全 文 ：含量的变化及 TMP的影响:大鼠浸水应激后胃粘
膜 NO S活力和 NO-2 /NO-3 含量均明显降低 ,而 ip
TM P ( 20 mg /kg )可抑制浸水应激导致的 NOS活
力和 NO-2 /N O-3 含量的降低 (表 4)。
　　表 4　 TMP对浸水应激大鼠胃粘膜 NOS活力和
NO-2 /NO-3 含量的影响
组别 动物数 N OS活力
( U /mg蛋白 )
NO-2 /N O-3 含量
( n mol /mg蛋白 )
Ⅰ 5 0. 52± 0. 02 9. 98± 2. 39
Ⅱ 6 0. 47± 0. 03* * 3. 24± 1. 79* * *
Ⅲ 6 0. 60± 0. 07# # 9. 46± 3. 46# #
　　与空白组 (Ⅰ )比较: * * P < 0. 01　* * * P < 0. 001
　　与对照组 (Ⅱ )比较: # # P < 0. 01
3　讨论
曾有报道 [1, 2 ]川芎嗪具有抗大鼠中枢神经系统损
伤和失血性休克导致的胃溃疡的作用。本研究结果表
明 ,川芎嗪具有抗大鼠浸水应激性胃溃疡的作用。
吴佐泉等 [1 ]报道口服川芎煎剂对中枢损伤应激
大鼠胃酸分泌无影响。本实验显示 ip川芎嗪虽能促
进胃液的分泌 ,但对胃酸的分泌无影响。提示 TMP
抗应激性溃疡不是通过抑制胃酸分泌途径来实验的。
胃运动亢进是导致应激性溃疡的重要原因 [8, 9 ]。
本研究表明 TM P能抑制第 1～ 4小时胃运动的频率
和第 1～ 3小时胃运动的幅度 ,而第 5小时胃运动的
频率和后 2 h胃运动幅度也低于对照组 ,但差异不显
著 ,这可能是由于药物在体内排泄而药效逐渐丧失的
缘故。因此 ,抑制胃运动可能是 TM P抗溃疡的机制
之一。
Masuda 等 [1 0]报道 , NG-硝 基-L-精氨 酸 ( L-
NNA,一种 NOS的抑制剂 )可加重酒精导致的胃粘
膜损伤 ,提出胃粘膜 NO含量的下降与胃溃疡的发
生有直接的关系。我们也观察到 L-NNA可加重浸
水应激性胃溃疡的发生 ,而 L -精氨酸 (L -Arg )可翻
转这一作用 (待发表 )。近年来的研究表明 , NO具有
抑制消化道平滑运动的功能 [11 ]。本研究结果表明 ,
浸水应激后大鼠胃粘膜 NO S活力和 NO-2 /NO-3 含
量均明显降低 ,说明 NOS活力降低 ,使 NO合成减
少与浸水应激性溃疡的发生有直接的关系 , NO合
成减少也可部分解释浸水应激后胃运动的亢进。
TMP能抑制浸水应激引起的胃粘膜 NO S活力和
NO含量的下降 ,表明 TM P的抗溃疡作用与其恢复
NOS活力 ,提高 NO含量 ,进而抑制了应激导致的
胃运动的亢进有关。 但浸水应激引起 NOS活力降
低及 TM P使 NO S活力恢复的原因还不清楚 ,仍有
待深入研究。
参 考 文 献
1　吴佐泉 ,等 .中国病理生理杂志 , 1989, 5: 307
2　李和泉 ,等 .中国病理生理杂志 , 1991, 7: 294
3　 Wan J L, et al . Dig Qis Sci, 1998, 43: 1652
4　 Wan J L. Exp Clin Gas t roen terol, 1993, 3: 154
5　 Guth P H, et al . Gast roen terology, 1979, 76: 88
6　 M urakami M , et al . Dig Dis Sci , 1985, 30: 346
7　 Tak euchi K, et al . Dig Dis Sci, 1985, 30: 1181
8　艾洪滨 ,等 .生理学报 , 1990, 42: 496
9　 Garrick T, et al . Am J Ph ysiol, 1986, 250: G191
10　 Masuda E, et al . Gas t roenterology, 1995, 108: 58
11　 Whit t le B JR. Ph ysiology of th e Gast rointes tinal Tract. 3rd ed,
New York: Raven Press , 1994: 267
( 1999-07-08收稿 )
磷酸川芎嗪的体外透皮吸收
广东医学院药理学教研室 (湛江 524023)　　王　晖 　高莉莉* *　许卫铭　刘　刚
