全 文 ：组峰 , 表 明 了 R P I 为糖类 化 合物 。 3 6 0 0 一
3 2 0 0 c m
一 ‘吸收是 O 一H 伸缩振动 , 存在分子
间和分子 内氢键 ; 1 4 0 一 1 2 0 c m 一’的吸收
峰是 e 一H 变角振动 ; 1 2 0 0 一 1 o o o e m 一 ‘区段
的吸收峰是毗喃糖环醚键 (C 一O 一C )和经基的
吸收 , 说明多糖中内醚糖的存在 。 8 5 8 c m 一‘处
的吸收峰为硫酸基 一O 一5 0 3 一的 C 一0 一S 伸缩振
动而形成 月 2 56 。m 一 ’处的吸收峰系硫酸基 -
O
一
5 0
3 的 S 一 0 伸缩 振动造成的 , 均证 实了
硫酸根基 团的存在 , 说明 R P I 为硫酸醋化多
糖 。 T er h o 法定量测定 , 经查标准曲线得 出的
硫酸基含量为 1 7 . 30 % (表 1 ) 。
表 1 红旅多辘 R P , 的组成成分
半乳糖 (% ) 3 , 6一内醚半乳糖 (% ) 硫酸基 (% )
7 0 0 4 9 5 6 1 7
.
3 0
实验结果表明 , 红藻多糖 R P I 是一种含
硫酸基 的硫酸酷化多糖 , 检 出组成 的单糖及
其 百分含 量 比为半乳 糖 : 3 , 6一 内醚半 乳糖
70
.
4 : 9
.
56 (表 1 ) 。 我们先前实验证明它对
BI V 的生长有较强的抑制作用 , 这与 国外对
其它的硫酸醋化多糖抗 H IV 的研究结果一
致 。 牛免疫缺陷病毒抗艾滋病药物筛选模型
的运用 [l0 〕, 初步证实了红藻多糖 R P , 在治疗
A ID S 方面具有 良好的前景 。
由于 H a ly m e n in s in e n s is T s e n g e t C . F .
C ha ng 为 我 国沿海 常 见藻 类 , 且 红 藻多 糖
R P
, 提取方法简便易行 , 这就为开发新 的抗
病毒药物 , 研制我国 自己 的抗 A ID S 药物提
供 了新 的资源 。所以 , 这一方面的研究具有重
要意义 。另外 , 红藻多糖抗病毒的作用机理还
有待于进一步研究 。
参 考 文 献
1 H a t a n a k a K
,
et a l
.
J M e d C h e m
, 1 9 8 7 , 3 0 ; 8 1 0
2 Ba b
a M
.
J In fe e t D is
,
19 9 0
.
1 4 2
:
4 0 7
3 W a g n e r W H
.
A r z n eim
一
Fo r s eh D r u g R e s
,
19 8 9
,
3 9
:
1
4 H id e ki N
, e t a l
.
A n t im ie r o b ia l A g e n ts a n d C h em o th
-
e r a Py , 1 9 8 7
, 3 1
:
1 5 2 4
5 陈家童 , 等 . 南开大学学报 (自然科 学版 ) , 19 98 , 4 : 26
6 S ta u b A M
.
M e t ho d s in C a r b o hyd r Ch e m
,
1 9 6 5
,
5
;
5
7 Y a p h e W
,
et a l
.
A n a ly t ie al B ioc h e m is t r y
,
1 9 6 5 13
:
1 4 3
8 张维杰 主编 . 复合多搪生化技术 . 上 海 : 上海科学技
术出版社 , 1 9 8 7 : 1 2 1
9 T e r h o T
, e t al
.
