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不同部位艾纳香中总黄酮的含量测定



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 26(4):453— 455 2006年 7月
不同部位艾纳香中总黄酮的含量测定
黄永林,赵志国,文永新
( 羹 广西植物研究所,广西桂林54106)
摘 要:以芦丁为对照品,建立紫外分光光度法检测艾纳香总黄酮含量的方法,并检测艾纳香中不同部位总
黄酮的含量。结果表明:芦丁在 0~0.048 32 mg/mL(r一0.999 8)范围内线性关系良好,平均回收率为
99.7 ,RSD=2.3 ,其叶、小枝条、茎含总黄酮分别为2.94 ,1.21%,1.36 ,该方法简便、可靠、准确,结果
可作为艾纳香中总黄酮含量的检测方法。
关键词:艾纳香;总黄酮;含量测定
中图分类号 :Q946 文献标识码 :A 文章编号 :lOOO一3142(2006)04—0453—03
Determination of total flavonoid in different
sections 0f Blumea balsani fera
HUANG Yong—lin,ZHAO Zhi—guo,W EN Yong-xin
(Guangxi Institute of Botany,Guangxi Zhuangzu Autonomous Region and Academia Sinica,Guilin 541006,China)
Abstract:Using rutin as a reference substance to develop a quantitative method for the determination in differ—
ent sections of total flavonoid in Blumea balsanifera DC.The results indicated that the linearity of rutin Was
obtained within the range of 0 and 0.04832 mg/mL(r=0.999 8).The average recovery was 99.6% and RSD
was 1.21 .The content of total flavonoid in B.balsanlfera DC.from leaf was 2.94%,branch was 1.21%,
stem was 1.36 .The method is convenient and reliable.It can be used as a quality control method tO the de—
termination of total flavonoids of B.balsanifera DC.
Key words:Blumea balsanlfera DC.;total flavonoid;determination
艾纳香(Blumea balsanifera DC.)又称大风
艾、大艾、冰片艾等,属菊科多年生木质草本植物,为
壮族民间草药,主产于广西西南部和云南东南部及
贵州、广东等省。艾纳香叶和嫩枝及根均可药用,性
味温辛,具有清热利尿祛风消肿、温中活血、消炎镇
痛、补虚壮阳之功效。可用于治疗寒湿泻痢、腹痛肠
鸣、跌打刀伤和高血压等症 (江苏新 医学 院编,
1997),临床主要用于经期提前、产后血崩、产后浮
肿、不孕症、阴疮等症 (广西壮族 自治区卫生厅,
1996)。现代药理学研究证明,以艾纳香为主要原料
制成的妇血康冲剂具有缩短凝血时间及促进子宫收
缩使妊娠产物的排出减少阴道流血,使血管闭合子
宫内膜脱落加速,达到缩短经期和减少出血量,并具
有促性腺激素的作用,使卵巢功能恢复正常,同时还
具有治疗和保健的双向调节作用,且疗程短,止血迅
速,临床观察效果总有效率达 85.9 9/6(陈德莲等,
2000;傅红专,2001;苏代芬等,1997),是广西著名的
中成药品种之一。艾纳香的成分比较复杂,有效成
分倘未确定,但黄酮类成分是其主成分之一(林永成
等,1988;邓芹英等,1996),其中艾纳香所含的二氢
黄酮类化合物具有一定 的生理活性 (赵金华等,
1997;许实波等,1998)。为了研究艾纳香中总黄酮
收稿 日期:2006-03-10 修回日期 :2006-04—12
基金项目:广西自然科学基金(桂科基 0448087)l广西科技攻关项目(桂科攻 0630002—4B)[-Supported by Natural Science
Foundation of Guang xi(O448O87)fKey Technologies Research and Development Program of Guangxi(0630002—4B)]
作者简介:黄永林(1974一).男,广西桂林人 ,助理研究员 ,从事天然产物开发利用研究 。
通讯作者(Author for correspondence,E-mail:wyx@gxib.cn)
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454 广 西 植 物 26卷
类成分与临床功效之间的关系,对其总黄酮含量进行
测定具有十分重要的意义。目前还未见有该药材总
黄酮含量测定方法的报道,为此我们采用分光光度
法,以芦丁为对照品,对艾纳香 叶、小枝条、茎中总黄
酮含量进行了分析测定,为今后对艾纳香中黄酮类成
分与临床功效间相互关系的深入研究奠定基础。
1 材料、仪器与试剂
药材:采自广西天峨县,经广西植物研究所分类
室韦发南研究员鉴定为菊科植物艾纳香(Blumea
balsanifeTa DC.)的干燥地上部分。
仪器:T6新世纪紫外可见光分光光度计(北京
普析通用仪器有限公司);瑞士 Precisa Bailnces Se-
ries XS电子天平(Precisa仪器有限公司)。
试剂:芦丁对照品(购自中国药品生物制品检定所)。
亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1供试液的制备
2.1.1对照品溶液的制备 精密称取 120℃干燥至
恒重的芦丁对照品 15.1 mg置 100 mL量瓶中,加
甲醇 7O mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至
刻度,摇匀,即得对照品溶液(每 1 mL溶液中含芦
丁 0.151 rag),待用。
2.1.2供试品溶液的制备 精密称取艾纳香药材粉
末 (40目)2 g,至烧 瓶 中,加 甲醇 100 mL,冷浸 3O
min后,在水浴上加热回流 6O rain,分取滤液,药渣加
甲醇 100 mL,继续水浴加热回流 30 min,过滤,药渣
用 3O mL甲醇洗涤,合并滤液,滤液置 250 mL量瓶
中,放冷,加甲醇至刻度,摇匀,作供试品溶液,待用。
2.2含量测定
2.2.1标准曲线的绘制 精密量取对照品溶液 0.0、
1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL分别置于 25 mL量瓶
中,各加水至 1O mL,加 5 亚硝酸钠溶液 1 mL,摇
匀,放置 6 min,加 1O 硝酸铝溶液 1 mL,摇匀,放
置 6 min,加 4 氢氧化钠溶液 1O mL,再加水至刻
度,摇匀,放置 15 min,以相应的试剂溶液为空白,
在 500 nm波长处测定吸收值。结果见表 1。以吸
收值 A为纵坐标,以对 照品浓度为横坐标 (rag/
mL),求得回归方程:A:11.808C一0.001(r一
0.999 8),线性范围O~O.048 32 mg/mL。
2.2.2样品溶液的测定 取不同部位艾纳香药材供
试品溶液,精密量取供试品溶液 2 mL,置 25 mL量
瓶中,按标准曲线绘制项下操作,分别加入5 亚硝
酸钠溶液,1O 硝酸铝溶液,4 氢氧化钠溶液及水,
经放置显色后,于 500 nm波长处测定吸收值 ,代入
表 1 线性实验结果
Table 1 Results of linearity tests
’ 表 2 不同部位艾纳香中总黄酮含量测定结果
Table 2 Contents of total flavonoids in different sections of Blumea balsanifeya
回归方程,计算总黄酮的含量。结果见表 2。
2.2.3精密度实验 取某一浓度对照品溶液,按标
准曲线绘制项下操作,加入显色剂显色后,测定吸收
值,连续 6次,计算得 RSD值为 1.26 ,表明仪器
精密度较好。
2.2.4稳定性实验 取某一供试品溶液,按样品溶液
测定项下操作,显色后每隔 5 min测定其吸收度,共
计 30 min,其测得值基本不变,RSD值为 1.49 ,结
果表明,供试品溶液在显色后 30 min之内基本稳定。
2.2.5重复性实验 取同一批样品按供试品溶液制
备项下方法平行制备供试品溶液 5份,依法显色后
测定吸收值,含量平均值为 2.93 ,RSD为 1.0 ,
表明重现性良好。结果见表 3。
2.2.6加样回收试验 精密称取 5份已知含量艾纳
香药材粉末(40目)1 g,分别加入芦丁对照品,按供试
品溶液制备方法制备供试液,按样品溶液测定方法测
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4期 黄永林等:不同部位艾纳香中总黄酮的含量测定 455
定吸收值,测得平均回收率为99.7 ,RSD为 2.3 。
表 3 重复性实验结果
Table 3 Results of parallel tests
编号 No
含量 Content(%)
平均含量 Average(%)
RSD ( )
3 讨论
(1)在总黄酮提取时,有人采用乙醚提取后再用
甲醇提取药材中的总黄酮(单鸣秋等,2002),本实验
曾采用乙醚提取后再用甲醇提取药材中的总黄酮与
用甲醇直接提取药材中的总黄酮制备供试品溶液进
行含量检测比较,结果表明两者相差较小,因此本实
验选用操作简便的单一甲醇作提取溶剂。
(2)从显色稳定性试验可见其吸收值在 30 min
内基本稳定,提示吸收值的测定在显色后 30 min内
完成较好,本实验选用显色后 15 min检测。本实验
方法简便、可靠、准确,可作为艾纳香中不同部位及
提取物的检测方法。
(3)从表 2的结果来看,艾纳香中三个不同部位
叶、小枝条、茎中总黄酮的含量有比较大的差别,其
中叶中总黄酮的含量最高,达 2.94 ,小枝条的含
量最低只有 1.21 9,6,只要通过叶、小枝条、茎的药理
试验结果,可以初步判断黄酮类成分与临床功效之
间的相互关系,为今后对艾纳香中黄酮类成分与临
床功效间相互关系的深入研究奠定了基础。
参考文献:
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(上接第 452页 Continue from page 452)
表 2 红丝线中香豆素的含量测定结果
Table 2 Contents of coumarin in Peristrophe baphica
编号 采集地 香豆索含量(g/kg)
No. Locality Coumarin content
4 讨论
(1)曾对提取溶剂(石油醚、甲醇)、提取方法(超
声处理、回流提取、浸渍)、提取时间(20,40,60 min)
作了对比试验,结果以本文提取方法为最佳。
(2)本试验用二极管阵列检测器对香豆素色谱
峰在 200~600 nm范围内进行光谱扫描,在 278 nm
处有最大吸收,选择 278 nm作为检测波长。
(3)测定结果表明,香豆素在观音草属植物中分
布是不均匀的。爵床科植物是分类难度很大的植
物,该 3种植物现在作为同名植物,但有分类学家认
为该 3种植物为不同的种。本研究结果支持了宜州
产红丝线不同于其他两种红丝线的分类学观点。
参考文献:
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