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HPLC法测定杜仲叶中槲皮素的含量



全 文 :链上 连接了 5种脂肪酸 , 即 : a 一亚麻酸 、 亚油
酸 、 油酸 、 硬脂酸和棕搁酸 。 棕桐酸的含量最
高 , a 一亚麻酸的含量其次 , 说明紫苏子里含有
连接 。 一 3 系列脂肪酸的磷脂 。 目前市面上广
泛应 用的是大豆磷脂 , 但大豆磷脂疏水基侧
链 上连接的是 。 一 6 系列脂肪酸 , 而 。 一 6 系列
脂肪酸摄取过剩会引起动脉硬化 , 高血脂症
等一系列疾病 。 相反 , 。 一 3 系列脂肪酸在治疗
心脑血管疾病方面有很好的疗效 。 经实验证
明 , a 一亚麻酸 乙醋能显著降低实验性脑缺血
大鼠的脑含水量 ; 延长实验性脑缺血小 鼠的
呼吸次数及 呼吸持续时间 ; 增加正常犬 的脑
血流量 , 降低脑血管阻力 ; 明显抑制大鼠血小
板的聚集及粘 附 , 抑制大 鼠血栓形成 ; 降低大
鼠血液粘度 , 降低高脂模型大 鼠血 中总脂及
总胆固醇 , 而对 正常小 鼠血清总胆固醇含量
无影 响 。 另外 , a 一亚麻酸对樟柳碱所致小鼠记
忆获得 障碍具有显著的作用 , 还 可以大 幅增
加视网膜中 D H A 含量 。 而连接了 a 一亚麻酸
的紫苏磷脂 , 经药理实验证明 , 可改善樟柳碱
所至 小 鼠记忆 获得 障碍 , 可增加小 鼠脑 内
D A 和 J一H T , 降低小 鼠心脑脂褐质含量 , 增
强超氧化物歧化酶活性并抑制单胺氧化酶 一B
活性 , 具有抗心肌缺血和改善小 鼠脑组织急
性缺血缺氧笋作用 。 因而连接 a 一亚麻酸的紫
苏磷脂 , 如应用到医药和食品工业方面 , 将有
一定 的增智 、 降血脂 、 抗 血栓 、 延缓衰老等作
用 , 有着十分广阔的开发前景 。
参 考 文 献
1 中华人民共和 国药典 . 一部 . 1 9 9 5 年版 : 301
2 陈 文 麟 , 等 . 油脂 化 学 . 武 汉 : 武 汉粮 食 工业 学 院 ,
1 9 9 3
:
1 0 2
( 1 9 9 8