摘　要　对磷酸川芎嗪透皮吸收的规律及释药机制进行探讨。 采用离体透皮实验装置 ,通过改变药物浓度、
p H值、促透剂及皮肤状态 ,研究磷酸川芎嗪的透皮吸收。 结果发现随着磷酸川芎嗪浓度增加 ,渗透系数明显
增加 ; p H增大 ,渗透系数随之增加 ;氮酮在 1%时可显著增加磷酸川芎嗪的透皮吸收 ;当去除角质层后 ,渗透
系数比完整皮肤增加近一半 ;完整皮肤的贮库效应大于去角质层皮肤。提示磷酸川芎嗪可透皮吸收 ,吸收的
主要屏障是角质层 ,且存在着贮库效应。
关键词　磷酸川芎嗪　透皮吸收　贮库效应　渗透系数
Transdermal Absorption of Ligustrazine Phosphate in vitro
Section of Pharmaco lo gy , Guangdong Medica l Co llege ( Zhanjiang 524023)　Wang Hui, Gao Lili, Xu Weiming and Liu
·117·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2000年第 31卷第 2期
Address: Wang Hui, Departmen t of Pharmacology, Guangd ong Medical Col leg e, Zhanjiang
* * 本院中心实验室
Gang
Abstract　　 Facto rs inf luencing the transdermal penet ration of ligustra zine phospha te ( LP) th rough
rabbi t skin were studied in vit ro. Results show ed that the permeation coef ficient w as increased when the
concentra tion o f LP and pH increa sed; 1 percent a zone could signi ficant ly enhanced LP transdermal
abso rption; the permea tion coefficient of st ripped st ra tum co rneum skin w as higher than that o f who le
skin; and the deposi t function o f w hole skin was larg er than that of stripped st ratum cor neum skin. It w as
concluded tha t LP could be absorbed through skin, the main barrier o f absorption w as the st ratum
corneum , and LP had the deposi t function also in the st ra tum co rneum.
Key words　　 lig ust ra zine pho sphate　 transdermal absorption　 deposit function　 permeation
coefficient
　　川芎嗪是伞形科植物川芎的一种主要生物碱 ,
临床上用于多种心脑肺血管病等的治疗 [1 ]。 药物动
力学研究发现该药的半衰期较短 [2, 3 ] ,如需长时期维
持疗效需持续用药 ,给临床用药带来不便。为克服此
缺点 ,国内已有厂家开始着手进行透皮制剂的研
制 [4 ] ,但迄今为止 ,尚未见到有关磷酸川芎嗪透皮吸
收规律的研究。我们对此进行初步的探讨。
1　材料
1. 1　动物:家兔 ,雌雄兼用 ,体重 2. 1～ 2. 3 kg ,由
本院动物中心提供。
1. 2　药品和试剂:磷酸川芎嗪由广东利民制药厂提
供 ,含量 99. 2% 。水溶性氮酮 ,新乡高金化学有限公
司产品。
1. 3　仪器: ZD-85型气浴振荡器 ,常州国华仪器厂
产品 ; UV -3010PC型紫外可见分光光度计 ,由惠普
公司制造。
2　方法和结果
2. 1　标准曲线的制定:用生理盐水将磷酸川芎嗪配
成 50. 00, 25. 00, 12. 50, 6. 25, 3. 12μg /mL溶液 ,在
紫外可见分光光度计上扫描样品后 ,确定在 276. 3
