全 文 ：草欢蓉对损伤肝枯否细胞免疫活性的影响
延边医学院 (延吉 3 3 10 0 0) 朴玉仁 , 姜玉顺 舟 . 李英信 金美善 “ 份 姜勇男
摘要 将W i s t a r系大鼠乳鼠肝枯否细胞体外培养 , 选生长良好的细胞培养瓶分为 正 常组 、 损伤
组、 实 脸组 及 阳性对照组 , 除正常组外均以四氯化碳损伤细胞 , 实验组再加草从 蓉 乙 醇 提取
物 , 阳性对照组加 P H A 。 然后在各培养瓶中加入已吸附兔抗绵羊红细胞抗体 Ig G 的 S R b C , 做花
环形成实验和吞噬试验 , 镜下计数并算出枯否细胞在特异抗体介导下的花环形成率 、 吞噬率及吞
噬指数。 结果 , 实验组比损伤组均显著增高 ( 尸 < 0 . 01 ) 。
关健词 草从蓉 肝枯否细胞 免疫活性
草从蓉B o s e h n ` a 掩` a r o s s i c a F e d t e e h . e t F l e r o v是从长白山区特有的 列 当科 草木植
物 , 常寄生于桦木科恺木属 , 东北恺木又名东北杨赤 A I。 “ : m an d : hur i ca 的 细根 上 , 具有补肾
壮阳 , 润 肠止血等功效 。 主治肾虚 、 阳萎 、 腰膝冷痛 , 对老人习惯性便秘 ,膀胧炎等亦有较好
的疗效〔。 。 本文用特异性花环形成试验和吞噬试验及透射电镜等方法检测了草从蓉对大鼠肝
枯否 细胞免疫活性的影响 。
1 材料与方法
取 1~ s d的W is t ar 系大鼠乳鼠 ( 由我院实验动物科供应 ) 肝脏 , 在无钙镁 P B S中剪成
l m m
3小块放入 0 . 05 %胶原酶与 0 . 06 %胰蛋白酶等量混合液中冷消化 . 经过离 心分离去掉肝
细胞 , 即可得到纯度较高的枯否细胞〔幻 , 含有 20 % F C S的 R PM l l 6 4 0培养基制 成细胞悬液 。
将已备好装有盖玻片的培养瓶内接种 , 在 37 O C原代单层培养 4 ~ s d 。 选 生 长 良好的瓶分
为正常组 、 损伤组 、 实验组及阳性对照组 , 各组为 3支 。 除正常组外均加含 s m ol / L 四氯化碳
的 2 0% F C S的 R PM l l 6 4 o培养液 3 m l〔 3 〕 , 实验组再加草从蓉 乙醇提取物 (由我室提取 ) o . s m g /
m l〔 4 〕 ( 相当生药 l . o m g ) , 阳性对照组加 P H A ( 广州医工所 产 品 ) 1 0 0产g / m l放置 3 7 “ C
30 m i n
, 分别做花环形成试验和吞噬试验 。
1
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1 免疫活性检测 : 5 % S R b C悬液加入 等 量 兔 抗 S R b C 抗 体 gI G ( 其效价 为 1 2 8 。 ,
稀释 2 0 0倍 ) , 置 3 7 “ C 3 o m i n , 温育后 s o u x g离心 l om i n , 弃去上 清 。 取 o . z Zm l 已结合抗
体 gI G 的绵羊红细胞 , 加入各培养瓶内 ,做花环形成试验的各组细胞培养瓶放置 4 O C 30 m i n ,
做吞 噬试验的培养瓶放置 3 7 “ C 15 m i n 。 取出盖片 , P B S洗 2次 , 洗掉未吸附 枯 否细 胞 的 S R
b C
, 然后放入 2 . 5%戊二醛固定 , H E染色 。 一个 M功上结合 3个以上 S R b C的为花环形成阳性 ,
计数花环形成率 、 吞噬率和吞噬指数 。
1
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2 透射电镜 : 供做吞噬试验的各组培养瓶中取出盖片 , P B S洗 , 2 . 5%戊二醛固定 , 脱
水包埋 , 用 L K B 一 V 型超薄切片机切片 , 铀铅双重染色 , 用 J E M 一 12。。透射电镜观察 枯 否细
胞超微结构及其吞噬 s R b C 的现象 。
2 结果与讨论
肝枯否细胞是机体巨噬细胞中最大的群体占总数的 50 %以上 , 具有重要的免疫功能 。
四氯化碳是肝细胞的毒性物质 , 我们用它损伤体外培养的大鼠肝枯否细胞 , 其结果花环
形成率 、 吞噬率及吞噬指数明显降低 ( P < 。 . 0 1 ) 。
.
A d d r e s s : P u Y u r e n
,
Y a n b i a n M e d i e a l C o l l e g e
,
Y a n j i
. 微生物学免疫教研室 . 中组织胫胎学教研室
2 0 0
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