全 文 ：表 野英巷种籽油中 v E活体含 t ( m g /l。。 g )
, 卜 不 冬
正相色谱
反相色谱
1 8
.
4 4 6
。
2 8
1 9
。
6 2 7
。
1 4
4
。
3 2
4
.
8 8
9
.
15
7
。
2 2
从图中维生素 E 4 种活性结构看 , 由于苯环
上 甲基个数及位置不同 ,分子极性不同 ,极性
排列顺序为 Q~ p~ 7 ~ 8 依次增强 。
从分子空间体积来看 , a ~ 日~ 下~ a 依次
变小 。 根据反相色谱原理 , 分子极性小 ,空间
体积大的物质在色谱柱上保留值大 , 因此出
峰顺序应是 占~ 下~ p~ a 。 正相色谱的保留机
理与反相色谱相反 ,其出峰顺序应是 a ~ p~
下斗占(图 1 、 图 2 ) 。
D e t e r . . i n at i
o n o f t血e C o o t e n t o f F o u r
由于种籽油中含有大量脂肪 , 直接溶解
进样分析对于色谱柱污染较大 ,柱压易升高 。
为克服这一缺点 , 实验中试图采用皂化提取
法 ,即先将油样皂化 ,去掉脂肪 ,再用乙醚从
中提取 不皂化物进行分析 , 分析结果是每
10 鲍 种子油含 2 5m g 维生素 E , 结果明显低
于直接进样分析 , 主要是皂化过程中维生素
E 受到损失所致 。
参 考 文 献
1 中国林科院分析中心 . 现代实用仪器分析方法 . 北京 : 中
国林业出版社 , i , 8 4
2 祁粗年 ,等 . 沙棘 . 1 9 95 , 8 : l
A e t i v e F a c t o sr
o f V i t a m i n e E i n 0 11
o f R u n n i n g M al l o w (材 d lvo r o t u 碑d习乞l认 )
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n o r m a l a n d r e v e r s e P h a s e H P L C
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T h e r e t e n t io n m e e h a n i s m o n t h e n o r m a l a n d r e v e r s e
Ph a s e e o l u m n s o f t h e fo u r a e t iv e fa e t o r s w a s s t u d ie d
.
高效液相色谱法测定复方制剂中阿魏酸和川有嗦
北京医科大学 实验药厂 ( 1 0 0 0 8 3 )重点实验室
张立冲 . 陈新旺
邹安庆
摘 要 用 R P 一H P L C 同时测定复方制剂中阿魏酸和川夸嗓的含量 ,用 1C 8柱 , 甲醉 一水 (含 1% 冰醋
酸 )为流动相 ,检测波长 2 8 o n m ,外标法定量 。
关锐词 H P L C 阿魏酸 川夸嗓 当归 川夸
《补阳还五汤 》成方是 由当归 、 川芍等数
味药组成 ,具有活血化痕的作用 , 其中当归 、
川芍的有效成分均含阿魏酸 , 川芍中含有川
芍嚓 , 国内外文献均有报道用 H P L C 方法测
定样 品中的阿魏酸 〔 ,一 5〕和川芍嗦〔` · ” 的方法 。
为测定《补阳还五汤 》方中有效成分的含量 ,
本文研究同时测定复方制剂中的阿魏酸和川
芍嗓的含量 , 比分别单独测定要简便 、 省时 。
1 实验方法与结果
1
.
1 仪器 , 试剂和药品 : 仪器 : V ar ia n 5 5 0 0
高效液相色谱仪 , D S “ 1数据处理仪 ,试剂均
为分析纯 ,水为重蒸去离了水 。
标准品 : 阿魏酸 、 盐酸 川芍嗓 (中国药品
生物制品检定所 ) ;样品 : 医院药剂科提供 。
·
A dd r e s s
:
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u n , E x p e r i m
e n t a l F
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,
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( 中草药 》 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 4 期 · 2 1 3 ·
1
.
2色谱条件 :色谱柱 : Y W G C l。 (3 OC m X
4
.
6m m )北京分析仪器厂填装 。 流动相 :甲醇
二水 (1 %醋酸 )一 35 : 6 5 ( p H一 4 ), 检测波长 :
2 80n m
。
1
.
3 标准曲线的制备 : 精密称取阿魏酸标准
品 5 . o 3m g 与盐酸川芍嚓 8 . gm g , 分别 以甲
醇各定容至 1 0m l 。 再精密量取阿魏酸标准
液 : 0 . 6 , 0 . 8 , 1 . 0 , 1 . 2 , 1 . 4m l 分置 r o m l 容量
瓶中 。量取盐酸川芍嗦标准液 : 0 . 1 , 0 . 2 , .0 3,
0
.
