全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 24(6)：546—549 2004年 l1月
不同生长日龄罗汉果甙类成分变化研究
李典鹏，陈月圆，潘争红，张厚瑞
( 量广西植物研究所，广西桂林54106)
摘 要：采集不同生长日龄的罗汉果，对果实中的甙类成分进行选择性提取，采用薄层色谱法对其甙类成分
进行比较研究，初步找出了罗汉果甙类成分在生长过程中的积累规律，为罗汉果采收提供科学依据。
关键词：罗汉果；薄层色谱；生长日龄；甙类成分
中图分类号：Q946．83 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2004)06—0546—04
Stud~on variation of gro’glycosidesb y O mo~ l~
from fruits of Siraitia grosvenorii
in different growing ages
LI Dian—peng，CHEN Yue—yuan，PAN Zhen—hong，ZHANG Hou—rui
(Guangxi Institute of Botany，Guangxi Zhuangzu Autonomous Region and Academia Sinica，Guilin 541006，China)
Abstract：Collecting the fruits of Siraitia grosvenorii in different growing ages，mogrol glycosides was slectivly
extracted from the fruits．Thin layer chromatogram(TLC)was used to study the variation 0f mogrol glyco—
sides．W e primary found out the accumulated rule of magrol glycosides in different growing ages．This conclu—
sion can provide scientific bases for the fruit picking of Siraitia grosvenorii．
Key words：Siraitia grosvenorii；TLC；different growing ages；mogrol glycocides
罗汉果(Siraitia grosvenorii(Swingle)C．Jeff—
rey)为葫芦科罗汉果属多年生宿根茎性的藤本植
物，是我国特有的经济、药用植物，为广西桂北地区
传统特产。罗汉果有清热润肺、凉血、润肠通便的功
效，特别是用作祛痰剂，在治疗百日咳、慢性气管炎、
感冒、便秘、胃肠小疾等方面疗效显著(中华人民共
和国卫生部药典委员会，1977；1985；199O)。罗汉果
的甜味物质为葫芦烷型三萜甙类成分，甜度约为蔗
糖的250～300倍，热量仅为蔗糖的五十分之一，是
十分理想的天然甜味剂(竹本常松等，1983)。目前，
由罗汉果提取制成的天然甜味剂——罗汉果甜甙已
投入工业化生产。
不同生长时期罗汉果果实甙类成分不一致，成
熟罗汉果富含罗汉果甜甙，主要为罗汉果甙 IV、V
(mogroside IV、V)(竹本常松等，1983)，味极甜；未
成熟的罗汉果主要含有罗汉果苦甙 A(mogroside
ⅡE)(徐位坤等，1992)，味苦。有关罗汉果鲜果及
市售干果的甙类成分前人已有详细报道(斯建勇等，
1996；Matsumoto等，1990；Kasai等，1989；王亚平
等，1992)，但罗汉果果实在生长发育过程中的甙类
成分变化及其积累规律尚未见有研究。本文采用薄
层色谱(TLC)比较研究了不同生长日龄罗汉果中的
甙类成分变化，并通过酸水解检测了其甙类成分水
解后的甙元和糖部分的薄层色谱，为阐明罗汉果甜
甙的形成机理和积累规律打下初步理论基础，为科
学确定优质罗汉果的采收日期提供依据。
收稿 日期 ：2003一l1一l1 修订日期 ：2004-03-22
基金项目：广西科学基金资助项目(桂科基0236052)；中国科学院“西部之光”人才培养计划人选项目(科发人教字E2oo211oi号)。
作者简介：李典鹏(1968一)，男，广西资源人，副研究员，从事植物资源的开发利用研究。E-mail：phytoldp@l63．net
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6期 李典鹏等：不同生长日龄罗汉果甙类成分变化研究 547
1 材料和仪器
材料：罗汉果样品采集于广西永福县龙江乡龙
山村，同一果园，同一品种，在 7月中旬 1周内，选择
同一天开花的子房，及同一周内开花并授粉后分别
生长 5、10、20、40、55、70、85 d的果实适量，切成约1
cm的碎片，按每 100 g果样加人 95 乙醇 150 mL
浸泡 20 d以上。罗汉果甙ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V等对照品
为广西植物研究所植物化学研究室自制。葡萄糖纯
