全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 21(3)：252— 254． 2001年 8月
北虫草抗氧自由基和羟自由基作用的研究
沈齐英 ，沈秋英
(1．北京石油化工学院，北京 102500~2．抚顺石油学院，辽宁抚顺 113001)
摘 要：基于很多痰病与脂质过氧化有关，探讨了利用人工培育的北虫草的抗脂质过氧化作用。结果显示：人工
培育的北虫草子座对Fenton反应生成的羟自由基具有较强的清除作用，且作用明显强于相同剂量的羟自由基
特异清除荆甘露醇(P<0．O1)；北虫草对邻苯三酚自氧化体系产生的氧自由基亦具有清除作用，与对照组比较P
关键词：北虫草；氧自由基；羟 自由基
中圈分类号 ：Q946 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—3142(2001)03—0252 03
Study on the resisting
and hydroxyl free
Cordyceps
oxygen free radical
radical effect of
milit aris
SHEN Qi—ying ．SHEN Qiu—ying
t 1 P iroE Chemkad tudu~r3 Colege m l~ei2)?tg}Beijing 102600．China：
2．Petroleum Colege in F~hun，Fushun 113001·China)
Abstract：Because many dlseasies have something to do with lipid peroxidotion and there are few drugs of the resist—
ing oxygen free radicals and hydroxyl free radicals，the resisting effect of Cordyceps mfitaris is studied．The results
show that Cordyceps militaris of propagation can scavenge hydroxyl free radical 0f Fenton raction，and the effect is
stronger than that of mannkol(Pweaker than ascorbic acid is．The results suggests Cordyceps mihtaris is effective on the resisting lipid peroxidation．
Key words：Cordyceps mihtaris；Oxygen free radical；hydroxyl free radical
近年来 自由基的研究已成为有机化学、无机化
学、生物化学、生物学和医学中很活跃的学术领域，自
由基致脂质过氧化损伤作为一个新的致病因素已引
起国内外广大生物学和医学工作者的极大关注“ 。所
以，近十几年来各种抗活性氧化合物的研究受到了广
泛的重视。目前，临床证实有效且应用较多的仅有维
生索 c、维生索E及甘露醇等几种 。
本实验拟从植物中寻找高效低毒的抗氧化剂对
探索新药，开拓新的治疗方法，了解药物作用机制都
十分有益。
1 材料与方法
1．1仪器与药品
超氧化物岐化酶(SOD)由上海生物化学研究所
东风公 司生产 ；北虫草(Cordyceps mitltarls)由锦州医
学院生化实验室采用固体培养基人工培育，已经中国
科学院微生物研究所鉴定{番红花红(safremine)为生
收稿 日期：2000-03—09
作者简介 泷齐英(i 963 )，女，辽宁抚顺人，医学硕士．讲师，生物化学专业，从事生物化学教学，科研工作。
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3期 沈齐英等：北虫草抗氧自由基和羟自由基作用的研究 253
物染色素；其余试剂均为国产分析纯{uv一】60】紫外
分光光度剂(日本岛津)。
1．2北虫草提取物的制备
准确称取碾成粉末的人工培育的北虫草子座 10
g，加水煮沸 30 rain制成 20 的水煎液 1周内4。C
存放备用。
1．3北虫草对氧自由基清除作用的测定
参考文献方法 ，略作修改，取 0．05 mol／I 、
pH8．2的Tris—HCI缓冲溶液4．5mL于试管中，置25
℃水浴中预热 20 min，加入供试药品(北虫草水煎液
／抗坏血酸，3组不同浓度)0．1 mI⋯2 5 mmol／I 邻苯
