全 文 :广 西 植 物 Guihaia 24(3):263—265 2004年 5月
泰国野生银边姜黄的组培快速繁殖
宋关玲,杨 谦,汪群慧,崔 杰,王 琴
(哈尔滨工业大学,黑龙江哈尔滨 150001)
摘 要:利用泰国野生银边姜黄的萌动芽做外植体,对泰国野生银边姜黄的离体快速繁殖进行了研究,旨在
为银边姜黄在中国的扩大栽培提供技术支持。筛选出了泰国野生银边姜黄萌动芽的恢复生长培养基:MS+
6-BA 0.8 mg.L-I+NAA 0.15 mg.L- ;芽增殖培养基:MS+6一BA 4 mg.L- +KT 1.5 mg.L- ;生根培养基:
MS+NAA O~O.5 mg.L- 。
关键词:银边姜黄;萌动芽;离体快速繁殖
中图分类号:Q94s 文献标识码:A 文章编号:1000—3142(2OO4)O3一O263一O3
r■、● ●l ·‘ n一 1 lne rapid propagation 0t Curcu JP.0sesana
wildly grown in Thailand by plant tissue culture
SONG Guan—ling,YANG Qian,WANG Qun—hui,
CUI Jie,WANG Qin
(Harbin Institute of Technology,Harbin 150001,Chiaa)
Abstract:Using the buds of Curcuma rosesana as explant,we studied its rapid multiplication by tissue culture
in order tO make a large-scale plantation of C rosesana in China.The optimum medium for the recovering
growth of bud was MS+6一BA 0.8 mg.L‘ +NAA 0.15 rag.L- .MS+6-BA 4 mg.L- +KT 1.5 mg.L- was
more available for the multiplication of the buds and MS+NAA O~O.5 mg.L- was more available for the in—
ducement of the roots.
Key words~Curcuma rosesana;bud;rapid proparagation in vitro
泰国野生银边姜黄(Curcuma rosesana)原野生
于泰国Nakornsawan省的北部山区,1998年该地
区的一位老药剂师将其进献给泰国国王,以其根茎
提取物高效的杀菌和清洁空气之功效使该植物受到
泰国国王的重视。1999年 1月泰国GPO组织(国
家药物组织)和哈尔滨工业大学生命科学系开始对
该药用植物进行合作研究,目的是为大面积地对该
植物进行栽培以便开发有价值的产品。我们曾将其
引种于哈尔滨师范大学的温室内并获得栽培上的成
功。在哈尔滨栽培期间,经中国科学院华南植物研
究所的刘念鉴定为姜科姜黄属的植物银边姜黄
(Curcuma rosesana)。
银边姜黄通常以根茎进行繁殖,由于该植物野
生且产量不高,从泰国获取大量的根茎进行大面积
栽培存在着一定的困难,利用组织培养的方法进行
快速繁殖就可以解决这个问题。
1 材料和方法
1.1材料
银边姜黄的根茎(由泰国GPO组织提供)。
1.2方法
1.2.1外植体(萌动芽)的获得 将银边姜黄的根茎
铺在有阳光的干净地面晾晒 1~2 d,然后将其于室
内覆草帘堆放2~3 d,进行困姜以促进其养分分解。
收稿日期:2003-06—16 修订日期:2003—07—28
作者简介:宋关玲(1971一),女,黑龙江伊春人,讲师,博士生,主要从事植物及其在环境治理方面的研究。
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264 广 西 植 物 24卷
经2~3次晒姜、困姜后开始催芽(赵德婉等,2000)。
催芽需在 20~25℃的黑暗处 20 d左右,一般上面应
该以草帘覆盖,并注意水分的供应。待芽点开始萌
动后,将根茎栽种于河沙混合泥炭土的花盆中,注意
水分的供应,大约 2个星期左右芽长到 3 crn左右时
取下作为外植体。
1.2.2材料消毒 将银边姜黄的萌动芽放到尼龙袋
中,放到自来水下冲洗 3 h以上,取出后放小烧杯中
用蒸馏水冲洗 2~3次。在超净工作台上将其放人
灭过菌的三角瓶内,先用 75 的酒精消毒约 10 S,
再用 0.1 的升 汞(曾宋君 等,1999;莫磊兴等,
1998)滴加数滴土温-80(谭文澄等,1999)消毒 1O~
12 min,然后用无菌水冲洗 6次以上,用滤纸吸干水
分后接种到培养基中进行培养。
1.2.3培养基 以 MS为基本培养基,在培养的不
同发育阶段添加不同种类和浓度的植物激素,培养
基中均加 0.7 的琼脂和 3 的蔗糖,pH值为 5.8,
120℃灭菌 15 min。
1.2.4培养条件 于温度为 23~25℃,光照强度为
2 400 Ix,光照时间为 12 h的人工光照培养箱中进
行培养。
1.2.5培养方法 首先将消过毒的银边姜黄的萌动
芽接种到萌动芽恢复生长培养基中使其恢复生长;
大约 1个星期左右萌动芽开始恢复生长,2个星期
后将恢复生长的萌动芽取出接种到增殖培养基中进
行增殖培养。如果有萌动芽生长较快,有多片叶子
展开则剪去叶片后再接种到增殖培养基中进行增
