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Analysis on mutagenic effects of EMS on three maize inbred lines

EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析



全 文 :  Guihaia  Aug. 2016ꎬ 36(8):906-914
http: / / journal.gxzw.gxib.cn
http: / / www.guihaia-journal.com
DOI: 10.11931 / guihaia.gxzw201503037
石海春ꎬ 陈超杰ꎬ 夏伟ꎬ 等. EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析[J]. 广西植物ꎬ 2016ꎬ 36(8):906-914
SHI HCꎬ CHEN CJꎬ XIA Wꎬ et al. Analysis on mutagenic effects of EMS on three maize inbred lines[J]. Guihaiaꎬ 2016ꎬ 36(8):906-914
EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析
石海春1ꎬ 陈超杰1ꎬ3ꎬ 夏  伟2ꎬ 余学杰1ꎬ 柯永培1ꎬ2∗
( 1. 四川农业大学 农学院ꎬ 成都 611130ꎻ 2. 四川农业大学 正红生物技术有限责任公司ꎬ
成都 610213ꎻ 3. 北京百迈客生物科技有限公司ꎬ 北京 101399 )
摘  要: EMS诱变玉米花粉是玉米化学诱变的主要技术ꎮ 该研究以生产上 3 个常用的玉米自交系 K305、21 ̄
ES、R08为材料ꎬ对其花粉用不同浓度的 EMS诱变处理ꎬ探讨其 EMS诱变的最佳浓度范围ꎬ明确其诱变效应ꎮ
结果表明:3个自交系经过不同浓度的 EMS诱变后ꎬ其结实率随着浓度的增大表现出减小的趋势ꎬ从其半致死
剂量来看ꎬEMS诱变花粉的适宜浓度范围自交系 K305和 R08均为 0.67~1.0 mL􀅰L ̄1ꎬ21 ̄ES在 1.67 mL􀅰L ̄1附
近ꎮ M1代不同性状其变异幅度和变异系数与对照相比主要表现出增大的趋势ꎬ其不同性状的生物学效应在
材料间表现不一致ꎬ表明性状在不同材料间对 EMS的敏感性不一样ꎬ生育期表现为 21 ̄ES>K305>R08ꎻ主要株
型性状表现为 R08>21 ̄ES>K305ꎻ主要雄穗性状 K305和 21 ̄ES比 R08敏感ꎻ主要果穗性状表现为 21 ̄ES>K305>
R08ꎮ M2代整体表现为变异谱扩大ꎬ其株高、穗位高和叶面积以及主要果穗性状的变异表现复杂ꎬ主要雄穗性
状中除 K305的 M2株系雄穗分枝数呈双向变异外ꎬ其余 M2株系整体偏向于雄穗变短ꎬ雄穗分枝数减小ꎮ 该研
究结果为后续研究和应用打下了基础ꎮ
关键词: 玉米ꎬ 自交系ꎬ EMSꎬ 诱变效应
中图分类号: Q945.49ꎬ S335.3    文献标识码: A    文章编号: 1000 ̄3142(2016)08 ̄0906 ̄09
Analysis on mutagenic effects of EMS
on three maize inbred lines
SHI Hai ̄Chun1ꎬ CHEN Chao ̄Jie1ꎬ3ꎬ XIA Wei2ꎬ YU Xue ̄Jie1ꎬ KE Yong ̄Pei1ꎬ2∗
( 1. College of Agricultureꎬ Sichuan Agriculture Universtiyꎬ Chengdu 611130ꎬ Chinaꎻ 2. Sichuan Nongda Zhenghong
Biol. Co.ꎬ Ltdꎬ Chengdu 610213ꎬ Chinaꎻ 3. Biomarker Technologies Co.ꎬ Ltdꎬ Beijing 101399ꎬ China )
Abstract: For nowꎬ as a main chemical technology EMS is applied to create the mutagenesis in higher plant. In this
studyꎬ we determined the optimum concentration of EMS for creating the mutations using three inbred lines of maize
K305ꎬ R08ꎬ 21 ̄ES as the materialsꎬ by treating the maize pollens with the different concentrations of EMS. The results
showed that the seed setting rate decreased with the increasing of EMS concentrationꎬ for the half lethal doseꎬ the opti ̄
mal concentrations of EMS for K305 and R08 were 0.67-1.0 mL􀅰L ̄1ꎬ for 21 ̄ES was 1.67 mL􀅰L ̄1 respectively. The
analysis of biological effects in Ml generation showed that the variation rangs and variation coefficients of the different
traits were improved ꎬ and the biological effects of different traits had different performances in the three inbred linesꎬ
which indicated that the different traits of the different materials had variable sensitivities in the different concentrations
收稿日期: 2015 ̄03 ̄26    修回日期: 2015 ̄05 ̄10
基金项目: 四川省战略性新兴产业发展专项(SC2013510122023)ꎻ四川省科技支撑计划项目(2011FZ0119)ꎻ四川省“十二五”农作物育种攻关项
目(2011 ̄3 ̄11)ꎻ四川省教育厅自筹项目(12ZA271)[Supported by the Special Development Fund for the Strategic Emerging Industries of Sichuan Prov ̄
ince (SC2013510122023)ꎻ Sichuan Key Technology R & D Program (2011FZ0119)ꎻ “ the Twelfth Five ̄Year” Crop Breeding Research Projects of Si ̄
chuan Province(2011 ̄3 ̄11)ꎻ Self ̄financing Project of Sichuan Education Office(12ZA271)]ꎮ
作者简介: 石海春(1974 ̄)ꎬ男ꎬ四川宣汉人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事玉米遗传育种研究ꎬ(E ̄mail)haichun169@ 163.comꎮ
∗通讯作者: 柯永培ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要从事玉米遗传育种研究ꎬ(E ̄mail)keyp169@ 163.comꎮ
of EMSꎬ sensitivity of the growth period was 21 ̄ES>K305>R08ꎬ sensitivity of the plant type traits was R08>21 ̄ES>
K305ꎻ sensitivity of tassel traits was K305>21 ̄ES>R08ꎬ sensitivity of the main ear traits was 21 ̄ES>K305>R08. The
analysis of mutagenic effects in M2 generation showed that general mutation spectrum was expandedꎬ variation of plant
heightꎬ ear heightꎬ leaf area and the main ear characters performed widely. The main tassel traits were two ̄way variation
except for branch number in K305 M2 strains. This study provides the foundation for the further research and
application.
