全 文 ：广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ　３２（３）：４００－４０５　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 ２０１２ 年 ５ 月
　
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０５．０２３
２６种滇产植物提取物的体外抗耐药菌作用研究
杨翠先１，２，左国营１＊，韩　峻２，王根春１
（１．解放军昆明总医院 天然药物研究中心，昆明６５００３２；２．云南中医学院，昆明６５０５００）
摘　要：研究２６种云南滇东南产植物８０％乙醇提取物的体外抗耐药菌作用。制备植物的醇提物，用琼脂打
孔法对其进行抗菌活性的筛选。通过微量稀释法测定提取物的最低抑菌浓度［ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａ－
ｔｉｏｎ（ＭＩＣ）］、最低杀细菌浓度［ｍｉｎｉｍｕｍ　ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＢＣ）］及最低杀真菌浓度［ｍｉｎｉｍｕｍ　ｆｕｎ－
ｇｉｃｉｄａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＦＣ）］。结果表明：２６种提取物中有９种对金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）、大肠埃希
菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌有不同程度的抑制活性；其中以红花荷、马蹄参、百花贝母兰、二色大包兰和光
序肉实树提取物对耐甲氧西林金葡菌的抑菌作用最强，其 ＭＩＣ／ＭＢＣ（ｍｇ／Ｌ）范围分别为５１２／２０４８～＞２０４８，
５１２／２０４８～＞２０４８，２５６－５１２／２０４８～＞２０４８，５１２～１０２４／１０２４～＞２０４８和５１２～１０２４／＞２０４８。另外，肋果茶提
取物对铜绿假单胞菌及白色念珠菌有较好的抑制作用，其对铜绿假单胞菌及其耐药菌株的 ＭＩＣ／ＭＢＣ为５１２
～２０４８／＞２０４８ｍｇ／Ｌ；对白色念珠菌及其耐药菌株的 ＭＩＣ／ＭＦＣ均为２０４８／＞２０４８ｍｇ／Ｌ。２６种植物提取物
对大肠埃希菌的抑制作用均较弱。
关键词：滇产植物；提取物；耐药菌；抗菌活性；ＭＩＣ／ＭＢＣ
中图分类号：Ｒ２８５．５　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０３－０４００－０６
＊
Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　２６Ｙｕｎｎａｎ　ｐｌａｎｔｓ
ｅｘｔｒａｃｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ
ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ
ＹＡＮＧ　Ｃｕｉ－Ｘｉａｎ１，２，ＺＵＯ　Ｇｕｏ－Ｙｉｎｇ１＊，ＨＡＮ　Ｊｕｎ２，ＷＡＮＧ　Ｇｅｎ－Ｃｈｕｎ１
（１．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，Ｋｕｎｍｉｎｇ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，ＰＬＡ，２１２　Ｄａ　Ｇｕａｎ　Ｒｏａｄ，
Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５００３２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｙｕｎｎａｎ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５０５００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　８０％ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　２６ｐｌａｎｔｓ　ｏｒｉｇｉｎａｔｅｄ　ｉｎ　ｓｏｕｔｈ－
ｅａｓｔ　ｏｆ　Ｙｕｎｎａｎ．Ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｐｌａｎｔ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｓｃｒｅｅｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ａｎｔｉ－
ｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｂｙ　ｔｈｅ　ａｇａｒ　ｈｏｌｅ　ｄｉｆｕｓｉｏｎ　ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ）ａｎｄ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＢＣ）ｏｒ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｆｕｎｇｉｃｉｄａｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＦＣ）ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｓｅｒｉａｌ　ｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｂｒｏｔｈ
ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　９ｏｆ　ｔｈｅ　２６ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｐｏｔｅｎｃｙ　ａｇａｉｎｓｔ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　ａｎｄ　Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ．Ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ａｃｔｉｖｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ａ－
ｇａｉｎｓｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）ｗｅｒｅ　ｆｒｏｍＲｈｏｄｏｌｅｉａ　ｐａｒｖｉｐｅｔａｌａ　Ｔｏｎｇ，Ｄｉｐｌｏ－
ｐａｎａｘ　ｓｔａｃｈｙａｎｔｈｕｓ　Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ，Ｓａｒｃｏｓｐｅｒｍａ　ｋａｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｅｘｅｌ　ｖａｒ．ｓｉｍｏｎｄｉ　Ｌａｍ．ｅｔ　Ｒｏｙｅｎ，Ｃｏｅｌｏｇｙｎｅ　ｌｅｕｃａｎｔｈａ　Ｗ．
Ｗ．Ｓｍｉｔｈ　ａｎｄ　Ｓｕｎｉｐｉａ　ｂｉｃｏｌｏｒ．Ｔｈｅｉｒ　ＭＩＣｓ／ＭＢＣｓ（ｍｇ／Ｌ）ｗｅｒｅ　５１２／２０４８－＞２０４８，５１２／２０４８－＞２０４８，２５６－５１２／２０４８－＞
＊ 收稿日期：２０１１－０９－２２　　修回日期：２０１２－０２－２０
基金项目：国家自然科学基金（ＮＳＦＣ　８１０７３１２６）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ（ＮＳＦＣ　８１０７３１２６）］
作者简介：杨翠先（１９８６－），女，重庆人，硕士研究生，主要从事天然产物活性物质开发与研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｙｃｘ４８４＠１２６．ｃｏｍ。
＊通讯作者：左国营，男，博士，主要从事植物活性成分研究和天然药物开发，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｚｕｏｇｕｏｙｉｎｇ＠２６３．ｎｅｔ。
２０４８，５１２－１０２４／１０２４－＞２０４８ａｎｄ　５１２－１０２４／＞２０４８，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｓｌａｄｅｎｉａ　ｃｅｌａｓｔｒｉｆｏｌｉａ　Ｋｕｒｚ　ｓｈｏｗｅｄ　ｓｔｒｏｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａ－
ｇａｉｎｓｔ　Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄ　Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ＭＩＣｓ／ＭＢＣｓ（ＭＦＣｓ）ｗｅｒｅ　５１２－２０４８／＞２０４８ａｎｄ　２０４８／＞２０４８ｍｇ／Ｌ，ｒｅ－
ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａｌ　ｔｈｅｓｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｗｅａｋ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｙｕｎｎａｎ　ｐｌａｎｔ；ｅｘｔｒａｃｔ；ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＭＩＣ／ＭＢＣ
　　自从１９３５年第一个磺胺类药物白浪多息进入
临床试验，１９４１年青霉素的投入临床使用，抗菌药
物得到了长足发展（张致平，２００２）。目前应用于临
床的抗菌药物有２００余种，包括人工合成抗菌药（喹
诺酮类、磺胺类）和抗生素（β－内酰胺类、大环内酯
类、氨基糖苷类、四环素类、多肽及糖肽类等）。但由
于近年来抗菌药物广泛使用，特别是不合理的临床
应用，造成耐药性致病菌不断增多。金黄色葡萄球
菌（简称金葡菌，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）、铜绿假单
胞菌 （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、大 肠 埃 希 菌
（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）和白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉ－
ｃａｎｓ）是临床上常见的致病菌。１９６１年，耐甲氧西
林金葡菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕ－
ｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）（Ｂａｒｂｅｒ，１９６１）菌株首次在英国被检
出，从发现至今 ＭＲＳＡ感染几乎遍及全球，已成为
院内感染 的重要病原菌之一 （Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ 等，
２００６）。１９９７年日本报道了第１例对万古霉素敏感
性降低的金葡菌感染，即万古霉素中介耐药的金葡
菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ－ｌｅｖｅｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈ－
ｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，ＶＩＳＡ）（Ｈｉｒａｍａｔｓｕ 等，１９９７）。
２００２年６月，在美国糖尿病患者的静脉导管分离出
第１株高水平耐万古霉素的金葡菌（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ－ｒｅ－
ｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，ＶＲＳＡ）（ＣＤＣ，２００２）
并进行了首次报道。
铜绿假单胞菌是目前医院感染主要的病原菌之
一，在呼吸内科、重症监护室病房的感染流行尤为突
出（Ｗｅｎ等，２００２）。白色念珠菌除可感染皮肤等部
位外，还可侵犯肺、肾等重要脏器，引起深部真菌感
染，严重时危及病人生命。因此，临床上迫切需要高
效、低毒、副作用小、价格低廉的抗菌药物。同时，由
于化学合成药物的开发难度大、毒副作用明显，人们
对从天然植物中寻找抗微生物感染的新药越来越重
视（左国营等，２００５；王航等，２００６；李宏等，２００７）。
为进一步发现更多具有抗感染作用的植物，扩大其
作用范围，探索其抗菌作用的物质基础，本研究对
２６种滇产植物８０％乙醇提取物抑制金葡菌、大肠埃
希菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的活性进行了筛
选研究，现报道如下。
１　材料与方法
１．１菌株与药敏纸片
标准菌：大肠埃希菌（ＡＴＣＣ２５９２２，Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ
ｃｏｌｉ，Ｅ．ｃｏｌｉ）、铜绿假单胞菌（ＡＴＣＣ２７８５３，Ｐｓｅｕｄｏ－
ｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、白 色 念 珠 菌
（ＡＴＣＣＹ０１０９，Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ，Ｃ．ａｌｂｃａｎｓ）、金黄
色葡萄球菌（ＡＴＣＣ２５９２３，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，
Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）（中国药品生物制品检定所提供）。
临床分离菌株：耐亚胺培南铜绿假单胞菌
（Ｉｍｉｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ＩＲ－
ＰＡ）（ＩＲＰＡ１２０，ＩＲＰＡ　１３２）、耐氟康唑白色念珠菌
（８８５、８４２号）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Ｍｅｔｈｉ－
ｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）
（ＭＲＳＡ００８、ＭＲＳＡ０９８、ＭＲＳＡ１２８、ＭＲＳＡ１４４、
ＭＲＳＡ１６７、ＭＲＳＡ３２１）（来自解放军昆明总医院呼
吸系统患者痰液标本）。抗生素药敏纸片（中国药品
生物制品检定所提供）。
１．２植物原材料
植物 （税玉民等，２００３）：红花荷 （Ｒｈｏｄｏｌｅｉａ
ｐａｒｖｉｐｅｔａｌａ）、光序肉实树（Ｓａｒｃｏｓｐｅｒｍａ　ｋａｃｈｉｎｅｎｓｅ
ｖａｒ．ｓｉｍｏｎｄｉｉ）、安息香（Ｂｅｎｚｏｉｎｕｍ　ｓｔｙｒａｃｉｓ）、马蹄
参（Ｄｉｐｌｏｐａｎａｘ　ｓｔａｃｈｙａｎｔｈｕｓ）、滇桂木莲（Ｍａｎｇｌｉ－
ｅｔｉａ　ｆｏｒｒｅｓｔｉｉ）、草蔻（Ａｌｐｉｎｉａｅ　ｋａｔｓｕｍａｄａｉ）、盘叶
柏那 参 （Ｂｒａｓｓａｉｏｐｓｉｓ　ｆａｔｓｉｏｉｄｅｓ）、大 叶 冷 水 花
（Ｐｉｌｅａ　ｍａｒｔｉｎｉ）、毒芹（Ｃｉｃｕｔａ　ｖｉｒｏｓａ）、大八角（Ｉｌ－
ｌｉｃｉｕｍ　ｍａｊｕｓ）、绿樟（Ｍｅｌｉｏｓｍａ　ｓｑｕｉｍｕｌａｔａ）、滇丁
香（Ｌｕｃｕｌｉａ　ｐｉｎｃｉａｎａ　ｖａｒ．ｐｉｎｃｉａｎａ）、黑面神（Ｂｒｅｙ－
ｎｉａ　ｆｒｕｔｉｃｏｓａ）、乌敛莓（Ｃａｙｒａｔｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ）、二色
大包兰（Ｓｕｎｉｐｉａ　ｂｉｃｏｌｏｒ）、百花贝母兰（Ｃｏｅｌｏｇｙｎｅ
ｌｅｕｃａｎｔｈａ）、苦梓含笑（Ｍｉｃｈｅｌｉａ　ｂａｌａｎｓａｅ）、弯蕊开
口箭（Ｔｕｐｉｓｔｒａ　ｗａｔｔｉｉ）、越南异形木（Ａｌｌｏｍｏｒｐｈｉａ
ｂａｖｉｅｎｓｉｓ）、大叶酸藤子（Ｅｍｂｅｌｉａ　ｓｕｂｃｏｒｉａｃｅａ）、云南
