全 文 ：化合物Ⅴ : 白色粉末 ( MeOH) , mp 237℃～ 238
℃。ESI-M S m /z: 1 636. 7 [2M ]+ 、 901. 6 [M+ AcOH
+ Na ]+ 、 841. 2 [ M+ Na ]+ 、 877. 4 [M+ AcO ]+ 、
816. 3 [ M - 2H ]
- 、 653. 1 [ M - glc- 2H ]- 、 491. 2
[M- 2g lc- 2H ]
-。 1HNM R( C5D5N )δ: 0. 79, 0. 90,
1. 10, 1. 26, 1. 39, 1. 45, 1. 57, 1. 61(各 3 H, s, 8个角
甲基 ) , 3. 25( 1H, dd, J= 11. 5, 4. 2 Hz, H-3) , 3. 76
( 1H, brd, J= 9. 5 Hz, H-24) , 3. 95( 1H, m, H-12) ,
4. 92( 1H, d, J= 7. 5 Hz, 3-g lc内侧 H-1′) , 5. 37( 1H,
d, J= 7. 7 Hz, 3-glc内侧 H-1″)。 13 CNM R谱数据见
表 1。
化合物Ⅷ :白色粉末 ( BuO H-EtAc) , mp 194℃
～ 196℃。 1HNMR、 13 CNMR数据与文献 [8 ]基本一
致 ,确定Ⅷ为人参皂苷 -Rg1 (ginsenoside-Rg1 )。
化合物Ⅸ : 白色针晶 ( EtO H) , mp 187℃～ 189
℃。 1HNM R、 13CNMR数据与文献 [8 ]基本一致 ,确定
Ⅺ为人参皂苷 -Rg2 ( ginsenoside-Rg2 )。
参 考 文 献
1　刘铁成主编 .中国西洋参 . 北京:人民卫生出版社 , 1995: 1
2　陈　霞 ,杨世杰 ,陈　立 ,等 . 中国中药杂志 , 1994, 19( 10): 617
3　 Mochizuki M , Yoo Y C, Matsuzama, et al . Biol Ph arm Bul l,
1995, 18( 9): 1197
4　 Tode T, Kikuchi-Y, Ki ta-T, et al . Cancer Res Clin Oncol,
1993, 120( 1- 2): 24
5　 Ng uyen M D, Minh Duc, Ryo ji Kasai Kazuhi ro Oh tani, et a l.
Chem Pharm Bull , 1994, 42( 3): 634
6　李平亚 ,李　铣 ,郝秀华 ,等 . 中草药 , 1991, 30( 8): 563
7　魏均娴 ,王菊芬 ,李增荣 ,等 . 中草药 , 1983, 14( 9): 5
8　王本祥主编 .人参研究进展 . 天津:天津科学技术出版社 , 1991:
29
( 1999-09-24收稿 )
金铁锁中的四个环二肽△
云南大学化学系 (昆明 650091)　　　　　　　　　　丁中涛
中国科学院昆明植物研究所植物化学开放实验室　 　周　俊　谭宁华
摘　要　从石竹科植物金铁锁 Psammosilene tunicoides中分离得到 2个环二肽及由 2个环二肽组成的混合物。 它
们的结构经光谱鉴定为环 (丙 -丙 ) (Ⅰ )、环 (丙 -缬 ) (Ⅱ )、环 (丙 -亮 ) (Ⅲ )和环 (丙 -异亮 ) (Ⅳ )。 它们均为新的天然产
物。
关键词　金铁锁　石竹科　环二肽
Cyclic Dipeptides from the Root of Psammosilene tunicoides
　　Depar tment of Chemistr y , Yunnan Univ er sity ( Kunming 650091)　 Ding Zhong tao
　　Kunming Institute o f Bo tany , Chinese Academ y o f Sciences　 Zhou Jun and Tan Ninghua
Abstract　　 From the ro ot of Psammosilene tunicoides W. C. Wu et C. Y. Wu, tw o cyclic dipeptides
(Ⅰ , Ⅱ ) and a mix ture of o ther tw o cyclic dipeptides (Ⅲ , Ⅳ ) w ere obtained. Thei r st ructures w ere
elucida ted as cyclo Ala-Ala (Ⅰ ) , cyclo Ala-Val (Ⅱ ) , cy clo Ala-Leu (Ⅲ ) , and cyclo Ala-Ile (Ⅳ ) , by
spect ro scopic means respectively. All of them are new natural products.
