全 文 ：青心酮对豚鼠离体气管条张力的影响及其机制
同济医科大学病理生理教研室 (武汉 430030)　　叶笃筠 　吴　萍　黄云峰　洪志刚　熊宗斌　余尚斌
摘　要　采用气管条浴槽实验方法 ,观察青心酮 ( DHAP)对离体豚鼠气管螺旋条张力的影响。结果发现: DHAP明
显松弛豚鼠的离体气管平滑肌 ;抑制由乙酰胆碱 ( Ach)、组胺 ( His)和氯化钾所致离体豚鼠气管平滑肌的收缩反应 ;
对 5-羟色胺 ( 5-HT )诱发的由内钙释放引起的Ⅰ 相收缩和外钙内流所致的Ⅱ相气管平滑肌收缩均有一定的抑制作
用。 3. 96× 10- 5 mo l / L DHAP则仅抑制Ⅱ相收缩。随着其剂量的增大 (> 10- 4 mo l /L ) ,Ⅰ 相收缩也被抑制 ,上述抑
制作用均呈剂量依赖性 ;消炎痛对 DHAP松驰离体气管平滑肌作用无明显影响。提示 DHAP这一效应可能与其钙
拮抗有关 ,而与其抑制环加氧酶的作用关系则不甚密切。
关键词　青心酮　气管　平滑肌　张力
Effect of 3, 4-Dihydroxyacetophenone on Isolated Guinea-Pig
Trachea and Its Mechanism of Action
　　Depar tment of Pa thoph ysio log y , Tong ji Unive rsity of Medical Sciences (Wuhan 430030)　 Ye Duyun, Wu Ping , Huang
Yunfeng , Hong Zhigang , Xiong Zongbin and Yu Shangbin
Abstract　　 The Effects o f 3, 4-dihydroxyacetophenone ( DHAP) on the tension o f iso lated guinea-pig
t rachea spi rals w ere studied by tension reco rding method. It w as found that DHAP relaxed the basal
tension and markedly depressed the contractile response induced by the spasmogens ( Ach, histamin, KCl,
5-HT) in a concentra tion-dependent manner. But indomethacin, a cycloo xygenase inhibitor, show ed no
influence on the relax ant effect of DHAP against the contraction of the spi rals caused by Ach. DHAP could
abolish the contraction induced by 5-HT bo th in phase 1 ( release of int racellula r calcium ) and phase 2
( ent rance o f ex t racellular calcium) . These results suggested that the relaxant effect o f DHAP on iso lated
guinea-pig t rachea spi ra ls may be resul ted f rom a decreased concentration of int racellular calcium.
Key words　　 3, 4-dihydro xyacetophenone　 t rachea　 smoo th muscle　 tension
　　青心酮 (又名 3, 4-二羟基苯乙酮 , DHAP)是从
中药毛冬青 Ilex pubescens Hook. et Ar n. 根中提
取的有效成分。它能有效抑制家兔离体肺血管环的
缺氧性肺血管收缩反应 ( HPV ) [1 ]和降低慢性阻塞
性疾病 ( CO PD)患者的肺血管阻力等 [2 ]。 继发现
DHAP对豚鼠在体气道内压呈双相调解后 ,本文观
察了 DHAP对豚鼠离体气管条张力的影响 ,并对其
调控机制进行了初步研究 ,旨在为 DHAP治疗
