全 文 ：肉获蓉和盐生肉获蓉化学成分和药理作用的比较 △
中国医药研究开发中心 北京 ! 徐文牵 年声祥 沈连 忠
苑 可武 毛京 南
摘要 对肉从蓉和盐生肉从蓉的化学成分、 药理作用和毒性进行了比 较研究 。用 法 , 两 者
的苯丙贰类化合物种类相似 , 但各化合物含量有差别 , 氧化还原滴定法 , 两者邻二狂基化合物 含
量一致 。 动物试验证明 , 两者均有壮阳 、 通便作用 均对大 鼠胃底条和豚鼠回肠有收缩作用 盐
生肉从蓉的正丁醇部位有清除氧自由基的活性 , 小鼠口服急性毒性显示两者毒性均较小。
关锐润 肉蓝蓉 盐生肉从蓉 化学成分比较 药理作用比较
中药肉从蓉是多年生寄生草本植物列当科肉从蓉 ‘对 介
的干燥带鳞叶 的肉质茎 , 由于近年肉从蓉药材紧缺 , 商品药材市场较 棍 乱 , 全
国有肉从蓉属的 种植物入药使用 , 即肉从蓉、 管花肉从 蓉 助“
、 盐生 肉从蓉 和沙从蓉 玄。。 。 全国
普遍使用 的肉从蓉是内蒙古产的 , 从内蒙古阿拉善左旗医药公司购买的商品 肉从蓉 , 经鉴定
除肉从蓉外 , 另外棍有约 的盐生肉从蓉 。 盐生肉从蓉和 肉灰蓉化学成分和药理作用是否
相似 两个 品种能否混用 今对这两 个品种的化学成分 、 药理作用和毒性进行了比较研究 。
试验材料
样品 肉从蓉和盐生肉从蓉是从内蒙古阿拉善左旗医药公句购得分拣并鉴定 。
化学成分 比较的样品处理 取 药材 ,切薄片或粉碎成粗粉 , 用 乙醇加热提取 次。
醇提取液减压浓缩成 , 分成 份 。 份用 乙酸乙醋萃取 次 , 乙酸 乙醋层合并, 用水 反洗
一次后 , 加无水硫酸钠千燥 , 蒸去溶剂 , 残渣溶于甲醇 , 于 容量瓶中定容 , 进行
色谱分析。 另 份用正丁醇同上法萃取处理后溶于甲醇 , 于 容量瓶中定容 , 进行
色谱分析 。第 份留作邻二经基化合物含量测定 。
药理 、 毒理样品处理 乙醇提取的浸膏 。氧 自由基清除试验样品为浸膏溶于水后 ,
用正丁醇萃取 , 分成正丁醇部位和水溶部位。
仪器 色谱仪为 ! 公司 , 泵 检出仪 , 紫外检 出波长 , 色谱
柱为大连化物所 。 小 听 一 张力换能器 , 航天医学工程研究所 , 一
记录仪 , 四川仪表四厂 , 一 光度计 , 德国。
试剂 氢化考的松 , 北京第三制药厂 ,批号 。黄漂岭 , 黄嗓 岭氧 化 酶
, 细胞色素 购自 公司 , 其余试剂均为国产分析纯 。 配溶液用
水为 的高纯水 。
动物 所有 动物均从北京医科大学动物部购进 。
方法与结果
化学成分对比
苯丙贰类化合物的 !色谱分析 流动相 一甲醇 , 一 醋酸 。
申 , 一 !