Key words: maizeꎬ inbred linesꎬ EMSꎬ mutagenic effects
    不断加强对玉米种质资源的改良、扩增和创新ꎬ
可以满足对玉米杂交种产量、品质和抗逆性不断提
高的要求ꎬ实现农业生产的可持续发展ꎮ 诱变技术
创造的突变率是自然突变的 100 ~ 1 000 倍ꎬ变异范
围广ꎬ性状稳定快ꎬ是种质资源创新的重要途径之
一ꎬ化学诱变育种是扩大种质基础的一种快速、高效
的育种方法 (周柱华和王增贵ꎬ1997ꎬ温贤芳等ꎬ
2004)ꎬ其中 EMS ̄石蜡油诱变技术简便快捷ꎬ被公认
为是最有效的化学诱变技术之一(Bird & Neufferꎬ
1987ꎬ刘翔等ꎬ2014)ꎮ 我国化学诱变育种经几十年
的发展取得了令世人瞩目的成就ꎬ诱变育成的品种
数量和种植面积居世界首位ꎬ大量应用的作物有水
稻(王彩芬等ꎬ2011ꎻ罗文龙等ꎬ2014)、小麦(薛芳
等ꎬ2010ꎻ张纪元等ꎬ2014)、玉米(刘晓丽等ꎬ2006ꎻ
郑向阳等ꎬ2013)、油菜(薛元超等ꎬ2012)、大豆(姜
振峰等ꎬ2006ꎻ吴秀红等ꎬ2012)和番茄(杨建华等ꎬ
2014)等ꎬ创造了显著的社会经济效益ꎮ
本研究以西南区 3个常用的优良玉米自交系为
材料ꎬ用不同浓度的 EMS 诱变处理其花粉ꎬ通过对
M0结实率来探讨每个材料适宜的 EMS 诱变浓度范
围ꎻ综合分析 M1代诱变系的生物学效应和 M2代的
诱变效应ꎬ期望选出遗传差异大、综合性状优良的诱
变系ꎬ以丰富可供玉米育种利用的种质资源ꎬ为后续
研究和应用打下基础ꎮ
1  材料与方法
1.1 供试材料
材料为四川农大正红生物技术有限责任公司提
供的玉米自交系 K305、R08 和 21 ̄ESꎮ 诱变剂为美
国西格玛奥德里奇公司生产的甲基磺酸乙酯
(EMS)ꎬ载体剂为成都市科龙化工试剂厂生产液体
石蜡ꎮ
1.2 试验方法
1.2.1 自交系的处理及操作   处理液的制备参照
Neuffer(1987)的方法进行ꎮ 在诱变当天上午ꎬ配成
2 × 10 ̄3、1.67 × 10 ̄3、1.0 × 10 ̄3、0.67 × 10 ̄3、0.50 ×
10 ̄3 mL􀅰L ̄1五种浓度的 EMS ̄石蜡油溶液各 10 mLꎬ
分别倒入小玻璃瓶中备用ꎬ纯石蜡油为对照(CK)ꎮ
田间诱变处理ꎬ选择生育期相对一致的优良单株套
雌穗ꎬ待花丝抽出 1 ~ 2 d 后ꎬ用酒精消毒后的剪刀
在下午 6:00左右对花丝进行整理ꎬ让花丝相对整齐
一致ꎻ第二天中午 12:00-13:00ꎬ收集 36 h前套袋的
新鲜花粉ꎬ用筛网除掉花药以后倒入各种 EMS 处理
浓度小瓶中(每瓶倒 1 g 左右的花粉)ꎬ室温黑暗条
件下摇晃混匀ꎬ45 min后ꎬ用毛笔均匀涂在花丝上ꎬ套
袋标记ꎮ
1.2.2 诱变后代的处理   Moꎬ成熟收获时统计每个
浓度处理的结实率ꎮ M1ꎬ2012 年冬季将 M1种子种
植在海南陵水ꎬ行宽 3.5 mꎬ行距 0.8 mꎬ每行 7穴ꎬ每
穴 3粒ꎬ每个浓度处理各种植 6行ꎬ另种 2行仅用石
蜡处理花粉所结的种子作为对照ꎬ分单株挂牌标记ꎬ
全部单株自交ꎬ田间单株调查和单株收获ꎬ观察记录
果穗变异和室内考种ꎮ M2ꎬ每个处理综合选择 5 个
农艺性状良好、符合育种需要的 M2代株系进行田间
种植ꎬ同时种植 M1代有特殊生物效应变化的株系ꎬ
M2株系种植在四川双流ꎬ同时每个株系选择优良单
株套袋自交ꎬ获得 M3种子ꎬ供后续研究和应用ꎮ
1.3 指标测定及数据处理
对 M1代和 M2代ꎬ田间考察性状主要有散粉期、
吐丝期、株高、穗位高、叶长、叶宽、一级雄穗长、一级
雄穗分枝数ꎻ室内考查指标主要有穗长、穗粗、穗行
数、百粒重ꎮ 与对照进行对比分析ꎬ比较各性状的变
异幅度、变异系数和平均值差异ꎬ以上数据在 SPSS
19.0软件上进行分析ꎮ
2  结果与分析
2.1 M0代的结实率分析
3个玉米自交系经不同浓度的 EMS处理后ꎬ 其
