全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 26(1)：l05一 l06 2006年 1月
毛两面针挥发油化学成分
王恒山，欧尚瑶，潘英明，向花俏
(广西师范大学 化学化工学院，广西 桂林 541004)
摘 要 ：利用气相色谱一质谱联用技术对广西柳州地区大瑶山的毛两面针挥发油化学成分进行了研究 ，共鉴
定出 2O种成分，占挥发油成分的 45．72 。其中主要成分为倍半萜。
关键词 ：毛两面针；挥发油；气相色谱一质谱
中图分类号 ：Q946 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2006)O1一O105—02
Essential oil from the hydr0distillati0n 0f
Zanthoxylum nitidum vat．fastuosum
W ANG H eng—shan，OU Shang—yao，PAN Ying—ming，XIANG H ua—qiao
(College of Chemistry and Chemical Engineering，Guangxi Normal University，Guilin 541004，China)
Abstract：Chemical constituents of volatile oil from Zanthocylum nitidum var．fastuosum originated from Yao
Mountain in Liuzhou City were analyzed by GC／MS，and their relative contents determined by area normaliza—
tion，2O constituents were identified，which accounted for 45．72 of volatile oil，and sesquiterpenoids are the
major chemical constituents．
Key words：Zanthozylum nitidum var．fastuosum；essential oil；GC／MS
毛两面针(Zanthozcylum nitidum vat． stuo—
sum)为芸 香 科 (Rutaceae)花 椒 属 (Zanthoacylum
L．)植物 ，此属植 物全世界 有 250种，广 布世界各
地，我国有 39种 l4变种 ，南北备省均有分布 (中国
科学院中国植物志编辑委员会，l 997)，据报道该属
植物其果实、根、茎、叶均作药用，具有镇痛、麻醉、抑
菌、杀虫、抗癌等功效。毛两面针在很多方面与两面
针有着相类似的功效(温尚开，l991)，到目前为止，未
见有报道对毛两面针挥发油研究 的文献 ，本文利用
GC／MS联用技术对毛两面针的挥发油进行了研究。
1 实验部分
1．1仪器和样品
气相色谱一质谱联用仪：日本岛津 GL一9A型气
相色谱仪：30 In×0．25 Inin OV一10l弹性石英毛细
管色谱柱。
毛两面针于 2003年 l2月采 于广 西金秀大瑶
山，经广西师范大学生命科学学院唐绍清博士鉴定。
1．2测试条件
色谱柱 ：柱温为 50℃(2 rain)一200℃(5 Inin)
一220℃(8 min)，进样量 0．3 L，分流 比 l5：l；载
气为高纯氦气 ；柱前压 10 Psi。
质谱 ：El—MS，离子源温度 200℃；电子能量 70
eV，电子倍增器电压 1．3 KV；发射电流 0．5 mA；扫
描范围 35～450 ainu。
1．3样品处理
毛两面针按常法水蒸汽蒸馏 ，馏出液用少量乙醚
多次萃取，经无水硫酸钠干燥，旋转蒸发蒸去乙醚后，
得到无色的具有刺鼻气味的挥发油，得油率0．38 。
收稿日期 ：2004—1I-08 修回日期：2005—05—20
基金项 目：国家 自然科学基金(20361002)；广西青年基金(桂青科 0229023)；广西师范大学重点项 Ft资助[Supported by the Na
tional Natural Science Foundation of China(20361002)；Science Foundation for Youth of Guangxi(0229023)；Key Item of Guangx
Normal University]。