,
△本课题获国家自然科学基金资助
《中芍药 》 年第 六第 刘
“ 通 娜度 —‘ —” — , 写— !—” 流速 灵敏度 纸速
测定结果两个品种 肉从蓉 , 所含苯丙贰类化合物基相相似 , 均检出 种 已知的 苯丙贰 ,
但各种贰的含量有差异 ,盐生肉从蓉的苯丙贰总含量相对较高 , 阵中肉从蓉贰含量较高 , 海胆
贰含量很低 而肉从蓉中麦角幽贰含量 最高 , 海胆贰次之 , 肉从蓉贰 的含量很低 。
邻经基化合物的含量测定 肉从蓉中含有大量甘露醇 、半乳糖醇等邻二经暮北合物 。
实验中 , 我们直接从肉从蓉粗提取物中分得的甘露醇达生药量 的 纬 以上 。因此 , 邻二经墓化
合物作为指标化合物测定其含量 , 对判断肉从蓉质量有一定的参考意义 。
方法 精密吸取得 提取液 , 蒸千 , 加乙醇 , 加热回流 , 放冷 , 滤至
容量瓶中, 用 乙醇定容 , 按 版药典二部滴定甘露醇的氧化还原测定方法测定 , 结果肉从蓉
和盐生肉从蓉中邻二经基化合物的含量 一 致 , 以甘露醇计 均为 写 。
药理作用 比较 , 寸刁、鼠的通便作用 的比较 用 写苯酚红溶液将药物配制成所、浓度 。 取 , 、重〕。土
昆明种小鼠 只 , 雌雄各半 , 按体重、 性别随机分成 组 。 禁食不禁水 , 对照组灌胃 苯
酚红 体重 , 其它组分别灌胃肉从蓉 、 , 盐生 肉从蓉
、 , 给药后立 即计时 , 各组记录每只小鼠从给完药到排出第一粒红色粪便的时间 ,
并观察粪便的硬度 , 性状等 表 。 动物均很快有红色的尿液排出, 给药组动物排 出 红 色
粪便的时间较短 , 粪便表面有油光、 较软 、 成形。 肉从蓉和盐生肉从蓉 剂量组 , 排便
时间均比对照组缩短 , 但无显著性差异尸 。 , ! ∀ # ∃ 剂量组 , 排便时间同对照组比
较均有非常显著差异 ( 尸< 0 .0 1 ) , 显示肉从蓉和盐生肉从蓉均有明显 的通便作用 , 且 盐生
肉从蓉的通便作用强于肉从蓉 。
表1 肉众蓉和盐生肉效巷对小鼠排便
时间的比较
组别 动物数(只) 剂量 (g /k g 、 排便时间 (m 她 )
15 1。 5 0 士 3 0 。 6 8
1 2 8
。
7 5 士 3 6 。 4 7
9 3
。
6 7 士 2 6 。 9 2 .
1 2 6
。
9 2 士 3 7 。 6 5
7 9
.
5 8 士3 3 。 6 8 *
八Un八IJ日
一万,白O口山众甘N3.1J
2
.
2
.
2 对氢化考的松引起的小鼠“ ’肾阳虚”
作用的比较 : 药物均用 生 理 盐 水 配 制 :
体重25 ~ 309雄性昆明种小 鼠60 只 , 按体 重
随机分成6组: 空白对照组和模型组灌 胃N S
o .4 0m l/ 20 g体重 , 其它4组分 别 灌胃肉从
蓉 1.2 、 3 . 5 9 / k g , 盐生肉从蓉一2 、 3 . 5 9 / k g
除空 白对 照组外 , 其它各组给药 同时均肌
注氢化考的松50 m g/k g · d , 共给药gd 。末次
给药 lh 后将 动 物放入 一 5一 一 7℃冰箱中 ,
对照
肉从蓉
肉从蓉
盐生 肉从蓉
盐生 肉从蓉
}2
12
12
12
12
同对照组比较 ’尸< c . o l
动物死亡达半数时取出 , 比较各组死亡率 , 然后将全部动物的双侧肾上腺 , 翠丸精确称重 , 比
较各组动物所称脏器的平均重量 (表2 ) 。 氢化考的松付 后动物就有明显的体重下僻 , 松毛 ,
形寒尾冷等 “肾阳虚” 症状 , g d 口J一 肾上腺重量明显减轻 , 口服肉从蓉和盐生肉从蓉对考的松
引起的小 鼠 “ ’肾阳虚” 症状: 体重 和肾上腺减轻 , 耐寒力降低有明显刘抗作用 , 说明它们均
有壮阳作用 , 作用效果盐生 肉从蓉强 于肉从蓉 。
2
.
2
.
3 对大鼠胃底条的作用比较: 药物用 K reb 产“液 配 制 成 应 用 浓 度 。 体重20 一 2509
W istar大鼠, 雌雄兼用 , 动物头部击毙 , 剖腹取 出胃 , 用 K r eb 尹“液冲洗干净后将 胃底部 剪
成2 x 1.om m 肌条 , 忿挂于3 0:。 1 K r e b ‘ s 营养液的浴槽中, 浴槽温度 32士 0 .5℃ , 通 气 95 %
0 :+ 5% C O :, 加负荷19平衡lh后 开始实验 。
, 1 4 4
表2 肉欢蓉和盐生肉欢蓉的壮阳作用比较
组 别 动物数
( 只 )
剂量
(g /k g )
体重变化(g ) 耐 寒 器官重量
gd 存 活数 存活% 辜丸(g ) 肾上腺(m g )
合吞八O”八CUnn,内nx,山八O勺d匕对照组
模型组
肉从蓉
肉从蓉
盐生肉从蓉
盐生肉从蓉
10
10
l0
10
10
10
N S
N S
起始体重
26 。 9 士1 。 4
2 6
。
7 士1 .3
2 7 。 0 士 1 。 3
Z fi
。
4 士 0 。 8
2 0
。
3 士 1 。 2
2 6
。
3 士 1 。 1
3
.
