全 文 ：高效薄层色谱扫描法测定玉泉丸中葛根素的含量
陕西师范大学化学系 (西安 710062)　　张尊听　刘谦光　库尔班江
　　玉泉丸的处方来源于清·叶天士《种福堂公选
良方》玉泉散 ,由葛根、天花粉、地黄等 5味中药组
成 ,具有生津止渴 ,清热除烦 ,养阴滋肾 ,益气和中之
功能 ,主治消渴糖尿病 ,肺胃肾亏损热病后期症
等 [1 ]。 处方中的葛根主要来源于豆科植物野葛
Pueraria lobata ( Wil ld ) Ohwi或粉葛 P. thomsonii
Benth的根 ,主要有效成分为葛根素 ( puerarin)、大
豆苷 ( daidzin)和大豆苷元 ( daidzein)等异黄酮类化
合物 [2 ]。关于玉泉丸中的有效成分测定未见报道 ,我
们采用高效硅胶 G薄层色谱双波长扫描法对玉泉
丸主要有效成分葛根素的含量进行测定 ,方法快速
简便 ,稳定性和重现性好 ,板间误差小 ,回收率高。
1　仪器与材料
1. 1　仪器:日本岛津 CS-9000型双波长扫描仪 ;定
量点样毛细管 ( Drummond Scientif ic Cop USA)。
1. 2　材料:葛根素对照品购自中国药品生物制品检
定所 ;硅胶 G高效预制板 ( 100 mm× 100 mm)由青
岛海洋化工厂分厂生产 ;玉泉丸 ,成都中药厂生产
[批准文号: 川卫准字 ( 1981)第 001432号 ,批号:
970819-51 ]。 所用试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　薄层与扫描条件
1-标准品 2-样品
图 1　样品 TLC图
2. 1. 1　展开条件:乙酸乙酯-丙
酮 -水-甲苯 ( 6. 5∶ 4. 5∶ 1. 2∶
0. 7)为展开剂 ,展开 ,展距 8 cm ,
在 365 nm紫外灯观察斑点的位
置 ,其 Rf= 0. 51,展开结果见图
1。
2. 1. 2　扫描条件: 锯齿反射扫
描 ,λS = 270 nm ,λR = 370 nm ,
SX= 3,灵敏度:中。狭缝 1. 0 mm
× 1. 0 mm。
2. 2　溶液的配制
2. 2. 1　标准溶液配制: 配制葛
根素对照品 0. 215 mg /mL的甲醇溶液。
2. 2　样品溶液的配制:称取研成细粉的玉泉丸样品
3. 010 5 g置于索氏提取器中 ,加甲醇适量提取至溶
液无色 (近 6 h ) ,浓缩至 10 mL,移至 25 mL容量
瓶 ,加入甲醇稀释至刻度备用。
2. 3　标准曲线的绘制:精密吸取葛根素的标准溶液
( 0. 215 mg /mL) 1, 2, 3, 4, 5, 6, 78μL点于同一块硅
胶 G高效薄层板上 ,以展开系统展开 ,展距 8 cm ,取
出 ,晾干 ,按扫描条件扫描 ,根据标准品的点样量及
吸收峰面积进行线性回归 ,回归方程为 Y= 45 651
X+ 13 789, r= 0. 999 8,结果表明:葛根素的点样量
在 0. 215～ 1. 720μg范围内呈良好的线性关系。
2. 4　精密度:精密吸取葛根素的标准溶液 1μL点
于同一块板上 5个点 ,展开 ,扫描 ,得峰面积为 Y=
22 926. 616, RSD为 0. 565% (n= 5)。
2. 5　稳定性:精密吸取葛根素标准溶液 2μL,点于
同一块薄层板上 ,展开 ,晾干 ,每隔 1 h扫描一次 ,结
果表明:葛根素斑点的峰面积在 5 h内稳定。
2. 6　重现性: 分别精密吸取葛根素标准溶液 3μL,
点于 5块薄层板上 ,展开 ,晾干 ,扫描 ,平均峰面积为
43 164. 375, RSD为 0. 580% (n= 5)。
2. 7　样品含量测定:精密吸取样品液 2μL,分别点
于同一块板上 5个点 ,随行点标准溶液 1μL按展开
条件展开 ,晾干 ,检视 ,扫描 ,测定 ,计算样品中葛根
素含量 ,结果见表 1。
表 1　样品中葛根素含量
序号 1 2 3 4 5 平均 R SD
峰面积 27 947 27 640 28 073 27 542 28 136
含量 (% ) 0. 129 0. 126 0. 130 0. 125 0. 131 0. 128 0. 98
2. 8　加样回收率的测定:精密称取样品内容物 5份
(每份含一丸 ) ,加标准溶液 1 mL,按样品溶液的制
备法处理 ,精密吸取 1μL,点于同一板上 5个点 ,展
开 ,晾干 ,扫描 ,测定 ,回收率为 99. 8% , RSD=
1. 3% (n= 5)。
3　讨论
3. 1　经高效薄层色谱展开体系的反复摸索 ,采取本
文展开体系时能使玉泉丸中葛根素斑点与上下其它
成分斑点距离较远 ,清晰 ,圆整 ,无拖尾 ,展开重现性
和分离效果均好 ,对于采用高效硅胶 G薄层可以展
·519·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 7期
现在新疆伊犁师范学院化学系工作
开的葛根制剂 ,亦可采用本法测定。
3. 2　本文采用硅胶 G高效薄层双波长扫描法对玉