绣球（Ｈｙｄｒａｎｇｅａ　ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）、山香圆（Ｔｕｒｐｉｎｉａ
Ｍｏｎｔａｎａ　ｖａｒ．Ｍｏｎｔａｎａ）、南蛇藤（Ｃｅｌａｓｔｒｕｓ　ｏｒｂｉｃｕ－
ｌａｔｕｓ）、倒 吊 笔 （Ｗｒｉｇｈｔｉａ　ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ）、肋 果 茶
（Ｓｌａｄｅｎｉａ　ｃｅｌａｓｔｒｉｆｏｌｉａ）、黄花倒水莲（Ｐｏｌｙｇａｌａ
１０４３期　　　　　　　　　杨翠先等：２６种滇产植物提取物的体外抗耐药菌作用研究
ｆａｌｌａｘ）（采自云南红河州金平县，由昆明植物研究
所税玉民副研究员鉴定）。
１．３培养基
Ｍ－Ｈ氏琼脂培养基（Ｍｕｅｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎ’ｓ　Ａｇａｒ）
用于抗金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞
菌试验；沙氏琼脂培养基（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ’ｓ　Ａｇａｒ）用于
抗白色念珠菌试验。
１．４耐药菌株鉴定
耐药菌株分离自本院临床感染性标本，常法增
菌培养。金葡菌株耐药性按抗菌素药敏常规测试方
法（Ｋ－Ｂ纸片法）进行，以 ＣＬＳＩ２００７版（第１７版）
（ＣＬＳＩ，２００７；鲁卫平等，２００６）推荐的头孢西丁药敏
纸片操作方法及判据确认：抑菌圈直径≤１９ｍｍ，判
定为 ＭＲＳＡ，抑菌圈直径≥２０ｍｍ，判定为敏感菌
株ＭＳＳＡ。铜绿假单胞菌耐药菌株为耐亚胺培南铜
绿假 单 胞 菌，其 鉴 定 方 法 和 判 断 标 准，参 考
ＣＬＳＩ２００７版（ＣＬＳＩ，２００７）：抑菌圈直径≥１６ｍｍ，
判断为敏感；抑菌圈直径在１４～１５ｍｍ，判断为中介；
抑菌圈直径≤１３ｍｍ，判断为耐药。白色念珠菌耐药
菌株为耐氟康唑白色念珠菌，其鉴定方法和判断标准
参考ＮＣＣＬＳ认可的纸片扩散法（ＮＣＣＬＳ，２００２）：抑菌
圈直径≥１９ｍｍ，判断为敏感；抑菌圈直径在１５～１８
ｍｍ，判断为中介；抑菌圈直径≤１４ｍｍ，判断为耐药。
１．５耐药菌药敏测试
耐药菌药敏测试按照 ＣＬＳＩ２００７ 版 （ＣＬＳＩ，
２００７）抗生素药敏常规测试方法（纸片法）进行，结果
详见表１。
１．６乙醇提取物的制备
将２６种植物粉碎成粗粉，各称取２５ｇ，用８０％
的乙醇２５０ｍＬ浸泡３次，第１次浸泡７ｄ，第２次和
第３次均浸泡３～４ｄ，过滤，合并滤液，在４０℃以下
用旋转蒸发仪浓缩，回收溶剂，用结晶刀转移至无菌
空安瓿瓶中备用。
１．７药液的制备
测定抑菌圈的药液配制：用电子分析天平称取
提取物各５０ｍｇ，溶于１ｍＬ的二甲基亚砜中，药液
浓度为５０ｍｇ／ｍＬ作为初筛浓度。测定 ＭＩＣ（最低
抑菌浓度）、ＭＢＣ（最低杀细菌浓度）、ＭＦＣ（最低杀
真菌浓度）的药液配制：用电子分析天平称取初筛后
的提取物各８．２ｍｇ，以 Ｍ－Ｈ 肉汤（含３０％二甲基
亚砜助溶剂）配成浓度为８．２ｍｇ／ｍＬ的溶液作为测
定 ＭＩＣ、ＭＢＣ（ＭＦＣ）用。
１．８菌液的配制
将菌株接种于普通琼脂平板上（白色念珠菌及
其耐药菌株接种于沙氏琼脂培养基中），置于３５℃
恒温烘箱中培养２４ｈ，用接种环将菌株转移至试管
中，加入无菌生理盐水，细菌配成浓度为１．５×１０９
ＣＦＵ／ｍＬ的菌液作初筛用（真菌的初筛菌液浓度为
１．０×１０６　ＣＦＵ／ｍＬ），再稀释成浓度为１０６　ＣＦＵ／ｍＬ
的菌液用于测定 ＭＩＣ（用于测定 ＭＦＣ的菌液浓度
为１．０×１０４　ＣＦＵ／ｍＬ）。
１．９抑菌试验
１．９．１琼脂扩散法测定醇提物的抑菌圈　用无菌棉
签将浓度为１．５×１０９ＣＦＵ／ｍＬ的标准菌液均匀涂
布于 Ｍ－Ｈ 氏琼脂培养基上（抗白色念珠菌试验用
沙氏琼脂培养基），然后用直径为６ｍｍ的无菌圆形
玻璃管打孔，将含有各提取物浓度为５０ｍｇ／ｍＬ的
药液５０μＬ加入孔中，加满为止，不得溢出。再将培
养皿置于３５℃恒温培养箱中培养１８～２４ｈ，取出观
察，用卡尺测量抑菌圈的直径（左国营等，２００５）。
１．９．２ＭＩＣ的测定　根据初筛结果，选择对标准菌
株的抑菌圈直径≥１２ｍｍ的提取物，参考美国临床
实验室标准委员会（ＣＬＳＩ）所公布的标准（ＣＬＳＩ，
２００７），采用微量液基稀释法测定各个样品对不同菌
株的 ＭＩＣ值（细菌用 Ｍ－Ｈ肉汤培养液，真菌用沙氏
液体培养液）。取无菌９６孔平底微量培养板，于每
排１～１２号各孔加入培养液１００μＬ，然后在每排第
２孔加入受试药物１００μＬ，混匀后取出１００μＬ移至
第３孔中，以此类推进行倍比稀释直至第１１孔混匀
后弃掉１００μＬ，使稀释后各孔中的受试药物浓度倍
比减少，最后于２～１２孔中各加入细菌及真菌的菌
悬液１００μＬ，每排第１孔只加培养液作阴性对照，
第１２只加菌液作阳性对照。将培养板置于３５℃恒
温箱中培养１８～２４ｈ观察结果，测定其 ＭＩＣ值。
在黑色背景下肉眼观察，阴性对照孔溶液应清晰透
亮，阳性对照孔菌落生长良好，此时以溶液清晰透亮
的最低浓度孔中的药物浓度为 ＭＩＣ。若实验前药
液与培养液的混合液是浑浊的须经涂片在显微镜下
观察无菌的孔为 ＭＩＣ。
１．９．３ＭＢＣ（ＭＦＣ）的测定　确定 ＭＩＣ后，取 ＭＩＣ
值的前３～５孔的培养物，分别吸取１接种环，转接
种于不含药的已制备好的普通琼脂培养基平板上，
置于３５℃恒温箱培养１８～２４ｈ。用活菌计数法检