7098期                  石海春等: EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析
表 1  EMS处理对玉米自交系M0代结实率的影响
Table 1  Effects of EMS on the M0 seed setting
rate of maize inbred lines
自交系
Inbred line
处理浓度
Treated
concentration
(mL􀅰L ̄1)
处理株数
Treated
plant
number
结实粒数
Seed
number
结实率
Seed setting
rate
(%)
K305 0 (CK) 7 980 —
0.5 7 828 84.49
0.67 7 740 75.51
1.0 7 449 45.82
1.67 7 329 33.57
2.0 7 318 32.45
R08 0 (CK) 4 584 —
0.5 4 460 78.77
0.67 4 370 63.36
1.0 4 277 47.43
1.67 4 202 34.59
2.0 4 42 7.19
21 ̄ES 0 (CK) 7 1045 —
0.5 7 810 77.51
0.67 7 645 61.72
1.0 7 590 56.46
1.67 7 537 51.39
2.0 7 348 33.30
结实率不同ꎬ但均表现出随浓度的增加呈下降的趋
势(表 1)ꎮ 表 1 显示ꎬ结实率达 50%(即半致死剂
量)的 EMS 浓度范围 K305 和 R08 在 0. 67 ~ 1. 0
mL􀅰L ̄1之间ꎬ21 ̄ES在 1.67 mL􀅰L ̄1附近ꎬ可分别视
为对 3 个自交系进行花粉 EMS 诱变的适宜诱变
浓度ꎮ
2.2 M1代的生物学效应分析
2.2.1 吐丝期、散粉期  3个自交系 M1代株系的散粉
期和吐丝期均有延长的趋势ꎬ且随着 EMS 浓度的增
加趋势更明显(表 2)ꎮ 表 2显示ꎬ与相应对照相比ꎬ
R08诱变系吐丝、散粉期差异不显著ꎬK305 诱变系
吐丝、散粉期在低浓度下差异不显著ꎬ在≥1. 67
mL􀅰L ̄1浓度时差异显著ꎻ21 ̄ES诱变系散粉期在≥
0.5 mL􀅰L ̄1浓度时ꎬ吐丝期在≥ 0.67 mL􀅰L ̄1浓度
时差异显著ꎬ说明不同材料的吐丝、散粉期对 EMS
的敏感性不同ꎬ其敏感性表现为 21 ̄ES> K305>R08ꎮ
此外ꎬ除 R08 经 0.5 mL􀅰L ̄1诱变后的散粉期和 21 ̄
ES 经 0.67 mL􀅰L ̄1诱变后的吐丝期变异系数略低
于对照外ꎬ其他的变异幅度和变异系数都比相应对
照大ꎬ且随浓度的增加表现出加大的趋势ꎮ
2.2.2 株高、穗位高和叶面积  从表 3 可以看出ꎬ除
K305经 0.5 mL􀅰L ̄1诱变后的株高、穗位高、叶面积
比对照略有增大外ꎬ其他浓度下的诱变系均比对照
小ꎬ且随着 EMS浓度的增加减小趋势明显ꎬ其中株
高、穗位高在≥2.0 mL􀅰L ̄1浓度时差异显著ꎻR08 诱
变系的株高、穗位高、叶面积均比对照小ꎬ且随着
EMS浓度的增加减小趋势明显ꎬ其中株高、叶面积
在≥1.0 mL􀅰L ̄1浓度时ꎬ穗位高在≥0.5 mL􀅰L ̄1浓
度时差异显著ꎻ21 ̄ES 诱变系的株高、穗位高、叶面
积均比对照小ꎬ且随着 EMS浓度的增加减小趋势明
显ꎬ其中株高在≥1.0 mL􀅰L ̄1浓度时ꎬ穗位高、叶面
积在≥1.67 mL􀅰L ̄1浓度时差异显著ꎮ 说明不同材
料的株高、穗位高和叶面积对 EMS 的敏感性不同ꎬ
其敏感性表现为 R08>21 ̄ES> K305ꎮ 此外ꎬ3 份材
料 M1代株系的变异幅度和变异系数都比相应对照
大ꎬ且随浓度的增加表现出加大的趋势ꎮ
2.2.3 主要雄穗性状  从表 4 可以看出ꎬ3 份材料除
R08 经 1.67 mL􀅰L ̄1诱变后的雄穗长略大于对照
外ꎬ其他的主要雄穗性状都比对照小ꎬ且随着 EMS
浓度的增加趋势更明显ꎮ 与相应对照相比ꎬK305 诱