度为 99 ，购自汕头市光华化学厂。
仪器：R-114型旋转蒸发仪，瑞士 Buchi公司生
产；高压液相色谱仪，美国 Waters公司产；Bruker
AM-400型和 DRX一500型核磁共振仪。
试剂：DM130大孔吸附树脂，330、732离子交
换树脂，购自于山东鲁抗树脂分厂；高效硅胶 H板，
青岛海洋化工厂生产；反相 C-18材料，Macherey
Nagel公司产。
2 实验部分
2．1罗汉果主要甙类成分对照品的提取分离
生长日龄 75 d以上的鲜罗汉果 5 kg，粉碎后加
人 95 乙醇5 000 mL，水浴加热回流提取 3 h，过
滤，滤渣再加入乙醇 4 000 mL，重复提取 1次，合并
滤液，减压回收乙醇至浸膏状。浸膏用蒸馏水充分
溶解，水溶液高速离心分离(转速大于 4 000转)，上
清液经过DM130的大孔树脂柱，先水洗除糖分、水
溶性杂质等，再用 7O 的乙醇洗脱，洗脱液减压回
收乙醇，残液再用蒸馏水溶解，先通过 330弱碱阴离
子树脂，流出液再经过 732强酸阳离子柱脱色，流出
水溶液减压浓缩至干，得到浅色罗汉果总皂甙。罗
汉果总甙用甲醇溶解，拌人硅胶，干法上硅胶柱用
CHCl 一CH OH(10：1～1：1)梯度洗脱，洗脱液经
TLC检验，相同斑点合并，再经反相 C。柱(50
CH OH洗脱)反复精制，分别得到化合物 I(120
mg)，化合物I(90 mg)，化合物II(120 mg)，化合物
IV(250 mg)，经 HNMR，¨ CNMR谱鉴定，对照文
献(Matsumoto等，1990)确证化合物 I为罗汉果甙
Ⅱ，化合物Ⅱ为罗汉果甙Ⅲ，化合物Ⅲ为罗汉果甙
Ⅳ，化合物Ⅳ为罗汉果甙V，经 HPLC相对峰面积
纯度测试，纯度分别为 99 9，6、98 9，6、94 、95 (色谱
条件：Waters高压液相色谱仪采用反相 C。分离柱，
示差检测器，甲醇一水(33：67)为流动相)。
2．2不同生长日龄罗汉果甙类成分的提取
取不同生长 日龄罗汉果样品乙醇浸泡液 5O
mL，过滤，滤液回收乙醇至浸膏状。浸膏加水悬浮，
上清液用氯仿萃取 3次，每次用氯仿 15 mL，氯仿萃
取后的水层再用正丁醇萃取 3次，每次 15 mL，合并
正丁醇萃取液，用旋转蒸发仪减压回收正丁醇，低温
真空干燥成粉，即得不同生长日龄罗汉果粗总甙，供
下述 TLC点样和水解用。
2．3不同生长日龄罗汉果甙类成分的水解及水解液
的提取分离
分别取上述 2．2项下的不同生长日龄罗汉果总
甙 1 g，加入含 5 H SO 的 5O 乙醇溶液 4O mL，
加热回流水解 4 h，减压回收乙醇，残液分别用 2O
mLCHCl 萃取 3次，分别得到 CHCI 层和水层，水
层经过 732强酸性阳离子柱去除 H ，过柱的溶液可
进行纸层析或 TLC测糖试验，CHCI。层用水洗多次，
至水洗液基本呈中性，减压回收 CHCI ，残渣可溶解
点样进行 TLC测定甙元。同时取罗汉果甙V50 mg
按上述试验，并在同一薄层析进行点样分析。
2．4 TLC试验条件
(1)不同生长日龄罗汉果甙类成分：取少量2．2
项下不同生长日龄罗汉果总甙及 2．1项下分离得到
罗汉果甙V，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ对照品，用少量甲醇溶解，用微量
毛细管点样于 100 mm×100 mm的高效硅胶 H板
上，距薄层板底边 15 rain处，相互间隔 10 iYlin。分别
试验了 CHCl 一CH OH—H2O(7：3：0．5)、(8：2：
1)；CH3(CH2)CH2OH：HAC：H2O(4：1：1)等展
开系统，最后选择CH (CH )CH ：HAC：H 0(4：
1：1)作为展开剂，分离效果较理想。显色剂：喷 1O
HzSO|水溶液，在 110℃下加热8 min显色。
(2)不同生长日龄罗汉果甙类成分水解后甙元：
取少量 2．3项下得到 CHCI 萃取物，加人少量
CHCl。溶解，用微量毛细管点样于 100 mm×200
mm的高效 H板上，距薄层板底边 15 miTt处，相互
间隔 10 mm。分别试验了苯一丙酮(7：1)、(7：
2)、(7：1．5)；展开体系，最后确定苯一丙酮(7：
1．5)系统分离效果较好。显色剂：喷 1O H SO 水
溶液，在 llO℃加热 8 min显色。
(3)不同生长日龄罗汉果甙类成分水解后糖部
分：取少量2．3项下得到的过阳离子柱水溶液，用微
量毛细管点样于100 mm×200 mm的高效 H板上，
距薄层板底边 15 mm处，相互间隔 10 mm。点样用
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548 广 西 植 物 24卷
图 1 不同生长 日龄罗汉果甙类成分的薄层色谱
Fig．1 TLC of mogrol gl ycosides in
dlIierent growin g ages
1．子房(German)；2．5 d果(5 days fruit)；3．10 d果 (10 days
fruit)；4．2O d果(2O daysfruit)；5．30 d果(30 daysfruit)；6．