nm处有最大吸收峰 ,在此波长处测定吸收度。在浓
度 (X )为横坐标 ,吸光度 ( Y )为纵坐标 ,在 Casio fx-
3800计算器上算得回归方程为 Y= 0. 006186+
0. 03014X , r= 0. 9998。
2. 2　离体兔皮的制备
2. 2. 1　全皮的制备:用电动剃须刀除去家兔背部的
毛 ,用戊巴比妥钠麻醉后 ,剥取皮肤 ,小心去除皮下
脂肪等组织 ,用生理盐水反复冲洗 ,直至洗液澄清为
止。
2. 2. 2　去角质层皮肤的制备:取上述方法制备的全
皮 ,用市售胶粘带反复撕贴 20次 ,即可。
上述两种皮肤样本均置于 - 10℃冰箱中保存 ,
2周内用完。
2. 3　干扰试验: 按 2. 6的透皮试验方法 ,取 36 h时
间点的透皮接收液适量 ,在 200～ 350 nm波长范围
内扫描 ,结果表明透皮液中的其它成分不干扰磷酸
川芎嗪的测定。
2. 4　精密度试验:取 3种浓度的溶液 ( 50. 00, 12. 50
和 3. 12μg /mL) ,分别测定日内误差和日间误差 ,结
果日内误差为 3. 12% ,日间误差为 4. 42% (n= 6)。
2. 5　结果处理:采用 t检验进行数据统计处理。
2. 6　透皮试验: 在本室过去建立的透皮试验装置
上 [5 ]进行实验 ,试验温度为 32℃ ,振速为 120 r /
min,扩散面积 0. 502 cm2 ,释放液 0. 5 mL,接收液 5
mL,在不同时间点取样 4 mL,同时补加等量的生理
盐水 ,测定吸光度 ,代入回归方程 ,按下式计算累积
透过量 (Q):
Q= CV+ V’ ΢n- 1
i= 1
C
其中 C为接收液的药物浓度 , V为接收液容积 , V’ 为所
取药物量。
将累积透过量对时间进行线性拟合 ,得回归方
程 ,方程的斜率即为渗透系数。
2. 6. 1　不同浓度磷酸川芎嗪的透皮吸收:磷酸川芎
嗪用生理盐水配成下列浓度 ( mg /mL)溶液: 5. 0,
2. 5, 1. 0, 0. 5作为释放液 ,生理盐水作为接收液 ,在
下列时间点分别取样 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48 h,测定
吸光度 ,计算浓度和累积透过量 ,并求得渗透系数。
结果如表 1。随着释放液中磷酸川芎嗪浓度增加 ,磷
酸川芎嗪的透皮吸收呈剂量依赖性增加。
表 1　不同浓度磷酸川芎嗪的透皮吸收 (x-± s ,n= 6)
药物浓度 ( mg /m L) 渗透系数 (μg /h )
0. 5 5. 92± 0. 58
1. 0 8. 80± 2. 03* *
2. 5 16. 84± 4. 36* *
5. 0 22. 38± 6. 49* *
　　与 0. 5 mg /m L组比较: * * P < 0. 01
2. 6. 2　不同 pH条件下磷酸川芎嗪的透皮吸收: 按
一九九五年版《中华人民共和国药典》方法配制 pH
·118· 中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2000年第 31卷第 2期
为 5. 0的磷酸盐缓冲液 ,用 0. 2 mol /L 浓度的
NaOH调节 pH为 6. 0, 7. 0, 8. 0,分别配制成含 1. 0
mg /m L溶液作为释放液 ,相应的 pH液作为接收
液 ,取样时间为 2, 5, 8, 12, 24, 48 h。 结果见表 2。
由表 2可看出 ,随着释放液 pH的增加 ,磷酸川
芎嗪的透皮渗透系数逐渐增加 ,增加呈线性关系 (由
溶液的 pH对渗透系数进行回归 ,得回归方程为
Y= - 3. 546+ 2. 159X , r= 0. 992)。
　表 2　不同 pH条件下磷酸川芎嗪的透皮吸收
( x-± s ,n= 5)
溶液 pH 渗透系数 (μg /h)
5. 0 7. 43± 0. 51
6. 0 8. 97± 1. 23*
7. 0 11. 90± 2. 03* *
8. 0 13. 65± 0. 84* *
　　与 pH 5组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
2. 6. 3　角质层对磷酸川芎嗪透皮吸收的阻滞作用:
以生理盐水配制 1. 0 mg /mL浓度的磷酸川芎嗪溶
液作为释放液 ,以全皮和去角质层的皮肤作为透皮
