全 文 ：#药理#
草苁蓉提取物对二乙基亚硝胺诱发的肝脏
癌前病变大鼠抗氧化活力的影响
沈明花 尹宗柱 k延边大学医学院肿瘤生化研究室 延吉 tvvsssl
摘要 目的 }探讨草苁蓉甲醇提取后进一步分离的水层成分对二乙基亚硝胺所致肝脏癌前病变大
鼠血清抗氧化活力的影响 ∀方法 }按 ≥²¯·2ƒ¤µ¥¨µ氏方法复制大鼠肝脏癌前病变模型 o用草苁蓉提取物饲
养大鼠共 {周后 o取血测定超氧化物歧化酶k≥’⁄l o丙二醛k  ⁄„l o谷胱甘肽过氧化物酶kŠ≥‹2°÷l o谷
胱甘肽2≥2转移酶kŠ≥×l的活性 ∀结果 }草苁蓉甲醇提取后进一步分离的水层成分对肝脏癌前病变大鼠
≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性有回升作用 o并能降低由于癌前病变的形成所增高的 Š≥× 活性及  ⁄„含量 o从而减
轻组织细胞的病损 ∀结论 }草苁蓉甲醇提取后进一步分离的水层成分具有抗氧化作用 o这可能是草苁蓉
抗癌作用的机理之一 ∀
关键词 草苁蓉 肝脏癌前病变 抗氧化作用 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶
草苁蓉 Βοσχηνιακια ροσσιχα ƒ §¨·¶¦«q ·¨
ƒ¯¨ µ²√为列当科草本植物 o具有补肾壮阳 o润肠
止血等功效 o主治肾虚阳痿 o腰膝冷痛 o肠燥便
秘 o膀胱炎 o功能性子宫出血等 ∀我国东北部山
区誉之为/不老草0 o民间作为抗衰老的医疗保
健品服用 ∀有文献报道草苁蓉具有清除自由基
和增强学习记忆≈t ou  o抗脂质过氧化作用≈v  ∀
最近也有文献报道草苁蓉甲醇提取物对二乙基
亚硝胺k⁄∞‘l诱发的大鼠肝脏化学致癌过程有
抑制作用≈w ox  ∀本文进一步观察草苁蓉甲醇提
取后进一步分离的水层成分对肝脏癌前病变大
鼠血清 ≥’⁄o ⁄„ oŠ≥‹2°÷ oŠ≥× 的影响 o探
讨该药物的抗氧化作用和抗癌作用的可能机
理 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 药物 草苁蓉采自吉林省长白山 ∀草
苁蓉经甲醇浸泡提取 o减压回收甲醇 o将浓缩后
的产物于二氯甲烷k≤ ‹u≤ u¯l o水k‹u ’l中进行
萃取分离 o取 ‹u ’层减压浓缩 o得浸膏ktª草苁
蓉有效成分等于 z qyxª草苁蓉生药 o简称 …• l ∀
1 q1 q2 试剂 二乙基亚硝胺k⁄∞‘l和乙酰氨
基芴k„„ƒl均系 ≥¬ª°¤公司产品 ∀ ≥’⁄o ⁄„ o
Š≥‹2°÷ 及 Š≥× 试剂盒购于南京建成生物技
术研究所 ∀
1 q1 q3 动物 • ¬¶·¤µ雄性大鼠 o体重为 txs ∗
t{sªk生后 y ∗ {周l o由我院动物科提供 ∀
1 q1 q4 仪器 恒温水浴 o离心机 ozut型分光
光度计 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 给药方法 大鼠肝脏癌前病变模型复
制及 …• 投予 }将健康的 • ¬¶·¤µ雄性大鼠 vs
只 o随机分为 v组 ∀ „组为正常对照组 o腹腔注
射生理盐水ks qw °¯ l ov周后肝脏部分切除
kurvl o给予标准粉末饲料 o饲养 {周后将大鼠
断头处死 ~…组为癌前病变模型组 o按尹宗柱等
略改良的 ≥²¯·2ƒ¤µ¥¨µ氏方法≈y 复制大鼠肝脏癌
前病变模型 ∀ ≤ 组为给药组 o给大鼠注射 ⁄∞‘
u周后开始在饲料中添加 s qssw h „„ƒ n …•
xss°ª#®ªp t o注射 ⁄∞‘v周后进行肝脏部分切
除术kurvl o共饲养 {周 ∀{周后将大鼠断头处
死 o收集血液 o放置凝血后离心 o分离血清 ∀
1 q2 q2 测定方法 ≥’⁄活性测定用黄嘌呤氧
化酶法 o血清经过蛋白定量后 ≥’⁄活力以比活
3 国家自然科学基金资助项目 ‘²qv|yyssut
#ywz# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tu期
力来表示k±˜#°ªp t血清蛋白l ∀  ⁄„ 测定用
硫代巴比妥酸比色法 ∀ Š≥‹2°÷ 测定用 ⁄× ‘…
比色法 o规定 s qt °¯ 血清在 vz ε o每分钟反应