变系一级雄穗分枝数差异不显著ꎬ雄穗长在低浓度
下差异不显著ꎬ在≥1.67 mL􀅰L ̄1浓度时显著下降ꎻ
R08诱变系雄穗长差异不显著ꎬ一级雄穗分枝数在
低浓度下差异不显著ꎬ在≥2.0 mL􀅰L ̄1浓度时显著
下降ꎻ21 ̄ES诱变系雄穗长差异不显著ꎬ一级雄穗分
枝数在低浓度下差异不显著ꎬ在≥1.67 mL􀅰L ̄1浓度
时显著下降ꎮ 说明不同材料的主要雄穗性状对
EMS的敏感性和变异方向不同ꎬK305 和 21 ̄ES 比
R08敏感ꎬ且 K305 变异偏向于雄穗长变短ꎬR08 和
21 ̄ES偏向于分枝数减少ꎮ 此外ꎬ3份材料 M1代株系
的变异幅度和变异系数都比对照大ꎬ且随浓度增加有
增大的趋势ꎮ
2.2.4 主要果穗性状   由表 5 可知ꎬ与相应对照相
比ꎬK305 诱变系的主要果穗性状变小ꎬ其穗长、穗
行、百粒重差异不显著ꎬ穗粗在低浓度下差异不显
著ꎬ在≥1.0 mL􀅰L ̄1浓度时差异显著ꎻR08 诱变系主
要果穗性状变化比较复杂ꎬ但差异不显著ꎻ21 ̄ES 诱
变系的主要果穗性状都变小ꎬ其穗长、穗行差异不显
著ꎬ穗粗在≥1.0 mL􀅰L ̄1浓度时、百粒重在≥1.67
mL􀅰L ̄1浓度时差异显著ꎬ说明不同材料的主要果穗
性状对 EMS的敏感性不同ꎬ 其敏感性表现为 21 ̄ES>
809 广  西  植  物                                  36卷
表 2  EMS处理对玉米自交系M1吐丝、散粉期的影响
Table 2  Effects of EMS on the M1 pollening and silking of maize inbred lines
自交系
Inbred line
处理浓度
Treatment
concentration
(mL􀅰L ̄1)
散粉期
Days from sowing to pollening
ME (d) RV (d) CV (%)
吐丝期
Days from sowing to silking
ME (d) RV (d) CV (%)
K305 0 (CK) 51.5 47~56 5.00 50.3 46~57 6.19
0.5 52.4 47~61 5.09 51.5 47~62 6.46
0.67 52.7 47~62 6.99 52.0 46~64 9.61
1.0 53.2 49~62 5.61 52.6 47~63 7.59
1.67 54.1∗ 47~62 6.15 54.9∗ 46~63 8.23
2.0 54.8∗ 49~69 7.11 55.7∗ 47~75 10.40
R08 0(CK) 51.8 49~58 4.87 51.0 48~57 4.74
0.5 53.6 49~60 4.55 53.4 48~59 5.74
0.67 52.1 47~62 5.95 52.1 47~63 7.81
1.0 53.3 49~61 5.69 53.1 47~61 7.03
1.67 53.1 49~59 5.44 53.1 48~61 6.00
2.0 52.6 47~62 6.68 53.5 47~64 8.62
21 ̄ES 0(CK) 55.0 51~59 4.34 57.5 54~64 5.53
0.5 57.0∗ 51~65 5.24 59.2 49~71 7.40
0.67 58.4∗ 53~63 4.35 60.0∗ 53~70 5.44
1.0 58.7∗ 53~66 4.97 60.7∗ 54~72 6.20
1.67 59.1∗ 54~67 4.83 60.6∗ 54~72 6.60
2.0 59.2∗ 53~66 5.15 61.5∗ 53~71 6.81
  注: ME. 平均值ꎻ RV. 变异幅度ꎻ CV. 变异系数ꎮ 下同ꎮ
  Note: ME. Meanꎻ RV. Range of Variationꎻ CV. Coefficient of variation. The same below.
