全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 25(3)：264—268 2005年 5月
石蒜属植物多糖组成的分析比较研究
吴 彦1一，周守标 ，万 安2
(1．安庆师范学院生命科学系．安徽安庆 246011；2．安徽师范大学生命科学院，安徽芜湖 241000)
摘 要：对五种石蒜属植物：安徽石蒜、中国石蒜、忽地笑、换锦花、石蒜多糖的结构组成进行了对比分析。结
果表明，安徽石蒜多糖与其他四种植物多糖差异较大，而忽地笑多糖和石蒜多糖相似、中国石蒜多糖和换锦花
多糖相似。该研究为探讨石蒜属种间亲缘关系提供实验依据。
关键词：石蒜属；植物多糖；单糖组成；对比分析
中图分类号：Q946．3 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2005)03—0264—05
AnalVSlS ancI C0m Darls0n ot D0lVSaCCnrlcIe ● 一 ● 1 ● n 一 ■ ● 1
content in L ycoris
WU Yan1，2．ZHOU Shou—biaoe．W AN An2
(1．The Life Science Dept．ofAnqing Normal Colege，Anqing 2,16011，China：2．College
0，Life Science．．4nhui Normal University．Wuhu 2 1 1000，China)
Abstract：The plant of Lycoris Herb．has great economic value．In this article，analysis and comparison of pol—
ysaccharides content had been studied in five plants：L．radiata，L．anhuie,tsis，L．chinensis，L．aureea，and L．
sprengeri．The results showed similarities between L．aurea and L．radiata；there was another similarity be—
tween L．chinensis and L．sprengeri；L．anhuiensis showed an outlying sacch ride profile．It can provide experi—
mental basis for construction upon taxonomic groupings of polysacchride in Lycoris Herb．
Key words：Lycoris Herb．；plant polysacchride~content of sacchride；analysis and comparison
石蒜属(Lycoris Herb．)植物具有很高的经济
价值。因其丰富的花型和色彩，现已成为世界著名
球根花卉。在我国民间自古即作为药用植物而被利
用。石蒜属植物在中国有 15种(季春峰，2002)，占
全世界石蒜属的 75％，故又被称作“中国郁金香”。
目前石蒜属研究主要集中于杂交育种和药用开发
上，应用和开发力度十分有限，还有巨大的开发利用
潜力。尽管国内外很多学者对石蒜属已经做了大量
的研究工作，但对石蒜属植物生物大分子方面的研
究还不多(聂刘旺等，2000)，尤其多糖类物质的研究
较少。本文对五种石蒜属植物：安徽石蒜、中国石
蒜、忽地笑、换锦花、石蒜多糖进行了分离和提纯，并
就其结构组成进行对比分析。研究结果为石蒜属植
物多糖的生物活性、药用价值开发利用和探讨石蒜
属植物种间亲缘关系提供实验依据。
1 材料试剂与设备
1．1材料
五种石蒜属植物的材料来源见表 1
1．2试剂
浓硫酸，氢氧化钡，碳酸钡，标准单糖：【)I葡萄糖、
【)I半乳糖、【)I木糖、【)I甘露糖、L_鼠李糖，吡啶，羟胺盐
酸盐，苯甲酰氯，氯仿，盐酸，无水碳酸钠。
1．3设备
电热恒温水浴锅 ，电热鼓风干燥箱，离心机，布
收稿日期：200．1—05—3l 修订 日期：200一卜07—20
基金项目：安徽省自然科学基金资助课题(000 124l5)；安徽省高等学校自然科学研究项 目(2OO5l
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3期 吴 彦等：石蒜属植物多糖组成的分析比较研究 265
氏漏斗，真空泵，透析袋，红外光谱仪(美国 Nieolet
公司AVATAR360型)，高效液相色谱仪(日本岛津
