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肉苁蓉总苷对 60Coγ射线损伤小鼠免疫功能的防护作用
商小英 ,王晓雯 ,王雪飞 ,杨永新
(新疆医科大学 基础部药理教研室 ,新疆 乌鲁木齐　 830054)
摘　要:目的　研究肉苁蓉总苷 ( GCs)对 60 Co损伤小鼠免疫功能及 30 d存活率的影响。 方法　小鼠在不同剂量
60Coγ射线照射前后 ,均服以 GCs,观察辐射及 GCs对其免疫功能的改变。 结果　 60 Co照射剂量为 2, 4及 7 Gy时 ,
可造成小鼠体液免疫、细胞免疫功能和非特异性免疫功能及 30 d存活率下降 ( P < 0. 05或 P < 0. 01); GCs( 31. 25,
62. 5, 125 mg /kg )组可促进上述各指标的恢复 ,对 60Co损伤小鼠的抗体产生 、外周血 T淋巴细胞数目、迟发型超敏
反应、腹腔巨噬细胞的吞噬功能均有明显保护作用 (P < 0. 01或 P < 0. 05) ;且能提高受照小鼠的脾指数、胸腺指数
及 30 d存活率 (P < 0. 01或 P < 0. 05)。 结论　 GCs对辐射损伤小鼠的免疫功能具有较强防护作用。
关键词: 肉苁蓉总苷 ;辐射损伤 ;免疫功能 ;存活率
中图分类号: R285; R967　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0139 04
Protective effect of glycos ides of cistanche on immune function of
60
Coγ-ray irradiated mice
S HAN G Xiao-ying , WANG Xiao-w en, WAN G Xue-fei, YAN G Yong-x in
　　 ( Depa rtment o f Pharmaco log y, Xinjiang Univ ersity o f Medica l Sciences, Wulumuqi Xinjing 830054, China)
Abstract: Object　 To investig ate the effect of cistanche g lycosides ( GCs) on immune functions and 30
d surviv al ra te o f
60
Co irradiated mice. Methods　 Mice w ere given GCs bo th befo re and after 60 Co irradia-
tion at di fferent doses, and the changes of their immunological functions observ ed by routine immunopha r-
macologic methods. Results　When irradiated at doses of 2, 4, and 7 Gy wi th 60 Co , the humo ral, cellula r
and non-specific immunity, and 30 d surviv al rate w ere all decrea sed ( P < 0. 05 o r P < 0. 01) . GCs at
doses of 31. 25, 62. 5 and 125 mg /kg could facilitate recoveries o f al l the above indices. GCs could also be
beneficia l to
60
Co irradiated mice in the fo llowing aspects: production o f antibodies impaired by
60
Co; pe-
ripheral blood T lymphocy te count; delay ed hypersensi tivi ty and phygocytosing function of peri toneal
macrophage ( P < 0. 01 o r P < 0. 05) . Fur thermo re, the immune index and 30 d surviva l ra te w ere in-
creased (P < 0. 01 o r P < 0. 05) . Conclusion　 GCs has protectiv e ef fects on immune functions of ir radi-
ated mice.
