全 文 ：· 药理实验与临床观察 ·
当归对大鼠脑缺血损伤保护作用的实验研究△
湖北 医科大学附属第 二医院 (武 汉 4 3 0 0 7 1 )
德国柏林洪堡大学莎丽特医学院神经科
廖维靖 ‘ 杨万 同
F r a n k W i
e g a n d
周 云峰
U lr ieh D ir n a g l
摘 要 探讨当归对大 鼠脑缺血 损伤是否具 有保护作 用 。 阻断大 鼠右 颈总动 脉和大脑中动脉 90
m in 后恢复再灌 , 给予 25 % 当归注射液 7 . 5 m L 静脉滴注 6 h 。 术后第 8 天用 图像处理技术测定 脑
梗死体积 。 结果显示 当归治疗组梗死体积显著小于 实验对照组 。 本实验首次证实当归具 有缩小脑
梗死体积 的作用 , 其作用机制待深人研究 阐明 。
关钮词 脑缺血 当归 脑梗死
研究脑缺血损伤保护剂是 国内外一直关
注的课题 , 有 效且无副作 用的神经保护剂是
中西医共 同追求 的目标 。 中医活血化癖药对
脑缺血 的保护作用 引起西 医的兴趣 , 活血化
痪治则引起西方 国家的重视 。 M E D L IN E 检
索迄今未见当归能否作为脑缺血损伤保护剂
的系统实验研究报道 。 为探讨 当归对脑缺血
的保护作用 , 作者在德国洪堡大学莎丽特 医
学院进行脑 缺血损 伤保护机 制 的合 作研究
时 , 在德方实验室动物缺血模型 的基础上试
用 当归 治疗 , 同期 观察 M K 一8 01 的作 用 , 旨
在探讨 当归对脑缺 血损伤是 否具有 保护作
用 , 并为今后 从活血化窟 药中筛选脑保 护剂
及确定单一有效成分奠定基础 。
l 材料和方法
1
.
1 动物造模 : 雄性 W is ta r 大 鼠 32 只 , 体
重 25 0一 3 0 0 9 。 所有动物均进行右颈总动脉
(C a r o t id e o m m o n a r t e r y
,
e e A )和大脑 中动
脉 (M id d le e e r e br a l a r t e r y , M C A )短暂阻 断
的手术 , 随机分为 2 组 。一组不进行任何治疗
用作实验对照组 (13 只 ) ; 另一组采用 当归治
疗 (1 9 只 ) 。 动物在 H a lo t ha n e 持续麻醉下置
于加热垫上 , 将体温探头插人直肠测体温 。切
开 鼠尾 , 将塑料导管插人尾动脉后固定 , 测量
术 中血压 。 切开颈部皮肤 , 暴露左颈静脉 , 插
人导管并固定 。 在背部皮肤穿一小孔将导管
引出 , 放置备用 。 仔细分离肌肉暴露 CC A 用
橡胶细管结扎 。 切开头颅右 MC A 体表投影
区皮肤 , 分离肌肉 。 用颅钻钻孔后 , 小心刺破
硬脑膜并剥离 。 用弧型丝钩提起 MC A , 并用
固定力量牵拉造成 MC A 短暂阻断 , 持续 90
m in
。 小心将 M C A 放回原处恢复再灌 , 缝合
皮肤 。 松开结扎 CCA 的橡胶管 , 缝合皮肤 。
术 中测体温 、血压 、血糖 、血氧 、血二氧化碳分
压 、血酸碱度等生理参数 , 体温维持在 (37 士
0
.
5 )℃ 。
1
.
2 给药 : 25 % 当归注射液 , 湖北医 科大学
附 属 第 二 医 院 药 厂 生 产 , 批 号 分 别 为
9 4 0 6 1 4
、
9 7 0 2 1 4 和 9 7 0 9 2 4 。 将 7 . 5 m L 当归
注射液加人 固定压力注射泵 , 调定速度 , 6 h
滴注完毕 。滴注中每 Z h 测体温 。 剪去暴露体
表的导管 , 牢固结扎后胶布固定 。
1
.
