全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　May２０１３,３３(３):４２８－４３１　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１３．０３．０２５
王硕,龚小妹,戴航,等．西瓜藤提取物的抑菌作用研究[J]．广西植物,２０１３,３３(３):４２８－４３１
WangS,GongXM,DaiH,etal．AntimicrobialactivityoftheextractsfromCitrullusvulgarisSchradvine[J]．Guihaia,２０１３,３３(３):４２８－４３１
西瓜藤提取物的抑菌作用研究
王　硕１,龚小妹２,３,戴　航２,周丹丹２,邓家刚１∗
(１．广西医科大学,南宁５３００２１;２．广西中医药大学,南宁５３０００１;３．广西药用
植物研究所 西南濒危药材资源开发国家工程实验室,南宁５３００２３)
摘　要:采用琼脂稀释法研究西瓜藤提取物的体外抑菌作用,用小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌法研究８０％醇提
物的体内抑菌作用.结果表明:西瓜藤提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门氏菌、
枯草芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏菌均有不同程度的抑制作用,但对链球菌作用不明显.其中８０％醇提取物和乙
酸乙酯萃取物抑制金黄色葡萄球菌活性最好,其最低抑菌浓度(MIC)分别为４．２、８．４mg􀅰mLＧ１.体内实验也表
明,８０％乙醇提取物具有较好的抑菌作用.西瓜藤提取物具有抑菌活性,在抑菌方面有一定开发前景.
关键词:西瓜藤;提取物;抑菌作用
中图分类号:R９６５．１　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１３)０３Ｇ０４２８Ｇ０４
Antimicrobialactivityoftheextractsfrom
CitrulusvulgarisSchradvine
WANGShuo１,GONGXiaoＧMei２,３,DAIHang２,
ZHOUDanＧDan２,DENGJiaＧGang１∗
(１．GuangxiMedicalUniversity,Nanning５３００２１,China;２．GuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity,
Nanning５３０００１,China;３．NationalEngineeringLaboratoryofSouthwestEndangeredMedicinalResources
Development,InstituteofGuangxiMedicinalPlant,Nanning５３００２３,China)
Abstract:AgardilutionmethodwasappliedtodetecttheantimicrobialefectsofCitrulusvulgarisSchradvineextract
invitro,andthemiceceliacinjectionofstaphylococcusaureusmethodwasappliedtodetecttheantimicrobialefectofC．
vulgarisSchradof８０％alcoholextractinvitro,inordertostudyantimicrobialactivityinvitroofC．vulgarisSchrad
vineextract．C．vulgarisSchradvineextracthaddiferentinhibitionefectsonstaphylococcusaureus,escherichiacoli,baＧ
cilusaeruginosus,salmonelatyph,bacilussubtilisandklebsielapneumoniae,butitshowedweakinhibitionefecton
chaincoccus．Efectsof８０％alcoholextractandethylacetateextractwerebeterthanothersonstaphylococcusaureus．
Theminimuminhibitionconcentration(MIC),was４．２mg􀅰mLＧ１,８．４mg􀅰mLＧ１respectively．C．vulgarisSchradvine
extracthadantibacterialaction,andwouldprovideabasistoexploitnewantimicroＧbicdrug．
Keywords:CitrulusvulgarisSchradvine;extraction;antibacterialaction
　　西瓜藤为葫芦科(Cucurbitaceae)植物西瓜
(Citrulluslanatus)的藤.西瓜的瓤、皮、籽皆可入
药,已有两千年药用历史,为我国历代本草收载的品
种,而目前对西瓜藤的研究比较少(李培,２００８),其
作为一种农作物废弃物,资源非常丰富,开展其药用
价值研究,对开发新的药用资源,实现中药资源的可
收稿日期:２０１３Ｇ０１Ｇ２４　　修回日期:２０１３Ｇ０４Ｇ１９
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻１０１２４００８Ｇ１２)
作者简介:王硕(１９７３Ｇ),男,博士研究生,研究方向为中药药理与新药研发,(EＧmail)ws４２８＠１６３．com.
