药典 2000年版一部规定野葛中含葛根
素不得少于 2. 4% ;粉葛中含葛根素不得少于
0. 30%。在 5种产地葛根中以山东葛根含葛根素为
最多。
·220· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-06-20