Key words　　 Psammosilene tunicoides W. C. Wu et C. Y. Wu　Caryophyl laceae　 cyclic dipeptide
　　金铁锁 Psammosilene tunicoides W. C. Wu et
C. Y. Wu是石竹科单种属植物 ,主要分布于云南、
四川、贵州等省区。 它是云南省著名的民间药用植
物 ,具有散瘀止痛、消痈排毒的功能 ,主要用于跌打
损伤、筋骨疼痛等症 [1 ]。 其根主要含皂苷成分 [2～ 4 ]。
作为石竹科植物环肽系列研究的一部分 [5～ 11 ] ,我们
研究了该植物的环肽成分 ,已从中分离鉴定了 2个
新的、微量的环八肽 [10 ]。经进一步研究 ,我们又分离
得到 2个环二肽 [环 (丙 -丙 ) (Ⅰ )、环 (丙 -缬 ) (Ⅱ ) ],
以及由 2个环二肽 [环 (丙 -亮 ) (Ⅲ )和环 (丙 -异亮 )
(Ⅳ ) ]组成的混合物。本文主要报道这些环二肽的提
取分离和结构鉴定。
·803·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期
Address: Di Zhong tao, Ch emical Department of Yunnan Univ ersi ty, Kunming丁中涛　男 , 1968年 12月生 ,云南人。 1993年 7月硕士毕业于云南大学化学系分析化学专业 ,并留校任教。 1996年 3月至 1999年 1月在中国科学院昆明植物研究所攻读博士学位 ,师从于周俊院士。 1999年 1月获博士学位。现为云南大学化学系副教授。 主要从事天然产物化学研究。△云南省教委资助课题 ( 9911143)
化合物Ⅰ 和Ⅱ均为无色针状结晶 ,对茚三酮反
应呈阴性 ,但经 6 mo l /L的 HCl水解后 ,则对茚三
酮反应呈阳性。 它们的红外光谱均在 3 300和 1 650
cm
- 1处分别有 NH和 C= O的吸收峰。
化合物Ⅰ 的高分辨质谱 ( HREI-M S)显示其分
子式为 C6H10N2O2 ( [M+ ]m /z 142. 073 3,计算值:
142. 074 2)。其中 1 HNMR和 13 CNMR谱分别显示有
2个具有相同化学位移的酰胺质子 (δ9. 34, br. , s)
和羰基碳信号 (δ170. 2) ,这表明该化合物是一个由
2个相同的氨基酸残基构成的对称的环二肽。 进一
步仔细分析其 DEPT谱 ,发现除上述 δ170. 2羰基
碳信号外 ,仅还有 δ51. 2的 CH信号和 δ19. 1的
CH3信号 ,分别对应 1 HNMR谱中的δ4. 28 ( q, J=
8. 0 Hz)和δ1. 63( d, J= 8. 0)的氢信号。这表明构成
该环二肽的氨基酸基是丙氨酸残基 ,故化合物Ⅰ 为
环 (丙 -丙 )。
化合物Ⅱ的高分辨质谱 ( HREI-M S)显示其分
子离子峰在 m /z 170. 106 8处 ,由此推断出其分子
式为 C8H14N2O2 (计算值: 170. 105 5)。其中 1 HNMR
和 13 CNMR谱分别显示有 2个酰胺质子 (δ9. 25和
8. 98)和 2个羰基碳信号 (δ171. 5和 167. 5) ,这表明
该化合物是一个环二肽。经对其 1 HNMR、 13 CNMR
以及 DEPT谱的仔细分析 ,证明该化合物是由一个
丙氨酸残基和一个缬氨酸残基构成的环二肽 ,即环
(丙 -缬 )。
混合物为白色粉末 ,由于量少 ( 8 mg )未进一步
分离。它同样对茚三酮反应呈阴性 ,但经 6 mo l /L的
HCl水解后 ,也对茚三酮反应呈阳性。其快原子轰击
质谱 ( FAB-M S)显示 [M+ H ]+峰在 m /z 185处。其
1
HNM R和 13 CNM R谱分别显示有 4个酰胺质子
(δ9. 26、 9. 25、 9. 16和 8. 95)和 4个羰基碳信号
(δ170. 0、 169. 7、 169. 6和 167. 8) ,这表明该混合物
是由 2个分子量相同的环二肽组成的。进一步分析
该混合物的 DEPT、 1 H-1HCOSY和 13 C-1 HCOSY
谱 ,表明有 2个丙氨酸、一个亮氨酸以及一个异亮氨