CO PD及支气管哮喘等呼吸道疾病提供实验及理论
依据。
1　材料
1. 1　动物: 健康成年雄性豚鼠 ,体重 300～ 600 g,由
同济医科大学实验动物中心提供。
1. 2　药物: 2%青心酮由北京医药制药工业研究所
馈赠 ;乌拉坦 (上海普扬第二中学化工厂 ) ;乙酰胆碱
和组胺 (美国 Sigma公司 ) ;氯化钾 (重庆北碚化学
试剂厂 ) ; Krebs-Henseleit ( K-H)液 pH 7. 4,成分
( mmol /L ): NaCl 119, KCl 4. 7, CaCl2 2. 5,
KH2 PO4 1. 2, NaHCO3 24, Glucose 11。
1. 3　仪器: JH-1B-25型张力传感器 (航空工业部 ) ,
RM-6000多道生理记录仪 ( N T HON KOHDEN )。
2　方法
2. 1　气管环制备: 20%乌拉坦 ( 5 m L /kg )麻醉动物
后 ,分离气管 ,按文献 [3 ]方法制成宽约 5 mm、长 20
mm螺旋条 ,悬挂于含 K-H液浴槽中 ,通以 95%
O2+ 5% CO2的气体以保持溶液中 P o2> 53. 3 k Pa,
维持 37℃恒温。气管条连接于张力换能器 ,用生理
记录仪记录张力变化 [4 ]。实验前气管条均在 1. 5 g
初张力下平衡 1 h,用 Ach( 20μmol /L)预收缩气管
条 2～ 3次 ,以达到最大收缩 ,新鲜 K-H液冲冼、平
衡后再进行实验。整个实验过程中每 15 min更换新
鲜 K-H液 1次。
·438· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 6期
Address: Ye Duyun, Departm ent of Pathoph ysiology, Tong ji Univ ersi ty of M edical Sciences , Wuhan叶笃筠　男 , 44岁 , 1982年毕业于同济医科大学 , 1987年获硕士学位 , 1989～ 1991年在德国自由大学热带病研究所进修 ,现在同济医科大学病理生理教研室暨卫生部呼吸系统病重点实验室工作 ,副教授。主要从事呼吸系疾病发病机制和活血化瘀中药药理机制研究。先后主持国家自然科学基金课题 3项、卫生部和湖北省卫生厅课题各 1项。
2. 2　对气管条基础张力的影响:气管条经平衡后 ,
分别在浴槽中加入不同剂量的 DHAP ( 1. 98×
10- 5、 3. 96× 10- 5、 7. 92× 10- 5和 1. 58× 10- 4 mo l /
L )。 记录给药后 1 h内张力变化。
2. 3　对致痉剂收缩反应的影响:在浴槽中分别加入
20μmol /L Ach、 20μmol /L His和 15μmol /L KCl
等致痉剂以诱发气管条收缩并记录其张力 ,待收缩
力达到坪值时 ,再在浴槽中以累积给药法加入
DHAP并观察张力变化 ,分别求出 IC50。
2. 4　消炎痛对 DHAP扩张气管作用的影响: 气管
条经平衡后 ,分别在浴槽中加入 1× 10- 4 mol /L消
炎痛或等容积溶媒 ,然后在浴槽中加入 20μmol /L
Ach,待收缩达到坪值时再在浴槽中以累加法加入
DHAP,并观察张力变化。
2. 5　对 5-羟色胺 ( 5-HT)所致两种收缩成分的影
响:以无钙 K-H液温育气管条 30 min后 ,先加入 5-
HT 15μmol /L,待收缩达到坪值时再加入 CaCl2
2. 5 mmol /L,使气管条进一步收缩并稳定 ,换正常
K-H液 3次 ,平衡约 30～ 45 min直至基线稳定 ,再
分别加入 3. 98× 10- 5和 1× 10- 4 mo l /L DHAP,温
育 10 min重复上述步骤 ,并观察张力的变化。
3　结果
3. 1　对气管条基础张力的影响: 给 1. 98× 10- 5
mol /L DHAP 10 min后 ,正常豚鼠离体气管条张力
一过性轻度增加 ,但无统计学意义 ( P> 0. 05) ;随
DHAP浓度的累加 ,气管条张力呈剂量依赖性抑制
(P < 0. 01) ,持续时间> 60 min(图 1)。
A-1. 98× 10- 5 mol /L　 B-3. 96× 10- 5 m ol /L
C-7. 92× 10- 5 m ol /L　 D-1. 58× 10- 4 mol /L
