全 文 ：In hib ito r y E ffe et o f P o lys . c c 翻a ro Pe tid e o f Yu n 滋 (〔协月沁扭s
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.
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.
引流熊胆药理作用的研究
延边医学院药理教研室 (延吉 13 3 0 0 0) 张红英 .
延边医学院附属医院 陈亚东 庄桂兰 秦幸智 张铁源
延边肿瘤医院药局 吕金钟
摘 要 熊胆 (Be a r bi le )灌胃给药可明显延长小鼠的常压耐缺氧存活时间 , 能明显对抗四抓化碳
(CCI
; , s 。 )引起的小鼠血清谷丙转氮醉(G P T )升高 , 对四抓化碳所致的肝病理组织改变有一定保护
作用 , 并对小鼠学习记忆有促进作用 , 同时能降低脂质过氧化产物丙二醛(M D A )的含量 。
关扭词 熊胆 耐缺载 Ccl . G PT 学习记忆 M D A
熊胆是熊科动物黑熊和棕熊的干燥胆 。
由于天然熊胆贵重和来源有限 , 所以常用人
工引流熊胆 。 引流熊胆与天然熊胆化学成分
相似〔, 〕。 熊胆的主要成分是胆汁酸 〔幻 。 主要为
熊胆特有的熊去氧胆酸 、鹅云氧胆酸 、胆酸及
去氧胆酸等 。 最近又有文献报道引流熊胆有
改变血液流变学参数及抑制血栓形成 的作
用‘3〕。 熊为我国重点保护动物 , 药源缺乏 。 本
文用黑熊引流熊胆进行了耐缺氧 , 保护肝脏 ,
促进小鼠学习记忆等药理作用的研究 。
l 实验材料
动物 : Bal b /c 小 鼠 , 昆明种小鼠 , 体重 2
士 2 9 , 雌雄兼用 。 由延边医学院实验动物科
供给 。
药物 : 引流熊胆由延吉市珍贵动物饲养
场提供 , 为当地黑熊的一次人工引流胆汁的
干燥粉末 , 引流熊胆粉末与天然胆汁制成的
粉末二者的含水量无区别 。 实验前用蒸馏水
配成所需浓度 。 四乙氧基丙烷(T EP )为 Fl u -
ka 产品 , 硫代巴 比妥酸 (T BA ) , 北京化工厂
产品 , 其它药物均为市售 。
仪器 : 7 21 分光光度计 (四 川分析仪器
厂) 。
2 方法与结果
2
.
1 对小鼠耐缺氧能力的影响 : 取健康小鼠
30 只 , 雌雄各半 , 按随机法分为 3 组 , 每组 10
只 。 实验组连续灌 胃给药引流熊胆 (2 0 ,
4 0 o m g / k g ) 4 一 sd , 对照给以等容量的常水 。
末次给药 lh 后 分 别置 于 经容 量标定 的
30 o m l广 口 瓶中 , 瓶内置 2馆 钠石灰以吸收
CO
: 和水份 , 瓶盖涂以凡士林密封 。记录小鼠
的死亡时间 , 即存活时间 , 并与对照组比较 ,
.
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re s s : Z h a n g Ho
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a r tm e n t o f P h a rm a e o lo g y
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,
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(中草药) 1 9 96 年第 2 7 卷第 10 期 一 6 0 9
结果见表 1 。 在常压条件下 , 引流熊胆可明显
延长小鼠的存活时间 。
表 1 引流熊胆对小鼠常压耐缺级能力的影
响(x 士s )
组别 动物数 (只) 剂量 (n , g / k g ) 存活时间 (m in )
对照 1 0 3 0 . 6 6士 3 . 38
熊月}1 1 0 2 0 0 4 1 . 4 5 士 5 · 5 7 ’
狠胆 1 0 4 0 0 4 6 , 6 4 士 6 . 了8 ’
与对照组比较 ‘ 尸< 0 . 01
2
.
2 对 CC1 4 所致小鼠血清 G PT 的影响 : 取
小鼠 40 只 , 随机分为 4 组 。生理盐水对照组 ,
引流熊胆 (2 0 0 , 4 0 o m g / k g )组 , 并设 CC I; 模
型组 。每天灌胃给药 1 次 , 连续 6d 。 生理盐水
组及给药组在第 5 次给生理盐水或给药后
lh 皮下注射 CC I; 0 . o 3 m l八 0 9 , 2 4h 后 眼眶
取血 , 按赖氏法〔。测血清 G PT 活性 。 结果表
明 : 引流 熊胆 (2 0 0 , 4 o o m g / k g )对小 鼠 CC I.
所致肝损伤引起的血清 G P T 活性升高有显
著性抑制作用 。 见表 2 。
表 2 引流熊胆对 CCI ; 引起小民血清 G PT
升高的影响 (于士 s )
组别 动物数(只 ) 剂量 (m g / k g ) G PT (o n )
对照 10 一 0 . 1 3士 0 . 15
CCI‘ 10
一
0
.