酸残基的存在。 HMBC谱显示 NH亮 同 C= O丙 1以及
N H异亮同 C= O丙 2有相关性。由此可推断组成这一混
合物的 2个环二肽是环 (丙-亮 ) (Ⅲ )和环 (丙 -异亮 )
(Ⅳ )。
以上推断证实这 4个环二肽的结构如图 1所
示 ,其 1HNM R和13 CNMR数据如后所列。
1　仪器和试剂
熔点由显微熔点仪测定 ,温度未校正 ;红外光谱
用 Bio-Rad FTS-135型红外分光光度计测定 ( KBr
图 1　化合物Ⅰ ～ Ⅳ的化学结构式
压片 ) ;质谱由 VG Auto Spec-3000型质谱仪测定 ;
核磁共振谱用 Bruker Am-400型和 DRX-500型核
磁共振仪测定 ,以 TM S为内标 ,氘代吡啶为溶剂。
薄层层析用硅胶 G高效板 ,柱层析用硅胶 ( 200～
300目和 300～ 400目 )均为青岛海洋化工厂生产。
金铁锁样品购于云南白药厂。
2　提取和分离
金铁锁样品 ( 25 kg )经粉碎后 ,以工业乙醇
( 90% )回流提取 3次 ,每次 4 h。减压浓缩后 ,浸于丙
酮中 ,搅溶 ,过滤得丙酮溶解部分 ,减压浓缩后得浸
膏 166 g。 将丙酮溶解部分进行硅胶柱层析 ,以
CHCl3-M eOH( 99∶ 1→ 70∶ 30)梯度洗脱 ,得Ⅰ ～ Ⅳ
共 4个组分 ,其中组分Ⅱ再进一步经硅胶 H柱层析
多次分离 (分别以 CHCl3-M eOH= 95∶ 5和 EtOAc-
M eOH= 98∶ 2洗脱 ) ,得到化合物Ⅰ ( 17 mg )和Ⅱ
( 12 mg ) ,以及由化合物Ⅲ 和Ⅳ组成的混合物 ( 8
mg )。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ : 无色针状结晶 (甲醇 ) , C6H1 0N2O2 ,
mp: 206℃～ 208℃ ; IR ( KBr )νmax cm- 1: 3 300,
1 650; EI-M S m /z(% ): 142( [M ]
+
, 65) , 114( 16) ,
99 ( 100) , 84 ( 5) , 71 ( 67) , 56( 65) ; HREI-M S m /z:
142. 073 3 [M ]
+ (计算值: 142. 074 2) ; 1 HNMR( 400
M Hz,氘代吡啶 )δ: 9. 30 ( 2H, br. s, N HAla ) , 4. 28
( 2H, q, J= 8. 0 Hz,α-HAla ) , 1. 63( 6H, d, J= 8. 0 Hz,
β-HAla )。 13 CNMR ( 100 M Hz,氘代吡啶 )δ: 170. 5
( COAla ) , 51. 2( CH,α-CAla ) , 19. 1( CH3 ,β -CAla )。如前
所述鉴定为环 (丙-丙 )。
化合物Ⅱ : 无色针状结晶 (甲醇 ) , C8H1 4N2O2 ,
mp: 177℃～ 179℃ ; IR ( KBr )νmax cm- 1: 3 300,
1 650; EI-M S m /z(% ): 170( [M ]
+
, 1) , 128( 100) ,
113 ( 35) , 99 ( 45) , 87( 17) , 72( 47) , 56( 22) ; HREI-
M S m /z: 170. 106 8 [ M ]
+ (计算值: 170. 105 5) ;
1
HNMR( 400 M Hz,氘代吡啶 )δ: 9. 25 ( 1H, br. s,
N H) , 8. 98 ( 1H, br. s, N H) , 4. 35 ( 1H, m ) , 4. 13
( 1H, m ) , 2. 67( 1H, m ,β -HVal ) , 1. 66( 3H, d, J= 4. 0
Hz,β -HAla ) , 1. 14( 3H, d, J= 8. 0 Hz,γ-HV al ) , 1. 07
( 3H, d, J= 8. 0 Hz,γ-HV al )。 13 CNMR( 100 MHz,氘
代吡啶 )δ: 171. 5( CO ) , 165. 5 ( CO ) , 60. 9 ( CH) ,