LC一10A)
2 实验方法
2．1石蒜属植物多糖的提纯工艺流程
新鲜植物一烘干、粉碎一热水浸提一抽滤去除
残渣一淀粉酶处理一浓缩一离心去杂质一浓缩液醇
析过夜一粗多糖一复溶一去脂一脱蛋白一脱色一离
子交换柱层析纯化一去离子一沉淀、洗涤、干燥一多
糖纯品。
操作要点：(1)粉碎：先采用组织捣碎机捣碎，再
用超声波粉碎细胞，可提高多糖得率。(2)淀粉酶处
理：由于石蒜属植物尤其鳞茎中含淀粉量较多，在热
水浸提过程中，部分可溶性淀粉也随多糖被提取出
来，需进一步用酶法去除。(3)醇析：4倍体积 95
乙醇沉淀，放置 4℃条件下静置过夜。(4)离心分
离：3 000 r／rain离心 20 rain。(5)去脂：加入乙醚震
摇 10 min，倒入分液漏斗静置分液，取下层糖液。
重复3次。(6)脱蛋白：加Sevag试剂(正丁醇：氯仿
一 1：4)充分震摇 20 rain后除去水层与氯仿层交界
外的变性蛋白质，取上层糖液。重复 3次。(7)柱层
析纯化：采用 DEAE一纤维素离子交换柱层析法。
表 1 材料来源及凭证标本
Table 2 Origin of samples and vouchers
2．2多糖分子构型分析
红外光谱分析，KBr压片法(李道荣等，2002)。
2．3多糖的单糖组成分析
高效液相色谱分析一糖肟全苯甲酸酯紫外标记
法(张憔杰，1987)。
2．3．1多糖样品水解 称取纯多糖样品 100 mg，用
0．5 mol／L硫酸 5 mL溶解，密封，水浴煮沸 5 h，冷
却。以氢氧化钡中和，pH值接近 7，再用碳酸钡中
和至中性。过滤，取清液，减压浓缩至干，置于干燥
器内过夜(盛家荣，1999)。
2．3．2糖肟全苯甲酸酯衍生物的制备 取上述经水
解后浓缩至干的单糖样品，加入 1O mL吡啶溶液充
分溶解。取0．1 mL单糖的吡啶溶液置于 5 mL具
磨口塞试管中，再加入 0．1 mL羟胺盐酸盐吡啶溶
液(浓度为 10 mg／mL)，摇匀后，在 8O℃水浴中加
热 10 min，冷却后加入 0．1 mL苯甲酰氯，再在 8O
℃水浴中加热60 rain，冷却后，加入2 mL氯仿，用3
×1．5 mL 2 mol／L盐酸洗涤，再用少量水洗后，以
无水碳酸钠干燥，取2O L氯仿溶液进行色谱分析。
2．3．3标准单糖的糖肟全苯甲酸酯衍生物的制备：
分别称取标准单糖：【)葡萄糖、【)半乳糖、【)木
糖、【)甘露糖、L．鼠李糖。同上述酸解后的糖样处
理，待用。
2．3．4高效液相色谱分析条件： 高效液相色谱仪，
紫外鉴定器(波长 254 rim)固定相：ODS；流动相：甲
醇 ：水一55：45(甲醇为色谱纯)；流速：0．8 mE／
min；操作温度：室温。
3 结果
3．1红外光谱对比分析
由图 1～5表明：五种植物多糖的红外图谱在 3
420 cm 和 1 060 cm 左右都有两吸收峰，它们分别
代表了糖类O—H的伸缩振动和变角振动；在 2 920
cm ，1 250 cm 左右有两吸收峰，分别代表了糖类
cH的伸缩振动和变角振动(谭周进，2002)；忽地
笑、石蒜、中国石蒜、换锦花中的多糖在 81O～839
cm 处出现了a一【)半乳糖吡喃糖的特征吸收峰(霍
光华，2002；张憔杰，1987)，安徽石蒜则没有；由谱图
可知，五种石蒜属植物中提取的物质具有糖类的一
般特征吸收峰，且忽地笑、石蒜、中国石蒜、换锦花多
糖其单糖组成有半乳糖。
3．2高效液相色谱对E匕分析
高效液相色谱分析一糖肟全苯甲酸酯紫外标记
法用紫外鉴定器检测，灵敏度为 6×10 too!(以葡
萄糖为例)，较一般的高效液相色谱分析示差折射鉴
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266 广 西 植 物 25卷
4OO3 30C0 2OOO 10120
Wavenurbers(crlq’)
图 1 安徽石蒜多糖的红外图谱
Fig．1 IR spectrum of polysacchride in L．anhuiensis
1∞
95
90
85
80
75
妄∞70
∞
56
50
45
40
35
30
4ooo 3ooo 20oo lOOO
Wavenunbers(crlq’’)
图 3 石蒜多糖的红外图谱
Fig．3 IR spectrum of polysacchride in L．radiata
Wavenumbers(cm’)
图 5 换锦花多糖的红外图谱
Fig．5 IR spectrum of polysacchride in L．sprengeri
定器测定单糖，灵敏度提高约 500～1 000倍。