4
, 。 . s m l 分置上述 10 m l 容量瓶中 。 分别以
甲醉稀释至刻度 , 在上述色谱条件下 , 进样
1即 l ,记录色谱图 (见 图中左 ) 。 由峰面积对
相应 浓度 直线 回 归 。 阿魏 酸 在 2 0 . 1 一
7 0
.
5 拌g / m l浓 度 范 围 内 回 归方程 为 Y -
5 7
.
5 1+ 4 1 3 X
,相关系数 r = 0 . 9 9 7 4 。 盐酸川
芍嗓在 8 . 92 一 4 4 . 6拜g /m l 浓度 范围 内回归
方程 Y ~ 4 1 + 3 0 8 X ,相关系数 r = 0 . 9 9 2 2 。
1
.
4 样 品测定 : 精密量取样品 Zm l ,置分液
漏斗中用二氯甲烷提取二次 ( 15 和 1 0m l) 合
并提取液加 l m ol / L HCI 甲醇液适量混匀 ,
p H 约 1 . 3 。 置水浴 (约 45 ℃ )上蒸干残渣 ,用
Zm l 甲醉溶解为供试品 。 进样 1。川记录色谱
图 (见图中右 ) , 由回归方程计算结果 , 样品含
量测定结果见精密度试验 。
1
.
5 加样回收试验 : 取 已知含量的样品 Zm l
两份 , 分别加入一定量的阿魏酸和盐酸川芍
嚓标准液 , 依法提取测定 , 计算 回收率 。 (见
表 )
图 色谱图
左 一标准品 右 一样 品 卜溶剂 一阿魏酸 I 一盐酸川芍臻
1
.
6 精密度和最小检测限测 定 : 取 2m l 样
品依法测定 5 次 。 结果 : 阿魏酸为 : 34 . 3拜 g /
m l
,
R S D = 2
.
8% ( n = 5 ) ; 川芍嗓为 : 1 4 . 8滩 /
m l
,
R S D 一 3 . 3% ( n 一 5 ) 。 最小检测限 : 阿魏
酸为 4 . 3拌g , J .!芍嗦为 3 , 7陀 。 ( S / N = 2 ) 。
2 讨论
2
.
1 检测波长的选择 : 经紫外扫描测得 , 阿
魏酸 入~ 一 3 2 2m m 在 2 8 o m m 也有较大吸
收 。 盐酸川芍嗦 入~ 一 2 8 o m m , 因考虑样品中
阿魏酸的含量大于川芍嗦的含量 ,为同时检
出二者选用 2 8 0 m m 为检测波长 。
2
.
2 流动相的选择 : 阿魏酸为酸性化合物 ,
流动相中加入适量醋酸较为合适 ,而 川芍嗓
为碱性化合物 , 在酸性中会成盐 , 有拖尾现
象 ,但在酸性中对样品的分离较好 ,所以选用
表 回收率试验结果
实测
总量
拜g / m l
回收率
写
平均 回
收率%
实测
总量
拌g / m l
回收率
%
平均 回
收率 %
3 5
。
2 3 4
.
3 6 7
.
2 0 9 6
.
6 2 0
.
9 14 8 3 3
.
0 9 2
.
5 3
10 1
.
9 9 4
.
7 6
35
.
2 3 4
.
3 7 2
.
4 1 0 4
.
2 14 ` 8 2 4
.
6 9 6
.
9 8
酸性流动相 ,适当调节 甲醇和水的比例 ,可以
与样品中其它杂质很好分离 。
2
.
