全 文 ：RP
一
H PL C法测定芦荟中芦荟昔的含量
中 日友好临床医学研究所 (北京 1。。。2 9)张永文 . 陈 玉武 李克明
摘 要 应用反相 H PL C法测定芦荟昔 ( al o in )的含量 。 用 S UL P E C OL C一 18 ( 2 0 5 m m4 X, 6 m 。 , 5
拌m )层析柱 , 流动相 : 乙睛 一。 . 01 m ol / L 三氟醋酸 ( 2 : 7 8 ) , 流速 : l m L /m in , 检 测波长 : 3 59 n m , 柱
温 :室 温 , 用外标法测定 。 芦荟昔 的平均 回收率为 98 · 37 % , 其检 测线 性范围 为 50 一 25 0 拌g /m L , 回
归方程 : Y一 0 . 2 69 十 54 . 723 X , r ~ O , 9 9 9 9 。 本法灵敏 、 简便 , 重现性好 。
关挂词 芦荟 芦荟昔 H P L C 法 含量测定
D e t e r m i n a t i o n o f A l o i n i n B a r b a d o s A l o e ( A l o e ba r b a d e n s is )
a n d R o b u s t A l o e ( A l oe fe or x ) b y R P
一
H P L C
Z h a n g Y o n g w e n
,
C h e n Y u w u a n d L i k e m in g ( C h i n a
一
J a p a n F r i e n d s h ip I n s t i t u t e o f C l in ie a l M
e
d i
e a l S e i
-
e n e e s , eB i ji
n g 1 0 0 0 2 9 )
A b s t ar e t A R P
一
H P L C m e t h o d w a s d e v e lo P e d fo r t h e d e t e r m in a t i o n o f a lo in i n A OI e ab
r b a de
n s i s
M il l二 a n d A . fe or x M il l . A n O D S e o l u m n w a s u s e d w i t h t h e m o b il e p h a s e o f a e e t o n i t r il e 一 0 . 0 1 m o l / L t r i fl u o -
r a e e t i
e a e
id ( 22 : 7 8 ) a t a f l o w r a t e o f 1 m L /m i n
,
S
a m p le s w e r e d e t e e t e d a t 3 5 9 n m a n d a t r o o m t e m p e r a t u r e
.
E x t
e r n a l s t a n d a r d w a s u s e d a n d t h e e a l ib r a t i o n e u r v e w a s li n e a r o v e r t h e r a n g e o f 5 0一 2 5 0 拌g / m L ( r = 0 .
9 9 9 9 )
.
T h e e x t r a e t io n r e e o v e r y r a t e w a s 9 8
,
3 7环. T h is m e t h o d 15 s e n s i t iv e , s im p le a n d w e ll r e p r o d u e i b l e .
K e y w o dr
s A lo e ab
r b a d e n s乞: M il l . A l o e fe or 二 M i l l . R P一 H P L C
中药芦荟具清肝热 、 通便的作用 ,用于便
秘 、 小儿疮积 、 惊风 , 外治湿癣川 。 现代药理实
验证 明芦荟有抗肿瘤 、 抗菌 、 对心血管系统 、
对 免疫 系统 及 炎症 、 抗 胃损伤 及保 肝 作用
等阁 。 药 材来 源为 百合 科植 物库 拉索 芦荟
A loe ba
r ba d en is : M il e r
、 好望角芦荟 A . fe -r
ox M il
e r 或其 他同属 近缘植物 叶的液汁浓
缩干燥物山 。 由于来源多样 ,有效成分含量不
一 , 其质量控制对药材使用尤显重要 。 芦荟昔
为芦荟中的主要有效成分之一 , 通过测定芦
荟昔的含量来控制芦荟质量是行之有效的方
法 。
以往 对芦荟昔 的含量 测定多采 用 比色
法 、 紫外分光光度法 、 色谱一分光光度法等图 ,
干扰因素较多 。 本文采用高效液相色谱法测
定芦荟药材中芦荟昔的含量 , 以便更好地 为
药材质量控制提供依据 。
l 仪器与试药
美 国 W a t e r s 5 0 1 型泵 , U 6 K 进样器 ,美
国 B ec k m a n 1 6 3 型可 变波长 紫外检测器和
42 7 型积分记录仪 ; 紫外吸收光谱用 日立 5 57
型分光光度仪测定 。 乙睛 : 色谱纯 ,水 : M il i -
p or e
一
Q 过滤高纯水 , 三氟醋 酸 : M er ck 试剂 。
芦荟昔标准品 : 购于中国药品生物制品检定
所 。 芦荟生药 ( 1 9 9 8 年 3 月购 自北京市药材
公司 , 标本样品存 于中 日友好临床 医学研究
所药物药理室 ) 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱 条件 : 美 国 S U P E L C O L C 一 18 柱
( 2 5 0 m m x 4
.
