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Comparison of total flavonoids content in 14 species of Camellia sect.Chrysantha

十四种金花茶组植物叶总黄酮含量比较



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 31(2):281— 284 2011年 3月
DOI:10.3969/j.issn.1000—3142.201 1.03.028
十四种金花茶组植物叶总黄酮含量比较
黄兴贤1,2,邹 蓉2,胡兴华2,韦 霄2,
(1.广西师范大学生命科学学院,广西桂林541o。4;2. 篝 毳
唐 辉2,漆小雪2
广西植物研究所 ,广西 桂林 541006)
摘 要 :金花茶叶含有丰富的黄酮类化合物。以 7O 乙醇为提取溶剂 ,对 14种金花茶叶中的黄酮进行超声
波提取 ,并以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法于 273 nm 处测定吸光度,得出各种金花茶 叶总黄酮 的含量
并进行了比较。结 果 表 明:不 同种 金 花茶 叶 黄酮 的含量 差 异较 大 ,平 果金 花 茶 中新 叶 的 总黄 酮 含量
(22.011 )最高 ,而东兴金花茶中一年叶龄叶子总黄酮含量(1.518%)最低 ;同种而不同叶龄的金花茶叶总黄
酮含量变化较大。新叶的总黄酮含量较一年生叶和二年生叶的含量高。平果金花茶和柠檬黄金花茶叶中黄
酮含量较高,具有潜在的研究与开发价值。
关键词:金花茶组 ;超声波提取 ;紫外分光光度法;不同叶龄;总黄酮 ;含量测定
中图分类号:Q946 文献标识码:A 文章编号:1000—3142(2011)02—0281—04
Comparison of total flavonoids content in 1 4
species of Camellia sect.Chrysantha
HUANG Xing-Xian 一,ZOU Rong2,HU Xing-Hua2,
WEI Xiao2,TANG Huie,QI Xiao-Xue2
(1.Colege of Li Sience,Guangxi Normol University,Guilin 541004,China;2.Cmangxi Institute of Botany,
Guangxi Zhuang Autonomous Region and the Chinese Academy of Sciences,Guilin 541006,China)
Abstract:There are rich flavonoids in leaves of Camellia sect.Chrysantha.The total flavonoids content in leaves of 14
species of Camelia sect.Chrysantha were extracted using 70 ethanol as extracting solvent by ultrasonic wave and were
determined by ultraviolet spectrophotometry in this study。with rutin as a standard sample at 273nm.The content differ—
ences among species were analyzed.The results showed that the total flavonoids content in new leaves of C pingguoensis
(22.011 )was highest and the lowest was the one-year-old leaves of C.tunghinensis(1.518 ).There were significant
differences of the total flavonoids in different leaf ages of the same species.The total flavonoids content in new leaves is
higher than that in one-year-old or two-year-old leaves.C.pingguoensis and C.1imonia had the potential value of re—
search and exploit witb higher total flavonoids content.
Key words:Camellia sect.Chrysantha;ultrasonic extraction;ultraviolet spectrophotometry;different leaf age;total fla—
vonoids;content determination
金花茶组 (Camellia sect.Chrysantha)植物(张
宏达 ,1979)属山茶科 山茶属常绿灌木或小乔木(张
宏达等,1998),是世界上著名 的观赏植物(韦霄等 ,
2005)。金花茶是金花茶组植物的统称。金花茶的
收稿 日期 :2O1O一09 25 修 回 日期 :2O11-01-27
基金项目:国家自然科学基金(31040014);广西留学回国人员科学基金(桂科基 0575008);广西科技攻关项 目(桂科攻 0992003B-36);中国科学院知
识创新工程重要方向项 目(K x2一Yw o913)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(31040014);Natural Science Foundation
for the Returned Scholars of Guangxi(0575008);Key Technologies Research and Development Program of Guangxi(0992003Pr36);Knowledge Innovation