使反应液 Š≥‹ 浓度降低 tΛ°²¯ #p t为一个酶
活力单位 k ˜l ∀ Š≥× 活性测定以 Š≥‹ 和
≤⁄‘…为底物 o在 vz ε 每分钟扣除非酶促反应 o
使 Š≥‹ 浓度降低 tΛ°²¯ #pt为一个酶活力单
位k˜l ∀
1 q2 q3 统计处理 用 ≥°≥≥ 统计软件来处理
kτ检验l ∀
2 结果
2 q1 血清 ≥’⁄活性
测定结果见表 t ∀表 t所示癌前病变组血
清 ≥’⁄活力显著低于正常组k Π s qsxl ~给药
组血清≥’⁄活力显著高于癌前病变组k Π 
s qstl ~给药组血清 ≥’⁄活力与正常组相比无
统计学差异 ∀说明 ⁄∞‘o„„ƒ可以明显地抑制
≥’⁄活性 o…• 提取物可以对 ⁄∞‘o„„ƒ 导致
的 ≥’⁄活力下降有明显的回升作用 ∀
2 q2 血清  ⁄„含量
测定结果见表 t ∀表 t 所示癌前病变组
 ⁄„含量显著高于正常组k Π s qsxl ~给药组
 ⁄„含量显著低于癌前病变组k Π s qsxl ~给
药组  ⁄„ 含量与正常组相比无统计学差异 ∀
这说明 o⁄∞‘o„„ƒ有增强脂质过氧化作用 o而
…• 提取物有较强的抑制由 ⁄∞‘o„„ƒ 造成的
脂质过氧化作用 ∀
2 q3 血清 Š≥‹2°÷ 活性
测定结果见表 t ∀表 t 所示癌前病变组
Š≥‹2°÷ 活性显著低于正常组k Π  s qstl ~给
药组 Š≥‹2°÷ 活性显著高于癌前病变组k Π 
s qsxl o其活性介于癌前病变组与正常组之间 o
这说明给药组 Š≥‹2°÷ 活性呈上升趋势 ∀
2 q4 血清 Š≥× 活性
测定结果见表 t ∀表 t 所示癌前病变组
Š≥× 活性显著高于正常组k Π s qstl ~给药组
Š≥× 活性显著低于癌前病变组k Π s qstl o其
活性介于癌前病变组与正常组之间 o这说明给
药组 Š≥× 活性呈向正常组水平恢复的趋势 ∀
表 t 草苁蓉提取物对肝脏癌前病变大鼠血清 ≥’⁄o ⁄„ oŠ≥‹2°÷ oŠ≥× 的影响
组别 ≥’⁄ ±˜#°ªp t  ⁄„ ±°²¯# °¯ p t Š≥‹2°÷ ˜ Š≥× ˜
正常对照组k„l | qsw ? t qwv w qws ? s q|v ww qsv ? u qut |t qst ? { q|s
癌前病变组k…l z quw ? t q{utl z qtx ? v qvztl vy qvw ? v qwzul tz| q{v ? vy qt{ul
…• 给药组k≤l ts qtv ? u qtvwl w qsz ? t qutvl v| qst ? w qvvv oyl tut qxz ? vu qv|w oxl
注 }ξ ? σ Α与 Β比 t) Π s .sx u) Π s .st Β与 Χ比 v) Π s .sx w) Π s qst „与 ≤ 比 xl Π s .sx y) Π s qst
3 讨论
近年来的研究表明自由基的产生和消除失
衡与肿瘤的发生发展有密切关系 ∀自由基的诱
癌 o促癌及致癌作用基本上被肯定≈z o{  ∀自由基
可引起细胞 !细胞膜结构和功能损伤而诱发癌
变≈|  ∀有的学者认为氧自由基既可直接损伤
⁄‘„ o也可通过脂类过氧化间接损伤 ⁄‘„ o最
终引起癌变 ∀自由基在致癌 !促癌过程中所起
作用逐渐被人们所认识 ∀ ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ oŠ≥×
是属于体内消除自由基的酶类 o它们与体内其
他酶类及抗氧化剂组成一个自由基的防御系
统 o以清除过多的自由基 ∀本实验中观察到癌
前病变模型组 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性均显著低于
正常对照组 o而 Š≥× 活性及  ⁄„ 含量均显著
高于正常对照组 ∀这一结果与文献报道的肿瘤
组织中 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性均明显低于正常组
织≈ts ∗ tu  o而 Š≥× 活性 o ⁄„ 含量显著高于正
常组织的结果基本相符≈tv otw  ∀癌前病变时
≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性下降的可能机理为 }≠ 肝脏