·804· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期
51. 2 ( CH ) , 32. 2 ( CH,β -Val ) , 20. 9 ( CH3 ,γ-CV la ) ,
19. 1( CH3 ,γ-CVla ) , 17. 1( CH3 ,β -CAla )。 如前所述鉴
定为环 (丙-缬 )。
化合物Ⅲ : 混合物中的一个组分 , C9H16N2O2 ,
FAB-M S m /z: 185 ( [ M + H ]
+
)。 1 HNMR ( 400
MHz,氘代吡啶 )δ: 9. 25 ( 1H, br. s, N HAla ) , 9. 16
( 1H, br. s, N HLen ) , 4. 34( 1H, ca. ,α-HAla ) , 4. 27( 1H,
m ,α-HLeu ) , 2. 12( 1H, ca. ,β -HLeu ) , 1. 96 ( 1H, m,β -
HLeu ) , 2. 12 ( 1H, ca. ,γ-HLeu ) , 1. 66 ( 3H, d, J= 6. 5
Hz,β -HAla ) , 0. 925( 3H,d, J= 6. 0 Hz,δ-HLeu ) , 0. 919
( 3H,d, J= 6. 4 Hz,δ-HLeu )。 13 CNM R( 100 M Hz,氘
代吡啶 )δ: 169. 7( COLeu ) , 169. 6( COAla ) , 54. 1( CH,
α-CLeu ) , 51. 4( CH,α-CAla ) , 43. 9( CH2 ,β -CLeu ) , 24. 7
( CH, γ-CLeu ) , 23. 4 ( CH3 , δ-CLeu ) , 21. 9 ( CH3 , δ-
CLeu ) , 20. 8( CH3 ,β -CAla )。 如前所述鉴定为环 (丙 -
亮 )。
化合物Ⅳ :混合物中的另一个组分 , C9 H16N2O2 ,
FAB-M S m /z: 185 ( [ M + H ]
+
)。 1 HNMR ( 400
MHz,氘代吡啶 )δ: 9. 26 ( 1H, br. s, N HAla ) , 8. 95
( 1H, br. s, N HIle ) , 4. 34( 1H, ca. ,α-HAla ) , 4. 19( 1H,
m ,α-HIle ) , 2. 34 ( 1H, m, β -HIle ) , 2. 06 ( 1H, m,γ-
HIle ) , 1. 74( 1H, m ,γ-HIle ) , 1. 68( 3H, d, J= 6. 5 Hz,
β-HAla ) , 1. 14( 3H, d, J= 7. 2 Hz,γ-HIle ) , 0. 887( 3H,
t , J= 7. 5 Hz,δ-HIle )。 13 CNMR( 100 MHz,氘代吡
啶 )δ: 170. 0 ( COAla ) , 167. 8 ( CO Ile ) , 60. 4 ( CH,α-
CIle ) , 51. 1 ( CH, α-CAla ) , 39. 2 ( CH, β -CIle ) , 24. 9
( CH2 ,γ-CIle ) , 20. 4( CH3 ,β -CAla ) , 15. 6( CH3 ,γ-CIle ) ,
12. 2( CH3 ,δ-CIla )。如前所述鉴定为环 (丙 -异亮 )。
致谢:中国科学院昆明植物研究所植物化学开
放实验室仪器分析组测定所有光谱 ,感谢云南省教
委给予科研经费资助。
参 考 文 献
1　吴征镒 . 新华本草纲要 . 第三册 . 上海:上海科技出版社 ,
1990: 47
2　浦相渝 ,杨崇仁 ,周　俊 . 云南植物研究 , 1984, 6( 4): 463
3　浦相渝 ,周　俊 . 云南植物研究 , 1987, 9( 3) : 369
4　浦相渝 ,周　俊 . 云南植物研究 , 1989, 11(2) : 198
5　 Tan N H, Zhou J, Ch en C X, et al . Ph ytoch emis t ry, 1993, 32:
1327
6　 Zh ao Y R, Zhou J, Wang X K, et al. Phytoch emis t ry, 1995,
