全 文 ：蛆 躬溶 栓 作 用 研 究 进 展
北京心肺血管医疗研究中心 , 金 鸣
摘要 蛆划提取物在离体及整体条件下可溶解血栓 。 它可直接溶解纤维蛋白并具纤溶酶原激活荆
作用 。 其活性成分为分子量数万的蛋白酶 , 该提取物毒副作用很低 , 人 口服后可促进纤溶 , 改善
凝血及血液流变学指标 。
纸阁是寡毛纲动物 , 《神农本草经 》中被列为下品药物〔〕。 它 可清热 、 平肝 、 止喘 、 通
络 , 主治高热狂躁 、 惊风抽搐 、 风热头痛等病症 。 蛆绷含蛆闯解热碱 、 蛆蜕素 、 纸蝴毒素 、
嗓吟 、 胆碱、 肌等成分 , 有降压 、 解热 、 镇静 、 抗惊厥等药理作用〔〕。 年 , 日本美原恒
等人发现人口服蛆闯水提取物后外周血纤溶活性明显增高〔〕。 此后研究表明 , 贩闯提取物口
服或静注均可溶解动物血栓 , 提示 以虹蜕为原料 , 可望开发出一新型溶栓剂 。
溶栓药理作用
纸躬地龙 是一平肝熄风中药 , 已有数千年的使用历史 。 年 美 原 恒首 次 发 现
科蛆绷水提物有直接溶解纤维蛋白及纤溶酶原激活物作用 。健康人口服 该药后 ,
纤维蛋白平板法测得外周血优球蛋 白的纤溶活性明显增高 , 优球蛋白溶解时间明显缩短 , 认
为该提取物可望发展为一新型溶栓剂〔〕。 路英华等以水提取 、 盐析 、 层 析 法 从银 齿 远 蜕
时 加。 制得蛆蚁纤溶酶 , 该酶具纤溶及纤溶酶原激活剂活性 , 可直接溶解纤维
蛋白及血凝块〔〕。 饶育雄等以颈动静脉间连管内穿线吸附纤维蛋白的模型进行试验 , 发现十
二指肠给参环毛绷尸 ‘。 体腔液冻干粉溶液 时 , 纤维蛋白形 成抑
制率为 士 设 组为。 。 该结果与静注 组 无 显 著 性 差 异
尸 〔幻 。 张世玲等证明纸蝴纤溶酶 ‘ , 以平板法测得活性数据标定药
量 , 下同离体条件下可使 血栓形成仪制得的 血栓明显减重 , 这 与
作用趋势一致 , 尸均 。 家兔静注该酶 少 , 后凝血时间、 凝血 酶原
时间及复钙时间均明显延长 尸均 , 后 , 双脉服法测得血浆纤维蛋白原明显下降 ,
尸 , 试验阳性数由给药前的。增至 与 组相 比尸 。 家兔 灌胃 沪 ,
及静注 , , 该酶后 , 均可使事先 给入肺动脉的血栓明
显减重 , 尸均 。 这些结果均表明 , 蛆绷成分经消化道吸收入血或由静脉注入 后 ,
有抗凝 , 促纤溶及促进血栓溶解的作用〔的 。欧兴长以离体实验发现终浓度 生药 的地龙
水提液 , 可抑制凝血酶催化的纤维蛋白形成反应〔〕。 李永吉等以广地龙 提取物 家兔静
注 生药 后 , 血栓形成仪检测 , 与 组相比 , 给药组血液 粘 度 下 降 尸
, “雪暴” 现象出现时 间 、 特征性血栓形成时间及纤维蛋白血栓形成时间 明 显 推迟
尸 , 尸 , 尸 , 血栓长度 明显缩短 尸 , 血栓干重下 降尸
。 , 提示该药有抑制血小板聚集 、 抗凝 、 降低血液粘度 、 抑制血栓形成的作用〔〕。
上述不 同方法的实验结果表明 , 蛆绷提取物在离体及整体条件下有抗凝及促进纤溶的作
用 , 从而抑制血栓形成 、 促进血栓溶解 , 提示 以蛆绷为原料有可能开发出一新型溶栓药 。
有效成分及其性质
近年来 , 对蛆闯提取物的溶栓有效成分进行 了一系列研究 。 年 , 美原恒等以 梯
, ,
《中草药 》 年第 卷第 期
度洗脱法用 一 柱从蛆躬水提物中分得一 , 一 亚 , 一 班个 部分 , 它们皆
币纤溶活性 , 其等电点依次为 , 和 。 各口服 , 均 可 使健 康人外周血纤溶
活性明显增高〔〕。 其后 , 他们又从这个部分中以凝胶过滤法分离得 种具纤溶及纤溶酶原激活
物作用的蛋白酶 , 其分子量 一 法分别为 , , , , 和
, 相应的 依次为 , , , , 下阴 。 离体条件下这种酶均可 溶 解
! 法 制 得的血栓明 。路英 华 等以水 ‘提 、盐析 、凝胶层析法从银齿远叫 耐。 , 。”
中提得户 一 法 的纯蛋白酶 , 其分子量各为 士 扣 士 , 这 成