∗通讯作者:邓家刚,教授,博士生导师,研究方向为中药药效与物质基础,(EＧmail)dengjg＠tom．com.
持续发展具有重要的意义(邓家刚,２０１０).笔者前
期研究发现,西瓜藤总提取物具有较好的抗炎镇痛
作用,其主要化学成分苯甲酸、对羟基苯甲酸、琥珀
酸等均具有较好的抑菌作用(王硕等,２０１２;王硕等,
２０１３;JiaＧgangDENG,２０１０).本文在前期研究基
础上,开展了西瓜藤不同提取物的体内外抑菌活性
研究,为开发新的药用资源提供了一点信息.
１　材料与仪器
１．１动物
昆明种小鼠６０只,体重１８~２０g,雌雄各半,由
广西医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK
(桂)２０１１Ｇ０００３.
１．２药品与试剂
西瓜藤采自广西崇左,由广西药用植物研究所
马小军研究员鉴定.MＧH琼脂(北京陆桥技术有限
责任公司);氧氟沙星(上海迪赛诺生物医药有限公
司,批号:国药准字 H２００１２２２４);无菌绵羊全血(广
西医科大学实验动物中心);其余试剂为分析纯.菌
株:金 黄色葡萄球菌(ATCC２９２１３)、大肠埃希氏菌
(ATCC２５９２２)、铜绿假单胞菌(ATCC２７８５３)、枯草芽
孢氏菌(CMCC１０２１１)、伤寒沙门氏菌(CMCC５００３５)、
肺炎克雷伯氏菌(CMCC４６１１７)、甲型溶血性链球菌
(CMCC３２２０５)、乙型溶血性链球菌(CMCC３２２０４),均
由中国药品生物制品检定所提供.
１．３仪器
SPX型智能生化培养箱(宁波江南仪器厂);
ATB细菌药敏比浊仪(法国梅里埃公司).
２　方法与结果
２．１西瓜藤的提取物和药液的制备
取西瓜藤５０g晒干粉碎,分别用１０倍、８倍量
水煮沸提取２、１．５h,合并提取液,浓缩干燥,即得水
提取浸膏(１２g)(每克浸膏相当于４．２g生药).取
西瓜藤干品２kg,用５倍量８０％乙醇分别常温超声
提取２、１h两次,过滤,合并滤液,减压浓缩至无醇
味,冷冻干燥得２４０g醇提取浸膏(每１g浸膏相当
于８．３g生药).将此浸膏分散于５００mL去离子水
中,静置过夜.离心(３０００r/min)分出不溶于水的
黏稠固体悬浮物和水溶液.取水溶液依次用石油
醚、乙酸乙酯、正丁醇３倍量萃取样品,萃取液分别
减压浓缩,回收溶剂,蒸干,得到石油醚浸膏(１２g)、
乙酸乙酯浸膏(１３．２g)、正丁醇浸膏(４０g)(每１g
浸膏相当于１６６．７、１５１．５、５０g生药).
称取８０％ 醇提浸膏及水提浸膏各２g,分别加入
２mL二甲亚砜(DMSO)溶解后用无菌生理盐水稀释
到１０mL,配成２０％的浓度;称取石油醚、乙酸乙酯、
正丁醇浸膏各２g,分别用４mLDMSO溶解后加无
菌生理盐水定容至２０mL,配成１０％的浓度.