A n aly tie a l B io eh em is t r y
,
19 7 1
, 4 1 :
4 7 1
10 王 岱 , 等 . 中国药理学与毒理学杂志 , 19 96 , 1 : 49
(1 9 9 9
一
0 1
一
1 4 收稿 )
车前草中熊果酸 、齐墩果酸的 H PL C 测定 △
河南中医学院 (郑州 45 0 0 3) 哀 坷 ’ 李根林 李俊芝 杨 怡
摘 要 采用 H P LC 法 同时测定车前草中熊果酸 、齐墩果 酸 的含 量 。 选用 Cl 。 O D S 色谱柱 , 流动
相 : 甲醉 一水 (8 8 : 1 2) , 检测 波长 : 2 2 0 n m , 流速 : 0 . 6 m L / m in , 柱 温 : 25 ℃ 。 熊 果酸和齐墩果 酸分别
在 0 · 4 0 4 2 ~ 2 · 0 2 0 拌g (r = 0 . 9 9 8 4 )和 0 . 4 1 0 一 2 . 0 5 0 拜g (; = 0 . 9 9 9 7 )范围 内呈线性 ; 熊果 酸 、齐墩果
酸的平均 回收率分别 为 98 . 2 % (R S D 一 1 . 74 % )和 97 . 8环 (R S D ~ 2 . 24 % ) 。 该法准确 、快 速 、灵敏 ,
重现性好 。
关键词 车前草 熊果酸 齐墩果 酸 H PL C 法
D e te r m in a tio n o f U r s o lie A eid a n d O le a n o lie A c id in A s ia tie Pla n ta in
(Pl
a n t a g o a sia tica ) b y H PL C
Y u a n K e
,
A bs tr 肠C t
L i G e n lin
,
L i Ju n z h i
, e t a l
.
(H e
’n a n C o lle g e o f T CM
,
Z he n g z h o u 4 5 0 0 0 3 )
T he e o n te n ts o f u r s o lxe a e id a n d o le a n o lie a e id in P la n ta g o a sia tic a L
.
w a s d e te rm in e d by
A d d r e s s
:
Y
u a n K
e ,
H e n a n C o lle g e o f T
r a d it io n a 王C hin e s e M e d ie in e ,
△河南省 自然科学基金资助课题第 9 9 4 0 2 4 0 号
Z h e n g z h o u
《中草 药》19 9 9 年第 3 0 卷第 1 2 期 9 0 1
H PL C
.
T h e H PL C s ys te m e o n s is te d o f C zs
一
O D S
,
m o b ile ph a s e o f m e th a n o l
一
w a t e r (9 6 , 4 ) m ix t u r e
,
w ith d e
-
t e c tio n a t 2 2 0 n m
,
flo w r a te 0
.
6 m L / m in a n d e o lu m n t e m p e ra t u r e 2 5 C
.
T he lin e a r r a n g e s o f d e te rm in a t io n
o f u r s o lle a e id a n d o le a n o lie a e id w e r e 0
.
4 0 4 一 2 . 0 2 0 拜g , r = 0 . 9 9 8 4 a n d 0 . 4 1 0 ~ 2 . 0 5 0 拜g , r = 0 . 9 9 9 7 , r e -
s p e e t iv e ly
.
T h e m e a n r e e o v e r y o f 9 8
.
2 %
,
R S D 1
.
7 4 %
,
fo r u r s o lie a e id a n d 9 7
.
8肠 , R S D 2 . 2 4 % fo r o lea n o -
lle a e id 15 o b t a in e d
.
T h e m e th o d 15 s e n s it iv e
, r a p id a n d a e e u r a t e w it h g o o d r e p r o d u e ib ilit y
·
K e y w o r d s P la n t a g o m 刃o r L . u r s o lie a e id o le a n o lie a e id
车前草为车前科植物车前 尸la n ta g 。 as i-
at ic a L
. 或平车前 尸 . d eP re ssa W il d . 的干燥
全草 。 车前草为传统中药 , 具有清热利尿 、祛
痰 、凉血 、解毒 的功能 , 并且有致泻 、护肝 、 降
压 、降低血清转氨酶 、抗癌 、抑 菌和 降低血清
胆固醇的作用 巨‘一 5」。 熊果酸和 齐墩果酸为车
前草中的主要有效成分 , 其含量测定方法未
见报道 。 我们研究建立了 H PL C 法同时测定
车前草中熊果酸 、齐 墩果酸 的含量 。 该法准
确 、快速 、灵敏 , 重现性好 。
l 仪器 、样品及试剂
L C
一
SA 型高效液相色谱仪 (日本 岛津公
司 ) , SP D 一 SA 型 紫外 一可 见检测 器 , C 一 R 3 A e
p lu s 型数据处理机 。
熊果酸 、齐墩果酸对照 品 由中国药 品生
物制品检定所提供 。
本实验所用 车前 草于 1 9 9 7 年 7 月采 自
河南省郑州市郊 , 采集的植物标本由本院标
本 室 王 中 会 副 教 授 鉴 定 为 车 前 科 车 前
P
.
a s ia t ic a L
. 及 平车前 P . d ePr e s s a W illd .