殖;4~5 d后有的培养基中的萌动芽开始增殖,从
根部开始新生出芽点,待新生芽长到 2~3 cm时(一
般需 3个星期左右)将其切下 ,重新接种到芽增殖培
养基中进行增殖;在移栽前 3个星期左右将增殖培
养基中的丛生芽切成单芽接种到生根培养基中进行
表 1 不同培养基对萌动芽恢复生长的影响
Table 1 Effects of different media on the renew growth of buds
激素组合Phytohormone composition 对萌动芽恢复生长的影响 Effects 0n the renew growth of buds
MS+6一BA 0.2 mg. +NAA 0.1 mg.Lq
MS+6一BA 0.8 mg.L『l+NAA 0.15 mg. l
MS+6一BA 1.5 mg.L『 +NAA 0.3 mg.L『1
MS+6一BA 0.2 mg.L『 +IBA 0.1 mg.I
MS+6一BA 0.8 mg. +IBA 0.15 mg.Lq
萌动芽生长较慢,生长效果差
萌动芽恢复生长好,切口处有少量根生长
萌动芽恢复生长较好,但在培养过程中易产生不定芽,切口处也有生根现象
萌动芽生长缓慢,切口处易变褐色,少有死亡
萌动芽生长缓慢,切口处不易有根产生
表 2 不同的培养基对恢复生长的萌动芽增殖的影响
TabIe 2 Effects of different media on the multiplication of buds
激素组合 Phytohormone composition 对萌动芽增殖的影响Effects on the the multiplication of buds
MS+6一BA 2 mg.L-I+ KT 1 mg.L-
MS+6一BA 4 mg.1;l+KT 1.5 mg.1.q
MS+6一BA 6 mg.L-l+KT 2.5 mg.L『l
MS+6一BA 8 mg.L-l+KT 3.5 mg.1;l
MS+6-BA 4 mg.Lq
萌动芽有少量的增殖,一般 1~2个不定芽,丛生芽粗壮,生长良好
萌动芽增殖良好,丛生芽较粗壮,生长良好,很少有愈伤组织产生
萌动芽增殖很好,丛生芽多,但较纤细,且基部易形成愈伤组织
萌动芽增殖很好,丛生芽多,但较纤细,基部易形成愈伤组织,且有的出现轻度的玻璃化
现象
萌动芽增殖良好,但丛生芽的生长较慢
生根培养;待苗充分生根后进行移载。本文所有的
实验均重复 3次,每次每种培养基接种不少于 2O
瓶,每瓶均接种 1个外植体。
2 结果与分析
2.1萌动芽的恢复生长
共试用了 5种萌动芽恢复生长培养基(表 1)。
在 5种培养基中萌动芽均可恢复生长,但恢复生长
的情况有一些区别。2号培养基(MS+6-BA 0.8
mg.L-i+NAA 0.15 mg.L’)比较适合萌动芽的恢
复生长,我们采用该培养基配方作为萌动芽恢复生
长培养基。
2.2不定芽的诱导
在不定芽诱导的研究中,也试用了5种以 MS培
养基为基础添加不同植物激素配比的培养基(表 2)。
大约接种 10 d后各种培养基中均有不定芽产
生,产生的丛生芽在数量和生长状况上存在着差别,
从表 2可以看出细胞分裂素对于芽的增殖是必须的,
但浓度必须控制在一定的范围内,否则丛生芽的生长
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3期 宋关玲等:泰国野生银边姜黄的组培快速繁殖 265
状态将受到影响。对比后我们选用 2号培养基(MS
+6一BA 4 mg.L- +KT 1.5 mg.L- )作为萌动芽和丛
生芽形成的不定芽增殖培养基。
2.3不定芽的增殖与快速繁殖
将丛生芽中的不定芽在超净工作台中切下接种
到上面所选择的不定芽诱导 2号培养基(MS+6-BA
4 mg.L- +KT 1.5 mg.L- )中进行增殖。增殖效果
很好,3个星期可增殖 4~6倍。
2.4生根与移栽
泰国野生银边姜黄的生根较容易,在恢复生长和
增殖的过程中均有不定根的产生。在移栽前 3~4星
期将从丛生芽切下的不定芽接种到 MS基本培养基
和添加少量生长素(NAA 0.1~O.5 mg.L- )的MS培
养基上,小芽生长均很好,添加少量生长素的MS培
养基更有利于芽的生根和生长。3~4星期后切下的
单芽可生长到 6 cm以上,并有大量的根产生。此时,
取出小苗,洗去根部的琼脂将其种植于消毒过的河砂
和腐殖质及酸性土混合的基质的花盆中,保持一定的
湿度,成活率 8O 以上。
参考文献:
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宋关玲,等:泰国野生银边姜黄的组培快速繁殖
SONG Guan-ling, a1.:The rapid propagation of Curcurna,口 P witdly
grown in Thailand by plant tissue culture
图版 I
PlateI
l~2.萌动芽在培养基中恢复生长}3.不定芽在培养基中增殖 }4.单芽在培养基中生根。
1~2.The renew grow~ of bud in medium 3.The muItipticalion 0f astatidsm bud
in medium;4.The rhizogenesis of sing[e bud in medium
.
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