２．２菌悬液和含药平皿的制备
采用直接菌落法制备菌悬液(张超等,２０１１;张
继红等,２０１０;周立刚等,２００４).取各菌于３７℃、１８
~２４h的纯培养物,用无菌生理盐水校正到浓度相
当于０．５麦氏标准比浊标准,无菌生理盐水１∶１０
稀释备用.每药取１０个７５mm培养皿,编号后按
顺序分别加入配好的药液１．００、０．８０、０．６０、０．４０、
０．２０、０．１０、０．０５、０．０２５、０．０１２５、０．０１mL;另取两个
平皿,各加１mL的无菌生理盐水和１mL含２０％
DMSO的无菌生理盐水.MＧH琼脂经１２０℃高压
灭菌２０min后,在水浴中平衡到６０℃备用.加好
药液的各组平皿,一份加 MＧH琼脂至１０mL,另一
份加含５％无菌绵羊全血的 MＧH琼脂至１０mL,轻
轻地振摇使药液和琼脂充分混匀,放置,冷却,琼脂
厚度为４~５mm.
２．３最小抑菌浓度(MIC)的测定
参照 NCCLS推荐的液体稀释法(Microdilution
method)进行,通过琼脂平板抑菌法观察上述西瓜藤
不同萃取物的MIC结果.具体应用２倍稀释法对药
物进行稀释,稀释液为 MH液体培养基,每种中草药
的 剂 量 分 别 为 ０．１００、０．０５０、０．０２５、０．０１２５、
０．００６２５mg/L,在每个试管中加入１．５×１０８CFU/L
的细菌１０μL,３５℃培养２４h,分别转种普通平板培
养基,２４h后无细菌生长的试管则为MIC.
２．４体外抑菌试验
精确吸取２μL菌液,接种于琼脂平皿表面,形
成直径为５~８mm 的菌斑,每个菌斑含菌数约为
１０４CFU,链球菌接种在含绵羊血的平皿上,其它菌
接种在不含血的平皿上.每药第１０个平皿不接菌
种作为药物对照,生理盐水组和DMSO组作生长对
照,均有菌斑生成.将接种好菌液的平皿置室温下
放置,待菌液被琼脂吸收后(一般不超过３０min),
把琼脂平皿倒置放入(３５±２)℃培养箱中孵育１６~
２０h(李宏等,２００７;黄宁珍等,２０１０;牛立新等,
２００８),链球菌２０~２４h.结果表明:试验方法重复
９２４３期　　　　　　　　　　　　　王硕等:西瓜藤提取物的抑菌作用研究
性良好.表中药物浓度为最后作用的药物浓度,即
每毫升培养基中所含提取物的相当生药量.西瓜藤
提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单
胞菌、伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌和肺炎克雷伯氏
菌均有不同程度的抑制作用.其中,８０％醇提取物
和乙酸乙酯萃取物抑制金黄色葡萄球菌活性最好,
其最低浓度(MIC)分别为４．２、８．４mg􀅰mLＧ１.各部
分提取物对敏感菌的 MIC结果见表１.
表１　西瓜藤提取物体外抑菌作用
Table１　InhibitioneffectsofextractsfromCitrullusvulgarisschradvinesinvitro
提取物
Extract
细菌
Bacteria
浓度C(mg􀅰mL
Ｇ１)
８４ ６７．２ ５０．４ ３３．６ １６．８ ８．４ ４．２ ２．１ １．０５
对照组
Controlgroup
最低抑菌浓度
MIC(mg􀅰mL
Ｇ１)
水提取物
Waterextract
金黄色葡萄球菌 － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ — ３３．６
大肠埃希氏菌 － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ８４
铜绿假单胞菌 － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ３３．６
枯草芽孢杆菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
伤寒沙门氏菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ５０．４
肺炎克雷伯氏菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
甲型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
８０％醇提物
８０％ethanolextract
金黄色葡萄球菌 － － － － － － － ＋ ＋ － ４．２
大肠埃希氏菌 － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ３３．６
铜绿假单胞菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
枯草芽孢杆菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ５０．４
伤寒沙门氏菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
肺炎克雷伯氏菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
甲型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙酸乙酯萃取物
Ethylacetatefraction
金黄色葡萄球菌 － － － － － － ＋ ＋ ＋ － ８．４
大肠埃希氏菌 － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ３３．６
铜绿假单胞菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
枯草芽孢杆菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ５０．４
伤寒沙门氏菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