Project of Chinese Academy of Sciences(KSCX2一YW一 O913)f
作者简介:黄兴贤(1982),男,广西平南人,硕士,主要从事经济植物生理生化研究 ,(Email)gghbhxx@126.corn。
282 广 西 植 物 31卷
花黄色,形态美观 ,具有极高的观赏价值 ,被誉为“茶
族皇后”和植物界的“大熊猫”(梁盛业 ,1993;宾晓芸
等,2005)。金花茶富含多种重要保健价值的微量元
素,具有清热解毒 ,利尿利湿等功效,常用于咽喉炎 、
痢疾、水肿 、高血压 、尿路感染 、预防肿瘤等疾病的治
疗 。近年来的动物学实验研究表 明,金花茶叶的水
浸出物具有降血糖、降血脂、抑制肿瘤生长、提高机
体免疫能力等多种生理功能 ,是一种 十分优 良的功
能性食品原料 (杨宏等,2005)。植物类黄酮在植物
中分布广泛 ,随着研究的深入 ,黄酮类成分在医药领
域 的应用取得 了良好 的社会效益和经济效益 ,如银
杏黄酮、葛根黄酮在 医药领域的广泛应用 (王德伟
等,2006;李大枝等,2008;张宁等 ,2003)。金花茶组
植物中普通金 花茶 (Camellia nitidssima)、凹脉金
花茶(C.impressinervis)、毛瓣金花茶(C.pubipeta—
ta)、显脉金花茶 (C.euphlebia)和平果 金花茶 (C.
pingguoensis)的叶黄 酮 的提 取 已有 报道 (陈全斌
等,2005;黄永林等 ,2009),但其它种类还未见相关
报道。本文对 14种不同叶龄 的金花茶组植物叶总
黄酮的含量进行 比较研究 ,旨在探明不 同种类金花
茶黄酮含量的差别,为进一步开发利用金花茶组植
物资源提供理论基础。
1 材料
1.1植物材 料
采 自广西植物研究所金花茶园不同种类金花茶
成年植株,经广西植物研究所赵瑞峰副研究员鉴定
为:弄岗金花茶(C.zo”gg& gens s)、平果金花茶、小
果金花茶 (C.microcarpa)、普通 金花茶、凹脉金花
茶 、显脉金花茶、小瓣金花茶 (C.parvipetala)、柠檬
黄金花 茶 (C.1imonia)、毛瓣金 花茶 、毛籽 金 花茶
(C.ptilosperma)、东兴金花茶(C.tunghinensis)、直
脉金花茶 (C.multipetala)、顶生金 花茶 (C.ping—
guoensis var.terminalis)、龙 州 金 花 茶 (C.1ong—
zhouensis)。
1.2仪器与试剂
TU一1901紫外分光光度计 ;微型高速万能试样
粉碎机 ;电热恒温水浴锅 ;真空干燥箱;JY92—2D超
声植物细胞粉碎机 ;电子天平。芦丁对照品(购 自中
国药 品生物制品检定所);亚硝酸钠、硝酸铝 、氢氧化
钠 、三氯化铝、无水乙醇等均为分析纯试剂。
2 方法
2.1提取方法
参照相关文献 (韦璐等,2007;胡文波等 ,2008;
李大枝等,2008),通过单 因素和正交实验对超声波
提取金花茶黄酮的工艺进行研究,探讨溶剂浓度 、料
液 比、提取时间及超声波功率这 四个影响因素,确定
了金花茶黄酮的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为
7O ,料液比为 1:60,处理时间为 35 rain,超声波
功率为 600 W。
2.2供试液的制备
对照品溶液的制备 :精密称取在 120。C下干燥
至恒重的芦 丁对照 品 20.0 mg置 100 mL容量瓶
中,加 7O 乙醇 60 mL置水浴上微热使溶解 ,放冷
至室温,加 7O 乙醇至刻度 ,摇匀 ,即得 0.2 mg/mL
对照品溶液 ,待用。
供试品溶液的制备 :称取金花茶叶末 1.O0 g,用
60 mL 70 乙醇溶液浸泡 20 rain,然后在 600 W 超
声波功率水平下处理 35 rain,处理后再置于室温下
浸泡 30 rain,过滤 ,滤液定容至 1()(]mL,待用。
3 结果
3.1标准曲线的绘制
分别取上述对照品溶液 0、1.0、2.0、4.0、6.0、
8.0 mI 置于 25 mL容量瓶中,各加 1 三氯化铝溶
液 4 mL,用 70 乙醇定 容至 刻度 ,摇匀 ,放置 l5
rain,分 别 得 空 白液 及 含 0.008、0.016、0.032、
0.048、0.064 mg/mL对照 品溶液。按照紫外分光
光度法在 273 nm 波长处 ,以试剂空白作参 比,测定
吸光度(胡文波 ,2008)。以芦丁浓度(mg/mI )为横
坐标 ,吸光度值为纵坐标作标准曲线,所得标准曲线
为 :v一24.39 +0.0056,R 一0.9983。
3.2样品的测定
吸取上述供试 品溶液 1 mI 置于 25 mI 容量瓶
中,加 1%三氯化铝溶液 4 mL,用 7O 乙醇定容至
刻度 ,摇匀,放置 15 rain,然后在 273 nm 处测定吸
光度 ,代入 回归方程 ,计算总黄酮的含量 。结果见表
1。通过方差分析 ,各种金花茶叶的黄酮总含量差异
显著 ,尤其是新 叶的差异最 明显 ,F值 668.459>F
(7,16)0.05—2.66(表 2)。
2期 黄兴贤等 :十四种金花茶组植物叶总黄酮含量 比较 283
3.3稳定性试验
取某一供试品溶液 1 mL置 于 25 mL容量瓶
中,加 1 三氯化铝溶液 4 mI ,用 70%乙醇定容至
刻度 ,摇匀 ,每隔 2 h测定其吸收度 ,共计 12 h,其测
得值基本保持不变,RSD值为 2.O4%,表明供试品
溶液黄酮基本稳定。
3.4重现性实验
取同一批药材样品(普通金花茶)按供试品溶液
的制备项下方法平行制备供试 品溶液 5份 ,分别取
供试品溶液 1 mL置于 25 mI 容量瓶 中,加 1 三
表 1 14种金花茶叶总黄酮的含量
TaBle 1 Content of total flavonoids in 14 species of sect.Chrysantha leaves( 一3)
采样时该种金花茶未抽新梢
This species of Camellia had nO new leaves when taking samples
表 2 方差分析表
Table 2 The table of variance analysis