Key words: total glycosides of Cistanche salsa ( C. A. M ey ) G. Beck ( GCs) ; radiation injury; im-
·139·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-07-10基金项目:新疆自治区科委基金资助 No. 96814作者简介:商小英 , 1972年 7月生 ,女 ,籍贯四川 , 1992～ 1999年就读于新疆医科大学 ,获药理学学士学位及药理学硕士学位 ; 1999年至今于北京大学医学部免疫学系攻读 T细胞研究博士学位 ,研究方向为树突状细胞的抗原呈递功能及肿瘤的免疫治疗。联系地址:北京大学医学部免疫学系 T细胞研究室　邮政编码: 100083　联系电话: ( 010) 62091155
mune function; surviv al ra te
　　肉苁蓉为列当科鳔苁蓉植物肉苁蓉的干燥带鳞
片的肉质茎 ,主产于我国西北地区 ,有补肾益精、润
燥的功能 ,主治男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等症。
近代药理学研究表明 ,肉苁蓉粗制剂具有增强免疫
功能 ,促进记忆 ,抗衰老等作用 [1 ]。 肉苁蓉总苷
( GCs)是从新疆北部产盐生肉苁蓉 Cistanche salsa
( C. A. M ey. ) G. Beck. 中提取出的主要生物活性
成分 [2 ] ,已证明 GCs具有抗脂质过氧化作用 [3 ] ,能
够保护冠脉结扎造成的大鼠心肌缺血 [4 ]。我们研究
了 GCs对 60 Coγ损伤小鼠免疫功能及 30 d存活率
的影响。
1　材料
1. 1　药品: 肉苁蓉总苷 ( Glycosides of Cistanche
salsa ,简称 GCs)系肉苁蓉中一类含苯乙醇苷类结
构成分的总称 ,由新疆医科大学药学院植化教研室
按日本文献提取并鉴定 [2 ] ;经紫外分光光度法测定 ,
以松果菊苷为对照品 ,测定波长为 333 nm时 ,所测
得苯乙醇总苷的含量为 67. 8% ;其中 ,松果菊苷是
肉苁蓉中主要活性成分之一 ,经 HPLC法测定 ,松
果菊苷在总苷中的含量为 10. 3%。 黄芪注射液
( AM ) ,上海福达有限公司生产 ,批号: 961208。绵羊
红细胞 ( sRBC)及鸡红细胞 ( cRBC) ,由新疆医科大
学动物房采集。 补体 ,采自多只豚鼠的混合血清 ,
- 40℃保存备用。
1. 2　动物:健康 N IH小鼠 , 6～ 8周龄 ,雌雄兼用 ,
由新疆地方病研究所实验动物中心提供。
1. 3　实验器材: 无菌超净台 (苏州净化设备厂 ) ,
O LYMPUS显微镜 (日本产 ) , YXQ GO2型手提式
高压蒸气消毒锅 (山东新华医疗器械厂 ) , 721型分
光光度计 (上海第三分析仪器厂 ) ,低温冰箱。
2　方法
2. 1　 GCs对辐射损伤小鼠体液免疫功能的影响:
取 N IH小鼠 90只 ,体重 ( 21. 5± 2. 2) g,随机均分
为 6组。正常对照组、照射对照组 ,均给以生理盐水
(N S) 20 m L /( kg· d) ;照射黄芪组 ,给以黄芪注射
液 20 mL /kg ,相当于生药 40 g /( kg. d) ;照射 GCs
31. 25, 62. 5, 125 mg /( kg. d)组。连续 ig给药 11 d,
第 6天后 5组用 60 Co照射 ,照射剂量为 2 Gy。照射
后次日每只 ip 3∶ 5 sRBC悬液 0. 2 mL免疫 ,继续
给药 4 d后 ,于实验第 11天称小鼠体重 ,摘除眼球
取血 ,分离血清测血清溶血素 ( HC50 )值 [5 ] ;小鼠处死
取脾 ,以脾重 /体重为脾指数 ( mg /g ) ;随即研磨脾 ,
取脾细胞悬液 ,用分光光度法测定空斑形成细胞
( PFC)溶血能力 [6 ]。
2. 2　 GCs对辐射损伤小鼠细胞免疫功能的影响:
取 N IH小鼠 60只 ,体重 ( 20. 6± 2. 0) g ,分组同 2. 1
项 ,连续 15 d ig给药。第 6天后 5组用 60 Co照射 ,照
射剂量为 4 Gy。 照后次日每鼠左后足跖 sc 10%
sRBC生理盐水悬液 50μL免疫 ; 7 d后 ,每鼠右后足