分均可水解纤维蛋 白及血凝块〔〕。 吴骋等从 属贩绷提取纯化得具溶栓活性组分一
, 其 一 为 条带 , 分子量各为 和 〔 〕。 周元聪等从贩好 玄 一
付 水提取物中以 火 一 柱分得个峰 , 其中第 峰具纤溶活性 , 该峰物质 以
! ∀#∃ 柱分离得12峰中 , 7 个峰 ( B 一 l 一 B一顶 ) 具 纤 溶 活 性 , 以F p L C法从含量较高
的B 一 l 及B 一V I H 中分得纤溶成 分B 一 l 一1 、 B 一V l l l一1 一与 B 一孤一 , 其 中 , B 一 孤一 1为 2 条 色
带 , 主 带分子量2张D , 另2成分均为分子 量 30 K D 的单色 带〔n 〕。 徐建民以慈菇蛋 白酶抑
制剂Seph 盯os e4 B柱条和层析法吸附贩绷水提物 , 洗脱的纤溶成分以M o n o Q 往分离 , 得1 个
蛋白峰 , 8 个峰有纤溶活性 , 含量最高峰的9为分子量约27 K D 的单一色带 。上述结果表明 , 纸绷
溶栓成分为多种水溶性酸性蛋白质 , 分子量约为20一40 K D 。 一般说来。蛋 白质进入消化道后 ,
必须被水解寡肤或氨基酸 , 才能吸收入血 。 蛆蜕提取物 口服后虽可见血浆纤溶活性增高 , 但
多次给药后未见明显变态反应 , 提示血浆中纤溶活性物质可能为寡肤 。
丝氨酸蛋 白酶抑制剂利马豆胰蛋 白酶抑制剂 、 N 一对甲苯磺酞赖氨氯甲基酮 、 二异 丙 基
氟磷酸醋等分别可抑制蛆绷纤溶酶活性的10 % 、 58 . 3 % 和 11.4 % , 提示该酶可能与纤溶 酶
类似 , 为一丝氮酸蛋白酶〔。 。贩蜕溶栓成分最适pH 为中性 , 在pH Z的胃液中会被破坏 , 改 口
服给药须用肠溶胶囊 。 贩酬提取物50 ℃保温30 m in 后活性尚剩 余92 % , 说 明其活性成分 对
热较稳定 。 美原恒分别将N S及C aC1 2溶液加入含贩姗提取物的人血浆 , 37 ℃反 一应后测 定纤
维蛋白降解产物 ( F D P ) , 结果表明 , N S 组F D P为阴性反应 , 而C aC I:组F D P水平明显升
高且在一定范围内与蛆绷提取物浓度成量效关系〔3〕。提示在该实验条件下 , 该提取物可 水 解
血浆纤维蛋 白而不水解纤维蛋 白原 。路英华等以S D S一P A G E 法观察到 , 蛆归纤溶酶可将缓 冲
液中的人血纤维蛋白原降解为小分子量片段〔13 〕, 提示美原恒实验中贩绷提取物的纤维蛋白特
异性作用可能与血浆中某些因子的影响有关 。 如果在人体内 , }敌丘州成分主要水解纤维蛋白而
很少水解纤维蛋 白原 , 则不易诱发出血 , 这是一溶栓剂十分可贵的待性 。
蛆绷成分溶栓作用机理虽已进行 了一定研究 , 但许多问题尚未搞清 。 如该药是否只水解
纤维蛋白而很少水解血浆纤维蛋白原 , 其水解纤维蛋白的作用点 , 该药主要有效蛋白酶的活
性中心 , 该药 q 服后经消化 , 吸收 , 其结构的变化及其与活性关系等的研究可充实药物溶栓的
理论 , 为研究新药、 指导临床提供依据 。
3 临床研究
郭斗涛等报告 , 成年高血粘度综合症及脑血栓患者38 例 , 口服蛆卿水提 物30 m l/ d , 1 4 d
为一疗程 , 治疗后红细胞压积 ( 尸< 。.0 1 ) 、 血浆粘度(尸< 0 .0 1 ) 、 全血粘度(尸< 0 .00 1) 、
全血还原粘度 ( 尸< 。. 0 1 ) 、 纤维蛋白原 ( 尸< 0 .0 1 ) 、 血沉 ( p < 0 .00 1 ) 及血沉方程K 值
(尸< 。.0 0 1)均有明显改善 , 其血液流变学综合指泳JG 道亦见改善〔有效率79 ;石) 。 提示贩闯
提取物口服可使脑血栓患者血液流变学指标明显改善〔14〕。 肾小球疾病多有血液高凝及血栓形
成现象。朱长连等报告9例肾小球肾炎患者口服蛇躬}提取物15om g/ 次 , 3 次/d , 连服7~ 14d后 ,
·
4 6
·