6 m m
,
5拜m ) , 柱温 为室温 ; 流
动相 : 乙腊 一 0 . 0 1 m o L / L 三氟醋酸 ( 2 2 : 7 8 ) ,
流速 : 1 . 0 m L /m i幻 检测波长 : 35 9 n m , 检测
,
A d d er s s
:
Zh a n g Y o n g w e n
,
C h in a 一 J a p a n F r i e n d s h ip In s t i t u t e o f C lin i e a l M e d i e a l S e ie n e e s , eB ij in g
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 8 期 5 7 7
器灵敏度 :0 . 05 A U FS 。
应用上述条件 , 取芦荟昔 .0 1 12 m g /m L
的甲醉溶液进行测定 ,理论塔板数可达 6 0 0
以上 ( 图 l ) 。
A
一芦荟昔 (l ) B一样品
图 1 芦荟样品 H P L C 图
2
.
2 标准曲线制备 : 精密称取干燥至恒重的
芦荟昔对照品适量 (约 1 2 , s m g ) 至 20 m L 容
量 瓶 中 , 加 甲醇溶 至 刻 度 、 摇 匀 , 配 成 0 . 5
m g /m L 的 溶 液 ; 分 别 精 密 吸 取 上 述 溶 液
1
.
0
、
2
.
0
、
3
.
0
、
4
,
0
、
5
.
0 m L
,置 1 0 m L 容量瓶
中 , 加 甲醇稀释至刻度 。 各进样 10 产L , 按上
述色谱分离条件进行 H P L C 测定 , 对照品峰
面积积分值与对照品量 (拌g ) 呈线性关系 , 线
性范围为 50 一 2 50 产g / m L , 回归方程为 Y -
0
.
2 6 9 + 5 4
.
7 2 3 X
, r ~ 0
.
9 9 9 9
。
2
.
3 样 品测定 : 称取本 品细粉 5 0 m g , 精密
称定 , 置 50 m I J 容量瓶 中 , 加人 甲醇 45 m L ,
超声提取 3 0 m in , 加 甲醇溶解至刻度 , 充分
摇匀 , 经 0 . 45 拜m 微孔滤膜 过滤 , 取续 滤液
照芦荟含量测定方法进行测定 。 精密吸取供
试品溶液 10 拼L , 以外标法计算得本品芦荟
昔 ( C 2 1 H 2 2 O 。 ) 含 量 为 1 3 6 m g / g , R S D -
1
.
7% ( n = 6 )
。
2
.
4 回收率试验 : 精密称取已知含量的芦荟
粉末 , 加人一定量的芦荟昔对照品 ,按样品测
定项下所述方法处理 ,测定芦荟昔含量 ,计算
其 平均 回 收率为 9 8 , 3 7 % , R S D ~ 0 . 8 9% ( ,
= 6 )
。
2
.
5
, 精密度 试验 : 精 密吸取上述 对照溶液
10 拌L , 重复进样 5 次 , 芦荟 昔峰面积积分值
的 R S D 一 0 . 6 7% ( n 一 5 ) 。
2
.
6 重现性试验 : 按上述含 量测定方法 , 精
密称取 同一 芦荟样 品粉末 40 m g , 制备供试
液 , H P L C 测定 并计算 芦荟昔含 量 , R S D -
1
.
8 4% ( n = 5 )
。
3 讨论
3
.
1 通过实验 比较 , 用不同比例的乙睛 一水 、
甲醇 一水为流动相 的 H P L C 法测定芦荟 中芦
荟营 的含量 , 均难 以与其它杂质成分有效分
离 ,样 品峰的重迭将导致含量测定结果偏高 。
本法选 用 乙睛 一 0 . 01 m ol / L 三 氟醋酸 ( 2 :
7 8 ) 为流动相 , 芦荟昔与其它杂质成分能达到
较高的分离度 , 理论塔板数高 ,准确性高 。
3
.
2 芦荟昔在 甲醇 中溶解度最大川 , 因此选
用甲醇制备样品供试液 。 实验 比较了用甲醉
直接冷浸过液 、 超声提取 30 m in 和加热回流
1 h 3 种提取方法 , 发现前两种方法得到的含
量测定结果相近 ,而 回流提取 l h 含量偏低 ,
可能加热导致 了部分芦荟昔的破坏 , 故选用
了超声 3 0 m in 的提取方式 。
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典 (一部 ) . 1 9 5 : 1 39
2 阴 健 , 等 . 中药现代研究 与临床应用 ( 1 ) . 北京 : 学苑
出版社 , 19 93 : 3 4 8
3 T h e M e r e k ln d e x
, 第 10 版 , 19 8 3 : 4 6
( 1 9 9 8
一
0 8 一 1 1 收稿 )
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5 7 8