全 文 ：广西植物Guihaia32(6)：793—799 2012年11月
DoI：10．3969／j．issn．1000一3142．2012．06．015
多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究
唐凤鸾1，江海涛2，赵志国1，付传明1，石云平1，黄宁珍1。
(1．；警篝掌蒌广西植物研究所．广西桂林541006；2．广西国有维都林场，广西来宾546100)
摘要：以多花兰种子为材料，研究了无机盐浓度、植物生长调节剂和光照条件对多花兰种子非共生萌发的
影响，在此基础上，通过研究原球茎增殖和分化、芽苗壮苗和生根的培养基配方及培养条件，建立多花兰组培
快繁技术体系。结果表明：多花兰种子萌发培养基为1／6MS十NAAo．5mg·L一1+6一BA2．omg·L。1+马
铃薯泥50g·L一1+Ac1．og·L～，光照度为1．25肛m01·m。2·s～，萌发率63．6％；原球茎增殖继代培养基为
1／4MS+6一BA2．Omg·L—l+NAAo．5mg·L1+AC1 g·L一1+PE200g·L～，繁殖倍数6．5倍／60d，芽分
化率60。2％；再生芽分化培养基为1／4Ms十6一BA2．omg·L一1+NAAO．2mg·L_1+AC1 g·L。1+PE200
g·L～，繁殖倍数4．o倍／60d，芽分化率85．o％；芽苗壮苗和生根培养基为1／6Ms+6一BA3．omg·L。1+
NAA1．omg·L一1+ACl g·L1+蔗糖20g·L一1+PE200g·L1和1／4MS+6一BA2．omg·L一1+NAA
1．2mg·L一1+AC1 g·L。1十蔗糖20g·L一1+PE200g·L～，生根率达100％，生根苗移栽成活率90％。此
技术可用于多花兰种苗繁育和种质资源保护。
关键词：多花兰；原球茎；增殖与分化；无机盐浓度；植物生长调节剂
中图分类号：Q945．5文献标识码：A 文章编号：1000一3142(2012)06一0793一07
Gennfi．Ieege砌nationofseetISa血IraDidprolif争b电mtre 霉『ernUna lonOIS C坞ancIplcI nI伊
rationZ咒订frDof(≯m易Z饿比m∥D^易MndHm
TANGFeng-Luanl，JIANGHai-，]晤o2，ZHAOZhi—Gu01，
FUChuan_Min91，SHIYun_Pin91，HUANGNing_Zhenl’
(1．G般”g矗J珊m“把o，Bo船ny，(五以g血Zh懈”gA“￡硎。脚似j妇i册n蒯琥P(飘in舀PAm如列o，＆i卯删，
Guilin541006，C11ina；2．G眦ngziW镜眈鼢￡Po姗“F0胁f胁删，bbin541000，China)
Abst均d：C)彻腕西“m∥ori妇，矗“mseedswereusedtoinvestigatetheffectsof altcomems，plantgmw hregulators
and1ightonseedas)仰bioticgerHlimtio几Basednthis，theissuecultureandrapidpmpagationtech血calsysteInofC
∥ori沈利跏werestablished，byinvest遮atingthemedi唧fomulaandcultureconditionsofproliferatbnandredifferen—
tiationofprotocom，strongseedlingsa dr00tingofbud．TheoptimalH1ediumforasymbioticgeH血mtionofC．∥o一一
6“删聊!seedswas1／6MS+NAAO．5mg·L_1+6一BA2．Omg·L1+meshedpotato50g·L_1+AC1．Og·L-1；the
light—intenSityofcul urewas1．25“mo卜m一2·s_1；theseedgerminationratewas63．6％．Theoptimalediumforsub—
cultureforprotocormmultiplicationw s1／4MS+6一BA2．Omg·L-1+NAAO．5mg·L_1+AC1．Og·L-1+PE200g