跖用 5% sRBC生理盐水悬液 50μL攻击。以千分卡
尺测量攻击前和攻击后 24 h右后足跖厚度 ,以其差
值表示肿胀度 ( mm ) ,测定迟发型超敏反应 ( DT H)。
小鼠尾静脉采血 ,制成血推片 ,进行酯酶染色 ,显微
镜油镜下记数 200个淋巴细胞 ,求其阳性淋巴细胞
的百分率 ,即为 T细胞百分率 [7 ] ;实验第 15天小鼠
称体重 ,处死取胸腺 ,称取胸腺重量 ,以胸腺重 /体重
为胸腺指数 ( mg /g )。
2. 3　 GCs对辐射损伤小鼠腹腔巨噬细胞 ( PM )吞
噬功能测定: N IH小鼠 60只 ,体重 ( 22± 2. 0) g ,分
组同 2. 1项 ,连续 15 d给药。第 6天后 5组用 60 Co
照射 ,照射剂量为 4 Gy,第 13天每只小鼠 ip 0. 01%
糖原溶液 2 mL,第 15天末次给药后 1 h给每鼠 ip
2% cRBC生理盐水悬液 1 mL, 4 h后处死小鼠 ,收
集腹腔巨噬细胞 ,以 1 000 r /min离心 10 min,弃上
清 ,留沉淀少许 ,涂片 ,行 Giemsa染色。油镜下计数
50个巨噬细胞 ,计算吞噬百分率和吞噬指数 [8 ]。
2. 4　 GCs对小鼠照射后 30 d存活率的影响: 取
N IH小鼠 142只 ,分组见表 4。连续 12 d ig给药 ,第
6天后 4组 60Co照射 ,剂量为 7 Gy ,照后继续给药 1
周。 从照射后起观察小鼠在 30 d内的存活情况 ,每
日记录小鼠的状态、死亡数。 并计算出小鼠 30 d存
活率、提高率及保护系数 [8 ]。
2. 5　统计学处理:计量资料结果用 x± s表示 ,两组
均数的比较采用 t检验 ;计数资料多个样本率的比
较 ,采用χ2检验。
3　结果
3. 1　 60 Co照射小鼠免疫功能及 30 d存活率的影
响: 照射剂量 2 Gy可导致小鼠外周血 HC50、 PFC溶
血能力、脾指数下降 ,见表 1。照射剂量 4 Gy可导致
小鼠 sRBC-DT H反应减弱 ,腹腔巨噬细胞吞噬功能
减退及外周血 T细胞数目、胸腺指数下降 ;上述各
指标与正常对照组比较 ,均有显著性差异 ( P <
0. 05)和 P < 0. 01,见表 2, 3。照射剂量 7 Gy可致小
鼠 30 d存活率明显低于正常对照组 ( P < 0. 01) ,见
·140· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
表 4。
3. 2　 GCs对 60 Co损伤小鼠体液免疫功能的影响:
见表 1。与照射对照组相比 ,照射后 GCs 3个剂量组
可促进小鼠血清中 s RBC-Ab的生成 ,提高 HC50值
表 1　 GCs对照射损伤小鼠体液免疫功能的影响 ( x± s ,n= 15)
组　别 剂　量
( mg /kg )
HC50
( A)
PFC
( A)
脾指数
( mg /g)
正常对照 　　　— 　　　　 231. 07± 32. 88 　　　　　 0. 24± 0. 054 　　　　 6. 44± 0. 74
照射对照 　　　— 58. 27± 13. 67* * 0. 09± 0. 028* * 3. 61± 0. 60* *
照射黄芪 　　　— 132. 85± 34. 45# # 0. 16± 0. 057 5. 51± 0. 92# #
照射 GCs 　 　 31. 25 99. 87± 38. 50# # 0. 11± 0. 046 4. 81± 0. 75# #
62. 50 109. 07± 42. 37# # 0. 12± 0. 037 5. 17± 0. 67# #
125. 00 122. 49± 37. 39# # 0. 15± 0. 054# # 5. 49± 0. 65# #
　　　　与正常对照组比较: * * P < 0. 01;　与照射对照组比较: # # P < 0. 01
表 2　 GCs对照射损伤小鼠细胞免疫功能的影响 ( x± s ,n= 15)
组　别 剂　量
( mg /k g)
DT H
(mm)
胸腺指数
( mg /g)
T细胞
(% )
正常对照 　　　　　— 　　　　 0. 29± 0. 088 　　　　 2. 37± 0. 42 　　　　 75± 4. 9