7 士 1 . 3二 5 .3 士1 . 7二
0 。 1 士1 。 2 0 。 l 士0 .9
0 。 4 士1 。 5 一 0 。 1 士 1 。 7
0
。
3 士 0 。 7 0 . 5 士0 。 9
1
.
5 士 0 .7 ’. 1 . 1 士 0 . 8 申
0
.
9 士 0 .9 1 . 1 . 0 . 7 .
0 。 1 6 4 士 0 。 0 4 4
0
。
1 6 1 士 0 。 0 2 4
0
。
1 4 5 士 0 。 0 3 0
0
。
1 3 2 士 0 。 0 2 3
0
。
1 5 3 士0 。 0 1 6
0
。
1 5 3 士 0 。 0 3 1
6
.
6 8 士 1 .8 6 宁 .
4
。
5 6 士1 .1 6
5 。 2 0 士 1二8 4
5 .9 3 士 1 .2 5 ,
5
。
2 0 士0 。 7 6
5
.
9 9 士 0 。 9 9 一 叮
t 检验 , 同模型组比较 , 中尸< 0 .05 , . 今尸< 0.01
X . 检验 , 同模型组比较 , 。尸< 。.05
先加入10一 Z m ol / L A c h 3 0 时 , 记录最大收缩强度 , 冲洗达平衡后 , 正交设 计 加 药 顺
序、 累积给药法 加药记录肉从蓉和盐生肉从蓉的累积反应曲线 。 数据处理以 10- “m ol / L ( 终
浓度 ) A ch 引起的肌条收缩强度为10 % , 分别计算不同浓度 的肉从蓉和盐生肉从蓉引 起 的
肌条收缩相对强度 , 并用 Bl iss法计算半数效应浓度E C 。。。
加入 106m ol /L 阿托品3娘 1, 作用 s m in 后再重新加入肉从蓉或盐生肉从蓉描 记 肌 条 反
应 。 结果 : 肉从蓉和盐生肉从蓉均能引起大鼠为胃底条收缩 , 且能被10一 。m ol / L ( 终浓度 )
阿托 品所抑制 , 肉从蓉作用于大鼠胃底条的E C 6。为: 6.50 士 2.07 x 10 一 ‘ ( g / m l , n = 8 ) , 盐
生 肉从蓉作用于大鼠胃底条的E C 。。为: 4 .10 士 1.51 x lo- , ( g / m l , n 二 8 ) 盐生肉从蓉 的半
数有效浓变小于肉灰蓉的半数有效浓度 , 说明盐生肉灰蓉对大鼠胃底条的作用强于肉从蓉 。
2
.
2
.
4 对豚 鼠回肠条的作用比较: 药物用T y ro d e ‘ s液配制戍应用浓度。 体重 20 0 ~ 25 09豚
鼠 , 雌雄兼用 。 头部击毙动物 , 迅速取回肠小段 , 冰浴中用 T y ro d e ‘ s 液冲洗干净 , 剪成 Ic m
左右肠段 , 悬挂于 3olnl T y ro d e ‘ s 的营养液浴槽 巾, 浴槽温度 37 土 0 . 5℃ , 并通气95 % O :+
5% C O :, 加 负荷1g 平衡 lh后开始实验 。 给药及数据处理同大鼠胃底条 。 结果: 肉从蓉和盐生
肉灰蓉均指引起豚鼠回肠条收缩 , 且能被10一 ’m ol / L ( 终浓度 ) 阿托品所抑制 ; 肉从蓉 作 用
于豚 鼠回肠条的半数有效 浓 度 E C S。为: 1 .47 士 。. 65 又 1 0 一“ ( g / m l , n = 8 ) , 盐生肉从蓉 作
用于豚鼠回肠条的半数有效浓度E C SD 为 : 1.54 士 o . 6 x l o 一 2 ( g / m l , n = 8 ) , 说明肉灰
蓉对豚 鼠回肠条的作用强于盐生肉从蓉 。
2
.
2
.
5 对氧自由基清除作用的比较(细胞色素C 法): 在反应池中加入H x 、 E D T A 一2 N a 、
磷酸盐缓冲液(。. O 5 m ol / L 磷酸钾缓冲液pH 7.s) 、 药物(对照以等体积缓冲液代替药物 ) ,
C y t
o
C 各物质反应浓度 为H X : 2.0 义 l。一 ‘m o l / L ; E n T A 一 Z N a : 1 . o x l o 一‘ m o l · d m 一 3 ,
C y t
o
C
: 1
.
0 、 1 0 一 ”m o l · d m 一 8 : 药物浓度下作 , 最后以。.。。2 5 U / m l的X .0 .启动反应在55on m
处 跟 踪 监 测 , 以前两分钟的反 应 速 度V 。的变化来计算药物对氧自由基 的抑制 能 力 , 以
In h % 表示药 物的抑制率 , I h 可 111下式给 {}} : In h % = (V 。对照 一 V 。加药)/V 。对照 x 100%
结果 (表3 ) 丧明 , 盐生肉从蓉的 !}三丁醉 适取部分有较明显的氧自由基清除作用 。
2
.