作者简介：王恒山(1965一)，男，浙江温州人，他：L，教授 ，从事天然有机化学、有机合成和有机分析等研究。
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lO6 广 西 植 物 26卷
2 结果与讨论
2．1成分鉴定
数据处理用 I AB—BASE系统 ，各分离组分峰的
质谱数据 ，通过 NIH—MS—IX；计算机谱库进行检索，
对各质谱图加以确定 ，通过对毛两面针挥发油的 GQ
MS分析，将打出峰号的 20种化合物进行归一化(近
似计算)，计算出这些化合物的相对含量(表 1)，鉴定
了其中的 2O种化学成分 ，占挥发油的 45．72％。并对
未鉴定的峰所对应的化合物类型作出推测。
2．2结果与讨论
对鉴定 出来 的 20种成分进行归类分析，发现毛
两面针挥发油中主要 以倍半萜为主，占挥发油总量
表 1 毛两 面针的挥 发油成 分
Table 1 The compound of volatile oil from the roots of Zantl zo：r3’lure nitidum var {nStt,OSU?7~
的 21．34％。表 l结果 表明，毛两 面针挥 发油中主
要 成 分 是 (一)一spathulenol(斯 巴 醇，相 对 含 量
l2．53 )，(一)一spalhulenol有 中等抗真菌活性 (程永
现 等，2002)，而 a—C y(1p1ylenen(a一石 竹 烯 ，
0．42％)有一定的平喘作用 ，是治疗老年慢性支气管
炎的有效成分之一(国家医药管理局 中草药情报 中
心站 ，1986)，7一Elemene(7一榄 香烯 ，1．7 )对肿瘤
有抑制作用，理学及临床研究 证明 ：7-Elemene是一
种疗效确切的非细胞毒性抗肿瘤药物，具有 良好 的
抗癌活性 ，且其抗癌作用还有一 定的特异性 (陈 晓
等，2003)。另外，石竹烯、大根香叶烯广泛应用于香
料食品工业 和药 物合成的重要 中问体 (阎建辉等，
2003)。综上所述 ，毛两面针是一币叶-有多种用途的植
物 ·而且是一种 资源丰富的植物 ，可以进一步进行开
发利 用
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1期 夏快飞等：一种可用于分析水稻花药中钙调素蛋白分布的胶体金免疫电镜标记技术 87
2 实验结果及讨论
2．1 CaM在水稻花药中的定位
在花药的花粉壁 (图 1)、花药壁(图 2)、花粉 细
胞核(图 3)等处均能见到有胶体金颗粒的分布，其中
绒毡层细胞有较多的胶体金分布(图 2)，绒毡层在花
药的整个发育过程中处于非常活跃的状态，通过绒毡
层的解体提供给花粉发育所需的大量物质(Pacini等，
1985)，估计绒毡层细胞中 CaM 分布较多与此有着密
切的关系。在花粉发育的单核期花粉内壁没有形成，
在花粉外壁及花粉的细胞质 中也含有较多的胶体金
(图 1)。图 4为对照，不见胶体金的分布。
2．2标记过程对 CaM 标记的影响
钙调素是一种热稳定性 蛋 白，因此用 Epon812
包埋样品可以获得较好的特异性标记物 ，这 曾被李
家旭等人(1989)证实。我们主要对标记过程中的温
度及时问的选择上做 了一些 比较研 究，结果表 明：
(1)10 H O 的处理时间：比较不同的样品处理时
间和 H O 浓度 ，发现用 10 的 H O。处理 5～lO
min即能得到较好的效果 ，H：O。处理时问过长或浓
度过高会影响细胞 的超微结构 。(2)抗体标记过程
中标记的温度 、时问直接影 响抗体标 记的特异性与
标记效果 ：我们 比较 了 3O、37℃下分别标 记 l、2、
2．5、4 h抗体标记特异性 ，3O℃下标记 1～2 h即可
达到较好的特异性标记 ，标记温度不宜太高 ，标记时
间超过 2 h后标记密度基本没有增加 ，故标记时问
达到 2 h即可。(3)在胶体金免疫标记之前于 3O℃
用阻断液阻断 3O～6O min可有效的防止非特异性
的标记。(4)染色 时间：我们通过 多次 的实验 发现
2 的醋酸双氧铀染色 6O min，及 6 的柠檬酸铅染
耳e耳e耳e心 耳e —．e 耳e—· 耳e心 耳e 心
色 10 min能够达到较好的细胞染色效果 ，细胞结构
反差适度且不影响胶体金颗粒的观察。
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