·L_1；thepmliferationcoefficientwas6．5／60d；thebudredifferentiationratewas60．2％．Theoptirnalmediumforbud
redifferentiationwas1／4MS+6一BA2．Or119·L-1+NAAO．2mg·L_1+AC1．Og·L_1+PE200g·L^1；thepmlifera一
收稿日期：2012一04—21修回日期：2012一09一05
基金项目：广西科技攻关项目(桂科攻10100012—5)；广西林业厅项目(桂林科字[2011]第07号)；桂林市科技开发项目(20120113—4)；广西植物
研究所基本业务费(佳植业11007)[supportedbytheTechnologiesR&DProgramofGuangxi(10lo001z一5)；ProgramofGuangxiForestry
Department(2011、07)；ScientificResearchandTechnologyDevelopmentProgramofGuilin(20120113—4)；FundamentalResearchFundofGuangxl
InstituteofBotany(11007)]
作者简介：唐风鸾(1978)，女，广西全州人，助理研究员．主要从事生物技术研究工作，(Pmail)tangfengluan@yahoo．com．cn。
’通讯作者：黄宁珍，研究员，从事兰科植物保护与繁育研究。(E—mail)huangnz@gxlb．cn。
万方数据
794 广 西植物 32卷
tion∞efficiemwas4．o／60d；thebudredifferemiationrate、Ⅳas85．o％．Theoptimalediumforstrongseedlingsand
r∞ting、Ⅳerel／6MS+6一BA3．Omg·L_1+NAA1．Omg·L_1+AC1．0g·L1十canesugar20g·L1+PE200g‘
L-1and1／4MS十6一BA2．Omg·L_1+NAA1．2mg·L-1+AC1．Og·L-1+canesugar20g·L-1+PE200g·L_1，re—
spectively．TherOotingp rcentagew s100％，andtransplantsur啊valrateeached90％．Thistechn0109ycouldbeused
toseedlingbree血培andgeHmplasmprotectionofC．∥o“玩蒯乱m．
Keywords：C∥ori锄蒯“m；pmtocom；proliferationandifferentia on；saltconcentration；plantgm、】lrthregulator
多花兰(Cym6idi“m．∥ori6M咒d“m)为兰科兰属
附生类植物，属《濒危野生动植物种国际贸易公约》
附录Ⅱ物种，为我国二级保护植物。多花兰主要分
布于云南、广西、广东、福建等我国长江以南各省；生
于海拔100～3300m的林中、林缘树上，或沿溪谷
岩壁上。其叶带型革质、具有光泽，抗旱防寒力强；
花带香气，花期较长，花色繁丽多姿，具有较高的观
赏价值，是较理想的盆栽花卉之一(中国科学院中国
植物志编辑委员会，2006)。
多花兰在株型、花朵数以及花色等方面均有丰
富的变异，适应性广，在新品种培育中具有重要应用
价值(卢思聪等，2005)。据国际兰花新品种登录机
构“RHSOrchidRegister”的资料显示，以多花兰作
为亲本的第1代杂交组合已达249个。一些热销大
花蕙兰品种是由多花兰与其它品种经过不断地杂交
培育而成(Li等，2007)。目前，国内对多花兰种子
非共生萌发和组培快繁技术研究不多(丁长春等，
2011；吴梅，2006)。为此，本文通过对非共生萌发培
养基中的无机盐含量、植物生长调节剂及光照等培养
条件的研究，探讨影响多花兰种子非共生萌发的因
素，建立多花兰种子非共生萌发技术体系；并在此基
础上，通过研究筛选原球茎增殖和分化、芽苗壮苗和
生根培养基配方及培养条件，建立多花兰组培快繁
技术体系。研究结果为多花兰种质资源保护和种苗
繁育提供技术支撑。
1 材料与方法
1．1材料