4O天果(40 days fruit)；7．55天果(55 days fruit)；8．70天果
(70 days fruit)；9．85天果(85 days fruit)；10．甙V(mogroside
V)；11．甙lV(mogroside IV)；12．甙I／I(mogroside I／I)；
13．甙 1I(mogroside 1I)。
案 羹 簟
图 2不同生长日龄罗汉果甙类成分水解后甙元薄层色谱
Fig．2 TLC Of mogrol after hydrolysis Of mogrol
glycosides in di儿erent growin g ages
2．5 d果(5 days fruit)；3．10 d果(10 days fruit)；4．2O d果
(2O days fruit)；5．30 d果(30 days fruit)；6．40天果(40 days
fruit)；7．55天果(55 days fruit)；8．70天果(70 days fruit)；
9．85天果(85 days fruit)；10．甙V(mogroside V)。
电吹风吹干。分别试验了正丁醇一乙酸一乙醚一水(10
：8：3：1)和正丁醇一吡啶一水(6：4：3)，最后确定
选用正丁醇一吡啶一水(6：4：3)为展开剂，分离效果
较好。显色剂：分别试验了茴香醛一硫酸一醋酸(0．1
：1：5O)和苯胺一二苯胺一磷酸试剂(二苯胺 4 g，苯
胺 4 mL及 85 磷酸2O mL溶入 200 mL丙酮)，喷
雾于薄层板上，ii0℃烘 8 min，结果发现苯胺一二苯
胺一磷酸作为显色剂，效果较优。
嚣 ：蕊 套囊 蠢祷
图 3 不同生长 日龄罗汉果甙类成分
水解后糖部分的薄层色谱
Fig．3 TLC of glucopyl after hydrolysis of mogrol
glycosides in different growing ages
2．5 d果(5 days fruit)；3．10 d果(10 days fmit)；4．2O d果(20
days fruit)；5．30 d果(30 da【ys fruit)；6．40天果(40 days fruit)
7．55天果(55 days fruit)；8．70天果(70 days fruit)；9．85天果
(85 days fruit)；10．甙V(mogroside V)；G．葡萄糖 (Glucose)。
3 结果与讨论
从图1可看出，罗汉果果实从授粉后 5 d开始
即有甙类成分出现，生长日龄在 30 d以前的嫩果主
要含有苦味的二糖甙即罗汉果甙ⅡE，30 d后开始
有罗汉果甙Ⅲ出现，到 55 d罗汉果甙Ⅲ含量达到高
峰，并有罗汉果甙Ⅳ生成，70 d左右，罗汉果甙Ⅳ含
量达到最高，并有罗汉果甙V生成，85 d以后，罗汉
果甙V为罗汉果的主要甜味成分，果实的外观开始
黄熟。图2显示，罗汉果甙类水解后其甙元 TLC图
谱基本一致，从已知的甙类成分结构获知，其甙类元
均为葫芦烷型四环三萜，即罗汉果醇(Mogro1)。其
甙类成分结构差异仅在于甙元连接葡萄糖数目的多
少和连接位置的不同。从图 3可知，罗汉果甙类成
分水解后其糖仅仅为葡萄糖。
从上述结果可得出以下结论 ：
(1)罗汉果中主要甙类成分其甙元相似，均为葫
芦烷型四环三萜皂甙，其甙元所连接的糖均为葡萄
糖，甙类成分结构差异仅在于葡萄糖连接甙元的位
置和连接糖的数目多少。
(2)罗汉果在授粉 5 d后即有罗汉果二糖甙出
现，随着座果生长 日龄增加，二糖甙逐渐减少，而相
应三糖甙，四糖甙，五糖甙逐渐增加，成熟罗汉果以
五糖甙为主，这种现象提示，罗汉果五糖甙(甜甙)可
盏■● 篱
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6期 李典鹏等：不同生长 日龄罗汉果甙类成分变化研究 549
能是以幼果中的二糖甙作为前体，经历一个复杂的
生源途径形成的。其中包含了在植物体内的糖基转
移酶(Glyclcyltransferase)作用下，葡萄糖残基逐步
地转移，依次形成呈强甜味的四糖甙、五糖甙过程。
(3)授粉后 70 d的果实，外观仍呈绿色，虽已积
累有五糖甙，但甜味强度较低的三糖甙、四糖甙仍是
主要成分，甚至还含部分呈苦味的二糖甙。罗汉果授
粉后85 d，五糖甙积累达到高峰，果实外观开始黄熟，
甜味最强。传统罗汉果主要烘烤加工成干果出售，以
授粉后 65～70 d作为罗汉果的采收期，此时的罗汉
果在烘烤过程中不易出现破裂现象，使成品果保持较
好的外观品质。目前大量用于加工提取甜味剂的罗
汉果鲜果，其采收期仍与加工干果的采收期相同，根
据本研究，其果龄应在 85 d以上，不应是目前沿用的
65~70 d。因此在开展罗汉果规范种植同时，必须制
定严格科学的采收标准，以保证罗汉果的质量。
(4)根据上述罗汉果甙类成分的变化规律，值得
进一步探索利用果实内本身存在的酶系，将葡萄糖
残基数较少，甜度较低的甙类成分(如二糖甙、三糖
甙)，充分转化生成高甜度的罗汉果五糖甙的罗汉果
采后处理技术，这对有效提高罗汉果及其提取物的
品质及商品价值意义重大。
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