的干燥全草 。 甲醇 (色谱纯 ) , 水 (双蒸水) 。
2 色谱条件
流动相为甲醇 一水 (8 8 : 1 2 ) , 色谱柱 : C 1 8 -
O D S 柱 ( 日本 岛津 ) , 检测波长 入一 2 20 n m ,
灵敏度 : 0 . 0 05 A U F S , 流速 : 0 . 6 m L / m in ,
柱温 : 2 5 C 。
3 实验方法
3
.
1 对照品溶液的配制 : 精密称取减压干燥
至恒重 的熊果酸对照 品 2 . 0 2 m g , 齐墩果酸
对照品 2 . 05 m g , 置 10 m IJ 容量瓶 中 , 加甲
醇溶解并稀释至刻度 , 制成对照品混合溶液 ,
分别为 0 . 2 0 2 m g / m L 和 O · 2 0 5 m g / m L 。
3
.
2 样品的预处理 : 车前全草去泥土 , 阴干
·
9 0 2
.
后经 50 、C 鼓 风干燥 3 h , 粉碎研细并过 60
目筛 。精密称取 2 0 9 , 加乙醚 2 5 0 m L 置索氏
提取器 中提取至近无色 (l 6 h ) , 将 乙醚提取
液抽滤后浓缩至干 , 残渣用甲醇溶解 , 转移至
5 0 m L 容量瓶中用 甲醇定容至刻度备用 。
3
.
3 线性关系的考察 : 取上述对照品的混合
溶液 分别 以 2 . 0 , 4 . 0 , 6 . 0 , 8 . 0 , 1 0 · 0 拌L 进
样分析 , 按上述色谱条件测定峰面积 , 以峰面
积值为横坐标 、 以 对照 品的进样量 为纵坐标
作图 , 分别得到通过原点的直线 。回归方程分
别为 :
Y (熊果酸 ) = 1 3 6 5 7 3 2 . 7 X 一 3 2 7 5 2 · 9 , r = 0 · 9 9 8 4
Y (齐墩果酸 )= 7 1 8 5 6 3 . 7 X 一 1 5 9 1 · 9 , r = 0 . 9 9 9 7
结果表明熊果酸进样量在 0 . 4 0 4 一 2 . 02
拼g 范围内线性关系 良好 , 齐墩果酸进样量在
0. 4 1。一 2. 0 5 0 拜g 范围内线性关系良好 。
3
.
4 精密度试验 :精密吸取对照品混合溶液
5 拜L , 重复进样 5 次 , 分别测定峰面积值 , 计
算 出熊果酸的 R S D 为 1 . 68 % , 齐墩果酸的
R S D 为 1 . 3 7 % 。
3
.
5 重复性试验 : 取 5 拜L 同一浓度的含对
照品的甲醇溶液 , 在上述色谱条件下连续进样
5 次 , 根据峰面积值 , 计算出熊果酸的 R S D 为
2
.
74 %
, 齐墩果酸的 R S D 为 2 . 63 % 。
3
.
6 加样回收率试验 : 精密称取干燥恒重并
过 6 0 目筛的车前草 4 份 , 每份 5 9 , 其 中 2
份加 人 已 精密 称定 的熊果 酸 、齐墩 果酸各
0
.
5 m g
,
4 份样品同时提取 , 其方法同样品的
预处理 , 用甲醇定容 50 m L , 按上述色谱条件
测定 , 计算回收率 。 结果熊果酸 、齐墩果酸的
平均 回 收率分别为 9 8 . 2 1 % , 9 7 . 8 2 % , R S D
分别为 1 . 7 4 % , 2 . 2 4 % 。
3
.
7 样品测定 : 分别精密吸取对照品混合溶
液与样品溶液各 5 拜L , 注人液相色谱仪 , 按上
述色谱条件测定 , 用外标法计算出样品中熊果
酸和齐墩果酸的含量 , 结果见图 1 及表 1 。
三工血一一元
A
一对 照品 B 一样品
1一齐墩果酸 2一熊果酸
图 1 对照 品及样品的 H PL C 图谱
表 1 车前草中熊果酸 、 齐墩果酸的含t
熊果酸含量 (% ) R S D (% ) 齐墩果 酸含量 (% ) R S D (% )
车 前 0 . 2 8 4 1 . 08 0 . 2 2 7 2 . 84
平 车前 0 . 2 7 6 1 . 6 3 0 . 2 0 4 1 · 9 2
4 讨论
4
.