K305>R08ꎮ 此外ꎬ3份材料M1代株系主要果穗性状
的变异幅度和变异系数除个别小于对照外ꎬ其它的
都大于相应对照ꎮ
2.3 M2株系主要性状变异分析
2.3.1 株高、穗位高和叶面积   从平均值(表 6)来
看ꎬ除来源于 K305 的穗位高和来源于 R08 的叶面
积与其对照差异不显著外ꎬ其余各项均显著小于相
应对照ꎮ 另从诱变系中株高、穗位高、叶面积平均值
与对照的差异达到正、负向显著的株系数比例来看ꎬ
来源于 K305的 M2株系中分别为 12%和 56%、16%
和 40%、0%和 68%ꎻ来源于 R08的M2株系中分别为
4%和 68%、8%和 64%、20%和 12%ꎻ来源于 21 ̄ES
的 M2株系中分别为 0%和 60%、8%和 60%、0%和
96%ꎬ表明其 M2株系的株高、穗位高和叶面积变异
表现复杂ꎬ如自交系 K305 的 M2株系其株高和穗位
高主要表现为双向变异ꎬ而其叶面积却主要表现为
降低ꎻ而自交系 R08的 M2株系 3个性状均表现出双
向变异ꎬ21 ̄ES 的 M2株系穗位高表现为双向变异ꎬ
而其株高和叶面积均表现出降低的趋势ꎮ
2.3.2 主要雄穗性状  从平均值(表 7)来看ꎬ除来源
于 K305的一级雄穗分枝数和 R08 的雄穗长与对照
相比差异不显著外ꎬ其余均显著减小ꎮ 另外ꎬ从 M2
株系中雄穗长和一级雄穗分枝数平均值与对照的差
异达到正、负向显著的株系数比例来看ꎬ来源于
K305的 M2株系中分别为 0%和 48%、28%和 28%ꎻ
来源于 R08 的 M2株系中分别为 4%和 8%、0%和
84%ꎻ来源于 21 ̄ES的 M2株系中分别为 0%和 72%、
0%和 64%ꎬ表明除 K305M2株系的一级雄穗分枝数
呈双向变异外ꎬ其余 M2株系整体偏向于雄穗变短ꎬ
雄穗分枝数减小ꎬ标准差变大ꎬ变异谱扩大ꎮ
2.3.3 主要果穗性状   从平均值(表 8)来看ꎬ来源
于K305的M2株系的穗长、穗粗和百粒重显著低于
9098期                  石海春等: EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析
表 3  EMS处理对玉米自交系M1株高、穗位高ꎬ叶面积的影响
Table 3  Effects of EMS on the M1 plant heightꎬear height and leaf area of maize inbred lines mutated
自交系
Inbred line
处理浓度
Treatment
concentration
(mL􀅰L ̄1)
株高 Plant height
ME (cm) RV (cm) CV (%)
穗位高 Ear height
ME (cm) RV (cm) CV (%)
叶面积 Leaf area
ME (m2) RV (m2) CV (%)
K305 0(CK) 195.8 185~215 4.33 53.3 45~70 13.46 0.868 0.70~1.00 10.31
0.5 197.4 110~220 8.30 56.2 30~80 16.19 0.903 0.37~1.16 17.11
0.67 194.1 140~220 8.12 49.9 20~70 20.67 0.853 0.41~1.15 19.83
1.0 192.4 145~220 7.27 50.0 30~70 18.00 0.866 0.42~1.10 16.32
1.67 185.3 155~215 8.27 47.9 35~65 18.04 0.780 0.43~1.02 17.31
2.0 179.8∗ 115~220 13.57 43.5∗ 15~65 25.13 0.806 0.30~1.13 22.95
R08 0(CK) 191.9 185~207 4.26 66.9 50~80 11.63 0.862 0.714~0.981 8.24
0.5 188.1 160~210 5.79 60.5∗ 45~80 13.67 0.837 0.651~1.012 10.73
0.67 185.4 135~220 9.82 60.3∗ 40~80 16.89 0.796 0.451~1.015 18.13
1.0 181.5∗ 120~215 7.43 53.0∗ 33~65 13.33 0.766∗ 0.494~0.980 15.64
1.67 180.9∗ 115~200 9.56 50.7∗ 25~65 14.97 0.722∗ 0.468~1.025 18.22
2.0 174.2∗ 120~210 10.47 50.8∗ 30~70 17.33 0.727∗ 0.417~0.971 16.93
21 ̄ES 0(CK) 203.6 175~220 7.17 73.9 60~85 10.99 0.869 0.618~0.995 13.04
0.5 193.8 150~225 9.56 70.9 50~90 13.47 0.817 0.549~1.035 15.42
0.67 193.5 150~225 8.98 70.6 50~90 11.17 0.814 0.500~1.033 14.82
1.0 188.9∗ 150~225 9.66 71.3 50~95 12.11 0.806 0.539~1.043 14.58
1.67 185.8∗ 120~220 12.27 63.8∗ 35~85 17.93 0.776∗ 0.411~1.002 18.09