查琼脂平板上的菌落，平均数小于５个的最小药物
浓度即为此药的 ＭＢＣ（ＭＦＣ）（ＮＣＣＬＳ，１９９９）。
２０４ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
２　结果
２．１耐药菌株的药敏纸片法
测定结果见表１。
２．２　２６种植物醇提物抑菌圈测定结果
２６种植物醇提物对金黄色葡萄球菌标准菌株
及耐药菌株、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌及白色念珠
菌的抗菌作用通过琼脂打孔法来测定，其抑菌圈结
果见表２。
２．３ＭＩＣ及 ＭＢＣ测定结果
通过抑菌圈结果的筛选，选取抑菌圈直径大于
１２ｍｍ的植物，包括：红花荷、马蹄参、百花贝母兰、
二色大包兰、光序肉实树、绿樟、毒芹、肋果茶、越南
异形木等对其进行ＭＩＣ及ＭＢＣ的测定。其测定结
果见表３，４。
表１　３种临床分离菌株对抗生素的药敏试验结果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ－ｄｒｕｇ　ｔｅｓｔ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　ａｇａｉｎｓｔ　３ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｆｒｏｍ　ｃｌｉｎｉｃａｌ
菌种
Ｓｔｒａｉｎ
菌株编号
Ｎｏ．
耐药
Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ
中介
Ｍｅｓｏｍｅｒｉｓｍ
敏感
Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ
金黄色葡萄球菌
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ＭＲＳＡ００８ 青霉素、苯唑西林、克林霉素、氨苄西林、先锋霉素 Ｖ、头
孢呋辛、利福平
加替沙星 万古霉素、利萘唑胺
ａｕｒｅｕｓ ＭＲＳＡ０９８ 青霉素、苯唑西林、头孢哌酮／舒巴坦、左氧氟沙星、克林
霉素、阿奇霉素
庆大霉素、青
霉素
万古霉素、磷霉素、
利萘唑胺
ＭＲＳＡ１２８ 青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛、左氧
氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、 ／
万古霉素、磷霉素、
利萘唑胺
ＭＲＳＡ１４４ 青霉素、苯唑西林、氨苄西林、阿奇霉素、克林霉素、克拉
霉素、头孢唑啉、头孢硫咪、头孢呋辛 ／
万古霉素、磷霉素、
利萘唑胺
ＭＲＳＡ１６７ 青霉素、氨苄西林、苯唑西林、克拉霉素、克林霉素、头孢
呋辛、阿奇霉素 ／
万古霉素、磷霉素、
利萘唑胺
ＭＲＳＡ３２１ 青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛、左氧
氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、 ／
万古霉素、磷霉素、
利萘唑胺
铜绿假单胞菌
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ＩＰＲＡ１２０ 头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星、环丙沙星、
哌拉西林、亚胺培南
头孢哌酮／舒
巴坦
左氧 氟 沙 星、环 丙
沙星
ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＩＰＲＡ１３２ 亚胺培南、哌拉西林、头孢哌酮、头孢噻肟、利福霉素、左
氧氟沙星、阿奇霉素
头孢哌酮／舒
巴坦
多西环素
白色念珠菌
Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ ８８５
氟康唑 未测定 未测定
８４２ 氟康唑 未测定 未测定
３　结论与讨论
本研究的实验菌株均为临床分离得到，且由临
床微生物实验通过ＣＬＳＩ２００７版推荐的操作方法及
判断依据对其进行专业鉴定。由表１可知，所测的
具有 ＭＲＳＡ特性的耐药菌株（ＭＲＳＡ００８、０９８、１２８、
１４４、１６７、３２１）除对万古霉素、利奈唑胺、磷霉素敏感
外，对 其 它 抗 菌 素 均 具 有 耐 药 性。ＩＰＲＡ１２０、
ＩＰＲＡ１３２菌株为耐亚胺培南的铜绿假单胞菌；８８５、
８４２号为耐氟康唑的白色念珠菌，其药敏实验因实
验条件限制，未测定对其中介和敏感的抗菌素。
本实验主要针对滇产植物的抗菌活性进行研
究。耐药菌株的出现是感染性疾病的一大突出问
题，也是我们拟解决的一大难题。越来越多的研究
者把目标转向传统中草药等植物资源，为扩大抗耐
药菌植物资源范围（Ｚｕｏ等，２００８；左国营等，２００５；
冯筱巍等，２０１１），我们筛选了２６种滇东南产植物进
行抗耐药菌活性实验。
本实验结果发现部分植物的提取物对革兰氏阳
性菌即金葡菌有较强的抑制作用，对革兰氏阴性菌
及真菌的抑制作用较弱，表现出广谱抗菌作用；其对
耐药菌也表现出一定的抑制作用。关于红花荷的化
学成分和药理作用至今尚未见报道，提示我们可以
进一步研究其化学成分及药理作用之间的相互关
系。二色大包兰和百花贝母兰均为兰科植物，文献
未报道其化学成分和药理作用，但李墅等（２００５）指
出兰科植物主要为萜类、黄酮类、菲类、联苯类等化