1 由于熊果酸和齐墩果酸均属三枯酸 , 且
结构极为相似 , 两者极性几乎无差别 , 因此在
薄层板上很难将两种成分分离开 , 从而无法
建立薄层扫描法对其进行测定 。 而这两种成
分在天然植物 中似乎又是共生共存 的 , 因此
建立 H PL C 法对其进行含量测定就显得尤
为重要 。 但由于波长在 2 2 0 n m 处 , 溶剂甲醇
也有强吸收 , 故测定前必须消除背景 。
4
.
2 从表 1 可以 看出车前草中熊果酸的含
量高于齐墩果酸 。
4
.
3 本法简便易行 、准确灵敏 , 适应范围广 ,
可用于检验 、评价车前草及其产品质量及生
产工艺控制 。
参 考 文 献
1 中华 人 民共 和国药典 . 一部 . 北 京 : 人民卫 生出版社 ,
19 8 5
:
5 0
2 江 苏新医 学 院编 : 中药大辞典 . 上册 . 上海 : 上海人 民
出版社 , 19 7 7 : 4 0 1
3 国家 医药管理局 中草药情报 中心 站编 . 植物药有效 成
分手册 . 北京 : 人民 出版社 , 1 9 8 6 (3 ) : 9 68
4 成都 中医 学 院 . 中药学 . 上海 : 上海科 学技术 出版社 ,
1 9 7 8
: 1 9 9
5 贾丹兵 , 等 . 中草药 , 1 9 90 , 2 1 (l ) : 2 4
(1 9 9 8
一
1 1
一
3 0 收稿 )
气相色谱一质谱联用分析广霍香挥发油成分含量
山 东大学实验 中心 (济南 25 0 1 0 0) 刘廷礼 ‘ 邱 琴 崔兆杰
山东大学 化学学 院 赵 怡 赵伟亮
摘 要 采用水蒸 气蒸 馏法从广蓄香 中提取挥 发油 。 采用不 同类型的毛细 管柱 进行分析 . 找出最
佳分析条件 , 用 归一 化法测定其百分 含量 , 并用气相 色谱一质谱 法对化学成 分进 行鉴定 。 共鉴定 了
2 3 个成分 , 占挥发油总组分的 82 % 以上 。
关键词 广霍香 挥发 油 气相色谱 一质谱 毛细管气相色谱
广蕾 香为唇 形科植 物广蕾 香 尸口g os le -
m o n c a blin (B la n e o ) B e n t h
. 的干燥 地上部
分 , 系多年生草本 , 均为栽培 , 主产于广东 [l] 。
广霍香具有芳香化浊 , 开 胃止呕 , 发表解暑之
功效 [ 2〕。
笔者采用广东所产广蕾香的干燥地上部
分 , 以水蒸气蒸馏法蒸出挥发油 , 进行毛细管
气相色谱分析 , 共分离出 28 个峰 , 以归一化
法计算 了各个峰的相对含量 , 用气相色谱 一质
谱法从中共鉴定 了 23 个成分 , 占挥发油总组
分的 82 % 以上 。
1 挥发油的提取
将广 蕾香 (由山东省药品采购供应站提
供 )粉碎后 , 用挥发油提取器按常规水蒸气蒸
馏法提取挥发油 , 经无水硫酸钠干燥后得挥
发油 。 收油率为 0 . 6 % , 挥发油为淡黄色透明
油状物 , 具有特殊浓郁香味 。
2 实验方法与条件
2
.
1 实验仪器 : G C 一 g A 型气相色谱仪 (日本
岛津 ) ; C 一R ZA 型数据处理系统 (日本岛津 ) ;
A d d
r e s s : L iu T in g li
,
E x p e r im e n t a l (:e n te
r o f Sh a n d o n g U n iv e
r s it y
,
Jin a n
《中草药》1 9 9 9 年第 3 0 卷第 12 期 . 9 0 3 -