0 3

3 3 收稿 )
H P L C 法测定杜仲叶中懈皮素的含量
北京 医科大 学天然药物与仿生药物 国家重点实验室 ( 1 0 0 0 8 3) 吴 伟 来 付宏征 程铁明
张家美 林文翰 ’ `
懈皮素是杜仲叶 中一种黄 酮类化合物 〔 1“ 。 近年
来研究表 明 , 杜 仲叶 中主要有 效成分懈皮素具有抗
自由基等作用 〔 “ · 3“ 。 因此 , 测定 杜仲叶 中懈皮素的含
量 , 可 以评价原料的质 量 。 本文建立 了 H P L C 法测
定杜 仲叶中撇皮素含量 的测定方法 。
1 仪器与试药
1
.
1 仪器 : V a r ia n 高效液相 色谱仪 ; 2 5 1 0 泵 ; 2 5 5 0
可变波长检测器 ; 4 2 9 0 积分仪 ; 超声波清洗仪 Y Y E -
3 0 0 (北医生产 ) 。
1
.
2 试剂与材料 :懈皮素对照 品购 自中国药品生物
制品检定所 , 批号 0 8 1一 9 0 0 3 ; 杜仲叶粉 由陕西省略 阳
杜仲工业公 司及贵州遵义安福 集团总公 司提供 。
2 实验方法与结果
2
,
1 色谱条件 : 色 谱柱 : Y WG 一C l : ( 2 5 0 m m x 4 . 6
m m
,
1 0 拜m ) 国产 柱 ; 流 动相 : 甲醇一 8% 乙 酸水溶液
( 51
:
49 )
, 经超声波脱 气 后 使用 ; 流 速 : 1. 0 m L /
m in ;检 测波长 : 3 6 7 n m ; 柱温为室温 。
2
.
2 样 品供试液的制备 : 称取样 品杜仲 叶粉约 2 9 ,
精密称定 , 加人 80 % 乙醇溶液 20 m L , 在水浴上 回流
提取 3 次 ( 20 m L 火 3) , 每次 l h , 合并提取液 , 滤过 ,
回收 乙醇得浸 膏 , 先加少 量水使之溶 解 , 用 95 % 乙
醇稀 释至体 积 约 50 m L , 加 等体积 Z m ol / L H CI 水
溶液 , 在水浴 上 回流 水解 Z h 左 右 , 直 至水解 完全 ,
蒸干得水解产物 , 用 甲醇溶解转移至 25 m L 容量瓶
中 , 并 稀释至 刻度摇匀 , 作供试 品溶 液备用 , 测定时
经 .0 45 拜m 滤膜过滤 。
2
.
3 标准曲线 :称取懈皮素对照 品加 甲醇溶解定容
配成系列溶液 。 进行色谱分析 , 以懈皮素的峰面积对
吴 伟 男 , 1 98 7 年毕业于贵 阳医学 院药学 系 , 获学 士学位 。 毕业后就职于遵义市安富药业有限公司 , 从事新药的研
制与开发工 作 。 曾参与几项新药的研制工作 , 近年来主要从事 中药 杜仲的替代药材杜仲叶的开发工 作 。
* 二 通讯 联系人

7 4 4
.
浓 度 进 行线 性 回 归 得 回 归 方 程 : A一 9 3 8 4 0 0C 一
23 2 73 4
, r = 0
.
9 9 9 3
, 懈皮素在 1 0 拌g /m L ~ 5 0 料g /m L
范围 内具有 良好的线性关系 。
2
.
4 精密 度试验 : 取 同一浓度对照 品溶液 , 在 上述
色 谱 条件 下 测 定 , 求 出 懈 皮 素 峰 面 积 , R S D ~
1
.
2 2 %

2
.
5 样 品测定 :取 杜仲叶粉约 2 9 , 精密称定 , 按样
品供试液的制备方法 进行提取 , 水解 , 照 上述色谱条
件 , 每次准确吸取供试 品液 20 拌L 注人液相 色谱仪 ,
平行测 定 3 次 , 得棚皮素的 峰 面积 , 由回 归方程计
算 , 结果见表 1 。
表 1 样品测定 结果
样品来源
陕西略阳
陕西略阳
陕西略阳
贵州遵义
批 号 杜仲叶粉中栅皮素含量
( “ g / g , n = 3 )
9 6 0 9 1 4
9 6 0 8 0 7
9 6 0 10 9
9 6 0 8 11
1 5 0
1 5 7
1 7 6
2 6 9
加 样 回收实验 :按样 品测 定方 法进行 测定 , 计
算 加 样 回 收率 , 结果 回 收率 为 9 7 . 4 3 % , R S D -
1
.
36% (
n = 6 )

3 讨论
3
.
1 懈皮素在杜仲叶中以懈皮素昔 的形式存在 , 所
以样 品须酸水解处理方能测定 , 水解是否 完全可用
薄层色谱鉴别得知 。
3
.
2 从样品测定结果看 , 由于两个 厂家生产 杜仲叶
粉的工艺条件不一 致 , 测 定结果懈皮素含 量相差 较
大 ,但同一厂家陕西生产 的杜仲叶粉 , 榭皮素含量较
均匀 , 且搬皮素在杜仲叶粉中不受存放时间与贮存
条件的影 响 , 比较稳定 。
致谢 : 中国杜仲 综合开发协会对 工作 的支持 。
参 考 文 献
1 周荣汉主编 . 中药资源学 . 北京 : 中国医药科技 出版社 ,
1 9 9 3
:
2 4 8
2 刘诗平 , 等 . 中草药 , 1 9 9 1 ; 2 2 ( 4 ) : 1 8 2
3 夏运岳 , 等 . 中草药 , 1 9 9 7 , 2 8 ( 4 ) : 2 0 7
( 1 9 9 8