2.0 178.2∗ 125~220 14.09 65.3∗ 35~90 16.44 0.757∗ 0.417~1.127 19.34
K305ꎬ来源于 R08的 M2株系的穗行数、百粒重显著
低于 R08ꎬ来源于 21 ̄ES的 M2株系的穗粗显著大于
21 ̄ESꎻ另外ꎬ从诱变系中穗长、穗粗、穗行数、百粒重
平均值与对照的差异达到正、负向显著的株系数比
例来看ꎬ来源于 K305 的 M2株系中分别为 0%和
28%、0%和 56%、0%和 16%、0%和 96%ꎻ来源于 R08
的 M2株系中分别为 8%和 4%、0%和 36%、0%和
76%、4%和 84%ꎻ来源于 21 ̄ES 的 M2株系中分别为
4%和 0%、44%和 0%、0%和 28%、56%和 36%ꎮ 表
明其 M2代株系的穗长、穗粗、穗行数、百粒重变异表
现复杂ꎬ如自交系 K305 的 M2株系中 4 个指标均表
现为显著降低或差异不明显ꎬ而自交系 R08的 M2株
系中穗长和百粒重却表现为双向变异ꎬ自交系 21 ̄
ES的 M2株系中只有百粒重表现为双向变异ꎮ
2.3.4 其它特殊变异  在本研究过程中发现ꎬR08 和
21 ̄ES的 M2代株系中各出现了 1 个雄性不育突变
体ꎬ在自交系 R08的 M2代株系中出现了 1个矮秆突
变体ꎬ它们的遗传特性还需要进一步研究ꎮ
3  讨论与结论
3.1 不同玉米自交系适宜的 EMS诱变浓度
赵永亮等(1999)的研究表明ꎬ低浓度下结实率
虽高ꎬ可得到较多诱变材料ꎬ但诱发突变的频率较
低ꎻ高浓度下虽然诱发突变的频率较高ꎬ但结实率
低ꎬ不能得到足够的诱变材料ꎮ 本研究表明ꎬ3 个自
交系经过不同浓度的 EMS诱变后ꎬ其结实率随着浓
度的增大表现出减小的趋势ꎬ说明 EMS 对玉米自交
系的抑制作用随着浓度的增加而增强ꎬ这与库来宝
(2007)的研究结果一致ꎮ K305 和 21 ̄ES 在 2. 0
mL􀅰L ̄1 EMS处理下的结实率为 30%左右ꎬ而 R08
仅为 7%ꎬ说明 EMS 对不同玉米自交系的影响因材
料不同而不同ꎮ 一般认为使 M1结实率达到 50%的
EMS 浓度诱变效果最好ꎬ可作为最佳诱变剂量(崔
清志等ꎬ2013)ꎮ 因此ꎬ可初步认为ꎬK305 和 R08 这
2个自交系适宜诱变浓度在 0.67~1.0 mL􀅰L ̄1之间ꎬ
019 广  西  植  物                                  36卷
表 4  EMS处理对玉米自交系M1主要雄穗性状的影响
Table 4  Effects of EMS on the M1 main tassel
characters of maize inbred lines mutated
自交系
Inbred
line
处理浓度
Treatment
concen ̄
tration
(mL􀅰L ̄1)
雄穗长
Branch length
ME
(cm)
RV
(cm)
CV
(%)
一级雄穗分枝数
Branch number
ME RV CV(%)
K305 0 (CK) 38.6 34~42 5.68 7.4 4~11 31.2
0.5 37.5 28~44 10.73 7.8 2~14 33.04
0.67 37.2 20~42 10.04 6.7 2~12 38.38
1 36.4 25~42 10.5 6.9 2~12 32.32
1.67 35.3∗ 27~41 9.02 6.3 2~12 41.15
2 35.4∗ 24~42 11.07 6.5 1~13 47.78
R08 0 (CK) 36.5 33~41 7.63 8.6 4~13 31.27
0.5 35.6 27~43 10.99 7.6 3~12 34.25
0.67 34.6 23~43 12.8 8.2 2~15 32.56
1 35.2 24~42 11.32 7.2 2~12 32.13
1.67 38.3 30~43 9.1 7.3 2~12 34.40
2 35.6 23~44 9.89 6.2∗ 1~12 40.35
21 ̄ES 0 (CK) 38.7 34~45 8.62 9.9 7~14 16.34
0.5 37.0 26~44 10.31 9.3 1~15 27.20
0.67 38.1 28~46 9.46 9.1 2~14 24.26
1 36.8 28~44 9.35 9.0 2~15 29.96
1.67 36.8 26~44 9.47 8.0∗ 0~15 35.56
2 36.8 22~45 11.61 7.3∗ 0~13 34.53
自交系 21 ̄ES 的最适诱变浓度在 1. 67 mL􀅰L ̄1
附近ꎮ
3.2 EMS诱变M1、M2株系主要性状遗传变异
前人对 M1代生物学效应研究主要集中在出苗
率、成株率ꎬ突变体的调查及主要果穗性状上ꎬ对株
高、穗位高、叶面积、主要雄穗性状研究较少(李海
军ꎬ2002ꎻ刘晓丽等ꎬ 2006ꎻ库来宝ꎬ 2007ꎻ焦杨ꎬ
2007)ꎮ 本研究认为ꎬM1代主要表现为散粉期、吐丝
期延长ꎬ株高、穗位高降低ꎬ叶面积减小ꎬ一级雄穗长
和一级雄穗分枝数减小ꎬ且随着 EMS 浓度的增加差
异越显著ꎬ这与李海军等(2002)和库来宝(2007)认
为 M1代受到的生理损伤大、长势低于对照的研究结
果一致ꎮ 不同浓度的 EMS对 M1代的主要果穗性状
影响不大ꎬ这与杨镇等(2006)和焦杨(2007)认为
M1代果穗性状未发生明显变异的结果一致ꎮ
安学丽等(2003)和杨镇等(2006)研究认为 M2
代株高变异率高且主要变矮ꎬ而刁钰婵等(2008)认
为 M2代株高主要变高ꎬ穗位高主要变矮ꎮ 本研究表