3 口服急性毒性比较: 肉灰蓉和 盐 , 匕肉从僚经 口 服给药 , 均无法 测 出 L D S。 。 l d 2 次 给
药 , 测得的肉从蓉和盐生肉从蓉的小鼠!:乏大 耐受量均为90.09 / k g ; 表明两者毒性均 较 低 ,
口服 比较安全 。
弓 讨论
雀中草药 》1 9 9 5年第26 卷第 3 期 1 4 5
肉从蓉和盐生肉从蓉所含邻二经基化合
物含量一致 , 所含苯丙贰类化合物种类相似 ,
但各种化合物含量有差别 , 前者麦角幽贰含
量较高 , 海胆贰次之 , 肉从蓉E 含量很 低 ,
后者则以肉从蓉贰E 为主 , 海胆贰含量很低 ,
苯丙贰总含量则 以后者较高 。
实验证明 , 两个品种肉从蓉粗提取物均
有药典所载之壮阳 , 通便作用 , 还能引起大
鼠胃底条和豚鼠回肠的收缩 , 并能被阿托 品
所抑制 , 推测其有拟胆碱活性并可能与其通
便作用有关。 盐生肉从蓉的正丁醇提取部位
还有氧自由基清除活性 。
两品种肉从蓉灌胃的最大耐受 墩均为90 .
计 ) 的450倍 。
表3 肉欢蓉和盐生肉欢蓉对氧自由基
的清除作用
V o对 照 Y o 加药 300卜l ) 1 n h %
肉从蓉
粗提物
正丁醇部分
水溶部分
盐生肉从蓉
粗提物
正丁醉邝分
水溶部分
4。 1 5 x 1 0 一 ‘
4 。 1 5 x 1 0 “ .
4
。
1 5 x 1 0
一 ‘
3 . 8 6 又 1 0 4
4 。 0 1 x 1 0 一 4
5
.
6 5 x 1 0
一 ‘
4 。 0 3 x 1 0
一 ‘
遭。 5 8 x 1 0 一 4
4
.
4 3 又 1 0 一 毛
4 。 8 9 X 1 0
-
2
。
0 2 x 1 0
‘
4
。
0 5 x 1 0
一药物始浓度0 .019 / m l) ( + 300协l) 药物终浓度
0.0 039 / m l
0 9 / k g , 此剂量相当于人 口服量 (9 .09 / 50k g · d
盐生肉从蓉与肉灰蓉比较 , 不但所含的苯丙贰类等化学成分相似 , 还有壮阳 、 通便等药
理作用 , 且在某种程度上优于肉从蓉 , 因叱 , 钦生肉从蓉可 以作肉从蓉使用或两者混 用 。
致谢: 北京 医科大学药学院金延明 同志帮助分拣祥品和样品 鉴 定 , 沈传勇同志 完成氧自
由基清除作用药理实验 , 本所香云 、 邓健云 同志参与部分工作 。
( 1 9 9 4
一0 4 一0 2收稿)
( 上接第150页 )
越的自然环境条件 , 加强药用真菌的驯化 、 栽培 , 扩大药源 以及新药和保健品的研究 , 前景
可观 。
参 考 文 献
戴芳澜 。 中国真菌总汇 。 北京: 科学技术 出版社 ,
1 9 7 9
。
2 3 7
、
3 6 9
邓淑群. 中国的真菌 . 北京: 科学出版社 , 1 9 6 3 .
2 5 6
魏景超 。 真菌鉴定手册 . 上海: 上海科学技术出
版社 , 1 9 7 9 。 1 0 1
刘 波 。 中国药用真菌. 第三版 . 太原 : 山西人
民出版社 , 1 9 8 4 . 1 、 2 2 2
中国科学院微生物研究所 。 常见与常用真菌 . 北
京: 科学 出版社 , 19 78 . 7
湖南中医药研究所编 . 湖南药物志、 第二卷 . 长
沙: 湖南人民出版社 , 一, 7 , . 8 6 。 3 5 4
湖南中医药研究所编 . 湖南药物志 。 第三卷 。 长
沙: 湖南人民 出版社 , 1 9 7 9 。 4 2 2 、 6 4 8
全国中草药汇编编写组编. 全 国中草药汇编 . 下
册 . 北京: 人民卫生 出版社 , 1 , 75 . 71
(
2 9 9 4
一0 4 一 2 5 收稿 )
《中药现代研究与临床应用 》I 今年8月出版
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究院中药研究所阴健联系 ( 邮编100700 )