材料 ,进行透皮试验。 结果如表 3。
　　　表 3　角质层对磷酸川芎嗪的透皮吸收的阻滞
作用 ( x-± s,n= 5)
皮　　肤 渗透系数 (μg /h)
全　　　皮 7. 71± 2. 21
去角质层皮肤 11. 44± 1. 23* *
　　与全皮组比较: * * P < 0. 01
从表 3知 ,去角质层后 ,磷酸川芎嗪的透皮渗透
系数增加了 48. 4% ,提示角质层对磷酸川芎嗪透皮
吸收具有阻滞作用。
2. 6. 4　水溶性氮酮对磷酸川芎嗪透皮吸收的影响:
在以生理盐水配制的磷酸川芎嗪溶液中加入不同量
水溶性氮酮作为释放液 ,使磷酸川芎嗪的浓度为
1. 0 mg /mL,水溶性氮酮的浓度分别为 0, 1% , 2% ,
3% ,进行透皮试验 ,结果如表 4。
表 4　水溶性氮酮对磷酸川芎嗪的透皮吸收的影响
(x-± s ,n= 5)
水溶性氮酮浓度 (% ) 渗透系数 (μg /h)
0 8. 17± 2. 55
1 17. 28± 2. 12* *
2 13. 68± 2. 47* *
3 14. 16± 2. 53* *
　　与不含氮酮组比较: * * P < 0. 01
在表 4中可看出随着水溶液氮酮浓度的增加 ,
磷酸川芎嗪透皮吸收并不随之增加 , 1%的浓度促透
作用最强。
2. 6. 5　角质层的贮库效应: 以生理盐水配制 1. 0
mg /m L浓度的磷酸川芎嗪溶液作为释放液 ,以全皮
和去角质层的皮肤作为透皮材料 ,扩散 10 h ,去除
释放液 ,用生理盐水反复冲洗 ,用滤纸吸干水分 ,按
前法进行透皮试验 ,取样时间仍在 48 h内。 结果如
表 5。
表 5　角质层对磷酸川芎嗪的贮库效应 (x-± s ,n= 8)
皮　　肤 渗透系数 (μg /h )
全　　　皮 12. 68± 3. 37
去角质层皮肤 5. 41± 1. 89* *
　　与全皮组比较: * * P < 0. 01
表 5显示 ,去角质层的皮肤与全皮相比 ,去除释
放液后 ,磷酸川芎嗪的透皮吸收显著减少 ,提示角质
层具贮库作用 ,如临床上磷酸川芎嗪经皮给药撤除
后 ,仍能较长时间发挥作用。
3　讨论
在整个皮肤结构中 ,角质层作为药物透皮吸收
的限速层 ,使一些药物的透皮吸收发生困难。实验发
现 ,在去除角质层后 ,磷酸川芎嗪的透皮作用明显增
强 ,提示角质层是磷酸川芎嗪透皮吸收的主要屏障。
角质层中含有 40%的角蛋白 ,与血浆蛋白具有较高
结合率的药物均有可能与角蛋白结合 [8 ] ,使药物滞
留在角质层中 ,形成贮库 [9 ] ,故去除释放液后 ,仍有
药物释放 ,且可维持较长的时间。
本实验结果表明 ,在不同的 pH条件下 ,随着溶
液 pH的升高 ,磷酸川芎嗪逐渐被中和为游离碱 ,使
其脂溶性逐渐增加 ,使药物容易透过角质层类脂的
双分子层结构 [6 ]。提示在透皮制剂的制备时应考虑
pH对磷酸川芎嗪透皮吸收的影响。
对透皮吸收促进剂氮酮的研究发现 ,氮酮可促
进许多药物的透皮吸收。 本研究利用不同浓度的氮
酮对磷酸川芎嗪的透皮吸收进行考察 ,发现 1%浓
度的氮酮促透作用最强 ,这可能与氮酮促透作用具
有极限这一特点有关 [7 ]。
考察释放液中磷酸川芎嗪的剂量对透皮吸收的
影响 ,发现其有剂量依赖性 ,随着剂量增加 ,透皮吸
收量也随之增加。
参 考 文 献
1　黄慕哲 ,等 .实用心脑肺血管病杂志 , 1997, 5( 1): 28
2　黄志力 ,等 .中国药理学通报 , 1989, ( 4): 240
3　蔡　伟 ,等 .药学学报 , 1989, 24( 12): 881
4　龙向志 .中成药 , 1994, 16( 12): 3
5　许卫铭 ,等 .中国药理学通报 , 1997, 13( 2): 185
6　 Vlasan t V. J Clin Ph armacol , 1991, 31: 401
7　王晓波 ,等 .中国药学杂志 , 1990, 25( 3): 151
8　 Chand ras ekaran S K, et al . Polym Eng Sci , 1980, 20: 36
9　 Kakuji Tojo, et a l. Drug Dev Ind Pharm, 1988, 14( 4): 561
( 1999-07-17收稿 )
·119·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2000年第 31卷第 2期