三酚 0．4 mI ，混匀后在 25℃ 水浴中准确反应 4
min，立即用 8 mol／I 的盐酸 2滴中止反应，并在 299
nm处测定吸收度(以蒸馏水调零)。空白组以0．1 ml
蒸馏水代替供试药品，同时设立一试剂空白管，然后
计算清除率。
1．4北虫草对羟自由基的生成及清除的测定
采用亚铁离子催化过氧化氢产生羟自由基(根据
Fenton反应原理“ )，该反应产生的羟自由基可使番
红花红褪色。该项实验以羟自由基的特异性清除剂甘
露酵作为阳性对照品。取0．1 5 mmol／l pH 7．4的磷
酸缓冲液 1 mI ，40 g／mI 的番红花红 1 mI ，供试药
品 0．51 mI 1．3 过氧化氢 1 m1 (新鲜配制)．0．954
mmol／I EDTA FeI 1 mI (新鲜配制)，混合后在 37
。c水浴中反应 30 min后在 520 nm处测吸收度。空白
组以0．5 ml 蒸馏水代替供试药品，对照组以1．5 ml
蒸馏水代替EDTA—Fel和供试药品，同时设立一试
剂空白管，然后计算清除率
2 实验结果
2．1北虫草对氧自由基的作用
本文所设氧自由基的产生体系，用标准 SOD作
抑制曲线，其图形特征与文献一致，北虫草对氧自由
基的清除作用如表 1所示。表 1数据为试剂空白管校
正后值。
表 1实验结果表明：北虫草对邻苯三酚自氧化体
系产生的氧 自由基的清除作用具有非常显著的意义，
并且药物的终浓度与清除率之间呈量效关系 r=
0．921 86，相关系数显著性检验 P<0．05，其作用比
相同剂量的抗坏血酸的作用弱。
2．2北虫草对羟自由基的清除作用
在 FeSQ．+H O2 Fenton羟 自由基发生体系中测
定的羟自由基的结果如表 2所示。表 2数据为试剂空
白管校正后值。
表 1 北虫草对氧 自由基的清除作用
Table 1 Oxygen free radicals was scavenged
by Cordyceps 口r
组 例鼓 药物终浓度 A299 R
aNutuber Drug
清
E
睬
lim
事
in
‘
a te 一
Group Example density(g／L) b ptl mte
*与对照组比较 P表 2 北虫草对羟自由基的清除作用
Table 2 Hydroxy[free radical was scavenged
by Cordyceps卅 nr
分组 倒数
o{
药物终浓度 A
．
299 Ray 清
E
腺
lim
事
in
(
a tenumber Drug
)
⋯
． Group Example density(g，L) b rpT． ” ra
*与对照组 比较 P<0 01；* 与对照蛆和相同剂量甘露酵组
比较 PIn compare with control P< 0．01：* in compane with control
and M annid of the same dose P< 0 01．
表 2实验结果表明：北虫草对羟自由基的清除作
用与空白对照组比较具有非常显著意义，药物终浓度
与清除率之问呈量效关系 r一0．940 58，相关系数显
著性检验 P用比相同剂量的甘露醇作用强，T—test具有非常显著
意义 。
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254 广 西 植 物 21卷
各种各样的外潦性和内潦性 自由基在一定外界
环境下，时刻产生并影响机体的各个方面，当体内自
由基产生过多和(或)消除能力降低，就会导致各种疾
病(炎症、癌症、脏器损伤、衰老等)。适量补充外潦性
抗氧化药物或给予能促使机体内源性抗氧化物质恢
复到一定水平的药物，可使损伤与病变有所改善，故
从植物中寻找高效低毒的抗氧化物质可引起人们的
广泛关注。
冬虫夏草，又名虫草是中国传统的滋补品，北虫
草是虫草的模式种，是珍贵的食用、药用真菌。本实验
使用的北虫草为固体培养基上人工培育，经中国科学
院微生物研究所鉴定，研究结果显示；北虫草对氧自
由基和羟自由基具有明显的清除作用，其清除羟自由
基的作用强于羟自由基的特异清除剂甘露酵，且北虫
草提取液对氧自由基和羟自由基均有剂量依鞍性影
响。结果表明：北虫草具有抗脂质过氧化作用。任何药
物的作用都有其局限性，抗氧化药物亦如此，加之氧
化损伤是一个复杂过程，所以如何评价北虫草的抗脂
质过氧化作用还有待于采用多个自由基发生体系，采
用多种组织和细胞为观察对象，弄清药物代谢及作用
环节。
本实验所用北虫草由锦州医学院陈顺志教授赠
送，在此表示感谢。
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