多花兰(Cym6idi“m厂zo“6“咒d“m)种子，采自
广西植物研究所兰科植物种质园。
1．2方法
1．2．1外植体消毒及接种将采集的蒴果用自来水
冲洗干净，于无菌操作台上先用75％的酒精浸泡2
min，后用o．1％HgCl：液消毒15min，无菌水冲洗
3次，滤干果皮表面水份，划破果皮将种子均匀撒在
培养基上。
1．2．2多花兰种子非共生萌发(1)培养基：以MS、
1／2MS、1／4MS、1／6MS为基本培养基，添加不同浓
度的植物生长调节剂NAA(0．1、o．5、1．o)mg·
L、6一BA(0．5、1．o、2．o)mg·L，附加20-1的
蔗糖、5．5g·L。1的琼脂、50g·L。马铃薯泥，pH值
为5．4。(2)培养条件：播种后在温度(26±2)℃、光
照时间12h·d。日光灯下培养，光照强度分别为25
umol·m一2·s～、12．5肚m01·m2·s～、6．25肛mol·
m一2·s、1．25“mol·m。2·s、0肚mol·m一2·s。
(3)种子萌发统计：播种120d后，每处理随机抽取3
瓶，统计种子萌发数量并计算萌发率。由于多花兰
种子非常小，为了准确计数，先向培养瓶内加50mL
水稀释成悬浮液，混合均匀后吸取1～5mL，铺在白
布和黑布上进行计数。
1．2．3多花兰原球茎增殖、分化、壮苗和生根培养
(1)培养基：以MS、1／2MS、1／4MS、1／6MS为基本
培养基。(2)根据实验目的添加不同种类和浓度的
植物生长调节剂为NAA0．2、o．5、o．8、1．o、1．2、
1．6mg·L～；6一BA1．0、2．0、3．0、4．O、8．0mg·
L_1；IBAO．5mg·L～；IAAO．5mg·L～；KT1．0
mg·L～；TDZ0．2mg·L～；T—ZT0．05mg·L；
附加AC1g·L，蔗糖20g·L～，琼脂5．5g·L，
及200g·L。的PE(马铃薯水煮液)、椰汁、香蕉或
2．0g·L。1的ACH(酸水解酪蛋白)、PT(蛋白胨)；
pH5．4(表3～5)。(3)培养条件：接种后在温度(28
±2)℃、光照时间12h·d～、光照强度25肛m01．
m1·s。1的培养室中培养。(4)结果观测和统计：培
养50～60d后，每处理随机抽取3瓶，观测增殖系
数、芽分化率、根分化率、苗高、苗形态等参数。综合
各项参数，筛选适合多花兰原球茎增殖、芽分化、芽
苗壮苗及生根的培养基配方。
1．2．4多花兰试管苗移栽将长好根的试管苗炼苗
2～3d，洗净根际培养基，用500倍甲基托布津溶液
浸沾1～2min，晾干后移栽至由碎火砖块和腐质土
按1：1混拌制成的移栽基质上，在75％荫蔽度的
大棚中培养，40～50d统计成活率。
万方数据
6期 唐凤鸾等：多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究 795
发所需时间较长，从播种到胚开始转绿需要90d。
2 结果与分析 种子在培养基上先膨大形成无色透明的圆球形，然
后发育成白色胚，在12．5且m01．m-2·s’1光照的刺
2．1多花兰种子非共生萌发条件研究 激下，胚颜色逐渐加深，呈淡黄绿色，后继续生长膨
2．1．1多花兰种子萌发及生长特性多花兰种子萌 大，形成绿色的原球茎，培养120d时在部份原球茎
图1 多花兰种子的萌发过程 A．白色的球形胚；B．淡黄绿色的原球茎；c．绿色的原球茎。
Fig．1GerminatedprocessofC．∥ori6“，2d仪mseedsA．whiteandround
embryos；B．pistachioprotocorms；C．greenprotocorms．
基部可观察到纤细白色绒毛。
2．1．2不同盐浓度对多花兰种子无菌萌发的影响
在含盐量不同的培养基中添加0．1mg·L_1NAA、
0．5mg·L_1BA，研究无机盐浓度对多花兰种子无
菌萌子的影响(表1)。表1结果表明不同无机盐浓
度对多花兰种子萌发影响较大，萌发率差异显著(P
而升高，其中1／6MS培养基上种子的萌发率达
(46．30±9．28)％，较1／2Ms培养基提高2倍，且原
球茎生长快质量好；而MS与1／2MS培养基上种子
的萌发效果相当，萌发率均较低，这说明高盐浓度的
培养基不利于多花兰种子的萌发。
表l不同盐浓度对种子萌发的影响
Table1 Effectsofdifferentsalconcentrations