3 萃取方法的考虑 : 阿魏酸和川芍嗓均可
直接用乙酸乙酷 、二氯甲烷萃取 ,但蒸干溶剂
时因川苟嚓易升华而丢失 ,故在萃取液 中加
入盐酸使其成盐则损失较少 。 我们曾比较乙
酸乙醋及二氯 甲烷的萃取结果 ,发现二氯 甲
烷较好 。阿魏酸用二种溶剂萃取 ,结果基本一
致 , 川芍嗓用二氯甲烷萃取后酸化比乙酸乙
酷萃取结果约高 10 % 。 (下转第 2 49 页 )
2 14
论中药水蛙生用
黑龙江省鸡西市药 品检验所 ( 1 8 51 0 0)
黑龙江省鸡西市人民医院
宋宝鹤 赵慧敏
王志光
水蛙始载于 《神农本草经 》 , 列为下 品 。 《神农本
草经 》载 : 味咸 、 平 , 主逐恶血 、癖血 、 月闭 , 是经典的
破血逐疲类中药 。 因部分本草及当代药典皆言其有
毒 , 而水蛙腥气味又太重 , 易引起恶心难服 , 中医临
床中多用炮制品 。 但自 20 年代起张锡纯主张水蛙生
用 , 他在 《医学衷中参西录 》中指 出 : “ 此品纯系水之
精华生成 , 故最宜生用 , 甚忌 火炙… … 。 ” 当代也有许
多临床报道认为水蛙生 用力专效宏 , 制后效减 , 对大
量因癖血所致的疑难杂症 用药安 全 、疗效确切 , 已引
起医药界的关注 。
水蛙属高度特化的环 节动物 , 目前 已知 全世 界
共有 30 多种 , 我国分布有 62 种 〔 ,一中国药典 ( 1 990
年 版 ) 收 载 为水蛙科 动 物蚂蜻 W h i t m a n i a p ig r a
w h i tm
a n
、 水蛙 万 i r u J 尸 , , I P ` , , , i 〔 a w h i t m a n 或柳 叶
蚂横 W人i t m a n i a a o r a n “ za z u w h l t m a n 的干燥体 。
水蛙是否有毒 , 古今记载不一 。 《神农本草经 》未
言其有毒 。 《名医别录 》言 “ 有毒 。 ” 《本草经疏 》言 “ 大
毒 。 ’ ,《中药大辞典 》及 高等医学教材 《中药鉴定学 》 、
《中药炮制学 》和 中国药典 ( 1 990 年版 ) 皆言其 “ 有
毒 ” 。 而《神农本草经百种录 》 、 《医学衷中参西录 》及
当代许多临床报道皆言其无毒 , 动物实验也未证实
水蛙有毒 。 家兔和大白鼠的亚急性毒性实验证明 :无
心 、脑 、 肝 、 肾等实质性脏器的损害 , 红血球和体重也
无异常变化 〔2〕 。 将水蛙 (蚂蜡 )粉末在 80 ℃水浴中温
浸 2 次 以后 , 浓缩成 1 . 3 9 / m l 的浓度 , 2 4 h 内分别给
对照组及样品组小鼠灌胃 3 次 , 每次 0 . Zm l / 1 0 9 ,给
药剂量相当于药典规定成人量 39 d/ 的 2 0 倍 : 给药
后观察一周 , 小鼠活动 、粪便 、 毛色正常 , 无死亡 。 一
周内体重增长 4一 6 9 ,与对照组无差异 。 依 目前临床
水蛙成人量 3一 10 9 d/ 计 ,其安全倍数为 1 6 5 6~ 50
::
S h im a d a K
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4 3 9 6
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3 1 解景 田 , 等 . 中国药理学报 , 1 9 8 5 , 6 ( 3 ) : 1 6 9
3 2 解景 田 , 等 . 中国药理学报 , 1 9 8 5 , 6 ( 4 ) : 2 5 4
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3 6 韩永晶 ,等 . 中国药理学报 , 1 9 8 6 , 7 ( 4 ) : 3 1 4
37 韩永晶 ,等 . 药学学报 . 1 99 2 , 2 7 ( 4 ) : 2 5 2
38 孙关林 ,等 . 中西医结合杂志 , 1 9 5 4 , 4 ( 5 ) : 2 9 7
39 祝银海 ,等 . 中西医结合杂志 , 1 9 89 , 9 ( 1 ) : 29
4 0 许长 照 ,等 . 中 医杂志 , 1 98 1 , 2 2 ( s ) : 3 7
4 1 姚振环 ,等 . 上海免疫学杂志 , 1 9 8 7 , 7 ( 2 ) : 9 6
42 金其泉 ,等 . 蚌埠医学院学报 , 1 9 5 2 , 7 ( 3 ) : 1 5 7
4 3 王德 昌 ,等 . 药学通报 , 1 98 0 , 1 5 ( 9 ) : 4 2 6
44 周激文 ,等 . 云南医药 , 1 98 9 , 1 0 ( 5 ) : 3 0 5
( 1 9 9 5
一
0 6
一
0 1 收稿 1 9 9 5 一 1 1一 3 0 修 回 )
1678920345
(上接 第 2 1 4 页 )
参 考 文 献
1 孟 彦 , 等 . 中成药 , 1 9 9 5 , 1 7 ( 3 ) : 2 0
2 黄京玉 , 等 . 中成药 , 1 9 9 1 , 1 3 ( 8 ) : 1 2
3 陈汉平 , 等 . 中草药 , 1 9 8 5 , 1 9 ( 10 ) : 1 5
K u n i n o r i T
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J
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:
2 5 5
P u s s a y a n a w in V
, e t a l
.
J o f C h r o m a t o g r 1 9 8 7
, 3 9 1 : 2 4 3
蔡伟 , 等 . 药学学报 , 1 98 9 , 2 4 : 8 81
赵志春 ,等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 1 , 1 6 ( 1 2 ) : 72 9
( 1 9 9 5
一
0 8
一
1 4 收稿 )
《中草药 》 1 99 6 年第 27 卷第 4 期 · 2 4 9 ·