3 取材 : 术后第一 天评定肢体功能 , 测体
温 、血糖 、血细胞压积 , 其后每天测体温 , 第 8
,
A d d r e s s
:
L ia o W e ijin g
,
T he
_
. 赓维靖 _ . 男 声四越姆 , 1 98 4 年咸宁医学院 医疗系本科 毕业 , 学士 。 1 9 91 年同济医科大学康复 医学专业研究生毕业 , 硕士 。现在剐北医科大学 附属第 二医院康复医学科从事科研 、 医疗和教学工作 。 1 9 9 3 ~ 1 9 9 5 年完成湖北省教委青年科学基金资助课题 1 项 。 1 9 9 6 ~ 1 9 9 7 年德 国柏 林洪堡大学莎丽特 医学 院访问学者 。 已发表论文 、综述 29 篇 , 待发表英 文论 文 4 篇 。 1 99 5年 12 月任 中国康复理论 与实践 杂志青年编委 。△ 湖北 省 自然科学基金课题
《中草药 》1 9 9 9 年 第 30 卷第 4 期 2 7 3
天再次评定肢体功能并处死动物 。 麻醉下断
头取脑 , 将脑置于液氮预冷的一 30 ℃异戊烷
( is o p e n t a n )中 固定 2 0 5 , 然 后迅 速 移入 一
80
O
C冰箱储放待处理 。 一 20 ℃恒冷箱 中冠状
连续切片 , 片厚 40 拜m 。 将每 20 片 中的第 1 、
2 张贴于一张玻璃片 。 每脑约做 2 0 张玻片 。
切片 干燥 过夜 , 酸性复 红染 色 , 梯度 乙 醇脱
水 , 封 片 。 采用德 国 Pol ar oi d 图像处理系统
(S p r in t S e a n 3 5 Plu s )测量每 张切片的面积
(m m
“
)
。 观察有梗死的切片张数可计算出梗
死的长度 , 算出梗死的体积 , 单位为 m m “。
1
.
4 统计处理 : 实验 数据用 (x 士 、)表示 , 输
入 E x ce l 7 . 0 软件进行 t 检验 。
2 结果
实验对照组 13 只动物 , 1 例因梗死灶出
血体积显著大而被剔 除 , 1 例 因梗死灶体积
小于 6 m m 3 剔除 。 这 2 例可能是手术误差所
致 。 治疗组动物死亡 5 例 , 1 例因梗死灶出血
被剔除 , 1 例也因体积小于 6 m m “ 被剔除 。统
计分 析时对 照组实 际例 数是 n 只 , 治疗组
12 只 。 9 4 0 6 1 4 批号动物 4 只 , 9 7 0 2 1 4 批号 7
只 , 9 7 0 9 2 4 批号 4 只 。 术 中 、术后生理参数变
化未见显著性差异 , 术后第 1 、 8 天肢体功能
未见显著性差异 。对照组 、治疗组脑梗死体积
变化见表 1 。
表 1 脑梗死体积变化‘士 s)
组 别 例数
对 照组
当归治疗组
1 1
1 2
梗死 体积 (m m “) 梗 死缩小 (% )
1 2 3
.
8 4 士 5 9 . 3 1
7 4
.