onseedgerminationofC．，ZDri6“挖dM研
盐浓度SaItconcentration萌发率Germinationrate(％)
MS
1／2MS
1／4MS
1／6MS
22．17土1．620
18．90±3．040
35．78士4．53b
46．30土9．288
2．1．3NAA、6一BA对多花兰种子无菌萌发的影响
在1／6MS中添加不同浓度的NAA、6一BA，研究植
物生长调节剂对多花兰种子萌发的影响(表2)。表
2结果表明NAA、BA的使用浓度对多花兰种子萌
发影响也较大，其中低浓度的NAA不利于种子萌
发，当浓度达到o．5mg·L1时，能显著提高萌发
率；此外多花兰种子萌发率随6一BA浓度的升高而
增加，当浓度为2．Omg·L。1时萌发率可达(63．56
±5．98)％，但与1．omg·L_16一BA浓度处理的差异
不显著，为了减少高浓度植物生长调节剂导致植物
材料产生变异，可适当选用较低浓度。
表2 不同浓度NAA和6-BA对多花兰种子萌发的影响
Table2 Effectsofdifferentco centrationsofNAA
and6一BAonseedgerminationofC．厂￡ori6“行d乱打z
生长调节剂种类 生长调节剂用量 萌发率(％)
Growth DosageofgrowthGermination
regulatorregulator(mg·L一1)rate
2．1．4不同光照强度对多花兰种子萌发的影响灭
菌后的多花兰种子接种于1／6MS+o．5mg·L1
NAA+2．omg·L‘16一BA培养基上，在不同的光照
强度下培养。结果表明：光照强度对多花兰种子的
萌发率有显著影响(F一2．781，P<0．05)，在25
“m01．m‘2·s‘1光强下培养的种子不发芽；当光强
为12．5灶m01．m-2·s。1时部分种子能萌发，但萌发
速度慢且萌发率低，仅为(16．75±2．47)％；当光强
万方数据
796 广 西 植 物 32卷
为6．25“m01·m七·s。1时，萌发率迅速上升到
(33．91±6．28)％，增加约1倍；1．25“m01·m‘2·
s。1光强最有利于多花兰种子萌发，发芽率高达
(55．60±9．20)％，且萌发速度快(图2)。
2．2多花兰原球茎继代增殖和分化培养条件研究
2．2．1无机盐浓度对多花兰原球茎增殖和分化的影
响 表3结果表明在MS、1／2MS、1／4MS、1／6MS
四种不同盐浓度的培养基中，以1／4MS对多花兰原
球茎的繁殖和芽分化最好，而且芽苗的长势好，粗壮
整齐。说明低盐浓度有利于多花兰原球茎的增殖、
分化和生长。
2．2．2细胞分裂素对多花兰原球茎增殖和分化的影
响 表3结果显示，在A(A1～A4)、B(B1～B4)、
0 1．25 6．25 1 2．5 25
光照强度Lightintensity(umoI．m-2·s1)
图2光照强度对种子萌发的影响
Fig．2Effectsoflightintensityonseed
germinationofC．／?ori6“行d“m
表3 无机盐、6一BA和NAA浓度对多花兰原球茎增殖和分化的影响
nble3 Effectsofconcentrationsofsalt，NAAand6一BAonprotocormpr01iferationandifferentiationofC．∥ 以施行d“m
恭恐}。m≯A-㈨g耸。，P鬟誊n纂熬：篡徽警’墨黧P嚣。
1．5g
2．Of
2．Of
2．0f
2．Of
2．5e
4．0o
3．5cd
5．Oi 3．o 2．5 黄、中 差
5．Oi 3．2 1．O 绿、中 差
15．Oh 8．o 2．o 绿、中 中上
15．Oh 7．o 2．O 绿、中 中上
71．6b 29．8 2．o 黄、细 差
72．ob 30．O 1．8 黄、细 差
85．Oa 80．o 2．5 绿、齐 优 芽分化
64．Oc 24．O 1．5 绿、齐 中上
43．2e 18．2 o．8 黄、中 差
50．od 18．o 1．8 绿、中 中
60．2c 26．o 1．9 绿、壮 优 球茎增殖
53．5d 63．5 1．8 绿、壮 中上
29．6g 8．5 o．9 绿、中 中
67．5bc 60．3 1．5 绿、壮 优 球茎增殖