图 1　不同浓度 DHAP对豚鼠离体气管条
基础张力的影响
3. 2　对致痉剂收缩反应的影响: 如图 2所示 ,
DHAP对 Ach、 His和 KCl所致离体豚鼠气管收缩
呈剂量依赖性抑制。 IC50值分别为: 1. 91× 10- 4、
3. 1× 10- 4及 2. 1× 10- 4 mol /L。
A-K-H液　 B, C, D-无钙 K-H液　 C-3. 96× 10- 5μmol /L
DHAP预处理　 D-10- 4 μmol /L DHAP预处理　 a-加入
CaCl2 25 mm ol /L
图 2　 DHAP对 5-HT( 15μmol /L)所致两种
收缩成分的影响
3. 3　消炎痛对 DHAP扩张气管作用的影响: 结果
表明消炎痛虽使 DHAP抑制 Ach所致气管收缩的
曲线右移 ,但与对照组比较 ,二者 IC50值及 DHAP
各浓度组抑制率经统计学处理均无明显差异。
3. 4　对 5-HT所致两种收缩成分的影响:如图 2所
示 , DHAP对 5-HT所致气管平滑肌依内钙释放引
起的Ⅰ相收缩和对外钙内流引起的Ⅱ相收缩均有明
显抑制。 在 DHAP的终浓度为 3. 96× 10- 4μmol /L
时 ,仅外钙内流引起的Ⅱ相收缩被抑制 ,随着其浓度
的加大 , DHAP对内钙释放引起的Ⅰ 相收缩也有明
显抑制作用 ,其抑制率可达 100%
3　讨论
本研究证实 DHAP能松弛正常豚鼠离体气管
条 ;对由 Ach、 His、 KCl及 5-HT等所致的豚鼠离体
气管收缩亦有一定的抑制作用。鉴于其对正常的气
管张力和众多的致痉剂所致的气管痉挛均有松弛作
用 ,故推测 DHAP扩张气管的作用环节极有可能在
受体后而非抑制受体或 /和拮抗第一信使。
在以往对 DHAP扩张血管的作用机制的研究
中 , DHAP抑制花生四烯酸代谢途径中环加氧酶的
作用被认为是其扩张血管的重要作用机制之一 [6 ] ,
推测 DHAP可能是一环加氧酶抑制剂。 然而 ,本实
验发现经典的环加氧酶抑制剂消炎痛则对 DHAP
的松弛气管平滑肌的作用无明显影响。 由此可见 ,
DHAP松弛气管的作用也许不是通过改变花生四
烯酸代谢中的环加氧酶代谢途径。有人认为 DHAP
的钙拮抗作用在 DHAP扩张人脐血管机制中占有
重要地位 ,推测 DHAP为一非竟争性外钙内流拮抗
剂。但未对其是否有抑制内钙释放进行研究。 5-HT
能激活其受体操纵钙通道 ,同时释放胞内侧结合钙
和贮存钙 [7 ]。本实验的结果也表明: D HAP在低剂量
能有效地抑制豚鼠离体气管平滑肌由 5-HT诱发的
外钙内流引起的Ⅱ相收缩 ,随着剂量的增加其对内
·439·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 6期
钙释放引起的Ⅰ相收缩也有明显抑制作用。故认为
DHAP松弛豚鼠离体气管的作用也与其钙拮抗作
用有关 ,且以抑制外钙内流作用为主。
总之 , DHAP能松弛正常豚鼠的离体气管 ;抑
制由 Ach、 His、 NaCl和 5-HT的离体豚鼠气管平滑
肌的收缩反应 ;抑制由 5-HT诱发的气管平滑肌细
胞由内钙释放和外钙内流引起的Ⅱ相收缩 ;结合我
们过去的实验已证明 DHAP能扩张肺血管和降低
肺血管阻力 ,表明 DHAP有可能成为治疗慢性阻塞
性肺病、支气管哮喘和肺动脉高压等具有一定开发
利用价值的药物。
参 考 文 献
1　 Farman Ullah, et al . J Tongji Medical Uni , 1994, 14( 3): 252
2　林春龙 ,等 .中华结核与呼吸病杂志 , 1995, 18( 2): 97
3　杨秋火 ,等 .药理实验方法学 . 北京:人民卫生出版社 , 1982: 906
4　黄引平 ,等 .中华妇产科杂志 , 1993, 28( 3): 333
5　洪志刚 ,等 .实用肺科杂志 , 1998, 5( 4): 12
6　 Yang D S, et al . Prostag landins. 1989, 38( 4): 497
7　 Janis R A, et a l. J M ed Chem, 1983, 26: 775
( 1999-11-29收稿 )
通脉活血灵胶囊对实验性高脂血症家兔血脂及动脉粥样硬化的影响
河北省医学科学院 (石家庄 050021)　　李兰芳 　张建新　兰漫野　刘赤平　陈素青　徐　涛
