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用菌土接种法鉴定云南省主要十字花科作物对根肿病的抗性



全 文 :中国蔬菜 2010(14):71-74
CHINA VEGETABLES
用菌土接种法鉴定云南省主要十字花科作
物对根肿病的抗性
胡靖锋 1,2 吴丽艳 2 林良斌 1 李卫芬 2 李石开 2 钟 利 2 和江明 2*
(1 云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明 650201;2 云南省农业科学院园艺作物研究所,
云南昆明 650205)

摘 要:采用菌土接种法鉴定了云南地区 110 份十字花科作物对根肿病的抗性。结果表明:芜菁材料
TS04 病情指数仅为 1.46,为高抗材料;H166、牛心莲花白、圆秆大青菜、建水青花、TS09 5 份材料表现抗
病,病情指数在 14.44~19.57 之间;尖叶花菜、春不老、东川黑二茵、TS11 4 份材料表现耐病,病情指数
在 20.79~23.51 之间;其余材料均表现为感病。
关键词:十字花科作物;根肿病;菌土接种法;抗病性
中图分类号:S436.341.1 文献标识码:A 文章编号:1000-6346(2010)14-0071-04
To Identify Clubroot Resistance of Cruciferae Vegetables from Yunnan Province by Using Soil Bacteria Inoculation Method
HU Jing-feng1,2, WU Li-yan2, LIN Liang-bin1, LI Wei-fen2, LI Shi-kai2, ZHONG Li2, HE Jiang-ming2*
( 1College of Agronomy and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, Yunnan, China;
2Institute of Horticultural Crops of Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, Yunnan, China)
Abstract:In our experiment,resistance to club-root disease of 110 accessions cruciferous crops
from Yunnan were identified by using soil bacteria inoculation methods. The results show that the disease
index of TS04 screened from turnip sample is only 1.46. It is a high-resistant material. H166,
‘Niuxinlianhuabai’,‘Yuangandaqingcai’,‘Jianshuiqinghua’and TS09 are disease resistant materials.
Their disease indexes are between 14.44 to 19.57.‘Jianyehuacai’,‘Chunbulao’,‘Dongchuanheieryin’
and TS11 are disease tolerant materials. Their disease indexes are 20.79 to 23.51. The remaining
materials are susceptible to disease.
Key words:Cruciferous crops; Club-root; Soil bacteria inoculation; Resistance

十字花科作物根肿病是由专性寄生菌芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)侵染引起的一
种世界性病害(宋元林 等,1995)。1852 年在美国首次报道,19 世纪在苏联北部及中部地区大
面积流行,并造成毁灭性灾害(Jeung-Haing et al.,1997)。近年来此病的危害日趋严重,尤其在
欧洲、北美、日本等地区,根肿病已成为一种主要病害,给十字花科作物的生产造成严重威胁。

收稿日期:2010-02-11;接受日期:2010-04-12
基金项目:云南省科技攻关计划(2006NG01),云南省技术创新人才培养计划(2007PY02-20),云南省科技创新强省计划(2009AB002),
云南省国际合作科技计划(2009EE002)
作者简介:胡靖锋,男,硕士研究生,主要从事蔬菜抗病遗传育种研究,E-mail:good_mf_13@163.com
* 通讯作者(Corresponding author):和江明,研究员,主要从事十字花科作物生物技术育种研究,E-mail:hejiangmimg666@
yahoo.com.cn