7 4士 0 . 0 5
保护作用 。
2
.
4 引流熊胆对小鼠学习记忆的促进作用 :
实验采用一次性被动回避反应—跳台法和避暗法〔5〕。
2
.
4
.
1 引流熊胆对小 鼠记忆获得的影响 : 小
鼠 5。只随机分为 5 组 , 灌 胃给药引流熊胆 7
~ sd
. 可 对 抗 训 练 前 l(1 m in ip 东 蓑 若碱
(3m g /k g )引起的小鼠学习记忆获得障碍 , 表
现为跳台法的错误次数 比东蓑若碱组明显减
少 , 并有一定的量效关系 。 结果见表 3 。
表 3 引流熊胆对东蔑营碱致小鼠记忆
获得障碍的影响
组别 动物数 剂量
(只) (m g / k g )
跳台法错误次数
(x 士 s )
熊胆
熊胆
0
.
6 6土 0 0 4 .
0
.
6 4士 0 . 0 4 二
与 CCI; 模型组 t 较 ‘ P < 0 . 0 1 “ P ( ()· () 0 1
2
.
3 对 CC1 4 所致小鼠肝组织损伤形态学改
变的影响 : 小鼠 30 只 , 随机分为对照组和给
药组 (2 0 0 , 4 0 0 m g / k g ) , 每组 1 0 只 , 给药方法
同前 , 末次给药 1h 后 , 皮下注射 CCI 。 原液
0
.
03 m l/ 1鲍 , 24 h 后处死 , 取其肝脏采用双盲
法进行病理 检查 , 肝脏 用 10 %福 尔马林 固
定 , 石腊包埋 , 切 片 , H E 染色进行观察 。 结
果 , c CI ; 组肝组织大片嗜酸性变性 , 坏死 , 伴
中性白细胞和淋巴细胞浸润以及血窦内皮增
生 。引流熊胆 (4 o om g /k g )组肝细胞和疏松化
及个别细胞的嗜酸性坏死 。 表明引流熊胆对
CC1
4 所致小鼠肝脏组织损伤形态有一定的
.
6 1 0
·
对照 10 一 0 . 2 5 士 0 . 4 6 份 .
东食若碱 1 0 3 2 . 1 3 士 1 . 3 5
熊胆 1 0 10 0 0 . 7 5士 0 . 4 6 ’
熊胆 1 0 2 0 0 0 . 6 2士 0 . 52 ’
熊胆 1 0 4 0 0 0 . 3 8土 0 . 52 . ’
与东直若碱组比较 “ 尸< 0 . 05 一 尸< 0 . 01
2
.
4
.
2 引流熊胆对小鼠记忆巩固的影响 : 训
练前 l o m in ip 氯霉素 ZO0 m g / kg 使小鼠在避
暗法中错误次数增 加 , 引流熊胆连续灌 胃 7
一 sd (10 0 , 2 0 0 , 4 o om g / k g )可对抗氯霉素所
致的记忆巩固障碍 , 并有明显的量效关系 。见
表 4 。
表 4 引流熊胆对氮 . 素致小鼠记忆巩固不
农的改善作用(x 士 s )
组别
动物数 剂量 避 暗 法
(只 ) (m g / k g ) 错误次数 潜伏期 (s )
对照 1 0 一 1 . 20 士 0 . 7 1 ” 8 7 . 3 0 士 1 00 . 4 2
氯霉素 1 0 20 0 2 . 7 0士 0 . 95 38 . 8 0 士 4 3 . 6 3
熊胆 1 0 1 00 1 . 6 0 士 0 . 9 7 ’ 6 7 . 70 士 8 8 . 10
熊胆 1 0 20 0 1 . 40 士 0 . 5 2 ‘ ’ 7 7 . 50 士 9 1 . 7 0
熊胆 1 0 4 0 0 1 . 2 0士 0 . 4 2 ’ ‘ . 7 9 . 00 士 4 9 . 6 8
与氮霉素组 比较 . 尸< 0 . 05 二 尸< 。. 01 · 二 · P < 。. 0 1
2
.
4
.
3 引流熊胆对小鼠记忆再现的影响 :经
训练的小鼠 , 于测验前 30 m in 灌 胃 40 % 乙醇
(O
·
lm l/ 1 0 9 )
。 结果表明 , 4 0 % 乙醇可使小鼠
跳台法错误次数增加 。 引流熊胆连续灌胃 7
一 sd (10 0 , 2 0 0 , 4 0 0 m g / k g )的记忆再现成绩
明显优于 乙醇对照组 (P < 0 . 01 ) , 结果见表
5
。
表 5 引流熊胆对 40 %乙醉致小成记忆再现
困难的改善作用‘士 s )
组别 动物数(只 ) 剂量(m 创k g ) 跳台法错误次数
对照 10 一 0 . 20 士 0 . 4 2 二 ’
乙醇 1 0 1 . 6 0 士 0 . 8 4
熊胆 1 0 10 0 0 . 9 0 土 1 . 5 0
熊胆 1 0 2 0 0 0 . 7 0 士 0 . 8 2 ‘
熊胆 1 0 4 0 0 0 . 4 0 士 0 . 5 2 二
与乙醉组比较 ’ 尸< 0 . 05 二 尸< 0 . 01 ‘ ’ . 尸< 0 . 0 01
2
.