7 2士 3 7 . 4 6 书 3 9
与对照相 比较 : ‘ 尸< 0 . 05
结果显示当归对脑缺血损伤具有保护作
用 。 与 M K 一 8 01 缩小梗死的结果相 比 , 当归
优于 M K 一8 01 。 M K 一8 01 的资料将 由德方发
表在英文期刊 。
3 讨论
测定梗死 面 /体积是观察梗死大小最直
接客观的指标 , 体积指标较面积准确 , 用计算
机进行 图像处理更易做到精确量化 。 深人研
究应观察功能 、代谢指标 以全面反映梗死变
化 。采用缺血 / 再灌模型较完全阻断血供的模
型更能模拟人体发病的情况 。 术后第 8 天是
梗死发展成最大的时间 , 且组织水肿消除 , 此
时测定梗死体积最准确 。
近年研究认为脑缺血损伤的病理生理机
制是损伤级联反应 , 即兴奋性毒性 、 梗死周围
去极化 、炎症和程序性细胞死亡 4 个过程 [lj 。
钙 、谷氨酸 、氧 自由基 、 N O 等涉及这些过程 。
中医认为缺血是察症 , 其治则为化痪 , 活血是
化疲的前提 。 M E D L IN E 检索迄今未见当归
作脑保护剂的研究 。 本文结果首次显示 当归
具有缩小脑梗死体积的作用 。 文献报道 当归
能够清 除 自由基川 , 本实验可能是当归清除
自由基 的作用结果 。 当归注射液的成分超过
4 0 种仁3〕, 当 归 成 分 之 一 的 阿 魏 酸 (fe r u lie
ac 记 )具有抗氧化损伤 的作用川 , 本结果是否
为阿魏 酸的作用有待证实 。
本实验预实验时 , 不 同批号 (次 )的药液
缩小梗塞的差异较大 , 可 能与中药制剂质量
不稳定有关 , 也可能是手术本身的原因 。本实
验所用剂量是通常文献报告剂量的一半 , 这
是依动物实际体重 、给药方式及便利而定 , 并
非最适剂量 。 一次给药方法与传统的每天给
药习 惯不 同 , 以 便跟 M K 一 8 01 进 行 比较 , 结
果提示 当归潜在的保护作用相当大 , 同时说
明药物疗效不一定是治疗 时间越长越好 , 剂
量越大越好 。
参 考 文 献
1 廖维 靖 , 等 . 国外 医 学 一脑 血管 疾病 分册 , 19 98 , 6 (4 ) :
1 9 7
2 胡永欣 , 等 . 第二军医大学学报 , 1 9 9 3 , 1 4 (l ) : 4 8
3 李家仁 . 中草药 , 1 9 8 3 , 1 4 (8 ) : 4 1
4 林迎晖 , 等 . 药学学报 , 1 9 9 4 , 2 9 (3 ) : 1 7 1
(1 9 9 8
一
0 6
一
0 4 收稿 )
A n E x Pe r im e n ta l Stu d y o n th e N e u r o P r o te etiv e E ffe e ts o f Ch in ese A n g e lic a
(A n g e lie a sin e n sis ) o n C e r e b r a l Isc h em ia In ju r y in R a t
L ia o W
e iji
n g
,
F r a n k W i
e g a n d
,
Y a n g W
a n t o n g
, et a l
·
(T he S e e o n d A ffilia t e d H o s p it a l
,
H u b e i U n iv e r s ity
·
2 7 4
·
o f M
ed ie a l S e ie n e e s
,
W
u h a n 4 3 0 0 7 1 )
A b str a c t Po t e n t ia l n e u r o p r o te e tiv e e ffe e t o f A n g e lic a s in e n sis (O liv
.
) D ie ls o n e e r e b r a l is e he m ia in j
u ry
in r a t w a s in v e s tig a te d
·
T he r ig h t e a r o tid e o m m o n a r t e ry (C C A ) a n d m id d le e e r e br a l a r te r y (M C A )
o fW i
s t a r
r a t w e r e te m p o r a r ily o e e lu d e d fo r 9 0 m in u te s a n d r e p e r fu se d a fte rw a r d s
.
7
.
5 m L o f 2 5 % A
.
, in e n s i , e x t r a e t
fo r in j
e e t io n w e r e d r ip p e d iv fo r s ix ho u r s a fte r r e p e r fu s io n
.
T h e in fa r et v o lu m e w e r e m e a s u r e d o n th e e ig h th
d a y b y im a g e p r o e e s sin g
.
T h e r e s u lt s sh o w e d t h a t th e in fa r e t v o lu m e o f th e t r e a t e d g r o u p w e r e s ig n ifie a n tly
s m a lle r th a n th a t o f th e e o n tr o l g r o u p ( 7 4
.
7 2士 3 7 . 4 6 ) m m 3 v s (1 2 3 . 8 4 士 5 9 . 3 1 ) m m 3 ( P < 0 . 0 5 ) . T h is 15
th e fir s t tim e t o d e m o n s t r a t e b y e x p e r im e n t th a t A
.
sin e n sis e o u ld d e c r e a s e e e r e br a l in fa r e t v o lu m e
,
b u t th e
m e e h a n is m o f it s a e tio n n e e d t o be fu r th e r in v e s t ig a te d
.
