全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 23(1)：93— 95 2003年 1月
香蕉组培苗 POD、PPO及 SOD
活性对银胁迫的反应
区炳庆 ，何丽烂
(佛山科学技术学院，广东南海 52823I)
摘 要 ：用 0．1 mg／mL硝酸银溶液处理香蕉组培苗 ，分别测定了多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)及超
氧化物岐化酶(SOD)的活性 。结果表 明：在银胁 迫下，香蕉组培苗的 PPO、POD、SOD 的活性 明显增加(P<
0．05或 P<0．01)，但随着胁迫时间的延长呈下降趋势且趋 于稳定 ，这说 明 PPO、POD和 SOD活性的提高与
维持是植物耐受银胁迫的物 质基础之一。
关键词 ：香蕉组培苗 ；过氧化物酶 ；多酚氧化酶 ；超氧化物岐化酶；银胁迫
中图分类号 ：Q945 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000-3142(2003)01—0—0
Reaction 0f activity 0f peroxidase，polyphenol
0Xldase and SUper0Xlde dlSm Utase in tlSSUe ● 1 1 ● 1 1● 』 ● 』■
；eedl ings 0f banana to the stresss I l Ul Ol“Ag t
OU Bing—qing，HE Li—lan
(Foshan University，Nanhai 528231，China)
Abstract：The activity of PPO，POD and SOD was examined after tissue seedlings of banana were treated with
0．1 mg／mL AgNO3．The results showed that the activity of PPO，POD and SOD obviously increased(P~0．05
or P
of the foundation of the tolerance to Ag stress．
Key words：banana tissue seedling；peroxidase；polyphenol oxidase；superoxide；Ag stress
关于重金属离子对植物 生理生化特性的影响 ，
国内外已有许多报道[1~33，但重金属离子对组培苗
生理生化特性影响的研究较少 。POD和 SOD在生
物体内对过氧化物、氧自由基起着清除作用而对生
物膜有保护作用 ，重金属离子胁迫可诱导 、影响这些
酶的活性及其同工酶的变化，从而反映出植物的受
害状况。本试验通过银胁迫对香蕉组培苗不同时期
POD、PPO、SOD活性的影响 ，以探讨重金属离子对
组培苗的毒害机理，为植物组织培养提供生化依据，
具有十分重要的理论和实际意义。
1 材料与方法
1．1材料
试验材料为泰国B9香蕉，组织培养采用 MS培
养基，以每瓶 20 mL分装。材料处理：(1)分化苗：
每瓶加入 5 mL硝酸银(Ag 浓度为 0．5 mg／mL)，
至银离子浓度为 0．1 mg／mL；(2)生根苗：当生根苗
收稿 日期 ：2002—04—15； 修订 日期 ：2002—07—25
作者简介：区炳庆(1966-)，男 ，广东云浮市人 ，讲师 ，主要从 事生物化学的教学与研究 。
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94 广 西 植 物 23卷
培养至长出根长约5～6 cm时，在无菌操作下，每瓶
加入 5 mL硝酸银。设对照组及试验组各 3O瓶。
高压灭菌后，按常规接种；培养温度为 25～3O℃之
间。2次重复 。
1．2方法
1．2．1酶液提取 每组随机抽取 6瓶，幼苗用去离
子水洗净，用滤纸吸干表面水分 ，分别称取分化期的
芽 、叶及生根期的叶、根各 0．50 g，于预 冷的研钵 中
加入 1．5 mL的样 品缓 冲液 (0．065 mol／L Tris一柠
檬酸缓冲液，pH8．2)，在冰浴中研磨匀浆，10 000 r／
min离心 10 min，取上清液作酶液，冻存于冰箱内备
用。
1．2．2酶活性测定 分别 于处理后 12、24、36、48、6O
h测定 POD、PPO及 SOD活性 ，测定方法参照文献
[4]和 [5]。
2 结果与分析
2．1硝酸银对 POD、PPO及 SOD活性的影响
2．1．1 PPO 活性 变化 硝酸银对香 蕉组培苗 PPO
活性的影 响见图 1、2。由图 1、2可知 ，香蕉组培苗
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时问 Time t／h
图 1 硝酸银对分化苗 PPO活性的影响
Fig．1 Effects of AgNO3 on PPO activities
in differentiated seedlings
随后 POD活性随时间变化而下降。
2．1．3 SOD活性 变化 SOD活性 的变 化见 图 5和
6。由图可知，硝酸银处理后 SOD活性明显增加，
分化期芽和叶 、生根期 叶酶活性 于 24 h达 到最 大
值 (分别为 2 180．67±35．25、1 903．90±40．32、
l 950±37．28)，与对 照组 (分别 为 1 813．17±
33．25、l 700．85±38．32、1 745．38±47．28) 比较
差异显著 (P