糖衍生化后不仅分析灵敏度有所提高，而且对
难分离的若干常见糖的分离度有明显改善，结构相
似的葡萄糖、甘露糖和半乳糖以及麦芽糖和纤维二
糖均能有效地分离。本方法特别适用于生物样品中
微量糖的分离和测定(张憔杰，1987)。
由图6可知，按出峰时间先后顺序依次为：吡啶
溶剂峰、L一鼠李糖、【)I木糖、【)I甘露糖、【)I葡萄糖 、r)I
半乳糖。对比标准单糖可知石蒜属五种植物多糖中
的单糖组成和比例如表 2。
Wavenurrbers(crlq。‘)
图 2 忽地笑多糖的红外图谱
Fig．2 IR spectrum of polysacchride in L．aurea
图 4 中国石蒜多糖的红外图谱
Fig．4 IR spectrum of polysacchride in L．chinensis
毫伏
1 01 70．6
图 6 标准单糖的高效液相色谱图
Fig．6 HPLC of the standard sacchride
4 结论
4．1详细比较五种植物多糖的红外图谱吸收峰
由红外图谱可知，五种石蒜属植物中提取的物
质具有糖类的一般特征吸收峰，证明为糖类物质。
实验图谱表明安徽石蒜多糖与其他几种多糖对比差
距较大。忽地笑和石蒜多糖在 3 430 cm。、1 740
cm 。
、 1 635 cm一、1 390 cm～、1 255 cm一、1 050 cm。
左右处均有相似吸收峰，在 2 934．85 cm一、814．79
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3期 吴 彦等：石蒜属植物多糖组成的分析比较研究 267
多糖含量Polysaccharide content(％)
单糖组成 Monosaccharide compositim
单糖比例 Monosaccharide ratio
5．28 8．06 7．8O 5．12 7．55
葡萄糖 木糖、葡萄糖、半乳糖 木糖、葡萄糖、半乳糖 葡萄糖、半乳糖 葡萄糖、半乳糖
毫伏
1 01 70．6
图 7 安徽石蒜多糖的高效液相色谱图
Fig．7 HPLC of polysacchride in L。anhuiensis
毫伏
101 70．6
图 9 石蒜多糖的高效液相色谱图
Fig．9 HPI C of polysacchride in L．radiata
毫伏
101 781
舯
图 11 换锦花多糖的高效液相色谱图
Fig．1 1 HPLC of polysacchride in L．sprengeri
cm- 两处则吸收峰完全一样，表明两者多糖具有极
为相似的官能团组成(魏玉西，1998)。中国石蒜和
图 8 忽地笑多糖的高效液相色谱图
Fig．8 HPLC of polysacchride in L．aurea
毫伏
1 01 71．8
4中
图 10 中国石蒜多糖的高效液相色谱图
Fig．10 HPLC of polysacchride in L．chinensis
换锦花多糖在 3 400 cm- 、2 925 cm。、1 630 cm-。、
1 080 cm～、610 cm。左右处均有相似的吸收峰，在
1 736．56 cm～、1 383．21 cm～、1 244．95 cm～、
819．91 cm- 四处则具有相同的吸收峰，表明两者具
有极为相似的官能团组成。两者多糖差距比忽地笑
多糖和石蒜多糖之间要小。
4．2由高效液相色谱分析可知。安徽石蒜多糖同其
他四种差距较大
同是多糖，其单糖组成为葡萄糖，其余四种为杂
多糖；忽地笑多糖和石蒜多糖一级结构单糖组成相
同，为木糖、葡萄糖、半乳糖；而中国石蒜多糖和换锦
花多糖一级结构单糖组成相同，为葡萄糖、半乳糖。
4．3红外光谱分析和高效液相色谱分析的结果相吻合
也是安徽石蒜多糖差别大一些，而忽地笑和石
n=二=二=== fn
： Nn ¨ ． _}
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268 广 西 植 物 25卷
蒜多糖相似、中国石蒜和换锦花多糖相似度更大。
4．4多糖的组成
也就是多糖一级结构对其生物活性有一定的影
响，而多糖的高级结构更有赖于一级结构的排步(黄
芳，1998)。与基因的遗传密码类似，可能存在多糖
密码，即所谓的糖码，生物多糖可能按照一定的规则
排列组合并相互识别。石蒜属中不同植物的多糖结
构组成不同，会导致不同的生物活性和药用价值(廖
代伟等，1997)。另外，多糖结构组成的差异可为探
讨石蒜属种间亲缘关系提供实验证据。
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