62．7c 33．9 1．8 绿、中 中
70．2b 68．4 2．5 绿、壮、齐 优 壮苗培养
38．9f 29．5 1．5 绿、壮、齐 优 壮苗培养
43．8e 43．8 2．o 绿、壮、齐中上
C(C1～C4)三组不同培养基中，从原球茎的繁殖倍
数、芽和根的分化率、芽苗的高度和长势上看，6一BA
2．omg·L。1显著优于6一BA1．omg·L。1培养基表
明，在一定范围内较高的6一BA水平(2．omg·L-1)
更利于多花兰原球茎的增殖、分化和生长。D组
(D1～D3)和E组(E1～E3)，在6一BA浓度为2．o～
4．omg·L。1时，多花兰原球茎繁殖倍数相对较高，
由原球茎分化成的芽苗粗壮、整齐，长势也相对较
好。以细胞分裂素KT、TDZ、T—ZT代替C3号培养
基中的6一BA进行实验，结果发现对多花兰原球茎
的繁殖、分化和生长，KT稍好于6一BA，6一BA则明
显好于TDZ和T—ZT。综合增殖倍数、芽的分化率、
芽苗生长情况及药品成本等因素，这说明多花兰原
球茎增殖和分化培养基中的细胞分裂素以6一BA为
好，使用浓度2．o～4．omg·L～。
2．2．3生长素对多花兰原球茎增殖和分化的影响
A、B、C三组实验结果(表3)表明，NAA对多花兰
原球茎增殖和分化的影响方式与6一BA有所不同。
低浓度的NAA(o．2mg·L。)利于多花兰原球茎分
化成苗，在NAA浓度较低(o．2mg·L。1)的B组实
验中，原球茎分化芽的效率普遍较高，为64．o～
85．o％；NAA浓度提高至o．5mg·L。1(C组)，原球
∞
∞
加
∞
加
∞
0一罅一uo；日uI曼o∞％∞甚口褂划船
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S
S|呈例伽删|呈例伽伽|呈伽伽删例例枷伽伽伽
1
2
3
4
1
2
3
4
1
2
3
4
l
Z
3
1
2
3
A
A
A
A
B
B
B
B
C
C
C
C
D
D
D
E
E
E
万方数据
6期 唐凤鸾等：多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究 797
茎分化芽的效率降低，繁殖倍数则提高，最高达6．5
倍／60d。D组和E组试验也证明了这一结果。而
以同样浓度的IAA或IBA代替C3号培养基中的
NAA，多花兰原球茎的繁殖系数和芽分化率显著降
低，苗的长势也明显变差。因此利于多花兰原球茎
增殖和分化的生长素种类为NAA，使用浓度o．2～
表4有机添加物对多花兰原球茎增殖和分化的影响
Table4 EffectsoforganicadditivesonprotocormproliferationandifferentiationofC．／Z ri6“咒d“研
嫱县 有机添加物 繁殖倍数 芽分化率(％) 根分化率(％) 苗高度 苗形态 评价
夏五 organicadditiVesProliferationRate0fbud Rateofrootseedlinghei htshapeof i：=P
(g·L，1) muItlple dlf±erentlatlOndltterentlatlOn(cmJ seedIlng
F1
F2
F3
F4
椰汁200
香蕉200
ACH2
PT2
2．Oc
2．Oc
Od
Od
58．9a
42．9c
Od
Od
细、弱
细、弱
死亡
死亡
差
差
极差
极差
C3 PE200 6．5b 60．2a 26．o 1．9 绿、壮 优
注：各培养基的基础配方为1／4MS+6一BA2．0mg·L一1+NAAo．5mg·L一1+AC1g·L_1+蔗糖20g·L_1，培养天数60d。
Note：Mediacomponentsintheableare1／4MS+6一BA2．Omg·L一1+NAAO．5mg·L|1+AC1g·L。1+sucrose20g·L_1，andi cubation
timewas60d．
表5不同培养基对多花兰壮苗及生根的影响
Table5 Effectsofdifferentm diaonseedlingsgrowinga drootingofC．／lori6“以d“m
D1 1／4MS 2．O 1．O 1．Od 3．5 100 绿、中 中
