全 文 ：1-木纤维　 2-皮层纤维　 3-果皮　 4-单细胞非腺毛　 5-草酸钙
针晶　 6-韧皮分泌细胞　 7-茎表皮组织　 8-叶表皮 ( a-上表皮 ,
b-下表皮 )　 9-薄壁细胞　 10-花粉粒　 11-环纹导管与纹孔管胞
图 2　茜草藤显微粉末图
图 3　茜草藤的薄层
色谱图
在 254 nm紫外灯下可观察
出 3个黄绿色的斑点 ,而后再
喷以 10%浓硫酸乙醇溶液 ,
在 105℃下烘烤 ,所有斑点显
色清晰 ,见图 3。
2. 4　化学成分定性鉴定
2. 4. 1　取本品粉末 5 g ,加水
50 mL,加热煮沸 30 min,过
滤。加滤液 0. 5 mL于白瓷板
上 ,加 5% FeCl3 试剂 3～ 4
滴 ,溶液由橙黄色变为黄绿
色 ,示有酚类物质存在。
2. 4. 2　取上述试液 2～ 3 mL于试管中 ,用力振荡 5
min,产生大量持久性泡沫 , 10 min内泡沫量不少于
溶液体积的 1 /3,示有皂苷类物质存在。
另取相同滤液于蒸发皿中 ,水浴蒸干。残渣加几
滴冰醋酸使其溶解 ,再加入醋酸酐 -浓硫酸 ( 19∶ 1)
试液几滴 ,溶液变紫红色并渐变为棕黑色 ,进一步证
明有皂苷类物质存在。
2. 4. 3　取本品粉末 5 g ,加 95%乙醇 50 mL,回流
30 min过滤。取滤液 2 mL,向其中加入少许镁粉并
振荡 ,再滴加 5滴浓盐酸 , 1～ 2 min即显紫红色 ,示
有黄酮类物质存在。
3　小结
本研究结果表明 ,茜草藤有明显的生药学特征 ;
化学成分定性鉴定表明 ,茜草藤含有皂苷、黄酮及酚
类物质。薄层色谱具有明显的 7个斑点 ,其中 Rf1=
0. 14, Rf2= 0. 17, Rf3= 0. 22, Rf4= 0. 30, Rf5= 0. 48,
Rf6= 0. 56, Rf7= 0. 71。 1, 4, 7三斑点具有黄绿色荧
光。这些结论为鉴别茜草藤的真伪提供了参考依据。
参考文献:
[ 1 ]　江苏新医学院 . 中药大辞典 [M ] . 上海: 上海人民出版社 ,
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119.
西洋参种胚形态后熟过程中种子内源激素变化动态
及其对种胚发育的调节
赵永华 ,杨世林 ,刘惠卿 ,刘铁城
(中国医学科学院、中国协和医科大学药用植物研究所 ,北京　 100094)
摘　要:目的　阐述西洋参种胚形态后熟过程中内源激素与种胚发育的关系。方法　激素测试用 HPLC法 ,外标法
定量 ,激素含量以 ng /g fw表示 ;淀粉酶总活性测定用比色法 ,比色波长为 520 nm。 结果　在西洋参种胚形态后熟
过程中吲哚乙酸 ( IAA )出现两次高峰 ,第一次峰值出现在层积开始后第 80天 ,第二次峰值出现在层积后第 140天 ,
随后很快下降。 赤霉素 ( GA3 )在层积处理开始的第 60天有一个高峰 ,至第 120天以后又开始持续升高。 玉米素
( Z)的变化动态与 GA3相似。 脱落酸 ( ABA )的变化动态与内源 IAA的变化动态相似 ,不同之处是在层积开始后的
前 20 d一直没有检测到 ABA的存在。结论　 GA3和 Z是西洋参种子萌发促进因子 ,而不能启动原胚的起始发育。
ABA第一个高峰的出现可能正是引起西洋参种胚起始发育的因子 ,第二个高峰则与种胚的快速发育一致 ,可能起
·159·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-01-12作者简介:赵永华 ( 1967-) ,男 ,籍贯山东 ,副研究员 ,理学博士。研究方向:中药材规范种植技术研究和基地建立 ;植物源农药和生物肥料的开发 ;濒危植物资源保护。发表论文 10篇 ,论著 3部。
着防止胚胎过早萌发的作用。
关键词: 西洋参 ;种胚后熟 ;内源激素 ;种胚发育
中图分类号: S567　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0159 04
Dynamics of endogenous hormone in American ginseng seed during morphological
after-ripening period and their regulation to embryo development
ZHAO Yong-h ua , YAN G Shi-lin, L IU Hui-qing , L IU Tie-cheng
　　 ( Institute of Medicinal Plant , Chinese Academy o f M edical Sciences and Peking Union Medica l Colleg e, Beijing 100094,
China)
Abstract: Object　 To aquire a deeper understanding of the relationship betw een endogenous ho rmone