泉丸中葛根素进行了含量的测定 ,方法快速简便 ,稳
定性和重现性好 ,板间误差小 ,回收率高 ,为该中成
药的质量分析和控制提供方便、可靠的依据和方法。
参 考 文 献
1　陈馥馨主编 . 新编中成药手册 . 北京: 中国医药科技出版社 ,
1992: 185
2　徐礼 ,刘爱茹 ,张香琴 ,等 . 药学学报 , 1987, 22( 3): 208
( 1999-07-05收稿 )
HPLC法则定小儿宣肺止嗽颗粒剂中大黄素的含量
天津市儿童医院药剂科 ( 300074)　　于　和
天津市南开医院药剂科　　　　　　李立程
天津市力生制药厂　　　　　　　　肖文惠　史　欣　唐世煜
　　小儿宣肺止嗽颗粒是由前胡、薄荷、鱼腥草和大
黄等 11味中药组成的复方制剂 ,具有宣肺清热、化
痰止咳的功效 ,在临床上用于治疗小儿肺热咳嗽 ,上
呼吸道感染及支气管所致的咳嗽不爽、痰黄粘稠、面
赤唇红和大便干燥等症。我们建立了 HPLC法测定
其中有效成分大黄素的含量 ,结果准确 ,可靠 ,操作
简便 ,可用于该产品的质量控制。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪　美国 Waters 515型泵 , 7725
Ⅰ 型手动进样器 , 486型紫外检测器 , PC800数据处
理软件 ;大黄素对照品 (中国药品生物制品检定所 ,
批号: 9608) ,试剂为分析纯 ,水为重蒸馏水。
小儿宣肺止嗽颗粒 ,由天津市力生制药厂生产 ,
批号: 9608001, 9608002, 9608003。
2　色谱条件
色谱柱: 十八烷基硅烷键合硅胶 ,流动相: 甲
醇 -0. 1%高氯酸 ( 80∶ 20) ,流速: 1. 2 mL /min,检测
波长 254 nm,柱温:室温。
3　溶液配制
3. 1　对照品溶液的制备:精密称取大黄素对照品约
5 mg ,置 50 mL量瓶中 ,加甲醇适量 ,超声处理使溶
解 ,并用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,精密量取 3 mL置
10 m L量瓶中加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。
3. 2　供试品溶液的制备:取小儿宣肺止嗽颗粒约 5
g ,精密称定 ,加水 20 mL,盐酸 1 mL,置水浴中 ,加
热 1 h,放冷 ,加氯仿 80 mL回流 3 h,用脱脂棉滤
过 ,滤液置分液漏斗中 ,分取氯仿层 ,再用氯仿 20
m L洗涤容器和残渣 ,合并洗液与滤液 ,用水洗 3
次 ,每次 20 mL,弃去水洗液 ,取氯仿溶液置蒸发皿
中 ,用少量氯仿洗涤容器 ,并入蒸发皿中 ,蒸干 ,残渣
物用适量甲醇溶解并移入 10 mL量瓶中 ,用甲醇稀
释至刻度 ,摇匀 ,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液及供试品溶
液各 20μL,注入液相色谱仪 ,测定 ,计算 ,即得。 本
品每 1 g含大黄素应不低于 0. 052 mg。
4　实验方法与结果
4. 1　线性关系的测定及标准曲线的绘制:精密量取
大黄素对照品溶液 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0, 6. 0,
7. 0, 8. 0, 9. 0 mL分别置于 25 mL量瓶中 ,加甲醇
稀释至刻度 ,摇匀 ,各取 20μL进样 ,测试 ,以对照品
的峰高为纵坐标 ,对照品溶液的浓度 ( mg /mL) 为
横坐标 ,绘制标准曲线。得回方程为: Y= 6. 4+ 4. 6
× 104X , r= 0. 999 9,在浓度 0. 004～ 0. 036 mg / mL
范围内线性关系良好。
4. 2　回收率试验:试验采用加样回收法:精密称取
已知大黄素含量的供试品约 5 g ,精密加入大黄素
对照品适量 ,照供试品溶液的制备方法制备样品溶
液 ,精密吸取 20μL进样 ,测试 ,测得大黄素的平均
回收率为 101. 18% ; RSD= 3. 38% (n= 5)。
4. 3　空白试验与供试品含量测定:取不含大黄素的
空白样品适量 ,精密称定 ,按“供试品溶液的制备”项
下操作 ,精密吸取 20μL进样测试 ,结果表明:空白
样品在大黄素出峰处无干扰峰 ,且流动相、溶剂 (甲
醇 )对大黄素峰无干扰。
取 3个批号 ( 9608001、 9608002、 9608003)的小
儿宣肺止嗽颗粒约 5 g,精密称定 ,照“供试品溶液
制备”项下操作 ,分别精密吸取 20μL ,测定 ,结果
见表 1。
4. 4　精密度与稳定性试验:照含量测定方法 ,对同
一供试品溶液进行多次测定 (n= 6) ,考察其精密度
RSD= 0. 011% ;对同一供试品每小时测定一次 ,在
8 h内含量测定结果稳定。
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