照射对照 　　　　　— 0. 15± 0. 060* 1. 61± 0. 65* * 63± 2. 2* *
照射黄芪 　　　　　— 0. 38± 0. 13# # 2. 68± 0. 62# # 72± 4. 7# #
照射 GCs 　　 　　 31. 25 0. 28± 0. 11# # 2. 37± 0. 69# 72± 3. 5# #
62. 50 0. 38± 0. 14# # 2. 42± 0. 58# 73± 6. 8# #
125. 00 0. 37± 0. 13# # 2. 67± 0. 88# # 78± 3. 9# #
　　　　与正常对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与照射对照组比较: # P < 0. 05　# # P < 0. 01
表 3　 GCs对照射损伤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 ( x± s ,n= 15)
组　别 剂量 (mg /kg) 吞噬率 (% ) 吞噬指数
正常对照 — 　　　　　　 71± 4. 40 　　　　　 1. 18± 0. 17
照射对照 — 30± 8. 50* * 0. 54± 0. 17* *
照射黄芪 — 60± 7. 00# # 1. 10± 0. 095# #
照射 GCs 31. 25 66± 5. 70# # 1. 28± 0. 27# #
62. 50 68± 5. 90# # 1. 28± 0. 29# #
125. 00 64± 4. 70# # 1. 33± 0. 25# #
　　　　与正常对照组比较: * * P < 0. 01;　与照射对照组比较: # # P < 0. 01
表 4　 GCs对照射损伤小鼠 30 d存活率的影响 ( x± s ,n= 15)
组　别 剂量 ( mg /kg ) 实验数 (只 ) 存活数 (只 ) 存活率 (% ) 保护系数 (K )
正常对照 — 10 10 　　　　 100
照射对照 — 33 1 3. 03* *
照射 GCs 31. 25 33 9 27. 27# 1. 50
62. 50 33 8 24. 24# 1. 45
125. 00 33 11 33. 33# # 1. 57
　　　　与正常对照组比较: * * P < 0. 01;　与照射对照组比较: # P < 0. 05　# # P < 0. 01;　与照射对照组比较: K> 1. 2为有效
(P < 0. 01) ,但仍明显低于正常对照组 ; GCs 31. 25,
62. 5 mg /kg组可使鼠脾细胞溶血能力 ( PFC值 )提
高 ,但无统计学意义 , GCs 125 mg /kg组其 PFC值
显著提高 (P < 0. 01) ; GCs 3个剂量组均能增加脾
指数 (P < 0. 01) ,且接近正常对照组。
3. 3　 GCs对 60 Co损伤小鼠细胞免疫功能的影响:
见表 2。与照射对照组比较 , GCs 3个剂量组可增强
受照射小鼠的 DTH反应 (P < 0. 01) ;可增加受照射
小鼠外周血中 T细胞数目 ( P < 0. 01) ;对受照射小
鼠的胸腺重量减轻有保护作用 ,与损伤组相比 , GCs
125 mg /kg组差异显著 ( P < 0. 01) , GCs 31. 25,
62. 5 mg /kg组有差异 ( P < 0. 05) ,以上各值均接近
或高于正常值。
3. 4　 GCs对 60 Co损伤小鼠非特异免疫功能的影
响:见表 3。 GCs各剂量组对腹腔 M 的吞噬率、吞
噬指数与损伤组相比均有所提高 ( P < 0. 01) ,其值
接近正常对照组。
3. 5　 GCs对 60 Co照射小鼠 30 d存活率的影响: 见
表 4。 GCs各剂量组的存活率较损伤组有提高 (P <
0. 05和 P < 0. 01 ) , 提 高 率分 别 为 24. 24% ,
21. 21% , 30. 30% ,其保护系数均在 1. 20以上。
4　讨论
·141·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
机体的免疫系统对辐射高度敏感 ,大、中剂量电
离辐射作用于机体 ,可使免疫功能下降 ,免疫系统各