and embryo development o f the seed of Panax quinquefolius L. Methods　 The content of endogenous ho r-
mone was determined by HPLC w ith the use of ex ternal standa rd and expressed in term of ng /g fw . To tal
amylase activi ty w as a ssessed by spect ropho tometry a tλ520 nm. Results　 During the af ter-ripening peri-
od of American ginseng embryo , peak concentrations of indo le acetic acid ( IAA) appea red tw ice, one on
the 80th day and the o ther on the 140th day af ter strati fica tion, and declined quickly thereaf ter. Abscisic
acid ( ABA) show ed simi lar dynamics, ex cept that i t w as undetectable during the fi rst 20 d af ter st ra tifica-
tion. gibberellic acid ( GA3 ) and zeatin ( Z) also show ed 2 peaks, w hich appeared on the 60th and 120th
day, respectively. Conclusion　 GA3 and Z can promo te germina tion of American ginseng seed, but canno t
ignite the development o f proembryo. Probably the fi rst peak o f ABA was the facto r fo r the igni tion of em-
bryo development , and the second peak runs in coincidence wi th the rapid development of the embryo and
may inhibi t the viv ipa ri ty of American ginseng seed.
Key words: Panax quinquefolius L. ; af ter-ripening o f embryo; endogenous hormone; embryo deve
lopment
　　西洋参 Panax quinquefolius L. 做为一种名贵
中药材 ,有广阔的应用前景。目前对西洋参离体培养
技术还未解决移栽问题 ,所以仍以种子繁殖。西洋参
果实成熟时种胚属于不完全类型 ,国内外对种胚滞
育的原因进行了大量研究 [1～ 5, 7, 8 ] ,但进展缓慢。有关
内源激素与西洋参种胚后熟的关系尚未见报道 ,本
文拟通过对西洋参种胚形态后熟过程中内源激素变
化动态的分析 ,阐述内源激素与种胚发育的关系。
1　材料与方法
1. 1　材料
所用材料全部取自北方怀柔西洋参联合开发总
公司所属参场种植的 3年生西洋参果实。 在红果期
取果实样品 ,除去外果皮和中果皮后晾干进行层积
处理。 种子和层积用的砂子均用 400倍液多菌灵消
毒 ,层积时种子∶砂子= 1∶ 3;层积温度为 ( 17± 2)
℃。层积于 1995年 9月 25日开始。 在层积过程中
每隔 20 d取样一次 ,样品用液氮冷冻后贮于低温冰
箱中以备分析 ,同时测定胚率 (种胚长 /胚乳长×
100% )的变化。完成形态后熟的标准我们定为胚率
达到 90%以上。1996～ 1997年度重复进行了 1995～
1996年度的实验。
1. 2　激素的测定
1. 2. 1　激素的提取:精密称取种子鲜样 1. 0 g于研
钵中 ,加 10 mL 80%的冷甲醇 ( 4℃ )和少量石英
砂 ,冰浴中将样品研成匀浆 ,转到 50 mL容量瓶中 ,
再向容量瓶加 20 mL 80%的冷甲醇 ,加塞于超声波
中在 4℃下振荡 4 h,放冰箱过夜 ;第 2天过滤 ,残
渣再加 20 mL 80%的冷甲醇 ,振荡 2 h后过滤 ,合
并两次滤液 ,减压蒸发至 10 mL待分析。
1. 2. 2　激素的测定: 用 HPLC法测定 ,外标法定
量 ,激素含量以 ng /gfw表示。 测定柱: Novapak C18
柱 ( 0. 4 cm× 15 cm ) ; 流动相: 40% CH3OH-15%
CH3 CN-45% H2O (用 H3 PO4调 pH= 4. 0) ;流速:
0. 7 mL /min,检测器: UV 254 nm。
1. 3　淀粉酶活性的测定: 按照文献 [ 6]方法 ,精密称
取 0. 5 g材料 ,加 1 mL蒸馏水和少许石英砂于研钵
中研成匀浆 , 20℃下放置 20 min(期间经常搅动 )后
8 000 r /min离心 0. 5 h,取上清液稀释一定倍数后
备用。α-淀粉酶和 (α+ β )淀粉酶的活性用 DN S比色
法测定 ,比色波长为 520 nm。 测α-淀粉酶活性时用
·160· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
( 70± 0. 5)℃恒温水浴加热 15 min以钝化 β-淀粉
酶的活性。 用麦芽糖标准液 ( 1 mg /mL)作标准曲
线 ,以 mg M altose /g fw . 5min 表示淀粉酶活性
大小。
2　结果与分析
西洋参种胚形态后熟过程中 ,种子内源 IAA,
Z, GA3和 ABA的变化动态见图 1。
图 1　西洋参种胚后熟期种子内源激素的变化动态
2. 1　 IAA的变化动态:从图 1可以看出 ,在西洋参
种胚形态后熟过程中 IAA出现两次高峰 ,第一次峰
值出现在层积开始后第 60天。 此间从胚率的变化
(表 1)看 ,种胚的发育是很慢的 ,其作用还不太清
楚。第二次峰值出现在层积后第 120天 ,随后很快下
降 ,此峰值期正是种胚生长较快的时期 ,可能与细胞
的伸长生长有关 ,最终导致种子裂口。 IAA第二次
峰值以后含量下降可能与种子休眠的解除有关。
表 1　西洋参种胚后熟过程中的胚率变化*
层积后天数
( d)
胚长
( mm)
种子长
(m m)
胚率
(% )
备　注
0 0. 26 5. 9 4. 41
20 0. 27 6. 1 4. 43
40 0. 29 5. 8 5. 00
60 0. 46 6. 3 7. 30
80 0. 71 5. 7 12. 46
100 1. 2 6. 0 20. 00
120 2. 6 5. 8 44. 83 种子裂口期
140 4. 4 5. 9 74. 58
160 5. 1 5. 6 91. 07 种胚形态后熟
180 5. 3 5. 9 92. 11
　　* 每次取 30粒种子 ,取其平均值。
2. 2　 GA3的变化动态:在西洋参种胚后熟过程中 ,
种子内源 GA3在层积处理开始的第 60天有一个高
峰 ,至第 120天以后又开始持续升高。 GA3的生理
作用一般是认为诱导 α-淀粉酶的产生 ,但是在层积
的前 40 d(即 GA3含量快速增长期 )并未检测到 α-
淀粉酶的存在 ,而是在 GA3含量的峰谷 (第 60天 )
才开始检测到 α-淀粉酶的存在 (图 2)。 GA3的第一
个峰值可能促进了α-淀粉酶的出现 ;第二次峰值与
种胚的快速发育一致 ,可能与种子的萌发有关。
图 2　西洋参种胚形态后熟期种子淀粉酶活性变化
2. 3　 Z的变化动态: 在西洋参种胚后熟过程中 ,层
积开始后第 80天出现第一个高峰 ,在第 120天以后
出现第二个高峰。一般认为细胞分裂素含量与胚的
生长速度是一致的。从图 1和胚率的变化来看 , Z的
第二个高峰可能与 GA3的第二个高峰共同起到了
解除种子休眠的作用。
2. 4　 ABA的变化动态: 由图 1可以看出 ,西洋参种
胚形态后熟过程中种子内源 ABA的变化动态与内
源 IAA的变化动态相似 ,不同之处是在层积开始后
的前 20 d一直没有检测到 ABA的存在。
3　讨论
从西洋参种子 IAA的变化来看 ,随着种子休眠
的解除 , IAA水平是下降的 ,可能与西洋参种子休
眠的解除有关。 GA3是萌发促进因子 ,而不是促进
启动原胚起始发育的因子。以前曾经在西洋参种子
处理中 ,在层积开始前就用外源 GA3或 6-BA处理 ,
结果给生产造成很大损失。本研究发现 ,西洋参种子
GA3和 Z的第二次峰值是与种胚的快速发育一致
的 ,可能与种子的萌发有关。外源 GA3或 6-BA应在
此期使用 ,而不是在层积开始前。在植物激素与种胚
发育的关系中 ,研究得最多同时也最重要的就是
ABA的作用。目前的研究结果认为 , ABA在植物种
胚发育中的作用主要有两点: 一是刺激胚胎的发生 ,
一是防止成熟的胚过早萌发而影响物种的延续。 从
西洋参果实形成期 [4 ]和种胚形态后熟过程中种子内
源 ABA的变化 ,可以推测可能前期没有 ABA而导
致促使种胚分化发育的特异蛋白质不能合成 ,从而
导致种胚滞育。 ABA第一个高峰的出现可能正是引
起西洋参种胚起始发育的因子 ,第二个高峰则与种
胚的快速发育一致 ,可能起着防止胚胎过早萌发的
作用。
据此笔者对西洋参种胚发育过程中的种子内源
激素调控机制提出下面一种假设:
第一阶段
胚乳形成 ,
胚胎发生 (滞育 )
第二阶段
胚胎发育
起动
第三阶段
胚胎快速
发育期
第四阶段
休眠至萌发
　　　
　　　 (果实形成期 )
·161·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