学成分，其抗菌方面的报道主要为二萜类及菲类成
分，提示其抗菌的主要有效成分可能为萜类、菲类及
黄酮类化合物，为下一步工作提供实验依据。马蹄
参为中国特有五加科马蹄参属单种植物，严小红等
（２００４）报道马蹄参中含有齐墩果酸、熊果酸、槲皮素
苷、鞣花酸等化学成分，未见其药理作用特别是抗菌
方面的报道。而本实验研究发现马蹄参对金葡菌及
ＭＲＳＡ有较强的抑制作用，我们正对其抗金葡菌特
３０４３期　　　　　　　　　杨翠先等：２６种滇产植物提取物的体外抗耐药菌作用研究
表２　２６种植物体外抑菌试验的抑菌圈直径
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｚｏｎｅｓ　ｄｉａｍｅｔｅｒｓ　ｏｆ　２６ｐｌａｎｔｓ　ｏｆ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ（ｍｍ）
种名Ｎａｍｅ　ｏｆ　ｓｐｅｃｉｅｓ　 ＡＴＣＣ２５９２３ ＭＲＳＡ００８ ＭＲＳＡ１２８ ＡＴＣＣ２７８５３ ＡＴＣＣ２５９２２ ＡＴＣＣＹ０１０９
红花荷Ｒｈｏｄｏｌｅｉａ　ｐａｒｖｉｐｅｔａｌａ　 １５　 １２　 １６　 １２　 １２　 ９
马蹄参Ｄｉｐｌｏｐａｎａｘ　ｓｔａｃｈｙａｎｔｈｕｓ　 １５　 １３　 １５　 １２　 １１　 ８
百花贝母兰Ｃｏｅｌｏｇｙｎｅ　ｌｅｕｃａｎｔｈａ　 １５　 ８　 １３　 ９　 ７　 ９
光序肉实树Ｓａｒｃｏｓｐｅｒｍａ　ｋａｃｈｉｎｅｎｓｅ　 １４　 １２　 １１　 １２　 １２　 １０
二色大包兰Ｓｕｎｉｐｉａ　ｂｉｃｏｌｏｒ　 １４　 ７　 １２ － １０　 １０
绿樟Ｍｅｌｉｏｓｍａ　ｓｑｕｉｍｕｌａｔａ　 １３　 ９　 １１　 １０　 １０　 １０
肋果茶Ｓｌａｄｅｎｉａ　ｃｅｌａｓｔｒｉｆｏｌｉａ　 １３　 １０　 １０　 １３　 １０　 １５
毒芹Ｃｉｃｕｔａ　ｖｉｒｏｓａ　 １２　 ７　 ９　 ７　 １２ －
越南异形木Ａｌｌｏｍｏｒｐｈｉａ　ｂａｖｉｅｎｓｉｓ　 １２　 ８　 １１　 １０　 １０　 ８
滇桂木莲Ｍａｎｇｌｉｅｔｉａ　ｆｏｒｒｅｓｔｉｉ　 １１ － ８　 ６ － －
大八角Ｉｌｌｉｃｉｕｍ　ｍａｊｕｓ　 １１ － ８ － １１ －
弯蕊开口箭Ｔｕｐｉｓｔｒａ　ｗａｔｔｉｉ　 １１　 ８　 ７　 ８　 ９ －
云南绣球Ｈｙｄｒａｎｇｅａ　ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ　 １１ － ９　 ８　 ８　 １１
山香圆Ｔｕｒｐｉｎｉａ　Ｍｏｎｔａｎａ　 １１　 ７　 １０　 １１　 ８　 ７
草蔻Ａｌｐｉｎｉａｅ　ｋａｔｓｕｍａｄａｉ　 １０ － ９　 １０　 ９　 ８
滇丁香Ｌｕｃｕｌｉａ　ｐｉｎｃｉａｎａ　 １０　 ７　 ７　 ９　 １１　 ８
黑面神Ｂｒｅｙｎｉａ　ｆｒｕｔｉｃｏｓａ　 １０　 ８　 ８　 １１　 ７　 ８
乌敛莓Ｃａｙｒａｔｉａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　 １０　 ９　 １０　 ９　 １０　 １０
南蛇藤Ｃｅｌａｓｔｒｕｓ？ｏｒｂｉｃｕｌａｔｕｓ　 ９　 １０　 ９　 １１　 １１　 ７
安息香Ｂｅｎｚｏｉｎｕｍ　ｓｔｙｒａｃｉｓ　 ８　 ７ － １０ － －
大叶酸藤子Ｅｍｂｅｌｉａ　ｓｕｂｃｏｒｉａｃｅａ　 ８　 ８　 ８　 ９　 １１　 ７
苦梓含笑Ｍｉｃｈｅｌｉａ　ｂａｌａｎｓａｅ　 ７ － － － １０ －
倒吊笔Ｗｒｉｇｈｔｉａ　ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ － － ９ － ９　 １０
盘叶柏那参Ｂｒａｓｓａｉｏｐｓｉｓ　ｆａｔｓｉｏｉｄｅｓ － － － ７　 １０ －
大叶冷水花Ｐｉｌｅａ　ｍａｒｔｉｎｉ － － － － １１ －
黄花倒水莲Ｐｏｌｙｇａｌａ　ｆａｌｌａｘ － － － － １０　 ９
　注：“－”表示提取物对菌株无抑制作用；ＡＴＣＣ２５９２３，为标准金黄色葡萄球菌；ＡＴＣＣ２７８５３，为标准大肠埃希菌；ＡＴＣＣ２５９２２，为标准铜绿假
单胞菌；ＡＴＣＣＹ０１０９，为标准白色念珠菌；ＭＲＳＡ，为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；所有样本均重复测定３次。下同。
　“－”：ｎｏ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ＡＴＣＣ２５９２３：Ｓ．ａｕｒｅｕｓ；ＡＴＣＣ２７８５３：Ｅ．ｃｏｌｉ；ＡＴＣＣ２５９２２：Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；ＡＴＣＣＹ０１０９：Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ；ＭＲＳＡ：Ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅ－
ｓｉｓｔａｎｔ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ．Ａｌ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｔｅｓｔｅｄ　ｉｎ　ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
表３　９种植物对金葡菌及其耐药菌的 ＭＩＣ／ＭＢＣ值