D2 l／4MS 4．O 1．o 1．2c 3．O 100 绿、壮、齐 优
D3 1／4MS 8．O 1．O 1．4b 2．7 100 绿、壮 中上
E1 1／4MS 2．O O．8 1．2c 3．O 100 绿、壮、齐 优
E2 1／4MS 2．O 1．2 1．4b 3．O 100 绿、壮、齐 优 壮苗及生根
E3 1／4MS 2．o 1．6 1．2c 3．o 100 绿、壮 中上
G1 1／6MS 1．o 1．o 1．od 3．O 100 绿、壮 中上
G2 1／6MS 2．o 1．o 1．2c 3．O 100 绿、壮 中上
G3 1／6MS 3．o ‘1．o 1．7a 3．o 100 绿、壮、齐 优 壮苗及生根
注：培养基中的其它添加物为Ac1g·L、蔗糖20g·L～、PE200g·L，培养50d。
Note：0theradditivemediaofcomponentsinthetableareAC1g·L、sucrose20g·L_1、PE200g·L～，andincubationtimeis50d．
0．5mg·L～。
2．2．4有机添加物对多花兰原球茎增殖和分化的影
响 1／4MS+6一BA2．Omg·L‘1+NAAO．5mg·
L。1+AC1．0g·L1为基础培养基，研究不同有机添
加物对多花兰原球茎增殖和分化的影响(表4)。表
4结果表明，对多花兰原球茎增殖、分化和生长最好
的有机添加物为PE，原球茎增殖率和芽分化率均较
高，分化形成的芽苗较壮；椰汁和香蕉为其次，增殖
率和分化率中等，分化形成的芽苗高但细弱；最差的
为ACH和PT，培养过程中原球茎大半死亡。因此
利于多花兰原球茎增殖、分化和生长的有机添加物
为PE，使用浓度200g·L～。
综合表3和表4的结果，多花兰原球茎的增殖
培养基为1／4MS+6一BA2．omg·L1+NAAO．5
mg·L_1+AC1．og·L1+PE200g·L～，繁殖倍
数6．5倍／60d，芽的分化率60．2％；原球茎分化成
芽的培养基为1／4MS+6一BA2．omg·L。1+NAA
O．2mg·L。1+AC1．Og·L-1+PE200g·L，繁
殖倍数4．o倍／60d，芽分化率85．o％。
2．3多花兰壮苗和生根培养研究
以多花兰小芽苗为材料，进行壮苗和生根培养，
50d后的结果见表5。从苗的长势、整体形态及繁
殖倍数看，G3和E2培养基整体表现较好。因此培
养基(1／6MS+6一BA3．0mg·L1+NAA1．Omg·
L。1+AC1．0g·L1+PE200g·L‘1和1／4MS+6一
BA2．Omg·L。1+NAA1．2mg·L·+AC1．Og·
L。1+PE200g·L1)可用于多花兰芽苗的壮苗和生
根培养。
2．4多花兰组培苗的移栽
当生根苗长至3～5cm、叶片3～4片时，打开
万方数据
798 广西植物 32卷
培养瓶盖，在室内通风处练苗2～3d；后将生根苗取
出洗净培养基，用500倍甲基托布津溶液浸沾根部
并晾干，再移栽到碎火砖块：腐质土1：1的基质
上，在75％荫蔽度的大棚中培养，50d后统计，成活
率达90％。多花兰原球茎增殖、分化、壮苗、生根及
移栽结果见图3。
图3 多花兰离体快繁过程 A．原球茎增殖与分化；B，c．原球茎分化成芽；D．壮苗生根；E．生根苗；F．移栽苗。
Fig．3ProcessofinvitrocultureandrapidpropagationofC．∥ori6“咒d“mA．cuItureforproliferationandd fferentiationof
protocorm；B，C．Budsdifferentiationfrompr tocorm；D．Cultureforstrongandrootingseedlings；E．Rootingseedlings；F．P1antletstrans—
planted．
3 结论与讨论
兰科植物种子萌发对光照具有特殊要求，且具
有种的特异性(Rasmussen，1995)。有些兰花种子
的萌发受光抑制(Stewart&Kane，2006)，有些则
被光促进(Whitlow，1996)，还有一些不受光影响
(Takahashi等，2000)。本研究结果表明，强光抑制
多花兰种子萌发，弱光则提高其萌发率并缩短萌发
时间。这与文慧婷等(2008)对香草兰、姚丽娟等
(2004)对蝴蝶兰的研究结果相似。此外还发现，多