So

urc

e
源 平
S

S
和 自
d

f
度 均
M

S F值
氯化铝溶液 4 mI ,用 70 乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,
放置 15 min,在 273 nm处测定吸光度 ,计算总黄酮
平均含量为 3.762 ,RSD 为 1.07 ,表明实验重
现性 良好 。
4 结论与讨论
4.1金花茶黄酮的提取
陈全斌等(2005)采用加水煮沸提取金花茶叶 中
总黄酮,该方法得率低 ,且所得黄酮提取液含糖分较
多,很难过滤分离。而本实验采用 70%乙醇作为提
取溶剂并经超声波处理,黄酮得率大大提高。同时
采用紫外分光光度法测定金花茶叶 中总黄酮含量 ,
方法快速、简便 、准确、可靠 ,为今后金花茶 中总黄酮
含量的检测提供 了便捷方法 ,也为深入开发利用金
花茶中黄酮类成分奠定了基础 。
4.2金花茶黄酮含量的比较
不同种金花茶新叶总黄酮含量差异很大。平果
金花茶新叶总黄酮 的含量(22.011 )最高 ,其次为
柠檬黄金花茶,达 17.052 ;最低为毛瓣金花茶,为
3.930 9/5;从一年生叶上看 ,柠檬黄金花茶 叶总黄酮
的含量最 高 ,为 6.710 ;其 次 为普 通 金花 茶 ,为
3.079 ;最低的是东兴金 花茶 ,为 1.518 。在二
年生叶中,柠檬 黄金花茶 叶总黄酮 的含量 最高,为
5.116 ;其次为顶生金花茶 ,为 4.432 ;最低的是
直脉金花茶,为 1.572 9/6。黄永林等(2009)对普通
金花茶 、凹脉金花茶、毛瓣金花茶、显脉金花茶和平
果金花茶等 5种金花茶的黄酮进行 了检测 ,经检测
毛瓣金花茶 中总黄酮含量最高,而显脉金花茶 中总
黄酮含量相对较低。我们测定这 5种金花茶一年生
叶的黄酮也得到相同的结论。
总体上看,各种金花茶新叶总黄酮的含量与一
年生、二年生有很大差异;除普通金花茶、柠檬黄金
花茶、弄岗金花茶 、直脉金花 茶外总黄酮含 量次序
284 广 西 植 物 3l卷
为 :新t>-年生叶>一年生叶。其它种类金花茶
叶总黄酮含量次序为 :新叶>一年生叶>二年生叶。
平果金花茶和柠檬黄金花茶叶中黄酮含量较 高,具
有潜在的研究与开发价值 。
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