Ｔａｂｌｅ　３　Ｔｈｅ　ＭＩＣ　ａｎｄ　ＭＢＣ　ｏｆ　９ｐｌａｎｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ａｎｄ　ＭＲＳＡ　ｓｔｒａｉｎｓ（ｍｇ／Ｌ）
种名Ｎａｍｅ　ｏｆ　ｓｐｅｃｉｅｓ　 ＭＩＣ／ＭＢＣ　ＡＴＣＣ２５９２３ ＭＲＳＡ００８ ＭＲＳＡ０９８ ＭＲＳＡ１２８ ＭＲＳＡ１４４ ＭＲＳＡ１６７ ＭＲＳＡ３２１
红花荷Ｒｈｏｄｏｌｅｉａ　ｐａｒｖｉｐｅｔａｌａ　 ＭＩＣ　 ５１２　 １０２４　 ５１２　 ５１２　 ５１２　 ５１２　 ５１２
ＭＢＣ　 １０２４ ＞２０４８ ＞２０４８　 ２０４８　 ２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
马蹄参Ｄｉｐｌｏｐａｎａｘ　ｓｔａｃｈｙａｎｔｈｕｓ　 ＭＩＣ　 ５１２　 ５１２　 ５１２　 １０２４　 ５１２　 ５１２　 ５１２
ＭＢＣ　 ２０４８　 ２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８　 ２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
百花贝母兰Ｃｏｅｌｏｇｙｎｅ　ｌｅｕｃａｎｔｈａ　 ＭＩＣ　 ５１２　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４
ＭＢＣ　 １０２４ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
光序肉实树Ｓａｒｃｏｓｐｅｒｍａ　ｋａｃｈｉｎｅｎｓｅ　 ＭＩＣ　 ２５６　 ５１２　 ５１２　 １０２４　 ５１２　 ５１２　 ５１２
ＭＢＣ　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８　 ２０４８ ＞２０４８
二色大包兰Ｓｕｎｉｐｉａ　ｂｉｃｏｌｏｒ　 ＭＩＣ　 ５１２　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １５２　 １０２４　 ５１２
ＭＢＣ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
绿樟Ｍｅｌｉｏｓｍａ　ｓｑｕｉｍｕｌａｔａ　 ＭＩＣ　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８　 １０２４　 ２０４８　 ２０４８　 １０２４
ＭＢＣ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
肋果茶Ｓｌａｄｅｎｉａ　ｃｅｌａｓｔｒｉｆｏｌｉａ　 ＭＩＣ　 １０２４　 ２０４８　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４
ＭＢＣ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
毒芹Ｃｉｃｕｔａ　ｖｉｒｏｓａ　 ＭＩＣ　 １０２４　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８
ＭＢＣ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
越南异形木Ａｌｌｏｍｏｒｐｈｉａ　ｂａｖｉｅｎｓｉｓ　 ＭＩＣ　 １０２４　 ２０４８　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４　 １０２４
ＭＢＣ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
４０４ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３２卷
表４　对铜绿假单胞菌和白色念珠菌作用的植物的 ＭＩＣ／ＭＢＣ值
Ｔａｂｌｅ　４　Ｔｈｅ　ＭＩＣ　ａｎｄ　ＭＢＣ／ＭＦＣ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄ　Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ　ｓｔｒａｉｎｓ（ｍｇ／Ｌ）
铜绿假单胞菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ 白色念珠菌Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ
ＡＴＣＣ２７８５３ ＩＰＲＡ１２０＊ ＩＰＲＡ１３２ ＡＴＣＣＹ０１０９　 ８８５　 ８４２
肋果茶 ＭＩＣ　 ２０４８　 １０２４　 ５１２　 ２０４８　 ２０４８　 ２０４８
Ｓｌａｄｅｎｉａ　ｃｅｌａｓｔｒｉｆｏｌｉａ　 ＭＢＣ（ＭＦＣ） ＞２０４８　 ２０４８　 ２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８ ＞２０４８
　＊ＩＰＲＡ１２０，ＩＰＲＡ１３２为耐亚胺培南的铜绿假单胞菌；８８５，８４２为耐氟康唑的白色念珠菌。
　＊ＩＰＲＡ１２０，ＩＰＲＡ１３２，Ｉｍｉｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；８８５，８４２，Ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ．