花兰萌发后增加光照强度，可促进类原球茎向原球
茎转化。
无机盐浓度对兰科植物种子萌发影响较大。本
研究结果显示，低无机盐浓度更利于多花兰种子萌
发，如在MS培养基中萌发率仅(22．17±1．62)％，
而1／6MS培养基为(46．30±9．28)％，且萌发所需
时间短，原球茎的质量好。这与丁长春等(2011)对
多花兰和孙崇波等(2008)对蕙兰(C．．心6P一)等研究
结果相似。通过研究我们还发现，低无机盐浓度同
样利于多花兰原球茎增殖、分化、壮苗及生根等整个
离体培养过程。但也有相反的实验结果，如余慧琳
等(2009)研究发现，MS和1／2MS比1／4Ms更利
于蝴蝶兰种子的萌发。因此无机盐浓度对兰科植物
种子萌发和离体快繁的影响，要根据具体的物种区
别对待。
植物生长调节剂可以代替植物激素，通过成分
和浓度的变化，调控植物细胞分裂、分化和脱分化、
种子萌发、器官发生和形成等一系列生长发育过程。
本研究发现，在培养基中添加合适浓度的6一BA(2．O
mg·L‘1)和NAA(o．5mg·L-1)可有效提高多花兰
种子的萌发率。在多花兰原球茎增殖和分化阶段，
相对较高的6一BA浓度(2．o～4．omg·L．1)更利于
原球茎的增殖、分化和生长；而NAA的作用则不
万方数据
6期 唐凤鸾等：多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究 799
同，低浓度(o．2mg·L。1)利于原球茎分化成苗；中
等浓度(o．5mg·L。1)利于提高繁殖倍数；高浓度
(1．o～1．2mg·L。1)则利于壮苗和生根。在其它兰
科植物的同类研究中，Shiau等(2005)发现，NAA
能促进血叶兰(H口P优nri口discozorui乜)原球茎的诱
导，并有益于幼苗生长；余迪求等(1996)发现，高浓
度的NAA(2．omg·L‘1)可使建兰种子萌发率高达
92．30％。但也有相反的观点和实验结果，如Van
waes(1984)认为，生长素对陆生兰种子萌发的作用
不大。这些结果显示，植物生长调节剂对兰花种子
萌发和生长发育的生理作用具有种的特异性(Ar—
ditti&Ernst，1984)；其作用效果还因发育阶段不
同而不同，如6一BA能促进沼兰种子萌发，但抑制原
球茎的形成(Miyoshi&Mii，1995)。这可能与不同
的兰科植物种子，其内源激素种类和含量存在差异
有关。
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万方数据
多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究
作者： 唐凤鸾， 江海涛， 赵志国， 付传明， 石云平， 黄宁珍， TANG Feng-Luan， JIANG Hai-Tao，
ZHAO Zhi-Guo， FU Chuan-Ming， SHI Yun-Ping， HUANG Ning-Zhen
作者单位： 唐凤鸾,赵志国,付传明,石云平,黄宁珍,TANG Feng-Luan,ZHAO Zhi-Guo,FU Chuan-Ming,SHI Yun-
Ping,HUANG Ning-Zhen(广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林,541006)， 江海涛
,JIANG Hai-Tao(广西国有维都林场,广西来宾,546100)
刊名： 广西植物
英文刊名： Guihaia
年，卷(期)： 2012,32(6)
被引用次数： 1次

参考文献(26条)
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引证文献(1条)
1.付传明,冼康华,黄宁珍,赵志国,唐凤鸾,石云平,何金祥 铁皮石斛与钩状石斛杂交及种子无菌播种快繁研究[期刊论文]-种子
2013(09)


引用本文格式：唐凤鸾.江海涛.赵志国.付传明.石云平.黄宁珍.TANG Feng-Luan.JIANG Hai-Tao.ZHAO Zhi-Guo.FU Chuan-Ming.
SHI Yun-Ping.HUANG Ning-Zhen 多花兰种子无菌萌发及离体快繁研究[期刊论文]-广西植物 2012(6)