明ꎬM2代株高、穗位高和叶面积变异表现复杂ꎬ如自
交系 R08的 M2株系 3 个性状均表现出双向变异ꎬ
K305 的 M2株系株高和穗位高主要表现为双向变
异ꎬ而其叶面积却主要表现为降低ꎬ21 ̄ES 的 M2株
系穗位高表现为双向变异ꎬ而其株高和叶面积均表
现出降低的趋势ꎮ 杨镇等(2006)认为穗长和百粒
重的变异系数与对照相比变化较大ꎬ穗粗和穗行与
对照相比则不明显ꎻ刁钰婵等(2008)认为 M2代主
要果穗性状的变异系数与对照相比从高到低依次为
百粒重、穗长、穗行和穗粗ꎮ 本研究认为 M2株系穗
长、穗粗、穗行数、百粒重变异表现复杂ꎬ如自交系
K305的 M2株系中 4个指标均表现为显著降低或差
异不明显ꎬ而自交系 R08的 M2株系中穗长和百粒重
却表现为双向变异ꎬ自交系 21 ̄ES 的 M2株系中只有
百粒重表现为双向变异ꎮ 另外ꎬ本研究还表明ꎬ除
K305的 M2株系一级雄穗分枝数呈双向变异外ꎬ其
余 M2株系整体偏向于雄穗变短ꎬ雄穗分枝数减小ꎮ
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1198期                  石海春等: EMS对三个玉米自交系的诱变效应分析
表 5  EMS处理对玉米自交系M1主要果穗性状的影响
Table 5  Effects of EMS on the M1 main ear characters of maize inbred lines mutated
自交系
Inbred
line
处理浓度
Treatment
concentration
(mL􀅰L ̄1)
穗长
Ear length
ME
(cm)
RV
(cm)
CV
(%)
穗粗
Ear diameter
ME
(cm)
RV
(cm)
CV
(%)
穗行
Ear row
ME RV CV(%)
百粒重
100 ̄seed weight
ME
(g)
CV
(%)
K305 0 (CK) 13.3 8~16.5 12.60 4.3 3.0~4.9 10.47 16.9 14~20 8.78 22.5 11.12
0.5 12.5 9~26.4 19.71 4.2 3.3~5.0 9.43 16.5 10~20 11.24 22.3 13.31
0.67 12.3 6.8~17 18.80 4.1 3.2~4.9 9.09 16.7 10~20 13.17 22.2 16.28
1 12.1 8.8~19 18.21 4.0∗ 3.1~4.9 9.96 16.7 14~20 11.25 22.5 13.97
1.67 12.1 8.0~17 19.14 4.0∗ 3.4~4.9 8.01 16.2 10~20 12.14 22.3 15.95
2 12.3 7.0~16 15.41 4.0∗ 3.0~4.7 10.3 16.3 14~20 12.20 21.6 14.59
R08 0 (CK) 13.8 11.0~16 11.06 4.1 3.4~4.6 7.51 12.8 10~16 12.03 23.4 17.82
0.5 13.8 10.5~17.2 14.49 4.1 3.5~4.7 8.51 13.0 10~16 11.69 24.5 21.65
0.67 13.5 9~17.5 16.10 3.9 3.4~4.8 8.81 13.6 10~16 9.90 23.8 21.68
1 13.2 8~17.3 14.65 4.1 2.5~4.8 10.13 13.5 12~16 8.96 24.1 17.85
1.67 14.6 11.5~18 12.06 4.0 2.6~5.0 14.62 13.2 10~16 12.08 24.7 24.00
2 13.2 7~16.8 16.81 3.9 2.6~4.8 12.05 13.3 10~16 11.39 21.7 27.34
21 ̄ES 0 (CK) 12.2 9.6~16 14.96 4.2 3.7~4.6 6.63 14.9 14~16 6.95 24.9 25.09
0.5 11.1 6.9~16.5 18.89 4.0 3.5~4.8 9.26 14.8 12~18 9.35 23.2 22.74
0.67 11.3 6.5~14 14.11 4.1 3~4.7 9.92 14.9 12~18 9.80 23.2 25.81
1 11.2 6.2~14 14.39 3.9∗ 2.9~4.7 9.97 14.9 12~18 9.17 22.0 25.52
1.67 11 5~14.4 19.67 3.9∗ 2.5~4.6 12.58 14.5 12~18 9.41 21.6∗ 24.88
2 10.6 4.3~14.5 20.40 3.9∗ 2.6~4.8 12.35 14.4 10~18 9.52 19.9∗ 26.90
表 6  EMS处理对M2株高、穗位高、叶面积的影响
Table 6  Effects of EMS on the M2 plant heightꎬear height and leaf area
材料
Material
性状
Character
对照均值 ± 标准差
Average value
of CK ± SD
M2株系均值 ±
标准差
Average value of
M2 lines ± SD
M2株系变异范围
Variation range of
M2 lines
显著增加频率
Positive frequency
significantly
than CK (%)
显著减小频率
Negative frequency