40: 1453
7　 Zh ao Y R, Zhou J, Wang X K, et al . Ch inese Journal of
Chemis t ry, 1995, 13( 6): 552
8　张荣平 , Zou C, He Y N,等 . 云南植物研究 , 1997, 19( 3) : 304
9　 Wang Y C, Tan N H, Zhou J, et al . Ph ytochemist ry, 1998, 49:
1453
10　 Ding Z T, Wang Y C, Zhou J, et al . Chin ese Ch emical
Let ters, 1999, 10: 1037
11　 Ding Z T, Zhou J, Tan N H, et a l. Plant M edica, 2000, 66: 386
( 1999-12-06收稿 )
长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究△
云南大学生物系 (昆明 650091)　　张玲琪 　郭　波　李海燕　曾松荣
云南省微生物研究所　　　 　　　邵　华　 谷　苏　魏蓉城
摘　要　首次报道从长春花 Catharanthus roseus ( L. ) G. Don 茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌 Fusarium
oxysporum ,为该植物的一种内生真菌 ,并用 TLC和 HPLC对该菌的 97CG3菌株培养物进行了分析 ,初步结果表明
该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。
关键词　长春花　内生真菌　尖孢镰刀菌　长春新碱
Preliminary Study on the Isolation of Endophytic Fungus of Catharanthus roseus and
Its Fermentation to Produce Products of Therapeutic Value
　　Depar tment of Bio log y , Yunnan Univ ersity ( Kunming 650091)　 Zhang Lingqi, Guo Bo , Li Haiyan and Zeng Song rong
　　Yunnan Institute o f Micr obio lo gy　 Shao Hua , Gu Su and Wei Rongcheng
Abstract　　 An endophy tic fungus, Fusarium oxysparum , ( 97CG3 ) w as isolated f rom the phloem
(inner ba rk) of Catharanthus roseus ( L. ) G. Don fo r the fi rst time. M etabolic products of cul tured 97CG3
have been ana lysed by TLC and HPLC. It w as show n that the fungus can produce vincristine w hich has an
·805·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期
Address: Zh ang Lingqi , Biology Departmen t of Yunnan Universi ty, Kunming张玲琪　女 , 57岁 , 1964年毕业于云南大学。现任生物系教授 ,硕士生导师。长期从事基础微生物学及应用微生物学的教学和科研工作 ,先后主持和参与国家和省自然科学基金以及有关部门委托的纵横向课题 10余项 ,在内生真菌、菌根菌以及环保和食品微生物等方面均完成了较多的工作 ,获得过部、省级科技进步奖 ,已发表有关论文 40余篇 ,并合著出版著作 2本。△国家自然科学基金资助项目 ( No 39860005) ;云南省应用基础研究基金资助项目 ( No 96C009M)