72 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2010 年 7 月(下)
我国的浙江、广东、广西、湖南、福建、江西、安徽、四川、云南、新疆、西藏、辽宁、山东、
上海、北京及重庆等省(市、区)均有发生,并且发病的面积和为害的种类急剧增加(司军 等,
2002)。筛选抗性种质资源,开展抗病育种,是从根本上解决根肿病危害的有效途径。
本试验通过采用菌土法对云南省几种主要十字花科作物进行抗病性筛选,通过对其病情指数
的比较分析,最终筛选出在昆明地区具有明显抗性的种质资源,为十字花科作物抗病育种奠定基
础,从而有效推进云南省十字花科作物产业的发展。
1 材料与方法
1.1 材料
从云南省各个地区收集到的 110 份材料,其中大白菜 50 份、甘蓝 5 份、花椰菜 8 份、青花
菜 1 份、甘蓝型油菜 10 份、芥菜 20 份、芜菁 16 份(表 1)。
表 1 110 份供试材料类型及来源
材料名称 类型 来源 材料名称 类型 来源 材料名称 类型 来源
大裹心 大白菜 云南东川 成都大白菜 大白菜 云南丽江 花叶苦菜 芥菜 云南昆明
小白口 大白菜 云南开远 北京大白菜 大白菜 云南永胜 包包苦菜 芥菜 云南昆明
黄秧白 大白菜 云南昆明 小根白 大白菜 云南下关 春不老 芥菜 云南昆明
东川黑二茵 大白菜 云南东川 高桩黒叶白 大白菜 云南个旧 水苦菜 芥菜 云南昆明
金边白菜 大白菜 云南鲁甸 黑叶白菜 大白菜 云南中甸 鸡啄青菜 芥菜 云南个旧
翻心白 大白菜 云南玉溪 豆叶绿白菜 大白菜 云南大理 粉秆青菜 芥菜 云南昆明
好包白 大白菜 云南保山 黑叶子白菜 大白菜 云南鹤庆 扁秆青菜 芥菜 云南东川
通海鸡窝白 大白菜 云南通海 大种江苏白 大白菜 云南昆明 圆秆大青菜 芥菜 云南东川
矮柱成都白 大白菜 云南昆明 小白麻叶 大白菜 云南蒙自 包包苦菜 芥菜 云南昆明
大心菜 大白菜 云南昆明 山东白 大白菜 云南腾冲 象耳青菜 芥菜 云南昆明
翻心菜 大白菜 云南昆明 蒜头白 大白菜 云南景东 宽叶柄苦菜 芥菜 云南宜良
黒叶东川白 大白菜 云南昆明 大头白 大白菜 云南昆明 花叶青菜 芥菜 云南东川
青麻菜 大白菜 云南昆明 乌塌菜 大白菜 云南昆明 本地青菜 芥菜 云南思茅
黑二叶白 大白菜 云南昭通 本地平头甘 结球甘蓝 云南建水 三月清青菜 芥菜 云南思茅
黄烟白 大白菜 云南昭通 大种莲花白 结球甘蓝 云南昆明 扭心粉秆 芥菜 云南个旧
绿叶菜 大白菜 云南宜良 小种莲花白 结球甘蓝 云南昆明 大花叶 芥菜 云南个旧
鸡油菜 大白菜 云南曲靖 本地京白菜 结球甘蓝 云南普洱 大叶青菜 芥菜 云南个旧
卷心白菜 大白菜 云南曲靖 牛心莲花白 结球甘蓝 云南昆明 黑叶一把筷 芥菜 云南个旧
黄芽白 大白菜 云南沾益 尖叶花菜 花椰菜 云南玉溪 灰秆青菜 芥菜 云南建水
黄心白 大白菜 云南会泽 通海花菜 花椰菜 云南通海 绿秆菜 芥菜 云南大理
迟白菜 大白菜 云南通海 迟洋花 花椰菜 云南通海 TS01 芜菁 云南迪庆
高桩白 大白菜 云南思茅 保山迟花菜 花椰菜 云南保山 TS02 芜菁 云南迪庆
好包心白 大白菜 云南保山 大理洋花菜 花椰菜 云南大理 TS03 芜菁 云南迪庆
二月黄心白 大白菜 云南腾冲 扭心花菜 花椰菜 云南个旧 TS04 芜菁 云南迪庆
矮脚白 大白菜 云南腾冲 个旧小花菜 花椰菜 云南个旧 TS05 芜菁 云南迪庆
平阳大青棒 大白菜 云南丽江 开远早花 花椰菜 云南开远 TS06 芜菁 云南迪庆
墨叶白菜 大白菜 云南丽江 建水青花 青花菜 云南建水 TS07 芜菁 云南迪庆
大种白菜 大白菜 云南个旧 H166 甘蓝型油菜 云南昆明 TS08 芜菁 云南迪庆
鸡窝白菜 大白菜 云南个旧 H165 甘蓝型油菜 云南昆明 TS09 芜菁 云南迪庆
大白麻叶 大白菜 云南蒙自 花油 3 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS10 芜菁 云南迪庆
大青口 大白菜 云南开远 花油 4 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS11 芜菁 云南迪庆
雪里白心菜 大白菜 云南下关 花油 5 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS12 芜菁 云南迪庆
江苏白 大白菜 云南昆明 花油 6 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS13 芜菁 云南迪庆
玉泉抱头白 大白菜 云南昆明 花油 7 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS14 芜菁 云南迪庆
小种江苏白 大白菜 云南昆明 花油 8 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS15 芜菁 云南迪庆
东川黒叶白 大白菜 云南昆明 云杂油 1 号 甘蓝型油菜 云南昆明 TS16 芜菁 云南迪庆
团白菜 大白菜 云南玉溪 云杂油 2 号 甘蓝型油菜 云南昆明