组成部分均出现抑制性效应。实验观察到当 60Co照
射剂量为 2, 4 Gy时 ,分别造成小鼠体液免疫、细胞
免疫及非特异性免疫功能下降 ,这说明不同照射剂
量对免疫功能的损伤程度是不同的 ,提示 B淋巴细
胞比 T淋巴细胞对电离辐射更为敏感。同时观察到
当照射剂量为 7 Gy时 ,可造成小鼠 30 d存活率降
低 ,这可能与大剂量电离辐射破坏了机体的天然防
御功能 ,引起机体免疫功能全面性抑制 ,导致感染合
并症有关。中药黄芪能够有效对抗微波辐射 [8 ]。本实
验采用黄芪作阳性对照 ,发现 GCs对辐射损伤小鼠
免疫功能具有的防护作用与黄芪类似。
机体所处的状态是中药发挥免疫效应的基础 ,
大多数中药对免疫功能低下者其促进作用尤为明
显 ,并可使紊乱的免疫功能恢复正常 [9 ]。本实验结果
提示 GCs能不同程度地调节辐射损伤小鼠的体液
免疫、细胞免疫及非特异性免疫功能 ,在实验剂量
下 , GCs增强细胞免疫及非特异性免疫作用可能高
于体液免疫 ,且呈一定的剂量依赖关系 ,其确切分子
机制很值得探讨。
GCs 具有抗自由基损伤 ,抗脂质过氧化作
用 [10 ]。我们认为 GCs可能通过直接或间接清除自由
基及脂质过氧化产物 ,保护免疫器官、细胞及分子 ,
从而增强机体的免疫功能。肉苁蓉在新疆资源丰富 ,
深入研究 GCs的抗辐射作用 ,对于临床预防、治疗
放疗病人所致的免疫系统损伤 ,无疑是大有裨益的。
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魔芋低聚糖对小鼠血糖含量和抗氧化能力的影响
杨艳燕 1 ,李小明 2 ,李顺意 1 ,高　尚 1 ,倪　红 1
( 1. 湖北大学生命科学学院 ,湖北 武汉　 430062;　 2. 湖北医科大学 生化教研室 ,湖北 武汉　 430071)
摘　要: 目的　研究魔芋低聚糖对小鼠血糖含量及抗氧化能力的影响。 方法　分别用 5% 、 15%的葡萄糖溶液和同
样浓度的魔芋低聚糖溶液为小鼠 ig,取血样测定多项生化指标。结果　高浓度葡萄糖可使小鼠血糖含量增高 ,而同
样浓度的魔芋低聚糖未使血糖含量发生明显变化 ,却使小鼠体内超氧化物歧化酶 ( SOD)活性明显升高 ,同时降低
了过氧化脂质 ( LPO )水平。 结论　魔芋低聚糖不升高血糖 ,且能提高机体抗氧化能力。
关键词: 魔芋低聚糖 ;血糖 ;超氧化物歧化酶 ;过氧化脂质
中图分类号: R285; R977　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0142 03
Effect of Konjac oligosaccharide on blood sugar and antioxidant ability of mice
YANG Yan-yan1 , L I Xiao-ming2 , L I Shun-yi1 , GAO Shang1 , N I Hong1
　　 ( 1. Colleg e of Life Sciences, Hubei Univ er sity , Wuhan Hubei 430062, China; 2. Depar tment of Biochemistr y , Hubei
Univ ersity o f Medica l Sciences, Wuhan Hubei 430071, China )
Abstract: Object　 To study the effect of konjac olig osaccharide on the blood sugar and antioxidant a-
bi li ty of mice. Methods　 Different g roups of mice w ere giv en ( ig) sepa ra tely w ith ei ther 5% or 15% kon-
·142· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-05-07基金项目:湖北省生物化学与分子生物学重点学科基金资助作者简介:杨艳燕 ( 1951年 3月 -)女 ,湖南祁阳人 ,副教授 ,硕士 , 1982年毕业于重庆医科大学生物化学专业 ,从事酶学与药学研究多年 ,现任湖北大学生命科学学院副院长。 联系电话: 027-86741746