significantly than
CK (%)
K305 株高
Plant height (cm)
187.5 ± 14.13 178.4 ±21.46∗ 76~227 12 56
穗位高
Ear height (cm)
47.0 ± 6.67 44.3 ± 12.27 11~83 16 40
叶面积
Leaf area (m2)
0.700 ± 0.09 0.597 ± 0.12∗ 0.214~1.127 0 68
R08 株高
Plant height (cm)
195.7 ± 11.93 181.0 ± 22.53∗ 97~250 4 68
穗位高
Ear height (cm)
62.2 ± 8.85 53.6 ± 14.21∗ 24~95 8 64
叶面积
Leaf area (m2)
0.690 ± 0.11 0.734 ± 0.15 0.330~1.266 20 12
21 ̄ES 株高
Plant height (cm)
193.3 ± 7.63 181.0 ± 18.61∗ 110~222 0 60
穗位高
Ear height (cm)
87.4 ± 6.38 79.6 ± 13.13∗ 39~125 8 60
叶面积
Leaf area (m2)
0.892 ± 0.06 0.704 ± 0.12∗ 0.282~1.138 0 96
219 广  西  植  物                                  36卷
表 7  EMS处理对M2主要雄穗性状的影响
Table 7  Effects on the M2 main tassel characters by EMS
材料
Material
性状
Character
对照均值 ± 标准差
Average value
of CK ± SD
M2株系均值 ±
标准差
Average value of
M2 lines ± SD
M2株系变异范围
Variation range of
M2 lines
显著增加频率
Positive frequency
significantly than
CK (%)
显著减小频率
Negative frequency
significantly than
CK (%)
K305 雄穗长
Branch length (cm)
43.0 ± 4.71 40.2 ± 4.95∗ 22~58 0 48
一级雄穗分枝数
Branch number
5.2 ± 1.53 5.3 ± 2.50 1~18 28 28
R08 雄穗长
Branch length (cm)
38.5 ± 3.24 38.2 ± 6.84 16~59 4 8
雄穗分枝数
Branch number
9.8 ± 2.70 6.9 ± 3.06∗ 1~19 0 84
21 ̄ES 雄穗长
Branch length (cm)
37.3 ± 1.99 34.4 ± 3.89∗ 21~46 0 72
一级雄穗分枝数
Branch number
9.1 ± 1.92 7.6 ± 2.04∗ 1~14 0 64
表 8  EMS处理对M2主要果穗性状的影响
Table 8  Effects on the M2 main ear characters by EMS
材料
Material
性状
Character
对照均值 ± 标准差
Average value
of CK ± SD
M2株系均值 ±
标准差
Average value of
M2 lines ± SD
M2株系变异范围
Variation range of
M2 lines
显著增加频率
Positive frequency
significantly than
CK (%)
显著减小频率
Negative frequency
significantly than
CK (%)
K305 穗长
Ear length (cm)
11.6 ± 1.33 10.3 ± 2.53∗ 5~16 0 28
穗粗
Ear diameter (cm)
3.4 ± 0.45 3.0 ± 0.44∗ 1.5~4.4 0 56
穗行数
Ear row
14.6 ± 1.71 13.9 ± 2.23 8~20 0 16
百粒重
100 ̄seed weight (g)
20.2 ± 0.22 13.5 ± 3.34∗ 7.93~25.2 0 96
R08 穗长
Ear length (cm)
12.3 ± 0.29 12.1 ± 2.34 3.5~18 8 4
穗粗
Ear diameter (cm)
3.4 ± 0.26 3.1 ± 0.43 1.7~4.2 0 36
穗行数
Ear row
14.3 ± 1.28 12.4 ± 1.64∗ 8~16 0 76
百粒重
100 ̄seed weight (g)
15.9 ± 0.30 11.3 ± 3.43∗ 4.54~19.63 4 84
21 ̄ES 穗长
Ear length (cm)
7.7 ± 0.21 8.4 ± 1.79 4.5~13 4 0
穗粗
Ear diameter (cm)
2.9 ± 0.12 3.4 ± 0.43∗ 1.9~4.4 44 0
穗行数
Ear row
14.0 ± 0.00 12.6 ± 1.90 8~18 0 28
百粒重
100 ̄seed eight (g)
17.2 ± 0.13 19.6 ± 4.74 13~31.03 56 36
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