2010(14) 胡靖锋等:用菌土接种法鉴定云南省主要十字花科作物对根肿病的抗性 73
1.2 方法
菌土法:从昆明附近的双龙、阿子营、大板桥、小板桥等根肿病重灾区采集菌土和病根。将
各点采集的菌土充分混合;将各点采集的菌根充分混合,用 DG180 型中药材粉碎机打成粉末,置
于冰柜待用。播种前在菌土中加入由菌根粉末加蒸馏水配成的孢子悬浮液,并充分混合。该悬浮
液经 3 000 r·min-1 离心 10 min,3 次重复,按杨佩文等(2002)的方法分离并检测孢子悬浮液及
菌土中的孢子浓度,最终使菌土中孢子含量达到 1×108 个·g-1 以上,再按沈夏淦(2006)的方法
将菌土 pH 值调节至 6.0。将材料播于装有菌土的育苗盘中,每份材料播 3 盘,每盘播 50 粒;保
持菌土湿度 75 %左右,白天温度 20~26 ℃,夜间 16~23 ℃。出苗后 45 d(大约 8 片真叶)进
行病害调查与统计。
统计方法:参照司军等(2003,2009)的方法将病情等级分为 5 级:0 级,不发病;1 级,
侧根有肿块,主根无肿块;2 级,主根有肿块,侧根无肿块;3 级,主、侧根均有肿块;4 级,主、
侧根有大量严重肿块。计算病情指数。品种抗病性评估标准:高抗,0<病情指数<10;抗病,
10≤病情指数<20;耐病,20≤病情指数<30;感病,30≤病情指数≤100。
∑(各级发病株数×各病级代表数值)病情指数= 调查总数×最高病级代表数值 ×100
2 结果与分析
由表 2 和表 3 可以看出,不同材料病情指数经方差分析 F=6.64>F10,20,0.01=3.368,说明不同材
料之间对根肿病的抗性存在极显著差异。TS04 的病情指数为 1.46,为高抗材料;H166、牛心莲
花白、圆秆大青菜、建水青花、TS09 病情指数在 14.44~19.57 之间,为抗病材料;尖叶花菜、春
不老、东川黑二茵、TS11 病情指数在 20.79~23.51 之间,为耐病材料;其余 100 份材料均为感
病材料。
表 2 不同材料抗病性方差分析结果
变异来源 平方和 SS 自由度 df 均方 MS F 值 F10,20,0.01
材料 1 617.85 10 161.79 6.64** 3.368
误差 535.95 22 24.36
总和 2 153.80 32
注:**表示差异极显著(α=0.01)。
3 讨论
从 110 份十字花科作物对根肿病的抗性筛
选结果来看,芜菁类材料对根肿病的抗性要高
于其他种类材料,甘蓝类材料和甘蓝型油菜材
料间抗性无差异,花椰菜及青花菜材料对根肿
病的抗性最弱。
目前,日本和韩国使用的抗源基因均来自
欧洲饲用芜菁(吉川宏昭,1983),周永红等
(2007)在接种浓度试验中也发现红芜菁对根
肿病表现出极强的抗性,本试验筛选到的 TS04
也是来自芜菁,在一定程度上验证了芜菁中具
表 3 病情指数低于 30 的 10 份材料菌土法接种结果
材料 病情指数 抗性分级
东川黑二茵 23.25 abcAB MR
牛心莲花白 15.01 cdB R
尖叶花菜 20.79 bcdAB MR
建水青花 18.52 bcdB R
H166 14.44 dB R
春不老 22.36 abcdAB MR
圆秆大青菜 15.03 cdB R
TS04 1.46 eC HR
TS09 19.57 bcdAB R
TS11 23.51 abAB MR
注:HR—高抗;R—抗病;MR—耐病;表中同列数据后不同
小写字母表示差异显著(α=0.05);不同大写字母表示差异极显著
(α=0.01)。