肺炎克雷伯氏菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
甲型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
石油醚萃取物
Patroleumether
fraction
金黄色葡萄球菌 － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ８４
大肠埃希氏菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
铜绿假单胞菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ５０．４
枯草芽孢杆菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
伤寒沙门氏菌 － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ８４
肺炎克雷伯氏菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
甲型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
正丁醇萃取物
NＧbutylalcoholfraction
金黄色葡萄球菌 － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ５０．４
大肠埃希氏菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
铜绿假单胞菌 － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ６７．２
枯草芽孢杆菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
伤寒沙门氏菌 － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － ８４
肺炎克雷伯氏菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
甲型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
乙型溶血性链球菌 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － －
　注:＋ 表示有细菌生长;－ 表示无细菌生长.　Note:＋bacteriagrowth;－ Nobacteriagrowth．
０３４ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３３卷
２．５体内抗菌实验
选体重１８~２０g小鼠,随机分组,设西瓜藤
８０％醇提物高、中、低剂量组;氧氟沙星０．０６g/kg
组和模型对照组,每组１０只,每天灌胃１次,连续５
d,末次给药１h后腹腔注射浓度为６×１０８个/mL
金黄色葡萄球菌悬液０．５mL.然后继续每天给药１
次,观察记录７d内各组动物的存活时间及死亡动
物数,与模型组比较,x２法检验死亡率差异性,用t
检验存活时间差异的显著性(张宏等,２０１２).结果
表明,西瓜藤８０％醇提物高、中剂量组有明显降低
金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的作用(P＜０．０５,
P＜０􀆰０１),结果见表２.
表２　西瓜藤８０％ 醇提物体内抗菌作用
Table２　InhibitioneffectsofethylacetateextractsfromCitrullusvulgarisschradvinesinvivo
组别 Group
剂量
Dose(g/kgＧ１􀅰dＧ１)
动物数(只)
No．ofanimals
死亡数/总数
Mortality/Total
死亡率
Mortalityrate
存活时间
Survivaltime(h)
模型组 Modelgroup — １０ ９/１０ ９０％ ６２．７０±２９．４６
阳性组Positivegroup ０．０６ １０ １/１０∗∗ １０％ １６７．５０±３４．３６∗∗
高剂量 HighＧdosegroup ２０ １０ ５/１０∗ ５０％ １０４．９４±６０．６９∗
中剂量 ModialＧdosegroup １０ １０ ５/１０∗ ５０％ ９９．５６±３９．１８∗
低剂量LowＧdosegroup ５ １０ ８/１０ ８０％ ７１．５０±５４．６３
　注:与模型组比较 ∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１.　Note:∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１,ascomparedtothemodelcontrol．
３　结论与讨论
本实验中西瓜藤５种不同提取物对临床常见
８种细菌的抑制作用进行了研究,结果发现其对除链
球菌外的７种临床常见致病菌金黄色葡萄球菌、大肠
埃希氏菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆
菌和肺炎克雷伯氏菌均有不同程度的抑制作用.其
中,８０％ 醇提取物抑制金黄色葡萄球菌活性最好,其
次为乙酸乙酯萃取物,最低浓度(MIC)分别为４．２、８．４
mg􀅰mLＧ１,说明西瓜藤抑菌活性成分主要为脂溶性
成分,存在于乙酸乙酯部位,但８０％ 醇提取物的作用
效果优于乙酸乙酯萃取物,可能是在萃取过程中一些
不溶于水的黏稠固体悬浮物被萃取掉了,而这部分也
具有抑菌的活性成分.体内实验表明,西瓜藤８０％
醇提物对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有一定的降低
死亡率的作用,但其作用机理有待进一步研究.