5 引流熊胆对正常小 鼠 M D A 含量的影
响 : 取小鼠 20 只均分 2 组 , 对照组灌 胃等量
的常水 , 给药组灌胃(l o o m g / k g ) , 2 次 / d , 连
续给药 1 5d , 末次给药 1h 后 , 将小鼠脱颈椎
处死 。 取心脑用 T BA 法川测定 MD A , 结果
见表 6 。 引流熊胆能够减少 M D A 的含量 , 表
明具有抗脂质过氧化作用 。
衰 ‘ 引流熊胆对小民心桩 、大脑 M D A 含t
的影响(x 士 s )
组别
动物数 剂量 M D A 含量 (n m ol / 砂
(只 ) (m g / k g ) 心脏
对照
熊胆
l 0
l 0
一 3 8 . 00 士 12 . 0 9
1 0 0 2 1
.
6 9士 6 . 2 5 二
大脑
6 0
.
00 士 18 .
3 6
.
5 6士 2 1 .
5 4
3 艺 .
与对照组 比较 ’ 尸< 0 . 05 , · 尸< 。. 01
3 讨论
本实验表明 , 引流熊胆灌胃给药 , 在常压
条件下能明显延长小鼠的存活时间 , 缺氧是
一种紧张性刺激 , 生命活动的重要器官—脑和心脏缺氧是小鼠常压缺氧死亡的主要原
因 。但是中枢神经抑制剂 , 中枢性迷走神经兴
奋剂和脑心血管扩张剂均能明显延长小 鼠耐
缺氧时间 。
引流熊胆可抑制 小鼠血清 G PT 活性升
高 ,并对 CC1 4 所致小鼠肝脏组织损伤形态学
有一定保护作用 。 目前认为 , CCI ; 所引起的
肝损伤机制为脂质过氧化作用 , C CI ; 可使细
胞膜性结构发生过氧化作用而破坏 , 从而导
致血清 G P T 等酶活性上升及形态学改变 。
引流熊胆可抑制 CCI ; 所致小 鼠血清 G PT 的
活性上升 , 并对肝脏组织嗜酸性变性 ,坏死有
一定对抗作用 , 表明引流熊胆可能对肝细胞
损伤有保护作用 ,从而具有降酶作用 。
引流熊胆在行为实验中使用不影响小鼠
自主活动的剂量 , 可对抗 3 种化学药物所致
记忆各阶段障碍 。 提示该药可能有易化记忆
的作用 。 东蓑若碱作为中枢胆碱能受体的拮
抗剂 , 可降低大脑皮质和海马 的胆碱能系统
活性 , 对记忆获得产生阻抑效应 。东蓑若碱已
被公认为一种记忆获得障碍的工具药〔5〕。 引
流熊胆 3 个剂量组训练前给药均可对抗东蓑
若碱引起的记忆获得障碍 , 这可能是通过增
加乙酞胆碱来提高中枢胆碱能系统功能改善
记忆障碍 。 已知蛋白质是长期记忆形成的内
在基础 , 记忆的巩 固与脑 内新 蛋白质合成密
切相关 〔, 〕 。 我们发现引流熊胆对蛋 白质合成
抑制剂氯霉素所造成的记忆巩固缺陷有改善
作用 , 说明引流熊胆可能具有促进蛋 白质合
成的作用 。乙醇为中枢神经系统抑制剂 , 在较
低浓度下即可明显破坏记忆过程 , 导致记忆
再现障碍〔5〕。 引流熊胆可明显对抗 乙醇所引
起的记忆再现障碍 。 同时可减少小鼠心脑组
织中 M D A 含量 , 表 明具有抗脂质过氧化作
用 。
引流熊胆的药理作用是多方面 , 有待进
一步研究 。
参 考 文 献
1 戚宝娣 . 中成药 , 1 9 8 9 , 1 1 (6 ) : 12
2 木村正康 , 等 . 药学杂志(日) , 19 6 7 , 8 7 (7 ) : 8 0 1
3 张红英 , 等 . 中草药 , 1 9 9 2 , 2 3 (8 ) : 4 2 0
4 福州部队总 医院编 . 临床医学检验 . 上海 : 上海科技出版
社 , 1 9 78 . 3 2 6
5 张均 田 , 等 . 药学学报 , 1 9 8 6 , 2 1 (1 ) : 12
6 陈顺志 , 等 . 临床检验杂志 , 1 9 84 , 2 (4) : 8
7 杨方中. 心理学动态 , 1 9 83 (1 ) : 32
(1 9 9 5
一0 7
一
0 4 收稿 )
(中草药 ) 19 9 6 年第 2 7 卷第 10 期 . 6 1 1 .