河北省中医学院　　　　　　　　 　　陈灵燕
摘　要　观察通脉活血灵胶囊对实验性高脂血症家兔血脂调节变化和动脉粥样硬化形成的影响。 实验结果表明 ,
高脂饲料喂养家兔可导致高脂血症 ,并可诱发动脉粥样硬化 ( AS)。通脉活血灵胶囊 2. 4, 1. 2 g /kg组均可明显降低
血清总胆固醇、血清甘油三酯、血清低密度脂蛋白 ,可升高血清高密度脂蛋白 ;并明显抑制 AS形成和发展 ,且有明
显的量效关系。
关键词　通脉活血灵胶囊　血清脂质　动脉粥样硬化
Effect of Tongmaihuoxueling Capsule on Blood Lipid and Atherosclerosis in
Hyperlipidemic Rabbits
　　 Hebei Academy of Medical Sciences ( Shijiazhuang 050021)　 Li Lanfang , Zhang Jianxin, Lan Manye, Liu Chiping ,
Chen Suqing and Xu Tao
　　 Hebei Colleg e of TCM　 Ch en Lingyan
Abstract　　 To study the ef fect of Tongmaihuoxueling Capsule ( TMHX L) on blood lipid and
a therosclerosis. Hyperlipidemic rabbi t models w ere prepa red by feeding high lipid diet fo r 12 w eeks. High,
medium and low doses of TM HX L were fed thereaf ter. Thei r blood lipid lev els w ere messured at the 12th
w eek. The aorta w as isolated and stained w ith sudanⅢ and hemato xy lin-eosin to examine the g ross and
microscopic evidences of a therosclerosis. TMHXL could decrease the serum to tal cholesterol ( TC) ,
t rig lyceride ( TG) and low densi ty lipoprotein cholestero l ( LDL-C) content , but elev ate the high densi ty
lipoprotein cholesterol ( HDL-C) and prevent the fo rmation o f a therosclerosis. TM HX L is ef fectiv e for the
prevention o f hyperlipidemia and the development of atherosclero sis.
Key words　　 Tongmaihuoxueling Capsule ( TM HX L)　hyperlipidemia　 atherosclero sis
　　通脉活血灵胶囊系具有益气活血、温经通脉功
效的中药复方制剂。临床观察表明 ,通脉活血灵胶囊
可明显改善高粘血症患者血液流变性 ,并明显降低
血液粘稠度 [1 ]。实验研究亦证明该药可显著改善实
验性高粘血症家兔全血比粘度、全血还原粘度、明显
抑制大鼠血小板聚集功能 [2 ]。 本文观察了通脉活血
灵胶囊对实验性高脂血症家兔血脂和动脉粥样硬化
的影响。
1　材料
1. 1　动物:选用健康日本大耳白家兔 ,雌雄各半 ,体
重 2. 5～ 3. 0 kg ,河北省实验动物中心提供。
1. 2　药物: 通脉活血灵胶囊由本院药物研究室研
制。 主要由人参、三七、丹参、川芎、首乌、附子、大黄
等组成 ,经加工制粒装胶囊 (每粒重 0. 5 g相当于生
·440· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 6期
Address: Li Lanfang, Hebei Academ y of M edical Sciences, Shijiazh uang