西瓜藤作为一种农作物废弃物,资源非常丰富,
且毒副作用相对较小(邓家刚等,２０１０),因此在抗菌
药物研究方面,具有较好的开发潜力以及广阔的临
床应用前景,值得进一步研究.
参考文献:
王硕,龚小妹,周小雷,等．２０１２．四种不同品种西瓜藤化学成分
预实验[J]．时珍国医国药,２３(２):３９０－３９１
邓家刚．２０１０．农作物废弃物药用研究的战略意义与基本思路
[J]．广西中医药,３３(１):１－３
DengJG(邓家刚),WangS(王硕),GuoLC(郭力城),etal．２０１０．
Extractsfromwatermelonrootsandleaveshaveprotectiverolesin
antiＧinflammationandanalgesia(西瓜根叶提取物抗炎镇痛作用
实验研究)[J]．ChinHerbMed(中草药),２(３):２３１－２３５
HuangNZ(黄宁珍),QuC(区婵),HeJX(何金祥),etal．
２０１０．Isolationandidentificationofantagonisticbacteriaand
theirmechanismsagainstPhytophthoraparasiticavar．ntＧ
cotianaeinkarstareaofGuangxi(广西岩溶区烟草黑胫病拮
抗细菌的筛选鉴定及其抗病机理)[J]．Guihaia(广西植
物),３０(６):８６９－８７５
LiH(李宏),JingHC(姜怀春)．２００７．AntibacterialefectsofthetoＧ
talextractofHypericumperforatumonclinicalyisolatedbacteria
(贯叶连翘总提取物对致病细菌的抗菌作用)[J]．Guihaia(广西
植物),２７(３):４６６－４６８
LiP(李培)．２００８．OptimizationofextractionprocessoftotalflaＧ
vonesfromwatermelonstalk(西瓜藤中黄酮类化合物提取工艺
的优化)[J]．ExpRep&TheorRes(实验报告与理论研究),１１
(２):２９－３１
NiuLX(牛立新),JinL(靳磊),ZhangYL(张延龙),etal．２００８．An
evaluationontheantibacterialefectsofthebulbextractfrom
threeLiliumspecies(三种百合鳞茎提取物的抑菌作用)[J]．
Guihaia(广西植物),２８(６):８４２－８４６
WangS(王硕),GongXM(龚小妹),ZhouDD(周丹丹),etal．２０１３．
StudyonchemicalconstituentsofCitrulluslanatusvine(I)(西瓜
藤的化学成分研究)(Ⅰ)[J]．ChinJExpTrad MedForm(中国
实验方剂学杂志),１９(６):１３１－１３４
ZhangC(张超),WeiQ(魏琴),DuYH(杜永华),etal．２０１１．The
antibacterialstudyonextractsfromdeＧoiledleavesofCinnamoＧ
mumlongepaniculatumagainstthreeofthepathogenicbacteria(脱
油油樟叶提取物的体外抑菌活性研究)[J]．Guihaia(广西植
物),３１(５):６９０－６９４
ZhangH(张宏),GanY(甘雨),QiaoM(乔敏)．２０１２．BacterioＧ
statictestoftheextractivefromBlackberrylilyrhizome(射
干提取物抑菌实验研究)[J]．LabAnimSci(实验动物科
学),２９(２):５－７
ZhangJH(张继红),TaoNG(陶能国),LiJL(李俊丽),etal．
２０１０．ExtractionofcapsaicinanditsantiＧmicrobialactivity(辣椒
素的提取及抑菌活性研究)[J]．Guihaia(广西植物),３０(１):
１３７－１４０
ZhouLG(周立刚),SongWT(宋卫堂),XieGH(谢光辉),etal．
２００４．Antimicrobialtreatmentofnutrientsolutioninhydroponic
cultivationofpopulusnigra(黑杨水培中营养液抑菌处理研究)
[J]．Guihaia(广西植物),２４(３):２５９－２６２
１３４３期　　　　　　　　　　　　　王硕等:西瓜藤提取物的抑菌作用研究