别是 ＭＲＳＡ方面进行深入研究。实验还发现肋果
茶具有广谱抗菌作用，不仅对革兰氏阳性菌有作用，
对革兰氏阴性菌和真菌都有一定程度的抑制作用，
有文献报道（何蓉等，２０１０）肋果茶含有黄烷醇类、萜
类等化合物，且其叶片、树皮和根皮具有杀虫活性，
提示其杀虫活性成分可能也有抑菌作用，需深入研
究。由实验可知，作为一种植物生长的防御机制，许
多植物次生代谢产物具有潜在的抗微生物感染的活
性，通过深入研究可望为抗病原菌感染药物的开发
寻找新的药用资源。
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Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ　ｆｏｒ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄｓ．２００２．Ｍｉ－
ｎｕｔｅｓ　ＵＳ　ＮＣＣＬＳ　ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｓｕｂ　ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ　ｍｅｅｔ－
ｉｎｇ　ｏｎ　ｉｎｔｅｒｐｒｅｔｉｖｅ　ｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｓ［Ｓ］．Ｗａｙｎｅ，ＰＡ：ＮＣＣＬＳ
Ｗａｎｇ　Ｈ（王航），Ｍｅｎｇ　Ｃ（孟春），Ｓｈｉ　ＸＡ（石贤爱），ｅｔ　ａｌ．２００６．
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｆｏｒ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｈｅｒｂａｌ　ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃ－
ｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅｉｒ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
（抗菌中草药的筛选及其有效成分的分离提取和初步鉴定）
［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｐｈａｒｍ（中国药业），１５（２０）：１５－１６
Ｗｅｎ　ＸＭ，Ｒｅｎ　Ｎ，Ｘｕ　ＸＨ，ｅｔ　ａｌ．２００２．Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅ－
ｒｉａｌ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｎｏｓｏｃｏｍｉａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｐａｔｈｏｇｅｎｓ　ｆｒｏｍ　ｎａｔｉｏｎａｌ
ｎｏｓｏｃｏｍｉａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｓｕｒｖｅｉｌａｎｃｅ　ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｎｏｓｏｃｏｍｉ－
ｏｌ，１２（４）：２４１－２４４
Ｙａｎ　ＸＨ（严小红），Ｇｕｏ　ＹＷ（郭跃伟）．２００４．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｄｉｐｌｏｐａｎａｘ　ｓｔａｃｈｙａｔｈｕｓ（马蹄参化
学成分的研究）［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｔｒａｄ　Ｈｅｒｂ　Ｄｒｕｇ（中草药），３５（２）：
１２５－１２７
Ｚｕｏ　ＧＹ（左国营），Ｈａｎ　Ｊ（韩峻），Ｙｕ　Ｗ（余巍），ｅｔ　ａｌ．２００５．Ａｎｔｉ－
ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆ　４７ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｈｅｒｂａｌ
ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ（４７种中草药提取物的体外抗菌活性筛选研
究）［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｐｈａｒｍ（中国药业），１２（１０）：７９８－７９９
Ｚｕｏ　ＧＹ，Ｗａｎｇ　ＧＣ，Ｚｈａｏ　ＹＢ，ｅｔ　ａｌ．２００８．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ　ｆｏｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ａｇａｉｎｓｔ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　ｍｅｔｈｉｃｉｌ－
ｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ）［Ｊ］．Ｊ　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒ－
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