K e y w o rd s A n g elie a s in e n s ; s (O liv
.
) D ie ls e e r e b r a l is e h e m ia
棚皮素对压力超负荷所致大鼠心肌肥厚的影响
苏 州医 学院药理 教研室 (2 1 5 0 0 7) 秦泰春 ‘ 顾振纶 刘世增
摘 要 大 鼠腹主动脉部 分狭窄 5 周后 , 形成实验性心肌 肥厚模型 , 心肌 和左心室重量 明显增加 ,
心肌 过氧化脂 质 (l _ P( ) 含量 显著增 加 , S O D 活性下 降 , 心肌 和主动脉 C a “ + 含 量明显增加 。 给斟皮
素 75 、 1 5 0 m g / k g 后均能 明显 降低心肌 和左 心室重量 , 降低心肌 L PO 含量 , 增加 S O D 活性 , 降低
心肌和 主动脉 C a “+ 的含量 , 提 示棚皮素抗 心肌肥厚作用 与清除氧 自由基和 钙拮抗有关 。
关键词 懈皮素 心肌 肥厚 氧 自由基 钙
心肌肥厚是心脏长期负荷过重时的一种
慢性代偿机制 , 现 已发现钙拮抗剂和血管 紧
张素转化酶抑 制剂叭 2口可 以有效地 防治心肌
肥厚 , 氧 自由基可能参予心肌肥厚 的发 生和
发展川 , 应用氧 自由基 清除剂有助于 预防和
治疗心肌肥厚 。 榔皮素 (q u e r e e t in , Q u e )为广
泛存在于天然植物中的黄酮类化合物 , 具 有
降血压 、保护心肌缺血再灌注损伤 、清除氧 自
由基 、钙拮抗和蛋白激酶 C 抑制仁‘一 7〕等作用 。
但 Q u e 对心肌肥厚的影响未见文献报道 , 我
们 通过狭窄 大 鼠腹 主动脉形成 心肌肥厚 模
型 , 观察 了 Q ue 对心肌肥厚的逆转作用并探
讨 了其作用机制 。
1 材料
1
·
1 动 物 : S p r a q u e 一D a w le y 大 鼠 , 雌 雄 兼
用 , 体重 2 0 0 ~ 2 4 0 9 , 由苏州医学院实验动物
中心提供 。
1
.
2 药品 : 棚皮素购于中国预防医学科学院
劳卫所 , 批号 9 1 1 0 1 5 , 维拉 帕米 (v e r a p a m il ,
V e r )购于连云 港 制药厂 , 批号 9 2 0 5 1 6 , 以二
甲亚讽溶解后稀释成所需浓度 。
1
.
3 仪 器 : 原 子 吸收 分 光光 度 计 为 日立 -
1 8 0 8 0 型 , 日立公 司产品 ; 紫外分光光度计为
7 5 2
一
C 型 , 上海第三分析仪器厂产品 。
2 方法
2
.
1 心肌肥厚模 型 的建立 和分组 : 取大 鼠
36 只随机分为 5 组 : 对照组 (n 一 6) , 心肌肥
厚组 (n = 1 2 ) , Q u e 7 5 、 1 5 0 m g / k g (分别 n =
6 )组 , 阳性对照组 V e r 1 0 m g / k g (n = 6 ) 。 参
照文献 [sj 制备腹 主动脉部分狭窄模型 (对照
组 只行假手术 ) , 术后第 2 天开始 19 Q ue 或
V e r
, 每 日 1 次 , 对照组给相 应容量蒸馏水 ,
连续 5 周 。
2
.
2 心肌重量 参数 的测 定 : 将大 鼠断头处
A d d r e s s
:
Q in g T a ie }lu n
,
D e p a r t m e n t o f Ph a r m a e o lo g y
,
S u z ho u M e d ie a l C o lle g e
,
S u : h o u
秦泰春 男 , 28 岁 , 1 9 9 8 年于苏州医学院研究生毕业 , 获药理学专业硕士学位 。 现工作单位为浙江 中医学 院 , 主要从事心血管药物及 中药戒 毒新产品的开发 。
《中草 药》1 9 9 9 年第 3 0 卷第 4 期 · 2 7 5 ·