癌前病变时造成血液循环障碍 o肝细胞缺血缺
氧 o合成 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 减少 ∀  肝脏癌前病变
时硒含量较低 o而硒是 Š≥‹2°÷ 的活性组分 o从
而 Š≥‹2°÷ 的合成减少 ∀本实验中还发现癌前
病变组 Š≥× 活性显著高于正常对照组 o其机理
可能为 }≠ Š≥× 是一类与解毒功能有关的酶 o当
机体受到 ⁄∞‘等化学致癌物的影响或者它们
在体内的浓度逐渐增高时 oŠ≥× 活性代偿性增
高 o以此来代谢化学致癌物保护机体 ∀  肝脏
#zwz# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tu期
癌前病变时 o≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性下降 o不能清除
体内产生的过多的自由基 o导致 Š≥× 活性代偿
性增高 ∀ ≈肝脏癌前病变时肝细胞膜的通透性
增加 oŠ≥× 很早就释放到血中 o导致血清 Š≥×
浓度增多 ∀本实验结果中还可以看到肝脏癌前
病变组  ⁄„含量显著高于正常对照组 o作者认
为这是 ≠ 肝脏癌前病变时 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性
下降 o不能清除过多的自由基 o导致脂质过氧化
作用增强 ∀ 肝脏癌前病变时肝脏血液循环发
生障碍 o肝细胞缺血缺氧 o通过黄嘌呤氧化酶途
径导致氧自由基增多 ∀ ≈肝脏癌前病变时虽然
Š≥× 活性代偿性增高 o但不能满足机体的需要 o
自由基的产生与消除仍处于失衡状态 o即前者
占优势 o引起脂质过氧化作用增强 o导致  ⁄„
含量增高 ∀通过上述途径产生的自由基直接或
间接地损伤 ⁄‘„ o引起癌变 ∀给癌前病变大鼠
给予草苁蓉提取物后显著提高 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷
活性 o抑制  ⁄„ 的生成 o降低 Š≥× 活性 o使曾
被受到抑制作用的抗氧化系统各成分又重新相
互协同 !依赖 o以清除体内产生的过多的自由
基 o减轻组织器官的损伤 ∀由此可见草苁蓉提
取物具有抗氧化作用 ∀有一些文献报道 ≥’⁄o
Š≥‹2°÷ 具有抗癌活性 o可以保护正常细胞 o有
利于肿瘤的防治≈tx oty  ∀还有一些文献报道在
肿瘤模型动物中提高 Š≥‹2°÷ 活性时可以提高
机体的解毒功能和免疫功能≈tz  ∀由此可以推
论提高 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性的药物可用于肿瘤
的治疗 ∀本实验中所用的草苁蓉提取物显著提
高肝脏癌前病变大鼠血清 ≥’⁄oŠ≥‹2°÷ 活性 o
这就提示草苁蓉提取物可用于肿瘤的治疗 ∀还
有一些资料表明草苁蓉对 ⁄∞‘诱发的肝化学
致癌过程有抑制作用≈w ox  o这就说明草苁蓉对肝
脏化学致癌过程起阻断作用 o其机理可能与草
苁蓉的抗氧化作用有关 ∀总之 o草苁蓉是在肿
瘤的预防和治疗上具有较好的应用前景的药
物 ∀
4 参考文献
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Βοσχηνιαρια ροσσιχα .∞·«±²³«¤µ°¤¦²¯ ot||w owt }{x
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Βοσχηνιαρια ροσσιχα ²± ⁄¬¶¦µ¬°¬±¤·¬²± ¨¤µ±¬±ª¬± ≤«²¯¬±¨ µª¬¦
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{ ƒ¬¶¦«¨µ≥  oƒ¯ ²¼§ • „ ¤±§≤²³¨ ¤¯±§ ∞ ≥ q• ²µ®¶«²³ • ³¨²µ·
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| 方允中 o李文杰 q自由基与酶 1 北京 }科学出版社 ot|{| q
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