74 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2010 年 7 月(下)
有较丰富根肿病抗性基因。欧洲饲用芜菁和来自云南迪庆的芜菁材料 TS04 存在地理上的远缘关
系,是否具有同一抗性基因有待于进一步研究。
根肿病菌在人工培养基上难以培养成功,常规的人工穿刺等接种方法不适宜于该菌的接种,
目前多依赖于菌土、菌根等含有大量孢子的物质作为种源。接种方法有菌土法、浸蘸法、插入法
等,Williams(1981)认为浸蘸法最好,郭向华等(2001)认为菌土法的效果较好,吉川宏昭(1983)
认为插入法较好。本试验选用菌土接种法对材料进行抗病性鉴定,理应先进行生理小种的鉴定,
但由于目前国内有根肿病菌生理小种欧洲鉴别寄主系统(ECD)的单位并不多,受试验条件的限
制,这一工作尚无法进行。由于本试验所采用的菌源是昆明地区根肿病发病较为严重的地方,对
根肿病的抗性鉴定只限于昆明地区,有望在今后的试验中扩大菌源范围和开展对根肿菌生理小种
的鉴定工作。
参考文献
郭向华,肖崇刚,曾艳.2001.甘蓝根肿病菌的生物学特性.西南农业大学学报,23(1):7-9.
吉川宏昭.1983.王素译.日本十字花科作物的抗根肿病育种.中国蔬菜,(3):55-56.
宋元林,孙庆才,徐明涛,陈顺才.1995.新编蔬菜病虫害防治技术.北京:中国农业出版社:60-62.
司军,李成琼,任雪松,肖崇刚.2002.十字花科植物根肿病及抗根肿病育种研究进展.西南农业学报,15(2):69-72.
司军,李成琼,肖崇刚,任雪松,王小佳.2003.甘蓝根肿病接种方法的研究.西南农业大学学报,25(3):216-219.
司军,李成琼,宋洪远,任雪松,宋明,王小佳.2009.结球甘蓝对根肿病的抗性鉴定与评价.西南大学学报,13(6):26-30.
沈夏淦.2006.土壤 pH 值及其调节.花卉,(4):11.
杨佩文,李家瑞,杨勤忠,王群.2002.十字花科蔬菜根肿病菌休眠孢子的分离与检测.云南农业大学学报,17(3):301-303.
周永红,孙保亚,沈向群.2007.大白菜根肿病抗病接种浓度的研究.辽宁农业科学,(3):34-35.
Jeung-Haing Oh,Jang-Hwan Cho,Bong-Gu Kim.1997.Environmental factors favoring the disease development and chemical control of clubroot
(Plasmodiophora brassicae)in Chinese cabbage.Korean Plant Pathol,13(4):244-247.
Willams P H.1981.Screening crucifers for multiple disease resistance.Madison:Department of Plant Pathology,University of Wisconsin-
Madison:168.
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