GA3 , Z+ ZR, IAA ABA ABA , GA3 , Z
种胚形态后熟期
GA3 , Z, PPP增加
种胚休眠期
对该调控机制假设的正确性有待以后验证。种
胚的发育受植物本身的遗传性和激素水平两种因素
制约 ,在种胚发育过程中其内在基因的表达有严格
的顺序性 ,用外源激素可以改变植物体内的激素平
衡关系 ,进而启动或者抑制基因的表达 ,使发育朝着
人们希望的方向进行。 但这种人为调控措施应在遵
循内源激素动态与植物生长发育规律的基础上 ,才
能形成一套比较完整合理的技术体系。
致谢: 实验得到中国林业科学院分析中心王文
芝老师帮助 ,谨致谢意。
参考文献:
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牯岭蛇葡萄根的生药学研究
罗　毅 1 ,陈科力 2 ,詹亚华 2
( 1. 武汉大学人民医院* 药学部 ,湖北 武汉　 430060;　 2. 湖北中医学院 药学系 ,湖北 武汉　 430060)
摘　要: 目的　为牯岭蛇葡萄 Ampelopsis brev ipedunculata ( Maxim. ) Tr autv . v ar. kulingensis Rehd. 根的开发利
用提供鉴定依据。方法　性状鉴定、显微鉴定及薄层色谱分析。结果　详细描述了牯岭蛇葡萄根的性状和显微鉴别
特征 ;经薄层色谱分析发现该药材含有羽扇豆醇等 4种成分。 结论　所发现的这些特征可作为鉴别牯岭蛇葡萄根
的依据。
关键词: 牡岭蛇葡萄根 ;性状鉴定 ;显微鉴定 ;薄层色谱
中图分类号: R282. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0162-03
Pharmacognostic studies on root of Ampelopsis brevipedunculata var. kulingens is
LUO Yi1 , CHEN Ke-li2 , ZHAN Ya-hua2
　　 ( 1. Depa rtment o f Pharmacy, People s Hospi ta l o f Wuhan Univ e rsity , Wuhan Hubei 430060, China; 2. Depa r tment of
Pha rmacy , Hubei Co lleg e o f TCM , Wuhan Hubei 430060, China )
Abstract: Object　 To prov ide evidences for the identif ica tion o f the root o f Ampelopsis brevipeduncu-
lata ( Maxim. ) Trautv . va r. kulingensis Rehd. as a basis fo r the rationa l exploi ta tion and utilization of this
medicinal plant. Methods　 The characteristic features w ere studied by macroscopic and microscopic obser-
va tions and i ts chemical costi tuents identi fied qualitativ ely by TLC. Results　 Macroscopic and micro scopic
cha racteristics of this crude drug w ere described. 4 chemical composi tions, such as lupeol, w ere found by
T LC. Conclusion　 The distinct characteristics rev ealed in the studies could provide a basis fo r the identifi-
cation o f this crude drug.
Key words: roo t of Ampelopsis brevipedunculata ( Maxim. ) Trautv. v ar. kul ingensis Rehd. ; identifica-
tion of characteristic features; microscopic identi fica tion; TLC
·162· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-10-26作者简介:罗　毅 ( 1972-) ,女 ,湖北枣阳人 ,主管药师 , 1993年毕业于湖北中医学院药学系 ,获学士学位 ,而后继续攻读该校研究生 ,于
1996年毕业 ,获硕士学位。 现主要从事中药材鉴定、中药制剂质量、标准的制定以及武汉大学药学系 (原湖北医科大学药学系 )《生药学》课程的教学工作。
* 　原湖北医科大学附属第一医院