后酶活性逐渐下降且低于对照组水平 ，而分化期叶
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经硝酸银处理后，PP0活性显著增加且随时间而变
化。分化期 ：硝酸银组 叶 中 PP0活性 明显增加 ，于
24 h(1．37±0．13)、36 h(1．68±0．18)与对 照组
(O．76±0．12、0．85±0．15)比较 差异显 著(P<
0．05、P<0．01)；芽 中 PP0活性 于 24 h最高 (1．55
±0．14)，与对 照组 (0．97±0．16)比较差异显著 (P
组 (O．74±0．11、0．73±0．13)比较 差异 显著 (P<
0．05)，根 于 24 h酶 活性 (1．84±0．17)与对照 组
(O．93±0．11)比较明显升高(P<0．05)。随后酶活
性逐渐下降 ，接近于对照组的水平。
2．1．2 POD活性 变化 POD活性 的变化见 图 3、4。
由图可知，分化期：芽和叶于24 h后 POD活性达到
最大值(5．76±0．33、5．66±0．21)，与对照组(4．O6
±0．22、4．35±0．34)比较，酶活性升高差异显著(P
(4．7O±0．18、4．55±0。27)比较 ，叶 中 POD活性升
高差异显 著 (P<0．05)，但根 增加不显著 (P>
0．05)，这说 明叶中 POD活性 比根增加更为明显。
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时间 Time t／h
图 2 硝酸银对生根苗 PPO活性的影响
Fig．2 Effects of AgNO3 on PPO activities
in rooting seedlings
和生根期叶和根降低更为明显 (P<0．01)，生根
苗于 36 h后则趋于稳定。
3 讨 论
银离子是大多数酶的不可逆抑制剂[6]，但在活
体中，银离子对酶的抑制作用可能与离体条件下的
酶抑制不同。在生物体内，植物体为消除银离子的
伤害有可能刺激生物体合成更多的酶。SOD能催
化超氧 自由基产生岐化反应 ，生成 分子氧和过氧化
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1期 区炳庆等 ：香蕉组培苗 POD、PPO及 SOD活性对银胁迫的反应 95
氢 ，超氧 自由基 (O-Z)属 于活性 氧的一种 ，具有很强
的氧化能力，可引发膜脂过氧化作用，破坏膜的完整
性；POD则能催化过氧化氢及某些酚类的分解，与
SOD等酶组成一个清除活性 氧的防御 过氧化系统 ，
使活性氧的产生和消除处于平衡状态，从而保护细
胞免受伤害 ，起 到保护作用C3]，PP0是一类 广泛存
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图 3 硝酸银对分化苗 POD活性的影响
Fig．3 Effects of AgNO3 on POD activities in
differentiated seedlings
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图 5 硝酸银对分化苗 SOD活性的影响
Fig． 5 Effects of AgNO3 on SOD activities in
differentiated seedlings
本一致(图 1～6)：分 化期的芽 、叶 中 3种 酶活性基
本上在 24 h后显著升高(P<0．05)，且随后下降，仅
叶 PPO活性维持至 36 h；生根期根、叶的情况与分
化期基本一至，且叶 POD活性也维持至 36 h，但根
SOD活性则提前于 12 h达到最大值(P<0．05)，这
可能与根 SOD对银离子的胁迫反应较敏感有关，分
化期和生根期中 SOD活性随后的明显下降也说明
了这一点。3种酶活性一定时间后达到高峰，此后
随着胁迫时间的延长酶活性逐渐下降并趋于稳定，
说明银胁迫下使体内活性氧自由基增多，诱导了体
内 PPO、POD、SOD的合成，其活性增强是氧自由基
诱导的结果，表明了它们在香蕉组培苗抗银胁迫的
协同性，共同组成防御过氧化系统，抵抗环境不良条
在于植物体内的应激反应酶系，在植物的呼吸作用
中，呼吸链 的末端氧化酶是直接把 呼吸底物的中间
产物氧化时脱出的电子传递给 Oz的氧化酶，PPO
是其中一种，它可催化酚类化合物氧化为醌类化合
物[3]。本试 验 中，香 蕉 组 培 苗 在 银 胁 迫 下 PPO、
POD、SOD三种酶活性在分化苗或生根苗的变化基
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图 4 硝酸银对生根苗 POD活性的影响
Fig．4 Effects of AgNO3 on POD activities
in rooting seedlings
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图 6 硝酸银对生根苗 SOD活性的影响
Fig．6 Effects of AgNO3 on SOD activities
in rooting seedlings
件对机体的破坏，对机体起保护作用。
本试验结果表明，具有抗衰老、清除自由基作用
的超氧化物岐化酶、在植物呼吸作用中起重要作用
的过氧化物酶和多酚氧化酶等活性的维持和提高与
组培苗对重金属离子的耐受性顺序 相一致 ，说 明这
些酶是某些植物抗银胁迫的物质基础之一 。
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