,
P T
,
T T 均明显延长 ( P 均< 0.05 ) , A T 一 l 活性上升 ( P < 0 .05 ) , F D P 增 加
( 尸< 。. 0 5 ) , 蛋白尿明显减少 (尸< 0 .05 ) 〔15〕。 另外 , 董德洛等给脑血栓患者治疗 组 19
例 , 安慰剂组8例 口服蛆绷提取物150 m g/次 , 3 次/d , 连续治疗一 周后 , 给药组K P T T , P T ,
T T 均显著延长 ( 尸< 0 .0 1 ) , 安慰剂组上述指标给药前后无显著性差异 , 给药组与安慰 剂
组间差异显著 ( 尸< 。.0 1 , 尸< 。.0 5 , 尸< 0 .0 5 ) 。 治疗组a:一P l 活性给药后明显降低 ( 尸<
0 .05 ) , 安慰剂组改变不明显 。 治疗组给药后神经功能缺损积分值明显减少 (尸< 0 .0 1 ) ,
提示该提取物可能通过抗凝及促纤溶作用 , 促进脑血栓患者神经功能缺损的恢复〔16 〕。 蛆绷
提取物的临床应用虽进行了一些探索 , 但对其在人体内是否确有溶栓作用 , 其作用特点及不
良反应尚认识不足 。 这方面的工作还有待加强 。
4 毒副作用
美原恒对贩姗提取物进行了急性毒性实验 , 结果表明 , 3 个有效部位F 一I , F 一 I , F 一 l
及6种溶纤蛋白酶小鼠口服给药 , L D 。。> 5 9 / k g , 这6种蛋白酶小鼠腹腔注射L D 。。分别为923370 , 6 0 , 5 8 , 4 8 及Zom gzkg , 静脉注射L n 。。分别为33, 3 8 , , o ‘, 1 3 5 , 8 8 , 及27m g/kg , 谑
示纸绷溶栓成分毒性很低 。 路英华报告 , 大鼠口服蛆绷纤溶 酶25500m m 丫d 或 静脉注 射10
m m /d后 , 其血压 、心率 、呼吸频率 、深度及一般行为活动均无异常改变 , 家兔口服127。。。m m V d
大鼠 灌 胃 25500m m Z/ d , 连 。续 16d , 消化道 及其他 器官 均 无异 常。 小 鼠腹 腔 注 射 该 酶
2600m m 叮d , 1 6 d 后处死 , 可见部分腹腔枯连肿大充血; 静脉注射5200m m 丫d , 连 续16d 后
处死 , 可见部 分小鼠肺出血 , 该酶 口 服L D 。。> s g/ k g , 静脉注 射L D S。 : 80 m g / k g , 小 鼠长
期毒性实验 , 最高剂量 360 0om m 丫d , 每周给药3一4d , 6 个月后处死 , 未见异常〔4〕。 姜 东 胜
等从蛆躬l纤溶酶给雄性小鼠灌胃 , L D 。。 > 1 . S X 1 0 ’m m Z / k g , 雌性小鼠灌 胃L D 。。> 1 . 5 x l o ,
m m
Z
/ k g 连续1od , 未见对生长有明显影响, 肝 、 脾 、 胸腺 、 心 、 肺 、 肾未见结构改变 , 皮下
未见明显出血〔17〕。 上述实验均说明 , 蛆绷溶栓成分的毒副作用很弱 。
.理想的溶栓剂应可迅速溶解血栓 , 无毒 , 无出血等副作用 , 给药方便 , 价格便宜 。 而目
前用于临床的溶栓剂在许多方面仍不理想 , 贩绷提取物可洛解血栓 、 毒副作用低 , 可口服给
药 , 且生产成本低廉 , 是一较有开发价值的新型溶栓剂 。 目前 , 贩卿 口服制剂的基础研究已
做了一些工作 , 但临床应用的报道尚不多 , 还应积累更多的资料 。 为满足临床需要 , 应进行
纸绷提取物静脉注射溶栓剂的研究 。 由于贩躬}溶栓活性成分为分子量数万的蛋白质 , 反复使
用后的变态反应将是一有待解决的间题 。 蛆姗溶解血栓的作用机理还有待深入研究 , 这种探
索可能充实药物溶栓理沦 , 为临床用药及药物开发提供指导 。
参 考 文
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《中草药》19 9 4年第25 卷第1期