1一 3 0 收稿 )
薄层扫描法测定化痪降脂茶主要有效成分的含量
天津中医学院 ( 3 0 0 1 9 3) 林翠英 张春喜 吴泽莲
临床实践证 明化癖降脂 茶对 血液有 降脂 、 降粘
作 用 , 可 预防心脑血管疾病 。 郁金 、 丹参是其 中的主
要组分 , 姜黄素 、 原儿茶醛分别是二者的 主要 有效成
分 。 为保证该茶 的有效 性 , 以此二 成分为指标 , 制定
了定性检识郁金 、 丹参 的薄层层 析法 。 在此基础 上 ,
又经实验研究建 立了用薄层扫描仪对原儿茶 醛测定
含量的方法 。
1 仪器与试剂
C S

9 3 0 薄层 扫 描 仪 ( 日本岛 津 ) ; 定 量 毛细 管
( D r u m m o n d 美 国 ) ; 硅胶 G F 25 ; 板 ; 原 儿茶 醛 (市售 )
试剂 经重结 晶精制 (三种 展开剂 的薄层 色谱均为 一
个斑点 ) ;其它试 剂均为分析纯 。
2 实验条件
2
.
1 薄层 分离条件 : 为适应 定量 分析 , 改善原儿茶
醛与其 它斑点 的分离 度及 简化定 位方法 , 将原定性
分析 的条件 改 为用硅 胶 G F 二 ;板 , 展开剂 为苯 一 乙 酸
乙 酷一 甲酸 (4 . 5 : 9 . 5 : 1 ) , 饱和 2 0 m ni , 展开 距离
1 2 。 m , 在紫外分析仪 ( 2 5 4 n m )下定 位 。
2
.
2 薄层扫描条件 : 单波 长荧光锯齿 扫描 , 入一 2 8 0
《中草药》 1 99 8 年第 29 卷第 n 期
n m
,
S
x = 3
, 狭缝 1 . 2 5 m m 只 1 . 2 5m m , 扫描 速度 2 0
m m /m in
, 灵敏 度 火 1 。
3 供试液制备
3
.
1 样 品液制备与定性分析 相同 。
3
.
2 对 照 品溶液制备 : 精密称取 原儿茶醛 对 照 品
4
.
8 8 m g
, 置 10 m L 容量瓶中 , 用乙醇 溶解 定容 , 摇
匀备用 。 浓度为 .0 4 8 8 m g / m L 。
4 稳定性考察
取原儿茶醛对照 品液一定 量点样 , 展 开定位后 ,
立 即测定并于室温下每隔 20 m ni 扫描 一次 , 12 h 内
吸收峰面积积分值基本不变 。
5 实验方法可行性考察
5
.
1 线性关系 考察 : 精密 吸取对 照 品溶液 0 . 5 、 1 、
1
.
5

2

2
.
5

3 拜L 点在同一块硅 胶 G F 25`板上 , 展开 、
定位 、 扫描 ,将点样量与峰面积值经 线性 回归 处理 ,
得 回归方程 Y 一 一 1 8 9 4 7+ 1 5 1 1 5X , r 一 0 . 9 9 8 2 ( n =
6)
。 说明在 0 . 24 拜g ~ 1 . 5 阳 范围内线性关系 良好 。
5
.
2 回收率试验 : 同法 制备 8 份样 品供试液 , 于同
一薄层板上各点 1 拜L , 其中 4 个斑点分别加点对照
·
7 4 5
-